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关键词： 间质干细胞   脂肪组织   成脂分化   成骨分化  

摘要： 目的探讨使用不同方法分离提取的脂肪间充质干细胞(ADMSCs)是否存在细胞生物学活性的差异。方法分别使用直接消化法和干细胞基质胶消化法分离提取ADMSCs,进行细胞表型鉴定、增殖活性检测,应用Real-time PCR方法检测诱导分化后成脂标志基因过氧化物酶体激活受体γ(PPAR-γ)和成骨标志基因runt转录因子2(RUNX-2)mRNA的表达,Western blot方法检测PPAR-γ和RUNX-2蛋白表达。结果基质胶消化法得到的ADMSCs相较于直接消化法得到的ADMSCs在培养第3天的增殖活力更高(F=727.139,P<0.05)。与直接消化法比较,成脂诱导分化6~12 d后基质胶消化法得到ADMSCs的PPAR-γmRNA表达增高(F=40.260~157.532,P<0.05),PPAR-γ蛋白表达在诱导分化6 d后增高(F=1501.475,P<0.05);成骨诱导分化3~12 d基质胶消化法得到ADMSCs的RUNX-2 mRNA表达较直接消化法增高,诱导分化3 d蛋白表达增高(F=58.018~2402.049,P<0.05)。结论使用基质胶消化法得到的ADMSCs成脂、成骨分化潜力优于直接消化法。

关键词： 细胞生物学   教学改革   教学内容   教学模式  

摘要： 为了更好地适应部省合建地方高校课程建设和人才培养要求,内蒙古大学生命科学学院教学团队对细胞生物学理论教学改革进行了探索和实践,通过更新教学内容、优化教学模式、改革考核方式,加强过程管理,激发了学生自主学习的欲望和学习兴趣,培养了学生的科研创新能力,取得了较好的教学效果。

关键词： 细胞生物学   思维导图   知识体系   教育模式   综合能力  

摘要： 本文综合考虑《细胞生物学》包含的知识面广、内容创新快,本科生知识背景参差不齐以及大学教育对学生的学科知识体系构建和综合素质培养的要求,提出了以思维导图为支架工具的《细胞生物学》教学设计和实践策略。首先将思维导图应用到教学的各个环节帮助学生建立起细胞生物学的基础知识体系,锻炼学生的发散思维能力;其次是结合学科发展史、细胞生物学与专业相关的契合点等,帮助学生建立起以专业、学科知识网络为背景的细胞生物学知识体系,增强学生的知识迁移能力;再在教学中灵活巧妙地采用讲授、多媒体教学、情境教学等多种教学模式,增强学生对知识的理解领会,培养科学精神和创新能力。该策略为《细胞生物学》教学改革提供了新思路,对类似的专业基础课程教学改革也有一定的参考价值。

关键词： 细胞生物学   课程设计   细胞原代培养   小鼠骨髓巨噬细胞   细胞分化   细胞吞噬  

摘要： 目的 细胞培养是现代生物技术中最核心、最基础的技术。目前细胞生物学实验课程对原代细胞分离培养技术培训不足。因此文章设计了实验以进一步提高医学生细胞培养技能。方法 分离4~6周龄雄性ICR小鼠骨髓细胞,在体外使用含有巨噬细胞集落刺激因子的RPMI 1640培养液培养七天,于第三天更换培养液一次,第七天通过乳胶珠吞噬实验检测细胞吞噬能力。结果 小鼠原代骨髓单核细胞经巨噬细胞集落刺激因子诱导一周后,分化为巨噬细胞,同时该细胞具有吞噬能力。结论通过实验,学生掌握了相关实验技能;加深对相关理论课程的理解;科研能力及综合素质得到有效提升。

关键词： 乳腺癌   磁共振成像   人表皮生长因子受体2   肿瘤抑制基因   增殖细胞核抗原  

摘要： 目的探讨乳腺癌患者核磁共振成像征象与细胞生物学因子指标的相关性。方法选取2019年3月至2020年5月本院收治的乳腺癌患者138例。进行核磁共振常规扫描和动态增强扫描,记录磁共振成像征象:肿块、钙化、肿块合并钙化、淋巴结转移;对表现为肿块的乳腺癌患者进一步记录分叶、毛刺、肿瘤直径情况。采用免疫组化法检测病灶组织中雌激素受体、孕激素受体、人表皮生长因子受体2、增殖细胞核抗原(Ki-67)、肿瘤抑制基因(p53)表达情况。分析核磁共振成像征象与细胞生物学因子指标的相关性。结果有淋巴结转移的乳腺癌患者人表皮生长因子受体2阳性率为67.57%,明显高于无淋巴结转移的患者39.06%,差异有统计学意义(P<0.01);有肿块的乳腺癌患者p53阳性率明显低于无肿块的患者,差异有统计学意义(P<0.01)。雌激素受体、孕激素受体、Ki-67水平在不同乳腺癌患者核磁共振成像征象之间比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。表现为肿块的124例乳腺癌患者中核磁共振成像征象有分叶征的Ki-67阳性率明显高于无分叶征的患者,p53阳性率明显低于无分叶征的患者,差异均有统计学意义(均P<0.01);雌激素受体、孕激素受体、人表皮生长因子受体2在是否存在分叶征的患者间比较差异均无统计学意义(均P>0.05);各细胞生物学因子在是否存在毛刺征以及不同肿瘤直径的患者间比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论乳腺癌患者核磁共振成像征象与人表皮生长因子受体2、p53、Ki-67存在相关性,相互结合能够更好地评估患者的病情和预后水平。

关键词： NFE2L2   A549   CRISPR/Cas9系统   顺铂   耐药  

摘要： 目的:构建核转录因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-like-2,NFE2L2)基因敲除的肺腺癌A549细胞,研究NFE2L2对细胞增殖和顺铂敏感性的影响。方法:利用CRISPR/Cas9技术,构建敲除NFE2L2基因的pLenti CRISPR v2-NFE2L2质粒,通过慢病毒转染体系筛选稳定细胞株,基因组测序和Western Blot法验证NFE2L2敲除成功。采用平板克隆形成实验、细胞计数法和Transwell迁移实验检测细胞增殖及迁移能力,采用CCK8法检测药物敏感性。结果:基因组测序提示包括NFE2L2第四外显子在内的227 bp碱基缺失,Western Blot显示NFE2L2及其下游蛋白均未见表达,表明NFE2L2敲除的A549细胞构建成功。敲除NFE2L2后,A549细胞单克隆形成能力、迁移能力和细胞生长速度均降低,且对顺铂敏感性增加。结论:敲除NFE2L2基因能抑制A549细胞的增殖,并增强其对顺铂的敏感性。

关键词： 胃癌   LncRNA MIR4435-1HG   miR-150-5p   增殖   侵袭   迁移  

摘要： 目的研究长链非编码RNA MIR4435-1HG(LncRNA MIR4435-1HG)对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响以及作用机制。方法荧光定量PCR(qPCR)检测LncRNA MIR4435-1HG在多种胃癌细胞系(MGC-803、MKN45、AGS、GES-1)中的表达量。AGS细胞分为对照组、siRNA-NC组、siRNA-MIR4435-1HG组。对照组细胞常规培养,siRNA-NC组、siRNA-MIR4435-1HG组分别在AGS细胞中转染siRNA NC和siRNA MIR4435-1HG质粒。CCK-8检测各组细胞的增殖能力,划痕实验和Transwell检测细胞迁移、侵袭能力,流式细胞术检测细胞的凋亡率。在线数据库DIANA-LncBase v2、双荧光素酶报告基因预测和验证LncRNA MIR4435-1HG与微小RNA-150-5p(miR-150-5p)的靶向关系。结果LncRNA MIR4435-1HG在胃癌细胞系中表达量上调(P<0.05),其中在AGS细胞中表达量相对较高。与对照组相比,siRNA-MIR4435-1HG组AGS细胞中LncRNA MIR4435-1HG的表达量明显降低(P<0.05)。下调LncRNA MIR4435-1HG抑制AGS细胞增殖(P<0.05),阻碍其侵袭、迁移(P<0.05),诱导其凋亡(P<0.05)。miR-150-5p是LncRNA MIR4435-1HG下游靶基因。结论LncRNA MIR4435-1HG在多种胃癌细胞系中表达量上调;下调LncRNA MIR4435-1HG可能通过靶向miR-150-5p抑制AGS细胞增殖、侵袭、迁移,诱导凋亡。

关键词： 乳腺肿瘤   甲基化   DACT2基因  

摘要： 目的探究乳腺癌组织中DACT2基因启动子甲基化与乳腺浸润性导管癌细胞生物学特性的关系。方法2018年2月至2019年12月获取20例正常乳腺组织设为正常乳腺组(取自体检需要进行乳腺活检者)、60例乳腺癌旁组织设为乳腺癌旁组、60例乳腺癌组织设为乳腺癌组。应用RT-PCR技术检测三组DACT2 mRNA表达情况,DACT2甲基化技术检测DACT2甲基化状态,Transwell实验检测侵袭转移情况。采用SPSS20.0统计分析软件进行处理;计量资料采用(x±s)表示,组间比较采用LSD-t检验;计数资料采用百分率(%)表示,组间比较采用χ^(2)分析;P<0.05表示差异有统计学意义。结果乳腺癌组中DACT2基因甲基化阳性率较乳腺癌旁组和正常乳腺组高(P<0.05)。乳腺癌旁组与正常乳腺组组织中DACT2基因甲基化发生率差异无统计学意义(P>0.05)。在乳腺癌甲基化中DACT2基因mRNA相对表达量低于非甲基化组(P<0.05)。乳腺癌组织出现不同程度的胞膜表达缺失。体外侵袭转移试验检测乳腺癌组织细胞的侵袭转移能力发现,乳腺癌组织中DACT2基因启动子甲基化高的模型组的细胞迁移能力上调(P<0.05)。乳腺癌组织中DACT2基因启动子甲基化低的模型组的细胞凋亡上调(P<0.05)。结论抑制乳腺癌组织中DACT2基因启动子甲基化可降低乳腺浸润性导管癌细胞侵袭和转移,同时上调其凋亡。

关键词： 前列腺肿瘤   FOXN2   细胞系   细胞运动  

摘要： 目的探讨双头框蛋白N2(FOXN2)在前列腺癌(PCa)组织中的表达以及对PCa细胞生物学的影响。方法选取宜宾市第二人民医院50例接受手术治疗的PCa患者的标本及癌旁组织, 通过RT-qPCR实验和Western blot实验分别检测PCa组织和癌旁组织中的FOXN2 mRNA及蛋白的表达水平, 并分析PCa组织中FOXN2与患者临床病理特征的相关性。通过RT-qPCR实验检测正常前列腺细胞RWPE-1、PCa细胞PC-3、DU145、LNCaP中FOXN2 mRNA的表达水平。选取PC-3细胞为研究对象, 分为FOXN2过表达组、空载体对照组以及对照组, 分别通过MTT实验、流式细胞实验、Transwell实验以及Western blot实验检测各组细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭情况以及相关蛋白Bax、CyclinD1、MMP-2的表达量。结果结果与癌旁组织相比, FOXN2的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05), 与TCGA数据库中结果一致。FOXN2低表达与PCa患者淋巴转移、TNM分期以及Gleason评分有关(P=0.003、0.005、0.002)。与人正常前列腺细胞RWPE-1相比, FOXN2在PCa细胞PC-3、DU145、LNCaP中均呈现低表达(P<0.05), 其中PC-3细胞中表达量最低。与对照组和空载体对照组相比, FOXN2过表达组的PC-3细胞在作用24 、48 、72 h后增殖能力显著下降(F=290.400、57.735、113.014, P<0.05), CyclinD1蛋白表达水平显著下降(P<0.05);PC-3细胞的凋亡率显著升高(P<0.05), Bax蛋白表达水平显著升高(P<0.05);PC-3细胞的迁移和侵袭能力显著下降(P<0.05), MMP-2蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。结论 FOXN2在PCa组织及细胞中低表达, 过表达FOXN2可抑制PCa细胞的增殖、迁移和侵袭, 并促进细胞凋亡。

关键词： 核异常   细胞   细胞核   恶性肿瘤   衰老   职业病   研究进展  

摘要： 核异常是细胞核损伤的结果,主要由射线、病毒和各种致癌、致畸、致突变化合物等导致。其形态多种多样,如核连接、核畸形、泪滴形核、染色质桥、多核和不对等分裂等。传统上,核异常只是一个描述性概念或形态学概念,一般仅指核出芽和核分叶,并未涉及核异常的功能。而实际上,部分核异常如核出芽和核分叶,其细胞并未死亡。核异常细胞是一种不受人体控制或调节的生物体,具有一定的生物学功能和行为,有自身的结局和命运;其是人体内长期存在的一种病态细胞或功能缺陷细胞,是染色体损伤和恶性肿瘤风险评估的生物标志物,是某些职业损伤或职业病发生的重要原因和机制;同时由于其功能活动减退,对神经内分泌等调节信号应答不良,可能也是恶性肿瘤、高血压、动脉粥样硬化、糖尿病和阿尔茨海默病等慢性难治性疾病与衰老发生的根源和基础。对核异常细胞进行深入研究,有助于揭示上述疾病或职业损伤的发病原因和机制,为该类疾病的预防、控制和治疗提供理论基础。