关键词:
脓毒症
山茱萸新苷
肠黏膜
NF-κB/NLRP3信号通路
摘要:
目的探讨山茱萸新苷对脓毒症大鼠肠黏膜屏障的影响及可能的作用机制。方法将90只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、地塞米松组(10 mg/kg)、山茱萸新苷低剂量组(12.5 mg/kg)、山茱萸新苷中剂量组(25 mg/kg)和山茱萸新苷高剂量组(50 mg/kg),每组15只。除假手术组外,其余各组大鼠均采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症模型。尾静脉注射药物干预,术后24 h取大鼠血清及回肠组织,采用苏木精-伊红(HE)染色法观察小肠黏膜病理损伤情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中黏膜屏障通透性标志物肠型脂肪酸结合蛋白(I-FABP)和二胺氧化酶(DAO)水平及小肠黏膜分泌型免疫球蛋白(sIgA)水平;异硫氰酸荧光素-葡聚糖(FITC-Dextran)示踪法检测肠黏膜通透性;ELISA法检测血清中白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、白介素-18(IL-18)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小肠组织中核转录因子κB(NF-κB)p65、p-NF-κB p65、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(caspase-1)蛋白表达水平。结果HE染色结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠肠黏膜结构缺失,绒毛缩短,炎症细胞浸润;与模型组比较,山茱萸新苷中、高剂量组及地塞米松组大鼠肠黏膜结构相对完整,绒毛排列紧密,炎症细胞浸润减少,而山茱萸新苷低剂量组大鼠肠黏膜结构、绒毛排列、炎症细胞浸润等病理学改善不明显。模型组大鼠血清I-FABP、DAO水平显著高于假手术组(均P<0.05),肠黏膜sIgA水平低于假手术组(P<0.05)。山茱萸新苷中、高剂量组及地塞米松组大鼠血清I-FABP、DAO水平低于模型组(均P<0.05),肠黏膜sIgA水平高于模型组(P<0.05),而山茱萸新苷低剂量组大鼠血清I-FABP、DAO和肠黏膜sIgA水平与模型组差异无统计学意义(均P>0.05)。模型组大鼠血清FITC-Dextran含量高于假手术组(P<0.05);山茱萸新苷中、高剂量组及地塞米松组大鼠血清FITC-Dextran含量少于模型组(均P<0.05),而山茱萸新苷低剂量组大鼠血清FITC-Dextran含量与模型组差异无统计学意义(P>0.05)。模型组大鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-18水平高于假手术组(均P<0.05);山茱萸新苷中、高剂量组及地塞米松组大鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-18水平低于模型组(均P<0.05),而山茱萸新苷低剂量组大鼠各指标与模型组差异无统计学意义(均P>0.05)。模型组大鼠小肠组织p-NF-κB p65/NF-κB p65、NLRP3和caspase-1蛋白表达水平均高于假手术组(均P<0.05);山茱萸新苷中、高剂量组及地塞米松组大鼠小肠组织p-NF-κB p65/NF-κB p65、NLRP3和caspase-1蛋白表达水平均低于模型组(P<0.05),而山茱萸新苷低剂量组各蛋白表达水平与模型组差异无统计学意义(均P>0.05)。结论山茱萸新苷对脓毒症大鼠肠黏膜屏障功能障碍具有一定改善作用,其机制可能与抑制NF-κB/NLRP3信号通路活化有关。