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关键词： 角膜内皮细胞   力学刺激   角膜水肿混浊   机械拉伸   拉伸应力   生物学功能   循环拉伸   再生能力  

摘要： 目的人角膜内皮细胞再生能力十分有限,一旦受损即会造成角膜水肿混浊,影响视力,甚至致盲。疾病、手术、外伤等因素会导致眼压波动,引起角膜所受拉伸应力改变,然而,力学刺激对角膜内皮细胞会有怎样的影响尚不清楚。研究机械拉伸对角膜内皮细胞形态及功能的影响。方法兔角膜内皮细胞以5%的幅度单轴循环拉伸4 h。

关键词： 细胞生物学   线粒体基本特征   说课设计   教学目标   教学方法  

摘要： 说课是近年来出现的一种新的教学活动形式。说课是将课堂教学以更高的视角总结分析,提升教师教学水平的一种教学活动形式。文章以细胞生物教材中线粒体基本特征的教学内容为例,基于供给侧视域下,从课程分析、教学目标、教学内容、学情分析、教学方法和教学过程等方面对教学设计方案进行剖析,以促进教学质量提高。

关键词： 干细胞   间充质基质细胞   人参皂苷   干细胞因子   实验  

摘要： 目的观察研究人参皂苷Rg1(GS-Rg1)对高糖诱导损伤人脐血间充质干细胞(hUCBMSCs)生物学特性及分泌干细胞因子(SCF)的影响。方法通过体外分离和培养hUCBMSCs,并取第4代细胞进行成骨、成软骨、成脂诱导分化鉴定。将鉴定成功的hUCBMSCs用含30 mmol/L葡萄糖的培养基培养120 h,分别用不同浓度GS-Rg1(0、5、10、20、40、80 mg/L)处理,确定GS-Rg1促进高糖诱导损伤hUCBMSCs增殖的最佳浓度。将高糖诱导损伤hUCBMSCs分成试验组和对照组,另将用含5.5 mmol/L葡萄糖的培养基培养的hUCBMSCs作为正常组。试验组用最佳浓度GS-Rg1干预,对照组和正常组用等容积磷酸盐缓冲液(PBS)干预,分别观察各组对高糖诱导损伤hUCBMSCs的增殖能力、黏附能力、迁移能力、抗凋亡能力及分泌SCF功能的影响。结果GS-Rg1促进高糖诱导损伤hUCBMSCs增殖的最佳浓度为40 mg/L。与正常组比较,对照组hUCBMSCs的增殖密度(OD)值、黏附数、迁移宽度及SCF含量均明显下降(P<0.05),细胞凋亡率明显升高(P<0.05);与对照组比较,试验组hUCBMSCs增殖OD值、黏附数、迁移宽度及SCF含量均明显增加(P<0.05),细胞凋亡率明显下降(P<0.05)。结论GS-Rg1对高糖诱导损伤hUCBMSCs的生物学特性具有保护作用,能够明显促进hUCBMSCs增殖,提高黏附和迁移能力,减少细胞凋亡,并能促进SCF分泌。

关键词： 分子肿瘤学   中医针灸   特定穴位   施针   生物力学研究   生物学原理   新加坡国立大学   细胞生物学  

摘要： 针灸的生物学原理是在施针过程中,皮肤组织表面的一系列特定穴位上施加的机械力刺激及其引发的下游信号。目前,本课题组与意大利FIRC分子肿瘤学研究所Marko Foiani教授和李青森教授以及新加坡国立大学生物力学研究所Hew Choy Leong教授进行合作,致力于研究中医针灸引发的机械力诱导下所产生的下游细胞生物学现象及机制,验证本文的假设。

关键词： 宫颈癌   异甘草素   mTOR/P70S6K信号通路   增殖凋亡  

摘要： 目的探讨异甘草素对宫颈癌细胞生物学特性及mTOR/P70S6K信号通路的影响。方法选择Si Ha人宫颈癌细胞,将浓度为25、50、100μg/ml的异甘草素培养液加入Si Ha细胞中,其中一组Si Ha细胞不加入异甘草素培养液作为Si组(Si Ha细胞),Ds组(25μg/ml)、Zs组(50μg/ml)、Gs组(100μg/ml),RT-PCR、Westernblot法分别检测mTOR、P70S6K水平、蛋白变化,Transwell法、MTT法对Si Ha细胞的迁移、增值变化,流式细胞仪测定Si Ha细胞凋亡率。结果 Si组mTOR、P70S6K水平高于其他3组,其余3组Ds组mTOR、P70S6K最高,Zs组其次、Gs组最低,4组比对差距显著(P<0.05)。Si组为正常Si Ha细胞mTOR、P70S6K蛋白最高,其余3组mTOR、P70S6K蛋白表达从低至高依次为Gs组、Zs组、Ds组,4组比对差距显著(P<0.05)。Ds组Si Ha细胞凋亡率最高,其次为Ds组、Zs组,Si组Hep-G2细胞凋亡率最低,4组调亡率比对差距显著(P<0.05)。Si组Si Ha细胞迁移能力最高,其余3组Siha细胞迁移能力,Gs组迁移能力最低,Zs组迁移能力高于Ds组,Gs组较Zs组低,4组细胞迁移能力比对差距显著(P<0.05)。Gs组Si Ha细胞增殖能力最低,Nc组细胞增值能力最高,Zs组低于Ds组高于Gs组,4组增值能力比对差距显著(P<0.05)。结论异甘草素在si Ha细胞的凋亡中发挥重要作用,其作用机制可能降低mTOR/P70S6K水平的表达从而抑制细胞增值和迁移。

关键词： 口腔颌面   牙周组织   细胞生物学   平行平板流动腔   荧光成像   图像分析   骨再生   剪切力  

摘要： 目的牙周膜细胞(PDLCs)是牙周组织内的主要细胞,对口腔颌面、骨再生具有重要的意义。以力学敏感分子YAP/TAZ作为切入点,研究剪切力调控PDLCs增殖的分子机制。方法利用平行平板流动腔对PDLCs加载流动剪切力,通过real-time PCR、western blot、siRNA、coIP等细胞生物学手段,实时荧光成像、ImageJ和Imaris进行图像分析,研究其力学传导机制。

关键词： 高原红细胞增多症   体液因子   流行病学调查   细胞生物学   调控因子   发病机制   分子生物学技术   HAPC  

摘要： 以往对于高原红细胞增多症(High altitude polycythemia,HAPC)的研究多集中在流行病学调查及基因研究方面,近年来,随着细胞生物学与分子生物学技术的发展,研究人员发现HAPC病人体内含有多种调控因子,从体液因子角度分析其调控因子与HAPC的关系,探讨HAPC的发病机制,不仅可以发现HAPC发病机制中的未知环节,也可以为HAPC的诊疗提供新思路。

关键词： 二十碳五烯酸   牙龈成纤维细胞   生物学活性   炎症因子  

摘要： 目的:探索二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)生物学活性及炎症因子表达的作用。方法:分别通过活-死细胞染色、免疫荧光染色、流式细胞术观察EPA对HGFs细胞活性、形态、细胞周期的影响,采用牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P. gingivalis)脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)或热灭活P. gingivalis刺激HGFs,分别通过实时定量PCR和ELISA观察EPA对白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、IL-8、IL-1β基因和蛋白表达的作用;进一步采用实时定量PCR和Western免疫印迹法,观察EPA对血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)基因和蛋白表达的作用。采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果:200μmol/L EPA可抑制HGFs的细胞活性;100μmol/L EPA不影响HGFs的细胞活性、形态,对细胞周期也无显著影响(P>0.05)。EPA浓度依赖性抑制P. gingivalis LPS及热灭活P. gingivalis诱导HGFs表达的IL-6 mRNA、蛋白以及IL-1βmRNA(P<0.05);EPA可呈浓度依赖性诱导HGFs表达HO-1 mRNA(P<0.05),并上调其蛋白表达。结论:EPA在不影响HGFs生物学活性的前提下,显著抑制细胞的炎症因子表达,可能与其对HO-1的诱导作用有关,提示EPA在牙周炎防治中具有潜在应用价值。

关键词： 细胞生物学   艺术设计   应用  

摘要： 为了说明将细胞生物学应用于艺术设计符合艺术设计未来发展的趋势。文章运用案例分析法及趋势分析法,研究细胞生物学在艺术设计中的应用,并以细胞生物学的艺术形式为例,说明细胞作为设计灵感,可以设计出新材料和新理念的作品。进一步让人们了解将细胞生物学应用于艺术设计的益处。以期对艺术设计的未来发展具有重要意义。

关键词： 外泌体   牛奶   切向流超滤法   多模式色谱法   工艺开发   规模化生产  

摘要： 目的:建立一种规模化的牛奶外泌体纯化工艺,用于实验室制备和工业规模生产,并评价牛奶外泌体的分子与细胞生物学活性。方法:取市售多种全脂或脱脂牛奶,以外泌体提取金标准——超速离心法(UC)作为对照,采用多种化学前处理方法去除乳蛋白,切向流超滤技术(TFF)进一步去除残留的乳蛋白,并实现牛奶样品的初纯与浓缩,多模式色谱法(BE-SEC)精纯牛奶外泌体,采用纳米流式细胞术(NanoFCM)检测牛奶外泌体的粒径、颗粒浓度和纯度,透射电子显微镜(TEM)观察牛奶外泌体的形态表现,高效液相色谱(HPLC)验证牛奶外泌体的尺寸和纯度,Western blotting法检测牛奶外泌体特异性蛋白的表达,基因本体(GO)富集分析差异表达微小RNA(miRNA)的候选靶基因,DAVID Bioinformatics Resources 6.8和KOBAS软件检测京都基因和基因组百科(KEGG)通路中目标候选基因的统计富集度,CytoFlex流式细胞术检测细胞对牛奶外泌体的摄取情况,流式细胞术检测牛奶外泌体作用后Caco-2细胞凋亡率。结果:工艺研究,磷酸钠沉淀法在操作便利性、方法稳定性和产品质量方便均优于其他预处理方法。TFF法可进一步去除残留乳蛋白并可实现液体浓缩目的,有效衔接至下游BE-SEC精纯方法。以该三步工艺所得外泌体样品经TEM成像显示均呈典型的盘状或杯状外泌体形态。NanoFCM法检测的样品粒径为30~150 nm,且优于UC所得外泌体样本纯度。Western blotting法检测,确定外泌体样品含有CD81、Alix和TSG101等外泌体特异性标志物。SEC-HPLC分析,不同批次终产物均为单一均质峰,无游离蛋白污染。GO与和KEGG数据库分析,牛奶外泌体富含免疫相关蛋白与炎症反应调节信号通路相关miRNA。上述制备工艺所得外泌体具备高效穿透细胞膜的能力,4 h内入胞比例达99%。结论:建立了一套由化学沉淀前处理、TFF和BE-SEC三步结合的牛奶外泌体高纯度制备工艺方法。该工艺方法所得牛奶外泌体纯度、产率均优于金标准——UC所得样品。样品理化性质符合典型牛奶外泌体标准,可在数小时内穿透细胞膜,并富含免疫与炎症反应调控相关miRNA。