关键词:
黄连制吴茱萸
炮制
抗炎作用
抗氧化作用
抑菌作用
摘要:
目的探讨吴茱萸经黄连炮制前后的抗炎、抗氧化及抑菌作用。方法制备净制吴茱萸饮片、黄连制吴茱萸饮片。采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型评价体内抗炎作用及对脏器指数的影响,将66只KM小鼠随机分为空白对照组(A组,等体积生理盐水),阳性药对照组(B组,醋酸地塞米松5 mg/kg),吴茱萸高、低剂量组(C_(1)组、C_(2)组,5,1 g/kg),黄连制吴茱萸高、低剂量组(D_(1)组、D_(2)组,5,1 g/kg),各11只,灌胃相应药物或20 mL/kg生理盐水,每日1次,连续5 d。采用脂多糖(LPS)诱导小鼠单核巨噬细胞(RAW 264.7)炎性反应,检测空白对照(G组,接种细胞,含等体积DMEM培养液)及不同质量浓度(4,2,1,0.5,0.25 mg/mL)吴茱萸(E1组、E2组、E3组、E4组、E5组)和黄连制吴茱萸(F_(1)组、F_(2)组、F_(3)组、F_(4)组、F_(5)组)对细胞存活率的影响;比较空白组(H组,1 mLDMEM培养液),模型组(I组,含1μg/mLLPS的DMEM培养液1 mL),吴茱萸高、中、低剂量组(J_(1)组、J_(2)组、J_(3)组,含2,1,0.5 mg/mL药液和1μg/mLLPS的DMEM培养液1 mL),黄连制吴茱萸高、中、低剂量组(K_(1)组、K_(2)组、K_(3)组,含2,1,0.5 mg/mL药液和1μg/mLLPS的DMEM培养液1 mL)一氧化氮(NO)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平。采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)评价体外抗氧化活性,采用纸片法和微量二倍稀释法评价对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的体外抑菌活性。结果与A组比较,B组、C_(1)组、C_(2)组、D_(1)组、D_(2)组小鼠耳肿胀度均显著降低(P<0.05),B组、D_(1)组、D_(2)组小鼠胸腺指数均显著降低(P<0.01),B组、C_(1)组、D_(1)组、D_(2)组小鼠脾指数均显著降低(P<0.05),且D_(1)组、D_(2)组小鼠以上指标分别显著低于C_(1)组、C_(2)组(P<0.05)。与G组比较,E1组和F_(1)组的吸光度均显著降低(P<0.01),E5组的吸光度显著升高(P<0.05)。与I组比较,J_(1)组、J_(2)组、J_(3)组、K_(1)组、K_(2)组、K_(3)组NO水平均显著降低(P<0.01),J_(1)组、J_(3)组、K_(1)组、K_(3)组IL-6水平均显著降低(P<0.05),J_(1)组、K_(1)组TNF-α水平均显著降低(P<0.05);与J_(1)组比较,K_(1)组IL-6水平显著降低(P<0.05)。吴茱萸和黄连制吴茱萸均对DPPH自由基有清除作用,半数抑制浓度(IC_(50))分别为0.0743,0.1067 mg/mL。吴茱萸和黄连制吴茱萸均对金黄色葡萄球菌的抑制高敏感,抑菌圈直径分别为(22.83±1.88)mm、(25.00±2.48)mm;而对大肠杆菌的抑制低敏感,抑菌圈直径分别为(7.83±0.85)mm、(7.17±0.94)mm。吴茱萸对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)为15.63 mg/mL,低于黄连制吴茱萸的31.25 mg/mL,而最低杀菌浓度(MBC)均为62.5 mg/mL;对大肠杆菌的MIC和MBC均相同,分别为62.5,125.0 mg/mL。结论吴茱萸及黄连制吴茱萸均有抗炎、抗氧化、抑菌作用,但后者药性更缓和,且抗炎作用更强。