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关键词： 基础医学   细胞生物学   课程设计   CCK-8法   细胞增殖   吸光度  

摘要： 《细胞生物学研究方法与实验技术》是首都医科大学面向基础医学专业本科生开设的一门理论与实验相结合的课程,《Cell Counting Kit-8法测定贴壁细胞数》是其中的实验课程之一。在本次实验中,针对肝癌细胞系BEL-7402设计不同接种密度、CCK-8孵育浓度和作用时间,通过酶标分析仪检测450 nm处吸光度,然后以细胞密度为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制BEL-7402细胞的生长曲线从而明确细胞的增殖情况。笔者在多年的教学实践中通过不断尝试和探索,对本次实验的课程设计,包括实验基本原理、教学目标、实验内容和教学程序等做出归纳和总结,旨在为相关教育工作者的教学实践提供参考。

关键词： 眼科病理学   细胞生物学   分子生物学   临床病理   实验病理  

摘要： 眼科病理学是系统组织病理学的重要分支,作为基础医学与临床医学之间的桥梁和纽带,对于深入认识和揭示眼部疾病的发病特点发挥着重要作用。眼科病理学在老一辈专家们的努力下奠定了坚实的基础。目前眼科病理学学科的发展随着眼科临床技术以及系统病理学的发展在不断的前进,细胞生物学及分子生物学的全方位结合和纵深应用带动并拓展了眼科病理学的研究领域,临床病理学及实验病理学的研究不断更新,新形势下眼科病理学的发展充满着机遇和挑战。

关键词： 肝癌   辛伐他汀   细胞增殖   脂质代谢  

摘要： 目的探讨辛伐他汀对肝癌细胞系HepG2细胞生物学特性与脂质代谢的影响。方法体外培养肝癌细胞系HepG2,分别给予不同浓度辛伐他汀(0、5、10、20及40μM),CCK-8方法检测各组肝癌细胞系HepG2细胞活力;细胞克隆实验观察各组细胞群落形成情况;流式细胞仪检测细胞凋亡率;细胞划痕与Transwell实验观察细胞侵袭与迁移能力;Real-time PCR检测脂质代谢相关基因SREBP1、SREBP2、FASN、SQLE、HMGCS1及HMGCR表达;Western blot检测SREBP1、SREBP2、FASN、SQLE、HMGCS1及HMGCR蛋白表达。结果不同浓度辛伐他汀均抑制了HepG2细胞活力;抑制了HepG2细胞群落形成,促进细胞凋亡,抑制细胞侵袭与迁移;辛伐他汀还下调SREBP1、 SREBP2、 FASN、 SQLE、 HMGCS1及HMGCR基因与蛋白表达(P<0.05)。结论辛伐他汀能够抑制肝癌细胞系HepG2增殖,促进凋亡,并抑制细胞迁移与侵袭,其作用机制可能与抑制脂质代谢相关基因与蛋白表达有关。

关键词： 蛇六谷   白血病   ERK信号通路   凋亡   细胞分化   细胞增殖  

摘要： 目的:探讨蛇六谷石油醚提取物(SLG)抑制白血病K562细胞增殖、促进凋亡和诱导分化的作用。方法:SLG处理K562细胞,同时加入ERK信号通路阻滞剂PD98059。采用MTT检测细胞活力,采用流式细胞术检测细胞凋亡率及分化相关抗原表达阳性的细胞比例,采用Western blot检测ERK1/2和p-ERK1/2的蛋白表达水平。结果:SLG 50、100、200 mg/L能够降低K562细胞的增殖活力,其抑制作用呈剂量依赖性(r=0.9997)。SLG能够提高细胞凋亡率及分化相关抗原CD11b、CD14和CD42b表达阳性的细胞比例,同时能够上调p-ERK1/2的表达。PD98059可部分逆转SLG促凋亡和分化的作用。结论:SLG通过ERK信号通路抑制K562细胞增殖、促进凋亡和诱导分化。

关键词： ASXL1   JAK2 V617F   骨髓增殖性肿瘤   HEL细胞   CRISPR/Cas9   芦可替尼  

摘要： 目的本研究以携带JAK2 V617F纯合突变的人红白血病细胞HEL为基础,建立ASXL1和JAK2 V617F双突变模型,为研究JAK2 V617F与ASXL1协同参与MPN疾病进展的机制以及寻找新的药物治疗靶点奠定基础。方法利用CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术建立ASXL1基因敲除的HEL细胞系,并进行一系列细胞功能实验来验证ASXL1敲除对HEL细胞增殖、克隆形成以及对化疗药物的敏感性的影响。结果成功构建ASXL1基因完全敲除的HEL细胞系(HEL-AKO),模拟JAK2 V617F突变与ASXL1基因功能缺失性突变并存。细胞功能实验发现,HEL-AKO细胞较HEL细胞迁移能力变强,增殖能力变慢,细胞周期G 2/M期的进程延长,且HEL-AKO细胞的克隆形成能力减弱,药物敏感实验表明,与HEL细胞相比,HEL-AKO细胞对JAK抑制剂芦可替尼产生一定耐受。结论运用CRISPR-Cas9基因编辑技术能够实现对JAK2 V617F突变的人红白血病细胞系HEL细胞系的特定编辑,且ASXL1基因敲除之后会对HEL细胞的生物学功能产生明显影响。

关键词： 医学细胞生物学   BOPPPS教学法   临床医学  

摘要： 在开展线上线下结合的新医科教学形势下,强化留学生教学质量具有重要意义。宁夏医科大学医学细胞生物学课程以BOPPPS式教学法模型为指导,在临床医学专业留学生医学细胞生物学线上线下相结合课程教学中进行了实践。文章简要分析了BOPPPS在课程教学中的经验和存在的问题,为提高留学生教育质量提供参考。

关键词： 教学法   口腔医学专业   细胞生物学   直播  

摘要： 目的研究八步导学法在细胞生物学线上直播教学的应用效果。方法以2017级和2018级口腔专业的本科生为研究对象,分别纳入非导学组(n=47)与导学组(n=42),非导学组采用线下传统的PowerPoint(PPT)多媒体授课,导学组采用八步导学法线上教学。通过课前课后测试成绩、期末考试成绩和满意度问卷评价导学法的教学效果。结果导学组课后平均成绩明显高于课前,差异有统计学意义[(94.05±10.22)分vs.(73.32±13.08)分,(P<0.05)]。导学组课后平均成绩略高于非导学组,差异无统计学意义[(94.05±10.22)分vs.(92.18±11.04)分,P>0.05];两组期末成绩接近80分,差异无统计学意义(P>0.05)。导学组共收回有效问卷41份,回收率96.62%;非导学组共收回有效问卷47份,回收率100.00%。问卷显示,导学组的教学效果满意度为97.56%,各个环节的满意度均大于85.00%。导学组在自主学习和自我管理能力方面的满意度明显高于非导学组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用八步导学法进行细胞生物学线上直播教学,保证了线上教学的质量,提高了学生自主学习能力和自我管理能力。

关键词： 骨髓间充质干细胞   成骨细胞   骨修复   旁分泌  

摘要： 目的探讨在骨修复中骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)旁分泌对成骨细胞生物活性的作用与影响。方法研究通过transwell对BMSCs与类成骨细胞MG63行非接触性共培养方法,排除BMSCs成骨分化的影响,单纯观察BMSCs旁分泌对MG63细胞生物学特性的改变。应用迁移实验和划痕实验检测成骨细胞迁移运动能力,流式细胞仪检测细胞周期,茜素红染色和碱性磷酸酶染色分别检测成骨细胞的钙化结节和碱性磷酸酶水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(real time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测成骨与迁移相关基因基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、MMP-9、骨钙素(osteocalcin,OCN)、骨桥素(osteopontin,OPN)、Osterix、Runt相关转录因子2(Runt related transcription factor 2,RUNX2)的转录水平。结果在共培养环境下,共培养组成骨细胞迁移、运动能力较对照组显著增高(P<0.05)。共培养组成骨细胞增殖加快并且S期与G2/M期细胞比例较对照组明显增高(P<0.05)。共培养组成骨细胞的钙化结节和碱性磷酸酶水平较对照组显著上升(P<0.05)。共培养组成骨细胞MMP-2、MMP-9、OPN、Osterix、RUNX2基因转录水平显著增高(P<0.05)。结论在非接触共培养条件下,BMSCs旁分泌促进了成骨细胞的运动迁移、增殖分裂、钙化、碱性磷酸酶活性、多种成骨基因表达。这些证据表明BMSCs除具有成骨分化能力外,还具有增强周围成骨细胞骨修复活性的旁分泌功能,这些证据为BMSCs移植在骨缺损及骨坏死中应用提供新的思路和依据。

关键词： 间充质干细胞   低能量激光照射疗法   光生物学效应   增殖   成骨分化  

摘要： 间充质干细胞(MSC)是一种多能基质干细胞,有自我更新能力,在一定条件下可分化为成骨细胞。在组织工程和再生医学中,MSC发挥重要作用。低能量激光照射疗法(LLLT)可调节MSC的增殖及成骨分化等生物学效应。LLLT对MSC产生正向生物学效应取决于照射情况及LLLT的基本参数,如能量密度、波长、照射频次等。选择不同的LLLT基本参数及照射情况,导致许多研究的结论不一致甚至相反。该文对LLLT对MSC生物学效应的调节、LLLT基本参数和照射情况的影响等方面的研究进展进行综述。

关键词： 微生物遗传学   高效课堂   毕业论文   知识框架   生物学科   合成生物学   授课对象   细胞生物学  

摘要： 教学背景微生物遗传学是以病毒、细菌和真菌等微生物为研究对象进行遗传学研究的学科,与微生物学、遗传学、生物化学、细胞生物学、分子生物学及合成生物学等学科有紧密联系。许多分子生物学和基因编辑技术,如接合转移、噬菌体转染、转化、克隆、蛋白质表达、TALEN及CRISPR-Cas9等在不同程度上都来源于微生物遗传学研究。选修本课程的授课对象主要为本科三年级学生,他们已经学习了生物学科的基本知识,具备一定的解决问题能力,并已经开始进入实验室进行科研训练或项目研究,且即将正式开始毕业论文的课题研究。这一阶段的学生需要进一步整合知识框架,提升科学研究的能力。