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关键词： 山茱萸多糖   血管内皮细胞   凋亡   自噬   AMPK/SIRT1信号通路  

摘要： 目的通过山茱萸多糖对OX-LDL诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)自噬及凋亡影响,探讨山茱萸多糖对内皮细胞损伤的保护作用,并进一步观察山茱萸多糖的作用机制是否通过调控腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(SIRT1)通路,从而对血管内皮细胞发挥保护作用。 方法体外培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),OX-LDL作用于人脐静脉血管内皮细胞诱导其损伤建立模型。用山茱萸多糖(6、12.5和25mg/mL)预处理1h,并与100ug/mL的OX-LDL连续孵育24h,采用MTT法检测HUVECs活力、乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测LDH,流式细胞术检测HUVECs凋亡率,筛选出适合的山茱萸多糖浓度用于后续的实验。山茱萸多糖对OX-LDL诱导HUVECS损伤及SIRTI信号通路的作用。实验分6组,空白对照组(si-Control预转染HUVECs);模型组(si-Control预转染HUVECs中加入100ug/mL的OX-LDL孵育24h);山茱萸多糖组(si-Control预转染HUVECs中先加入25mg/mL浓度的山茱萸多糖孵育1h,再加入100ug/mL的OX-LDL孵育24h);si-SIRT1对照组(si-SIRT1预转染HUVECs);si-SIRT1预转染组(si-SIRT1预转染HUVECs中加入100ug/mL的OX-LDL孵育24h);si-SIRT1+山茱萸多糖组(si-SIRT1预转染HUVECs中先加入25mg/mL浓度的山茱萸多糖孵育1h,再加入100ug/mL的OX-LDL孵育24h)。AMPK/SIRT1通路介导山茱萸多糖对OX-LDL诱导HUVECS的作用。实验分6组,空白对照组(si-Control预转染HUVECs);模型组(si-Control预转染HUVECs中加入100ug/mL的OX-LDL孵育24h);山茱萸多糖组(si-Control预转染HUVECs中先加入25mg/mL浓度的山茱萸多糖孵育1h,再加入100ug/mL的OX-LDL孵育24h);si-AMPK对照组(si-AMPK预转染HUVECs);si-AMPK预转染组(si-AMPK预转染HUVECs中加入100ug/mL的OX-LDL孵育24h);si-AMPK+山茱萸多糖组(si-AMPK预转染HUVECs中先加入25mg/mL浓度的山茱萸多糖孵育1h,再加入100ug/mL的OX-LDL孵育24h)。采用流式细胞术检测细胞凋亡率,比色测定试剂盒检测Caspase-3活力,Western Blot法检测自噬相关蛋白Beclin-1、LC3I/LC3II和SIRT1、P-AMPK相关蛋白表达水平。 结果不同浓度山茱萸多糖(6.25、12.5和25mg/mL)与OX-LDL同时作用HUVECs时,细胞存活率逐渐上升,LDH释放逐渐减少,凋亡率降低(P<0.05);与空白对照组比,模型组能够显著降低HUVECs的活力,增加细胞中LDH的释放、凋亡率及Caspase3活性(P<0.05),同时增加了自噬相关蛋白Beclin-1和LC3I/LC3Ⅱ的表达(P<0.05),而SIRT1和P-AMPK蛋白表达降低(P<0.05);与模型组比,山茱萸多糖可逆转OX-LDL诱导的细胞活力下调、LDH释放和细胞凋亡率及Caspase3活性增加(P<0.05);同时减低了自噬相关蛋白Beclin-1和LC3I/LC3II的表达(P<0.05);此外,山茱萸多糖增加OX-LDL诱导的HUVECs中SIRT1和P-AMPK蛋白的表达(P<0.05);si-SIRT1消除了山茱萸多糖对OX-LDL诱导的细胞活力上升和LDH释放减低、caspase-3活性、细胞凋亡率和细胞自噬蛋白表达增加(P<0.05);同时降低SIRT1蛋白的表达(P<0.05);si-AMPK同样消除了山茱萸多糖对OX-LDL诱导的细胞活力的上升和LDH释放的降低,除此之外,si-AMPK还进一步降低了SIRT1的表达(P<0.05)。 结论山茱萸多糖对OX-LDL诱导的HUVECs的损伤具有明显保护作用,其机制可能与激活AMPK/SIRT1通路有关。

关键词： 糖尿病肾病   焦亡   足细胞   吴茱萸次碱   VEGFR2  

摘要： 背景与目的:糖尿病(DM)的患病人数在世界范围内以惊人的速度不断增加。据统计,2021年全球有5.37亿成年人患有这种疾病。其中,90%的糖尿病患者为2型糖尿病。糖尿病肾病(DKD)是糖尿病累及肾脏所产生的疾病,在我国的发病率呈现上升趋势,已成为当今世界终末期肾病(ESRD)的首要原因。DKD临床以微量蛋白尿到大量蛋白尿伴随肾功能损害为特征,而肾小球足细胞是肾小球电荷屏障的重要组分之一,起着调节肾小球滤过功能的重要作用。探究足细胞的受损机制对于DKD的治疗有着重要意义,寻找关键治疗靶点对疾病的防治有着较大的研究空间。传统中药(TCM)在中国已有数千年的历史,中药更是被广泛用于糖尿病及其并发症的治疗。随着中药治疗DKD的疗效及作用机制研究的深入,中药可能在缓解蛋白尿方面发挥重要作用。吴茱萸次碱(Rutaecarpine)是中药吴茱萸的一种重要活性成分,在抗炎症治疗方面有着大量报道。因此吴茱萸次碱可作为多种疾病的潜在治疗药物。课题组前期研究结果显示,吴茱萸次碱(Rut)在肾脏疾病中有良好的保护作用。本课题旨在探究吴茱萸次碱能否改善糖尿病肾病肾脏损伤,以及其具体作用机制,为治疗糖尿病肾病的药物开发提供新思路。方法:体内实验:使用db/db小鼠(C57BLKS/J db/db)模拟2型糖尿病肾病,模型治疗组分别进行12周吴茱萸次碱灌胃治疗,每两周检测记录一次小鼠体重及血糖变化。该实验分为六组(n=6-8):db/m对照组,单独灌药组(Rut),db/db模型组,模型治疗组(db/db+Rut5、10、20mg/kg)。12周后检测小鼠一般指标和病理学变化,24h尿蛋白定量,以及观察足细胞损伤指标。HE、PAS、透射电镜染色观察各组肾小球形态学变化。通过免疫组化和(或)Western blot检测糖尿病小鼠肾小球中足细胞损伤标志物蛋白表达变化(nephrin/podocin/WT-1),检测炎症炎症指标的表达及活化程度(NLRP3/ASC/IL-18/IL-1β);实时荧光定量PCR检测炎症因子m RNA表达水平的变化(IL-18/IL-1β);Western blot,免疫组化,实时荧光定量PCR技术检测焦亡相关蛋白的活化、表达情况(caspase-1/GSDMD)。体外实验:选取小鼠足细胞(MPC5)作为实验对象。运用MTT实验筛选出吴茱萸次碱药物毒性以及药物最适浓度。实验分为七组:正常组,甘露醇组,正常+吴茱萸次碱组,高糖组,高糖+不同剂量吴茱萸次碱组(0.25μM、0.5μM、1μM)。通过免疫荧光和Western blot实验检测细胞损伤(nephrin/podocin);Western blot和(或)实时荧光定量PCR技术检测炎症因子的表达(NLRP3/ASC/IL-18/IL-1β);Western blot和实时荧光定量PCR技术检测焦亡参与蛋白的活化及含量(caspase-1/GSDMD);TUNEL试剂盒检测细胞程序性死亡水平。运用Dicovery Studio软件进行药物靶点预测,评选出药物最有潜力的作用靶点VEGFR2;采用分子对接、热位移(CESTA)实验以及表面等离子共振法(SPR)加以验证药物与靶点是否可以结合以及结合的作用模式和稳定性;同时,我们运用免疫共沉淀(co-ip)验证了药物靶点蛋白与下游信号通路蛋白NLRP3的结合。Western blot实验检测各组小鼠肾脏组织及MPC5细胞中VEGFR2的表达;通过转染实验沉默MPC5细胞中的靶点蛋白(VEGFR2),再运用Western blot以及实时荧光定量PCR技术检测作用靶点沉默成功后,药物对MPC5胞损伤、炎症、焦亡反应指标的影响。结果:体内实验:生化指标提示,经吴茱萸次碱治疗后可以显著逆转db/db2型糖尿病小鼠的肾功能减退;HE、PAS染色、透射电镜显示吴茱萸次碱治疗后db/db糖尿病小鼠的肾脏的病理学特征如肾小管扩张、系膜区扩张增生、足突宽度、基底膜厚度都有所改善;Western blot和免疫组化实验结果均提示db/db糖尿病小鼠肾脏中nephrin/podocin/WT-1表达量下降,而吴茱萸次碱可以上调这些指标;同样,实时荧光定量PCR和(或)Western blot、免疫组化实验提示db/db糖尿病小鼠肾脏中高表达的NLRP3/ASC/IL-18/IL-1β经吴茱萸次碱治疗后有所缓解;Western blot和(或)实时荧光定量PCR、免疫组化实验同样提示经吴茱萸次碱治疗后糖尿病小鼠的caspase-1/GSDMD表达水平被显著遏制。且上述指标均对吴茱萸次碱呈药物依赖性上调或下降。体外实验:MTT法显示,吴茱萸次碱有效浓度分别为0.25u M、0.5u M、1u M。Western blot和免疫荧光表明吴茱萸次碱可以上调高糖诱发

关键词： 糖尿病肾病   吴茱萸次碱   炎症   细胞外基质   CK2α  

摘要： 背景和目的:糖尿病肾病（DN）是糖尿病的严重微血管并发症之一,也是导致终末期肾病（ESRD）的主要原因,并且其患病率在全球范围内以惊人的速度增加,为社会带来了巨大的经济负担。DN的主要病理特征之一就是肾脏细胞外基质（ECM）蛋白积聚,从而导致肾小球系膜区扩张,最终导致肾小球硬化,而肾小球系膜细胞（GMCs）在调节系膜区基质的稳态中发挥重要作用。目前对于DN的治疗策略并不能满足现有的需求,寻找新的治疗药物迫在眉睫。吴茱萸次碱（Rut）是从传统中药吴茱萸中提取出的生物碱,具有多种生物活性,其中包括抗炎、抗纤维化、抗氧化等,另外有研究提出Rut对DN具有一定保护作用,同时在其他肾脏疾病模型中也表现出了很好的保护作用。因此本研究旨在探究Rut是否能够对DN GMCs发挥保护作用及具体机制。方法:体内实验:选取db/db糖尿病小鼠作为DN动物模型,db/m小鼠作为对照,血糖≥16.7mmol/l的小鼠代表糖尿病成模。将db/m小鼠随机分成2组:（1）db/m组,（2）db/m+Rut组;将成模的db/db小鼠随机分成4组:（1）db/db组,（2）db/db+5mg/kg Rut组,（3）db/db+10mg/kg Rut组,（4）db/db+20mg/kg Rut组;每组6只。每天灌胃一次,每两周测一次尾尖血糖,饲养12周。分别称量小鼠的肾脏重量与体重,计算小鼠的肾重体重比。收集小鼠的24小时尿液离心后弃沉渣,然后用白蛋白检测试剂盒检测24小时尿白蛋白。收集小鼠血液并检测血清肌酐和尿素氮。为了观察小鼠的肾脏病理结构改变,我们进行了石蜡切片的HE、PAS染色以及制作了电镜标本。通过免疫组化和Western blot观察纤连蛋白（FN）、Ⅳ型胶原（Col-Ⅳ）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、转化生长因子β1（TGF-β1）和蛋白激酶Ⅱα（CK2α）在小鼠肾组织中的分布及表达情况。为了观察小鼠肾脏的炎症反应,通过免疫组化和实时荧光定量PCR检测了单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）在肾组织中的定位及表达变化。通过Western blot检测p-Smad3、Smad3、NF-κBp65、p-NF-κBp65在小鼠肾组织中的表达情况。体外实验:选择系膜细胞SV40 MES 13细胞株为研究对象。首先使用MTT实验筛选Rut对SV40细胞的药物无毒剂量、发挥保护作用的最适剂量。实验分组:甘露醇对照组（M）、低糖组（LG）、低糖+Rut组（LG+2μM Rut）、高糖组（HG）、高糖加低、中、高剂量Rut组（HG+0.5、1、2μM Rut）。将SV40细胞与含30m M高糖的培养基及不同浓度的Rut培养24小时后,为了观察FN、Col-Ⅳ、α-SMA、TGF-β1、p-Smad3、Smad3、p-NF-κBp65、NF-κBp65、CK2α、p-CK2α的蛋白表达水平,采用Western blot方法检测。MCP-1、TNF-α、IL-1β的mRNA表达水平由实时荧光定量PCR检测。采用免疫荧光的方法观察SV40细胞中FN的表达变化。使用discovery studio 2018软件筛选Rut可能的潜在靶点,通过分子对接、细胞热位移实验（CETSA）证明Rut与CK2α的结合。通过si RNA转染沉默CK2α的表达,将CK2α沉默后的SV40细胞与含有30m M高糖的培养基及Rut一起培养24小时后,采用Western blot实验方法观察FN、Col-Ⅳ、α-SMA、TGF-β1、p-Smad3、Smad3、p-NF-κBp65、NF-κBp65的表达情况,实时荧光定量PCR检测MCP-1、TNF-α、IL-1β的mRNA表达水平。结果:体内实验:Rut对db/db小鼠的血糖无降低作用,但是能够降低肾重体重比值,减少24小时尿白蛋白排泄,降低血肌酐和血尿素氮改善肾功能。显微镜下观察HE、PAS染色切片可看到Rut治疗组小鼠的肾脏组织结构趋于正常化,同时发现Rut可抑制系膜区的扩张及ECM的积聚。电镜结果显示Rut可抑制db/db小鼠肾小球基底膜（GBM）的增厚,减少系膜区ECM的沉积。免疫组化结果显示,Rut降低了db/db小鼠肾脏内FN、Col-Ⅳ、α-SMA、TGF-β1、MCP-1、TNF-α、IL-1β的表达。Western blot结果显示Rut可降低db/db小鼠肾脏内FN、Col-Ⅳ、α-SMA、TGF-β1、p-Smad3、p-NF-κBp65、CK2α的表达。实时荧光定量PCR结果表明Rut可降低db/db小鼠肾脏内MCP-1、TNF-α、IL-1β的mRNA水平。体外实验:MTT实验筛选出Rut的最适作用浓度为0.5μM、1μM、2μM。Western blot结果

关键词： 糯良佤族   农耕祭祀   仪式变迁   社会变迁  

摘要： 佤族传统农耕祭祀仪式是佤族民俗信仰意识中文化内涵丰富、民众参与广泛、文化象征意义完整的一套祭祀仪式体系,其反映着佤族人民万物有灵的传统信仰观,规范着佤族人民的社会秩序,强化着佤族社会的民族凝聚力。从仪式变迁的视角来探究佤族传统农耕祭祀仪式在经济社会转型的大背景下而产生的一系列变迁,是我们深入研究佤族传统文化的一个重要方面,这对传承和保护佤族优秀传统文化具有十分重要的理论意义和现实意义。目前,国内外关于佤族传统农耕祭祀仪式的研究,主要集中在佤族传统农耕祭祀仪式的文化功能以及主持农耕祭祀仪式的领袖(魔巴)及其社会功能等两个大的方面,而对于佤族传统农耕祭祀仪式的变迁性研究还比较少。基于此,本研究以“农耕祭祀仪式”为焦点,选取云南省临沧市沧源县糯良佤族村为田野点,从宏观视角出发,紧紧围绕着“社会变迁”这一历时性主线,从糯良佤族农耕祭祀仪式自1950年以来的“延续(1950—1960)—断裂(1960—1978)—恢复(1978—1985)—革新(1985—2021)”的流变过程切入,将传统农耕祭祀仪式置于当地佤族社会发展变迁的时代背景之中,采用文献整理、实地访谈、参与观察等相结合的方法,来探讨糯良佤族传统农耕祭祀仪式的结构、功能及其文化意涵。在此基础上,本研究从微观层面出发,着重探讨了1985—2021年糯良佤族农耕祭祀仪式在内容、形制以及功能等方面的革新问题,并从政府政策影响、经济结构转型、文化结构转型等层面深入剖析了其发生“革新”的主要原因。最后,本研究从仪式变迁、社会结构、文化展演等角度分析、归纳出“仪式变迁是社会结构变迁的重要缩影”,“文化展演是文化自觉与文化传承的重要形式”,“具有历时性和共时性的文化个性是深刻诠释社会结构的一种重要面向”,“仪式变迁是国家、社会与地方三者之间的一种文化博弈”等四个方面的研究结论。

关键词： 山茱萸   炮制   挥发油   代谢组学   气-质联用   液-质联用   网络药理学   马钱苷  

摘要： 目的:对山茱萸炮制前后挥发性成分和环烯醚萜类成分进行定性分析,对主要环烯醚萜类成分进行定量分析,经过多元数据统计筛选出山茱萸炮制前后挥发油和环烯醚萜类差异性成分;对环烯醚萜类差异性成分进行网络药理学研究,构建药物-靶点-通路-疾病网络。同时对山茱萸中主要环烯醚萜类活性成分马钱苷进行代谢物鉴定,研究其在大鼠体内的生物转化。方法:利用GC-MS和LC-MS技术分别对山萸肉和酒萸肉的挥发性成分和非挥发性成分进行了分析。采用水蒸气蒸馏法提取山萸肉和酒萸肉挥发油,使用超声提取法提取山萸肉和酒萸肉中的环烯醚萜类成分,样品预处理后分别进行GC-MS和LC-MS分析。将所得挥发油数据通过NIST MS数据库根据名称、分子式和CAS对挥发性成分进行鉴定分析,将LC-MS相关数据根据自建的环烯醚萜类成分数据库对环烯醚萜类成分进行Peak View分析,最终鉴定出山茱萸炮制前后的挥发性成分和环烯醚萜类成分。分别将得到的数据导入Progenesis QI软件进行数据预处理,之后通过SIMCA-p软件进行PCA(主成分分析)分析和建立OPLS-DA模型对组间样品进行聚类分析。通过倍数变化法(FC值)以及T检验等多元统计分析方法,设置FC≥1.2或FC≤0.8、P<0.05、VIP>1筛选出挥发油和环烯醚萜类差异性成分。分别将挥发油和环烯醚萜类差异性成分数据导入在线软件Metabo Analyst 4.0进行热图分析,比较差异性成分在药物炮制前后的含量变化。同时对差异性环烯醚萜类成分进行网络药理学研究,将差异性环烯醚萜类成分相关数据利用Metascape数据库、TTD数据库、Gene map数据库、STRING分析平台和Cytoscape 3.7.2软件等构建药物-成分-靶点-疾病网络,分析山茱萸炮制前后发挥补肾作用的信号通路。利用LC-MS技术对山萸肉和酒萸肉中主要的环烯醚萜类成分马钱苷、莫诺苷、山茱萸新苷、7-O-甲基莫诺苷、7-O-乙基莫诺苷、脱水莫诺苷元和5-羟甲基糠醛进行了定量分析。通过超声提取制备供试品溶液,之后对这7种成分进行了方法学验证和含量测定,比较了这些成分在炮制前后的含量差异。最后,利用UHPLC-QTOF-MS/MS技术和Metabolite Pilot软件分析数据,对山茱萸中主要的环烯醚萜类活性成分马钱苷在SD大鼠尿液、胆汁、血浆样品中的代谢产物进行结构推断,总结其在大鼠体内的代谢途径。结果:通过GC-MS分析,在炮制前后山萸肉的挥发油中共鉴定出74种化学成分,其中山萸肉中有51种,酒萸肉中50种。主要含有酯类、烃类、醛类、酮类、酚类、醇类、烷烃类以及脂肪酸及其酯类等成分。共筛选出24种差异性挥发油成分,其中山茱萸炮制后α-松油醇、糠醛、乙酸丁酯含量减少,而棕榈酸、亚麻酸乙酯、棕榈酸乙酯、亚油酸的含量增加。通过LC-MS对炮制前后山萸肉的环烯醚萜类成分定性分析,共鉴定出了65种环烯醚萜类成分,其中山萸肉中有53种,酒萸肉中61种,共筛选出28种差异性成分。山茱萸炮制后山茱萸新苷IV、8-表没食子酸、獐牙菜苷、戟叶马鞭草苷、7-脱氢马钱素和二氢山茱萸苷等化学成分含量升高,而Cornuside N、Sweroside、山茱萸新苷III、Cornusfural C、Cornusphenoside B、Cornifins C和Officinaloside A等化学成分含量降低。通过网络药理学对环烯醚萜类差异性成分进行分析,共筛选出36个核心靶点,其GO功能分析结果显示,12个与生物过程(BP)相关,12个与分子功能(MF)相关,7个与细胞组成(CC)相关。KEGG通路富集分析结果显示,共获得11条富集结果,表明山茱萸炮制前和炮制后是通过作用于不同的信号通路来发挥补肾的作用。通过LC-MS技术对山萸肉和酒萸肉中7种主要活性成分进行定量分析,其中山茱萸经过炮制后马钱苷、莫诺苷、7-O-甲基莫诺苷和脱水莫诺苷元的含量下降,7-O-乙基莫诺苷和5-羟甲基糠醛的含量增加。通过对马钱苷的代谢物鉴定分析,共检测到18种代谢物,其生物转化主要途径为脱水反应、脱羧反应、甲基化反应和缩酮反应等。结论:本研究建立了一种GC-MS技术鉴定山茱萸炮制前后挥发性成分的方法和LC-MS技术定量、定性分析山茱萸炮制前后环烯醚萜类成分的方法,且方法准确、可靠。通过数据分析,发现山茱萸炮制前后挥发性成分和非挥发性成分在质和量上均发生了改变。这为全面评价山茱萸提供了参考,为更多中药的炮制机理研究提供了理论基础和方法技术。通过网络药理学技术对环烯醚萜类成分进行研究,全面地分析了山茱萸炮制前后不同的作用信号通路,解释了山茱萸炮制前后是通过不同的机制来发挥补肾的作用。最后,对马钱苷在大鼠体内进行了代谢物鉴定,为进一步了解马钱苷在临床应用中的代谢过程和揭示山茱萸药效机制提供了系统的

摘要： 故乡荆州，在江汉平原腹地，是楚文化的发祥地。一马平川，水网密集，恰如陶渊明《桃花源记》中所写，“有良田美池桑竹之属，阡陌交通，鸡犬相闻”，是著名的“鱼米之乡”。梁朝宗懔的《荆楚岁时记》，就是记载我家乡民俗文化的一部重要著作。从小在乡下长大的我，对节俗文化中飘逸的草木清香，是再熟悉不过的了。

关键词： 清入关前   盛京城   宗教建筑   皇家宗教祭祀建筑  

摘要： 作为我国东北地区历史文化底蕴最为丰富的城市之一,沈阳拥有着为数众多的文化古迹,如沈阳故宫、昭福二陵,诸多享誉世界的重要文化遗产,其诞生很大程度上要归功于那段“一朝发祥地,两代帝王都”的历史时期,即沈阳作为清入关前政权首府的时期。宗教祭祀建筑上也是如此,虽然单从数量上看,盛京城在作为清朝陪都的二百余年诞生的宗教建筑无疑要远远超过关外首都时期的不到二十年,但从重要性和研究价值上,后者的意义却非同一般。而在这一时期的众多的宗教建筑中,最引人瞩目的当属皇家宗教祭祀建筑,即盛京堂子、实胜寺、盛京天坛、盛京地坛和盛京太庙。作为清入关前最具地位的宗教祭祀建筑,对于它们的深入研究,对于打造盛京清文化品牌具有重要的意义。

关键词： 格格祭祀   乌布尔满族   民族关系   文化功能  

摘要： 铸牢中华民族共同体意识是习近平总书记对党的民族理论做出的重大的原创性理论。中华民族共同体是我国几千年历史发展的必然成果,是各族人民在长期交往、交流、交融中构成的共同选择。本论文观察了内蒙古赤峰市阿鲁科尔沁旗扎嘎斯台苏木花根塔拉嘎查花根塔拉小组成员的生活,了解了当地满蒙两个民族是如何融合,分析了当地各民族之间的生活习惯的交融情况。对当地满蒙汉三个民族融合的重要因素阿鲁科尔沁旗乌布尔满族格格祭祀进行了研究,同时也对格格祭祀文化功能与传承方式做了分析,认为乌布尔满族格格祭祀文化促进了当地满蒙汉三个民族之间的相互交往、交流、交融。本论文:第一章,写了花根塔拉嘎查地理位置,花根塔拉小组户口情况和生活方面进行了介绍,通过介绍花根塔拉小组成员日常生活,主要考察了这里的满蒙两个民族的交融情况。第二章,介绍了阿鲁科尔沁旗乌布尔满族格格祭祀,包括阿鲁科尔沁满族的来历以及乌布尔满族的来历,还有乌布尔满族原主要聚居地满吉芒哈(地名)和格格祭祀中的民族关系。第三章,分析了格格祭祀对地区民族关系的影响,生态保护的有效力量和对花根塔拉满吉芒哈人民生活的积极影响。同时交代了当地满族如何恢复和保护满族文化和对格格祭祀文化的传承功能进行了探讨。论文最后总结了阿鲁科尔沁旗乌布尔满族跟蒙古族有三百年的交往、交流、交融的历史,在这期间当地满蒙两个民族之间的边界变得越来越模糊,同时也跟汉族同胞们有交往、交流,形成了一个满蒙汉三个民族和谐包容的共同体。尤其乌布尔满族格格祭祀是当地颇具影响的民间信仰,格格祭祀不仅融合了花根塔拉小组满蒙两个民族,而且促进了周边满蒙汉三个民族之间互相往来,成为民族与地方文化相结合的中华民族共同体。满族也在中华民族多元一体形成中作出了自己的贡献。清朝时期对蒙古实施的婚姻政策促进了民族之间的交往、交流、交融,有利于弘扬中华民族文化的多样性。

关键词： 濮阳谢氏   腊八祭祀   仪式音乐  

摘要： 濮阳谢氏腊八祭祀仪式是每年腊月初八于河南省濮阳市花园屯村进行的一种家族祭祀活动,在仪式中所使用的音乐是锣鼓乐。音乐作为重要的祭祀行为,一方面以外向的行为传达了自己的信仰和内心活动,另一方面对仪式也烘托了仪式气氛,产生了积极的效应,达到了娱神和娱人的目的。本文以河南省濮阳市花园屯村的谢氏腊八祭祀仪式音乐为研究对象,从民族音乐学的视角出发,采用田野考察法,探索濮阳谢氏腊八祭祀仪式及音乐形态,深度阐述濮阳谢氏腊八祭祀仪式、信仰、仪式音乐之间的关系,在此基础上总结濮阳谢氏腊八祭祀仪式音乐的深层社会功能,希望可以呈现濮阳谢氏家族的社群关系,并为华北地区的仪式音乐研究提供基础性的案例研究。本论文共分为五个章节,第一章介绍濮阳谢氏腊八祭祀仪式的自然环境和社会人文环境,揭示仪式音声的生存背景,阐释了其对于仪式的潜在影响。第二章笔者从濮阳腊八祭祀仪式准备、濮阳腊八祭祀仪式过程实录两方面对谢氏家族腊八仪式进行整体关照,观察记录仪式过程。第三章在濮阳谢氏腊八祭祀仪式过程的基础上,通过讨论仪式的结构与过程、场合和内在动力“信仰”,探究“思想”观念范畴的信仰与“行为”范畴的仪式之间的关系,为下面分析仪式音乐形态做铺垫。第四章通过离音乐的远、近的关系,将仪式声音的范畴划分为近音乐和远音乐,并界定濮阳腊八祭祀仪式音乐,即锣鼓乐。以锣鼓乐为对象,分析乐器及乐队编制、音乐结构和仪式与音乐的关系,全面分析濮阳腊八祭祀仪式音乐,阐述音乐在仪式中的作用及所表现的效应,把握仪式音乐在仪式中的效应。第五章建立在前几章节论述的基础上,论证濮阳谢氏腊八祭祀仪式音乐所发挥功能,包括美感功能、娱乐功能、道德教化功能、族群认同功能。综上所述,濮阳谢氏腊八祭祀仪式经过岁月的洗礼依旧历久弥新,成为当地重要的民间活动之一,离不开家族成员的共同努力。希望对濮阳谢氏腊八祭祀仪式的考察,可以为传统仪式活动在新时期下保持活力的新路径提供基础性的研究。

关键词： 吴茱萸   肝损伤   物质基础   液质联用   毒代动力学  

摘要： 本课题对吴茱萸致肝损伤作用进行了“量-时-毒”关系研究,在此基础上,通过大量文献查阅并结合预测软件确定毒性物质基础研究对象,开展含量测定、细胞毒性研究、实验动物体内肝损伤验证以及毒性伴随的毒代动力学研究,探究吴茱萸肝毒性物质基础,以期为《中国药典》一部收载的吴茱萸质量标准提高提供试验依据和参考。研究内容如下:(1)吴茱萸致肝损伤的“量-时-毒”关系研究通过吴茱萸水提物急性毒性试验得到小鼠的半数致死量(LD50)为64.227 g/kg(以下均以生药量计),大鼠最大耐受量(MTD)大于88.45 g/kg;单次给药急性肝损伤试验的结果发现40、60、80 g/kg各剂量组均能引起小鼠肝损伤;重复给药肝损伤试验发现连续给药7d,40 g/kg剂量组小鼠表现出明显肝损伤,连续给药14d,20、40 g/kg剂量组小鼠均表现出明显肝损伤,而大鼠连续28 d给予等效剂量的吴茱萸水提物后,却未表现出明显肝毒性。(2)吴茱萸肝毒性物质基础研究结合文献查阅和毒性预测软件Derek Nexus将本章研究对象确定为吴茱萸指标成分即吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素,和其他主要成分即吴茱萸新碱、吴茱萸苦素、去氢吴茱萸碱,共6个化合物;采用超高效液相色谱-高分辨质谱联用技术(UPLC-Q-TOF/MS)对吴茱萸水提物进行含量测定,得到吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素、吴茱萸新碱、去氢吴茱萸碱的含量分别为0.0834%、0.0419%、1.0921%、0.0016%、0.4193%;采用细胞计数(CCK-8)法,得到吴茱萸水提物的IC50为0.34mg·mL-1,吴茱萸新碱的IC50为70.32μmoL-1,去氢吴茱萸碱的IC50为135.60 μmoL-1,而其余成分对HepG2细胞的增殖均无明显抑制作用;通过吴茱萸主要成分急性肝损伤试验,得到200 mg/kg柠檬苦素、吴茱萸新碱和100 mg/kg的去氢吴茱萸碱腹腔注射能使小鼠血清ALT显著升高(P<0.05或P<0.01),肝体比显著升高(P<0.05或P<0.01),提示200 mg/kg柠檬苦素、吴茱萸新碱和100 mg/kg去氢吴茱萸碱腹腔注射能引起小鼠急性肝损伤。(3)基于LC-MS/MS的毒代动力学研究在毒性伴随的毒代动力学研究中,选取柠檬苦素作为目标分析物,设立吴茱萸水提物灌胃组、柠檬苦素灌胃组、柠檬苦素腹腔注射组,给药剂量分别为60 g/kg、200 mg/kg、200mg/kg,结果得到吴茱萸水提物灌胃组小鼠血浆中柠檬苦素的AUC0-t为 91797.2±31524.4 h·ng/mL、Cmax为11130.0±3047.8 ng/mL,柠檬苦素灌胃组的 AUC0-t 为 138.5±139.3 h·ng/mL、Cmax 为 32.1±14.5 ng/mL,柠檬苦素腹腔注射组的 AUC0-t为 10234.5±6917.3 h·ng/mL、Cmax为 1080.0±296.3 ng/mL。综上所述,吴茱萸水提物致小鼠肝损伤具有一定“量-时-毒”效应,随着给药时间的延长以及剂量的增加,小鼠肝损伤程度加重;通过体外与体内毒性研究发现柠檬苦素、吴茱萸新碱、去氢吴茱萸碱腹腔注射可引起小鼠肝损伤;毒性伴随的毒代动力学研究表明柠檬苦素在体内的吸收较为迅速,在同等剂量下,相比于柠檬苦素单体,吴茱萸水提物入血后,柠檬苦素在体内吸收更快、暴露量更大,且肝损伤表现程度更重。本研究明确了吴茱萸水提物致肝毒性的“量-时-毒”关系,初步阐释了吴茱萸中6个主要成分与吴茱萸水提物致肝毒性的相关性,揭示了吴茱萸水提物致肝毒性与柠檬苦素在体内暴露量的相关性,为临床安全使用吴茱萸提供了数据支持,为制备安全性更高的吴茱萸制剂提供科学依据,为药典吴茱萸质量标准提高提供了参考数据,也为其他有毒中药的毒性物质研究提供了新思路。