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关键词： 羟基吴茱萸碱   NQO1靶向   吲哚醌   非小细胞肺癌   抗肿瘤活性  

摘要： 研究背景:非小细胞肺癌作为临床上最常见的肺癌类型,在肺癌中占比近85%。研究发现,醌氧化还原酶（NQO1）在多种恶性肿瘤细胞中呈高表达状态,并依赖辅酶NAD（P）H催化一系列醌类化合物还原为氢醌,具有独特的生物活化醌类化合物的特性,可作为抗肿瘤药物研究的一个潜在性分子治疗靶点。3-甲基吲哚醌靶向激活型前药以3-甲基吲哚醌作为NQO1酶的良好底物,能够在细胞内被NQO1酶专性催化,继而发挥抗肿瘤活性,杀伤癌细胞。我国作为中药资源大国,许多中药活性小分子都显现出较好的抗肿瘤活性。其中,吴茱萸碱作为中药吴茱萸的主要生物碱成分之一,在抗肿瘤方面已取得较大进展,不仅对其作用机制也进行了初步探讨,也通过结构修饰和改造研究,合成了一系列毒副作用更小、活性更高的活性衍生物,其中以10-羟基吴茱萸碱活性最佳。研究目的:本文通过一系列化学合成步骤,合成具有NQO1靶向的吲哚醌类吴茱萸碱衍生物,并依据药物设计拼合原理,以吲哚醌小分子作为中间连接基团,得到羟基吴茱萸碱与厄洛替尼拼合药物,结合体外活性评价方法,初步研究其抗肿瘤作用机制,为羟基吴茱萸碱的进一步开发和应用提供参考,并探讨吲哚醌类吴茱萸碱靶向性前药是否能够有效逆转PC-9/GR对吉非替尼的耐药性及其作用机制。研究方法:通过酯化缩合,获得具有NQO1靶向的吲哚醌类吴茱萸碱衍生物,进一步通过点击反应将羟基吴茱萸碱与厄洛替尼拼合得到同时包含两种药物的拼合药物,利用1H-NMR、13C-NMR及ESI-MS确定结构的准确性,MTT法评价所合成目标化合物对非小细胞肺癌的抗肿瘤活性,流式细胞仪初步探讨优势衍生物的抗肿瘤机制,Western blot法检测通路蛋白、凋亡蛋白及耐药相关蛋白的表达情况。研究结果:（1）选用NQO1的良好底物3-甲基吲哚醌分子与10-羟基吴茱萸碱相连,并以二元羧酸为连接键,设计合成一系列具有NQO1靶向的吲哚醌类吴茱萸碱衍生物,所得化合物1H-NMR、13C-NMR、ESI-MS等分析手段进行表征确认,并对其进行了细胞毒性实验,发现在羟基吴茱萸碱上引入吲哚醌母核后,化合物9a、9b可明显改善其抗肿瘤活性;随后,选择化合物9b为优势衍生物,在NQO1抑制剂双香豆素存在下,化合物9b对NQO1高表达的A549细胞抗增殖活性降低,说明NQO1参与了吲哚醌类化合物的生活还原活化过程,且与抗增殖活性密切相关;采用HPLC进行前药的释放研究,发现在加入NQO1酶后前药释放量增加,进一步说明了NQO1酶参与了化合物的生物还原活化;同时,通过流式细胞仪检测了化合物9b对H358细胞的凋亡影响,发现其能够诱导细胞凋亡;Western blot法检测化合物9b对H358细胞信号通路相关蛋白表达的影响,结果表明化合物9b诱导细胞凋亡与线粒体途径有关,并影响（PI3K）/Akt/m TOR和（MAPK）/ERK/m TOR信号通路;最后通过计算机模拟化合物与蛋白的结合情况,结果表明所合成化合物能够与NQO1蛋白通过氢键稳定结合。（2）利用拼合药物设计原理,以吲哚醌小分子作为中间连接基团,将羟基吴茱萸碱和厄洛替尼进行拼接,设计、合成羟基吴茱萸碱与厄洛替尼拼合药物化合物13,经1H-NMR、13C-NMR、ESI-MS表征结构正确;抗肿瘤活性评价结果显示,化合物13对于NQO1过表达的A549、H460、PC-9及其耐药株PC-9/GR四种非小细胞肺癌细胞都具有一定的抗增殖活性;将化合物13与NQO1抑制剂双香豆素共培养,共培养后的细胞对化合物13的敏感性降低,证明其抗增殖活性与NQO1酶密切相关;进一步的作用机制研究表明,化合物13可促进细胞周期阻滞于G0/G1期,诱导凋亡;在诱导细胞凋亡方面,能够下调Bcl-2/Bax比值,并促进caspase-3、caspase-9和P53的表达增加。（3）将不同浓度的化合物9b作用于PC-9及其耐药株PC-9/GR细胞,研究其对PC-9/GR细胞的耐药逆转作用。体外抗肿瘤试验表明化合物9b对PC-9及其耐药株PC-9/GR均表现出优异的抑制活性,在耐药细胞PC-9/GR中还显示出一定的逆转吉非替尼耐药的能力,并呈剂量依赖方式促进PC-9/GR细胞的凋亡,阻滞细胞周期于S期;进一步耐药机制研究表明,其通过降低耐药相关蛋白P-gp、MDR及ABCG2的表达来逆转耐药。研究结论:（1）吲哚醌类吴茱萸碱靶向性前药9b能够被NQO1特异性激活,抑制细胞增殖,诱导凋亡,提高了羟基吴茱萸碱的靶向性;体外抗肿瘤机制研究表明,（PI3K）/Akt/m TOR和（MAPK）/ERK/m TOR通路可能参与了靶向性前药9b于体外杀伤非小细胞肺癌细胞的分子作用途径。（2）以吲哚醌小分子作为中间连接基团的羟基吴茱萸碱和厄洛替尼拼合药物13对非小细胞肺癌细胞都具有一定的抗增殖活性,能够阻滞细

关键词： 吴茱萸碱   结肠癌sw480细胞   wnt/β-catenin信号通路   β-catenin   Cyclin D1  

摘要： 研究背景与目的:结直肠癌（Colorectal Carcinoma,CRC）是全球常见的恶性肿瘤之一,其发病率及病死率日渐上升。奥沙利铂（Oxaliplatin,L-OHP）作为第三代新型铂类化疗药,广泛应用于结肠癌的治疗方案中,然而,临床观察可见其具有一定的毒副作用及耐药性,可能对患者预后产生不良影响。吴茱萸碱（Evodimine,EVO）是一种从中药吴茱萸中分离出的天然生物碱成分,现代药理学研究显示,吴茱萸碱具有较好的抗肿瘤活性、抗骨质疏松、抗炎等作用。近年来关于中药中单体成分的抗瘤活性研究发现相较于西医化疗药物具有更少的不良反应,可提高机体免疫力,延长患者生存期。通过前期课题组的实验研究发现反左金丸及其主要成分盐酸小檗碱均有较好的抗肿瘤活性,为进一步探究,我们通过富集分析进行数据挖掘寻找相关通路及研究因子并建立荷瘤裸鼠模型,应用不同浓度的吴茱萸碱以研究其对结肠癌的抑瘤效果并摸索可能的作用机制,试图找出更为安全有效的化疗药物,为吴茱萸碱临床应用于结肠癌的治疗提供更多客观的实验依据。本实验的目的是观察吴茱萸碱对人源性结肠癌sw480细胞荷瘤裸鼠肿瘤的抑制作用,以及对细胞周期、β-连环蛋白（β-catenin）、细胞周期蛋白D1（cyclin D1）的影响结合富集分析结果探讨其可能的相关作用机制。研究方法:通过功能富集分析挖掘结肠癌相关信号通路及相关研究基因;常规培养人源结肠癌sw480细胞,使用前将其调整成浓度为5×10～6个/ml的单细胞混悬液,按0.2cell·ml-1的剂量接种于5只裸鼠右侧腋部皮下,每日观察实体瘤的生长情况,待测量到瘤体的直径超过1cm时,剖取无溃烂且状态较好的移植瘤样本,将其直接接种于剩余裸鼠的右侧腋下,直至瘤块生长体积超过100mm3左右时随机分为空白对照组、阳性对照组（奥沙利铂组）、吴茱萸碱低剂量组、吴茱萸碱中剂量组、吴茱萸碱高剂量组,共计5组,每组6只,连续给药干预3周。期间观察荷瘤裸鼠的精神状况,定期测量并记录裸鼠的瘤重及体重,末次给药结束后通过摘除眼球的方式采血,迅速剥出皮下移植瘤,称重并计算抑瘤率、应用血清生化分析仪化验肝功能、流式细胞仪测定肿瘤组织细胞周期百分率、肿瘤组织HE染色观察病理形态、免疫组化技术分析肿瘤组织中β-catenin和Cyclin D1的表达情况。结果:1、通过KEGG信号通路富集分析发现这些结肠癌差异基因涉及信号通路众多,其中前20条信号通路包括Wnt信号通路（Wnt signaling pathway）、TNF信号通路（TNF signaling pathway）、NF-kappa B信号通路（NF-kappa B signaling pathway）等。利用c Bio Portal工具分析CCNB1和CTNNB1的遗传信息结果发现在TCGA（Pan Cancer Atlas）数据集中收集的594例样本中,有52例（8.7%）在这两个基因中发生突变。2、实验各组瘤重均值分别为1.41±0.83g;0.67±0.16g;0.78±0.43g;0.75±0.52g;0.73±0.29g。与空白对照组相对比,奥沙利铂组、吴茱萸碱低剂量组、吴茱萸碱中剂量组及吴茱萸碱高剂量组的裸鼠肿瘤重量均偏小且差异存在统计学意义（P﹤0.05）,其中,奥沙利铂组抑制肿瘤效果最强,抑瘤率为52%;其次是吴茱萸碱高剂量组,抑瘤率为48%;再者是吴茱萸碱中剂量组,抑瘤率为47%;而吴茱萸碱低剂量组的抑制肿瘤生长效果最弱,抑瘤率为45%,但三组之间的差异并不存在统计学意义（P﹥0.05）。与奥沙利铂组相对比,吴茱萸碱低剂量组、吴茱萸碱中剂量组及吴茱萸碱高剂量组的瘤重均值明显偏大但差异不存在统计学意义（P﹥0.05）。3、实验药物干预各组荷瘤裸鼠的肝功能检测结果与空白对照组比较的差异并不存在统计学意义（p>0.05）,不同浓度吴茱萸碱实验组组间的差异也不明显(（p>0.05）)。4、流式细胞仪分析结果:吴茱萸碱低剂量组（52.66±9.25）%、吴茱萸碱中剂量组（63.76±9.21）%和吴茱萸碱高剂量组（54.83±9.32）%在G0/G1期的百分率比奥沙利铂组（49.72±10.10）%高,但差异不存在统计学意义（p>0.05）;相较于空白对照组,吴茱萸碱中剂量组在G0/G1期的百分比较高,吴茱萸中剂量组和吴茱萸高剂量组在G2/M期的百分比明显升高,且差异存在统计学意义（p<0.05）。5、通过对肿瘤组织常规HE染色,镜下观察可见空白对照组肿瘤细胞排列紧密且呈不规则形态,大小不一,以类圆形为主,胞核偏大,染色较深,异型明显。吴茱萸碱给药干预组中出现肿瘤组织的片状坏死、退变,细胞发生核固缩及崩解,核分裂象减少。6、通过对免疫组化染色结果的对比分析可见,在空白对照组中β-catenin和Cycl

关键词： 吴茱萸汤   方证理论   伤寒论   金匮要略   医案统计  

摘要： 目的:本文通过整理《伤寒论》和《金匮要略》中与吴茱萸汤方证相关的条文,并结合后世医家的论述阐释和现代临床医案数据统计,进而深入探讨本方的辨证特点、用药规律及疾病运用范畴,为临床使用提供理论支持。方法:第一部分,以宋版《伤寒论》和《金匮要略》为蓝本,摘取两书中与吴茱萸汤证相关的条文,并结合后世医家的注解,探析本方证的基本要素,包括病因病机、主症、病位、方药、类似方证及争议问题。第二部分,收集后世医家书中关于吴茱萸汤方证之临床应用与认识的记载,如《千金要方》《外台秘要》《圣济总录》等书,进而归纳后世医家对于本方的继承发展及创新应用。第三部分,筛选吴茱萸汤现代临床医案报道,运用现代统计学方法进行处理。通过搜索中国知网、万方、维普数据库1990至2021年10月中与吴茱萸汤的相关医案,筛选符合标准的个案,并标准化分类所陈述的内容,创建Microsoft Access数据库统计数据,对中医病名、西医病名、症状、证型、舌象、脉象、药物剂量等信息进行统计分析,以期明确现代临床中吴茱萸汤证的临床辨证要点、用药规律等问题。结果:吴茱萸汤证的病机包括阳明虚寒、少阴寒盛及厥阴肝寒。吴茱萸汤证的主要症状有胃中虚寒之呕吐,厥阴肝寒之巅顶头痛、吐涎沫,阳虚之手足不温,少阴吐利之烦躁,肝寒凝滞或中焦虚寒之胸胁满闷。主要病位涉及肝、脾胃、心肾、头部、手足、膈。吴茱萸汤具有温肝暖胃、助阳祛寒、降逆止呕之效。吴茱萸一药在热汤浸泡晒干后苦烈之性减弱方可入药。通过后世医家的应用发展,吴茱萸汤亦可用于治疗久寒胸胁逆满、妇女月经不调、阴缩等病症,煎汁外用可治疗虫蛇咬伤,内服可具有软化骨鲠的作用。通过现代医案统计,在纳入的103份病例中,根据频数统计分析,吴茱萸汤的临床症状以头痛、吐涎沫、呕吐、疲乏、头晕、食欲不振、四肢欠温、胃寒、恶心、大便溏薄、目眩、不寐、干呕、面色白、舌淡白,苔白或白腻、脉弦细或沉弦为主。证型以肝胃虚寒证、中焦虚寒证及厥阴肝寒证为主。中医病症分布以肝胆病和脾胃病为主,具体包括头痛、呕吐、眩晕、胃痛、泄泻。西医疾病分布以神经系统疾病和消化系统疾病为主,具体包括急慢性胃炎、美尼尔氏综合征、神经性呕吐、高血压。临床药物组成为吴茱萸、大枣、生姜、党参或人参,常用加减药物有半夏、当归、茯苓、白术、川芎。结论:通过研究发现,吴茱萸汤主要用于治疗以肝胃虚寒,浊阴上泛为发病机理的病症。临床辨证要点以头痛、呕吐或吐涎沫、疲乏、头晕、食欲不振、四肢不温、舌淡白,苔白或白腻,脉弦细或沉弦为主。吴茱萸汤常用组方为吴茱萸、生姜、党参、大枣。本方在临床使用时,多以党参易人参,亦有用红参、太子参替之。其药物临床平均剂量为吴茱萸11g、大枣6枚、人参10g、党参18g、红参9g、太子参12g、生姜16g、干姜9g。本方临床加减药物常用配伍:呕吐甚者加半夏、吐利甚者加茯苓、头痛甚者加川芎、妊娠呕吐者加白术、痛经者加当归。现代临床上,中医运用吴茱萸汤治疗脾胃病和肝胆病疗效较好,具体病症有呕吐、胃痛、头痛、眩晕,主要证型为肝胃虚寒证、中焦虚寒证、厥阴肝寒证。西医以治疗神经系统和消化系统疾病为优势,如急慢性胃炎属中焦虚寒者、神经性呕吐及美尼尔氏综合征属肝胃虚寒者、高血压属厥阴肝寒者等有良好的治疗效果。通过对吴茱萸汤方证理论的系统梳理,以期为现代临床治疗里寒型病症提供思路。

摘要： This project examines the reciprocal and evolving relationship between American women’s culture, vernacular religion, and the social development of American ethnicity. This project focuses on the roles of white ethnic women, both literary and real, in the construction, maintenance, and transmission of ethnic identity. The project highlights the connections between the folkloric performances of vernacular religion and the discursive articulation of ethnicity by focusing on two women writers and two groups of Slovak American women. The fiction of Kate Chopin and Anzia Yezierska illustrates how literary authors bring their contemporary concepts of folklore into their writing. The writings of these two women reveal the development from group-based difference to ethnicity in the early twentieth century. These literary depictions are paired with the life experience narratives collected from two small groups of Slovak American women: a subset of American Catholic sisters from the Vincentian Sisters of Charity and a group of women who belong to the Slovak Heritage Association of the Laurel Highlands. Together, these oral history-based chapters illustrate the ways in which women’s culture is fundamental to the development of American ethnicity. The stories of these women challenge the boundaries of what are considered stable boundaries of racial and ethnic groups. Through this research, I provide an overview of the techniques through which women’s engagement in informal religious traditions fuels the social dynamism of ethnicity.

关键词： 国际中文教育   《诗经》   祭祀文化   文化教学  

摘要： 《诗经》是儒家“五经”之一,在中外文化交流的进程中,《诗经》就一直作为中华文化经典的代表性符号得到广泛传播。《诗经》中包含着丰富多彩的礼仪文化,体现了西周时期和谐的社会秩序和完备的社会规范,这些礼仪制度今天仍然影响着中国人的情感和行为,更是国外汉学家研究的焦点和外国留学生了解中国的媒介,在当代中国加强国际传播能力的背景下,对《诗经》礼仪文化进行研究和教学仍然具有现实意义。本论文以《诗经》中的祭祀礼仪为研究对象,在详细分析《诗经》中祭祀礼起源的基础上,整理出了《诗经》中祭祀礼的类别,并对其中的郊祀礼、雩祭礼、宗庙礼、丧祭礼进行了分类研究,总结归纳出祭祀礼所包含的天人合一、敬畏神灵、和谐繁荣、崇德尚礼、文化传承的精神文化内涵,并从祭祀礼是礼仪文化的雏形、促进人与人之间的沟通、维系社会和谐等方面分析了祭祀礼的意义。本论文以建构主义学习理论、文化差异的民族性为理论基础,以《诗经》中的祭祀礼为研究对象,在分类归纳出了祭祀文化教学的重要意义的基础上,最后得出了从国际中文教育的角度《诗经》祭祀文化教学的应遵循的教学原则和教学方法,并对《诗经》祭祀文化进行了教学设计,以此提高外国留学生学习体会中国礼仪文化的兴趣,感受中华文化的魅力,促进中华文化的传播。

关键词： 吴均   “史才”   边塞诗   用典   《续齐谐记》  

摘要： 作为齐梁时期著名的文学家、史学家，吴均的“史才”对其诗歌和小说的创作产生了一定的影响。于诗歌而言，不仅表现在边塞诗的纪实性，还体现在好用典，并常以历史人物作比；于小说而言，史学实录的精神与文学手法的结合，使其在艺术上较其他小说更胜一筹。

摘要： 小靳村人文自然环境小靳村位于山西省介休市南面10公里绵山脚下，村落历史悠久，文物古迹、遗存古物随处可见，全国重点文物保护单位东岳庙亦在此。为落实关于保护和弘扬优秀传统文化的精神，挖掘整理传统村落民俗文化建筑与文化遗产，小靳村村民继承了每年3次的传统庙会习俗，分别于每年正月初十举行祭祀活动、七月初七唱猴猴、九月初九唱庙会，来表达对先贤神佛的敬仰及对未来美好生活的期盼。特别是每年正月初十的祭祀仪式一直流传至今，兼以舞龙灯、

关键词： 谶纬   礼制   祭祀制度   儒学神化   光武封禅  

摘要： 谶纬文献的产生,源于西汉中后期儒生假托孔子之名,以神学化的思维对儒家经籍进行再解释的社会思潮。光武在两汉之际的政治纷争中应图谶而兴,使得谶纬之学在东汉获得了官方显学的地位,一度凌驾于经学之上,并深刻影响了东汉初年的政治社会。谶纬用以解释世界本质及其运转规律的核心观点,是以阴阳五行与数术学说为基本框架的天人感应思想,对天人沟通之事的重视使得其在东汉国家祭祀制度的建设中影响尤甚。谶纬文献所载祭祀制度,涉及宗庙、郊祀、封禅及三朝之礼等诸多方面。虽然谶纬文献在某些方面对礼的内容和功用做了有侧重的论述,但从其佚文中仍能发现,纬与经在祭祀礼制的大多数问题上是观点趋同的。这主要是因为,谶纬文献主要产生于西汉中后期,当时的礼制改革大致是以符合经义为标准、以重塑一统为目标的。纬书在宗庙、祭天与封禅等国家祭祀制度的关键礼制上,都深受这一大势影响,其所记载的其实是改革后趋于规整与完整的祭祀制度,因此才会出现经、纬之礼的趋同,以及纬书观点倾向于西汉礼制“改革派”的历史结果。基于这样的史实,谶纬对东汉祭祀制度的影响并不在其对具体礼仪细节规范的指导上,而在于谶纬作为官方意识形态的崇高地位,它使得“引谶制礼”为东汉的礼制重建增添了权威性和合理性。尤其是在宗庙、封禅这类事关阐释东汉法统与光武天命的祭祀活动中,谶纬是作为构建东汉权力合法性的思想权威和礼学理论资源,其政治支撑作用远远大于其礼制指导功用。光武帝封禅祭文中对谶纬的大量引用,实际上有效地构建出了其受命中兴的政治神话,从而使两汉之间的继承关系在封禅仪式中得到了权威性确认。光武帝通过真正实现“受命中兴”的方式,彻底消解了西汉成、哀时期以来对汉室统治权威的质疑情绪和“更受命”流言的不利影响,在思想上稳固了东汉的再统一局面。这才是“纬书之礼”不可被“经书之礼”所替代的关键历史意义。

关键词： 吴茱萸汤   针刺   反流性食管炎  

摘要： 目的探讨吴茱萸汤联合针刺治疗肝胃虚寒型反流性食管炎(RE)的临床疗效。方法将医院2019年8月—2021年8月收治的76例肝胃虚寒型RE患者,按照随机数字法结合组间性别、年龄、病情严重程度均衡可比的原则,分为对照组和观察组,每组38例。治疗组采用吴茱萸汤联合针刺治疗,对照组采用常规针刺治疗。对比两组患者的治疗效果、治疗后的中医症状积分变化及不良反应发生率。结果治疗组的总有效率高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);治疗前,两组患者主症与次症的中医症状积分差异无统计学意义(P>0.05);治疗1个月后,治疗组患者的烧心、反酸、神疲乏力、纳差、上腹痛、大便稀溏、苔白腻等中医症状积分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组的不良反应发生率接近于对照组,差异无统计学意义(P>0.05)。结论吴茱萸汤联合针刺治疗肝胃虚寒型RE患者可改善中医症状,且不良反应少。