关键词:
山茱萸
莫诺苷
脱水莫诺苷元
抗炎
肝保护
摘要:
目的 探讨山茱萸主要成分莫诺苷(morroniside,MO)的炮制转化成分脱水莫诺苷元(sarracenin,SA)的抗炎及肝保护作用。方法 采用超高效液相色谱法对MO及SA进行鉴定;将对数生长期的人单核细胞白血病THP-1细胞随机分为对照组、模型组及MO低、高剂量(25、100μmol/L)组和SA低、高剂量(25、100μmol/L)组,采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)联合腺嘌呤核苷三磷酸(adenosine triphosphate,ATP)刺激THP-1细胞构建炎症细胞模型,各给药组分别给予不同浓度的MO及SA,Western blotting法检测细胞总蛋白中含NLR家族PYRIN域蛋白3(NOD-like receptor family pyrin domain containing 3,NLRP3)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、丝氨酸/苏氨酸激酶(protein kinase B,Akt)及磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(phosphorylation protein kinase B,p-Akt)的表达以及细胞培养液中IL-1β的蛋白表达;将雄性Balb/c小鼠随机为对照组、SA组(50 mg/kg)、对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP,300 mg/kg)组和APAP(300 mg/kg)+SA低、中、高剂量(5、25、50 mg/kg)组,各给药组小鼠ig相应质量浓度SA 2 h后,除对照组及SA组小鼠外,其余各组小鼠ig APAP,24 h后麻醉处死小鼠,检测血清中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)及肝脏组织中丙二醛(malonic dialdehyde,MDA)水平,检测组织病理学变化情况,检测小鼠含生长因子样模体黏液样激素样受体1(mouse EGF-like module-containing mucin-like hormone receptor-like 1,EMR1,又称F4/80)、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1)、IL-1β、p-Akt及Akt的蛋白表达情况。结果 体外实验表明SA与MO均能抑制巨噬细胞中NLRP3及IL-1β的蛋白表达(P<0.05、0.01、0.001),且SA的药效要优于MO;体内实验进一步发现SA能够抑制APAP诱导的小鼠血清中ALT、AST及肝脏组织中MDA的蛋白表达(P<0.05、0.01、0.001),改善肝脏病理损伤,网络药理学揭示SA的抗炎及肝保护作用与Akt通路有关。结论 SA是山茱萸炮制增效成分,能够通过调控Akt通路发挥抗炎及肝保护作用。