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关键词： 吴茱萸次碱   急性胰腺炎   降钙素基因相关肽   炎症抑制   信号通路  

摘要： 研究背景和目的:急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)是一种由多种病因导致的胰酶提前激活,在胰腺内引起胰腺组织自身消化、水肿、出血甚至坏死的炎症反应疾病。AP作为一种可危及生命的疾病,影响着全球数百万人,发病率呈逐年上升趋势。然而,由于临床治疗缺乏特定的治疗靶点,目前可用的AP治疗方案的疗效十分有限,因此,研究AP的治疗新策略和潜在的药物治疗靶点成为对AP的研究重点。AP的发病机制复杂,胰腺的炎症和胰腺组织的坏死被认为是AP过程中最主要的起始病理因素。吴茱萸次碱是传统中药吴茱萸的主要活性成分,具有广泛的生物学及药理学作用。既往有研究报道,吴茱萸次碱可通过多个靶点表现出显著的抗炎和免疫调节作用,而吴茱萸次碱大部分药理学作用的分子靶点被证实为降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)的释放与介导。因此,本研究在小鼠AP模型以及大鼠胰腺外分泌细胞系(AR42J细胞株)的AP模型中探索吴茱萸次碱对AP炎症的治疗作用及其相关机制,以及探索吴茱萸次碱的治疗作用对CGRP的依赖,旨在为AP的抗炎治疗提供新的思路和治疗靶点。研究方法:我们采用雨蛙素联合脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠的AP模型,并构建了CGRP基因敲除的纯合子(CGRP)小鼠进行动物实验,通过在野生型C57 BL/6小鼠以及CGRP小鼠中进行AP模型的诱导以及吴茱萸次碱的治疗,观察各组小鼠胰腺组织的镜下病理变化,促炎和抗炎细胞因子水平的改变,和MAPK、NF-κB以及STAT3信号转导通路的关键蛋白磷酸化水平的改变,进而研究吴茱萸次碱对小鼠AP模型的治疗作用及相关机制。同样地,在AR42J细胞株也进行AP模型的诱导,并构建了CGRP过表达质粒和CGRP-sh RNA质粒转染的细胞株,通过吴茱萸次碱的治疗,观察各组细胞株的促炎和抗炎细胞因子水平的改变,胰腺细胞的凋亡率以及MAPK、NF-κB和STAT3信号转导通路的关键蛋白磷酸化水平的改变,进而研究吴茱萸次碱对AR42J细胞株AP模型的治疗作用及相关机制。结果:1.吴茱萸次碱通过下调AP模型小鼠的促炎细胞因子IL-6、IL-12和TNF-α的水平,上调抗炎细胞因子IL-10的水平,并改善胰腺组织的缺血、水肿、坏死,抑制胰腺的MAPK和NF-κB炎症信号转导通路的活化,进而对野生型小鼠AP的炎症发挥保护作用,并且这种保护作用至少是大部分依赖于CGRP的介导。2.通过细胞实验也进一步验证了吴茱萸次碱对诱导了AP的AR42J细胞株的炎症保护作用,包括降低促炎细胞因子IL-6和TNF-α的水平,上调抗炎细胞因子IL-10的水平,提高胰腺细胞的活力,抑制胰腺细胞的凋亡,以及抑制胰腺的MAPK、NF-κB和STAT3炎症信号转导通路的活化,并且证实这种保护作用依赖于CGRP的表达水平。结论:吴茱萸次碱通过CGRP的介导显著改善了雨蛙素联合LPS诱导的小鼠和AR42J细胞株的AP炎症反应。因此,吴茱萸次碱可能成为AP患者的潜在治疗药物的新选择。本研究为AP的药物开发提供了新的见解。图22幅,表35个,参考文献123篇

关键词： 体育非物质文化遗产   祭祀仪式   文化空间   图像内容分析   扎根理论  

摘要： 为了构建我国体育非物质文化遗产祭祀仪式的文化空间,以我国体育非物质文化遗产的祭祀仪式为研究对象,首先运用图像内容分析法对收集到的357张原始图像资料进行元素提取、内容解码,再采用扎根理论法进行三级编码,架构出理论模型。从图像中窥探出我国体育非物质文化遗产深厚的文化底蕴,并对其进行理论性诠释。 本研究得出以下结果:(1)原始图像资料经开放式编码工作确立108个概念,16个类属。主轴编码阶段共计得到物质空间、社会空间、精神空间、祭祀行为4个主类属。主轴编码阶段将祭祀行为选定为核心类属。(2)体育非物质文化遗产祭祀仪式的物质空间由宗祠、庙宇和纪念馆等场所及其周围环境构成。(3)体育非物质文化遗产祭祀仪式的社会空间由某个宗族、某个族群和村民群众构成。(4)体育非物质文化遗产祭祀仪式的精神空间包括:自然崇拜、鬼神崇拜、神兽崇拜和祖先崇拜等具有象征性精神信仰。(5)体育非物质文化遗产的祭祀行为主要包括:仪式开始时的参拜、上香等;展演者们模拟神兽神态动作、祖先的生产生活等;仪式结束后送神兽、神像回庙等环节。 本研究提出以下结论:(1)特定的祭祀场所及其周围环境作为进行体育非物质文化遗产祭祀仪式的场域,体育非物质文化遗产活动成为民族文化的表达工具。(2)各族群、宗族或是村落成员在特定的自然与人文历史所营造的环境中,集体参与了体育非物质文化遗产活动,形成了各族群成员心理认同和情感归属,营造出和谐的社会空间。(3)在体育非物质文化遗产活动祭祀仪式的整个环节中,有具身化的场景体验及身体行为,各族群成员通过这些身体记忆表达出坚定的精神信仰。(4)在体育非物质文化遗产的物质空间的基础上,社会空间的成员在精神空间中的崇拜信仰下进行祭祀行为,用身体语言来表达体育非物质文化遗产中的精神内涵。体育非物质文化遗产的文化空间环环相扣,一一对应,显示出体育非物质文化遗产祭拜活动不仅仅是简单的肢体动作表现,更深层的是该地域历史的积淀、风土人情的呈现和文化内涵的延续。

关键词： 文化遗产   博格达乌拉山祭祀   非遗传承人白双虎  

摘要： 文化遗产的传承是人类文明的基本特征,也是人类文化多样性的保证。在全球化的今天,民族文化身份遭到了前所未有的危机和挑战,正是在这样的背景之下,文化遗产从战略的角度引起各个国家的高度重视。内蒙古兴安盟扎赉特旗博格达乌拉祭祀文化历史悠久,清乾隆五十一年(1786年),当时的旗札萨克贝勒玛什巴图王爷将此山定为全旗的信奉山并开始进行了山神祭祀活动,1931年东北开始沦陷后逐渐停止祭祀,直到2003年白双虎等人恢复博格达乌拉祭祀。其祭祀仪式2014年进入我国国家级非物质文化遗产名录。本文力图从文化遗产学视角,揭示博格达乌拉祭祀文化的形成发展轨迹。论文由四个部分构成。在第一章扎赉特旗及其非遗文化体系中简述博格达乌拉山管辖区扎赉特旗历史地理特点及其非遗文化体系,深度描写培育国家级非遗扎赉特博格达乌拉祭祀的文化生态。在第二章扎赉特旗博格达乌拉祭祀文化的形成与发展在概述博格达乌拉祭祀停办与恢复过程及传承人的影响。第三章扎赉特旗博格达乌拉祭祀文化及旅游融合发展论述了祭祀文化所带来的影响和对未来的展望。在结论部分作者分析提炼出几条现实意义的观点。博格达乌拉祭祀是中华民族传统祭祀文化的一个案例。山祭祀与生态文化的关系、推动非遗与旅游深度融合发展的趋势对非遗保护和地方经济构成了一个生动的参考实例。

摘要： 一、西汉祭祀礼制的演变（一）汉高祖创立“五帝神”宣扬正统西汉建立初期，以汉高祖为首的统治阶级成为社会的主导。在这个阶段，他们需要维护社会秩序，保障政权的合法性，君主更加需要加强自己皇权的权威性，一个新朝代的建立，需要的不仅仅是政权的强制性措施，更需要让广大老百姓在思想意识上的认同。汉高祖出身乡野,本身素养不高,

关键词： 芸香科   叶绿体基因组   指纹图谱   质量评价   系统发育  

摘要： 目的:开发一个准确有效的吴茱萸属药用植物鉴定方法,并对不同基原、规格吴茱萸药材的质量进行评价,为吴茱萸药材进一步开发利用提供依据。方法:1.采用文献检索和实地考察的方式调查吴茱萸药材的基原。通过体式显微镜观察吴茱萸、疏毛吴茱萸和石虎的果实发育过程。2.采用二代高通量测序技术对7种吴茱萸属药用植物进行全基因组测序、组装和注释。利用MEGA、condon W、REPuter、m VISTA等软件分析叶绿体基因组特征,并基于叶绿体全基因组序列和共有蛋白编码基因构建芸香科植物最大似然(ML)系统发育树。3.基于UHPLC法建立吴茱萸、石虎和疏毛吴茱萸的指纹图谱,基于质谱检测通过文献查阅结合对照品比对(新绿原酸、隐绿原酸、绿原酸、去氢吴茱萸碱、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、芦丁、金丝桃苷、水仙苷)的方法指认吴茱萸药材化学成分,通过SIMCA 14.1、IBM SPSS 26.0软件进行化学模式识别和聚类分析;HPLC法对柠檬苦素、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量进行测定,综合评价吴茱萸药材的质量。结果:1.吴茱萸属植物广泛分布于我国长江以南地区,其药材主产地及品种变化不大,除《中国药典》规定品种外,同属植物果实常作为吴茱萸药材地方习用品和混伪品。但是,果实形态观察表明吴茱萸属物种间的果实形态差异较大。2.本研究测得的7种吴茱萸属药用植物的叶绿体基因组为典型的四分体结构,其长度在158563至158762 bp之间。其中大单拷贝区(LSC)长度为86104-86273bp,小单拷贝区(SSC)长度为18212-18265 bp,反向重复区(IR)长度为27110-27127 bp。所有叶绿体基因组均注释到133个基因,包括88个蛋白质编码基因、37个t RNA基因和8个r RNA基因,其中有18个基因在IR区重复。GC含量为38.33-38.37%。3.通过比较基因组学分析,共鉴定出14个高度可变的区域,即trn H-psb A、psb Z-trn G、pet N-psb M、trn R-atp A、trn D-trn Y、psb C-trn S、trn S-psb Z、ycf4-cem A、rpl32-trn L、atp A、atp F、trn Y、rbc L和clp P这些序列片段可作为吴茱萸药材物种鉴定的潜在DNA条形码。系统发育关系分析结果表明,基于完整的叶绿体基因组序列和共有蛋白编码基因序列数据集构建的两个系统发育树拓扑结构基本一致,前者分辨率较后者高。吴茱萸与少果吴萸关系更为紧密,聚为一支;疏毛吴茱萸、石虎以及密果吴萸互为姊妹种,亲缘关系更近,聚为一支;这两个主要分支又以100%的支持率互为姊妹类群。楝叶吴萸与臭辣吴萸亲缘关系较近聚为一个分支,与前两个分支的亲缘关系相对较远。4.建立了吴茱萸UHPLC指纹图谱检测方法,对《中国药典》规定的3个基原吴茱萸药材样品(共39批次)进行检测并得到拟合对照指纹图谱,疏毛吴茱萸、吴茱萸和石虎指纹图谱分别有共有峰11、13、17个,39批次的指纹图谱拟合对照图谱中共有峰数量为8个。指纹图谱峰指认共鉴定22个化合物,对照品比对指认了其中8个成分(新绿原酸、隐绿原酸、绿原酸、去氢吴茱萸碱、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、芦丁、金丝桃苷、水仙苷)。化学模式识别可以将39批吴茱萸药材分为3类,吴茱萸、疏毛吴茱萸、石虎各分为1类;聚类分析结果与化学模式识别分析结果一致;经主成分分析,2个主成分因子的累积方差贡献率分别为74.10%和91.80%。含量测定结果显示,47批药材中小花规格吴茱萸药材柠檬苦素质量分数为0.08%～1.96%;吴茱萸碱质量分数为0.04%～0.28%;吴茱萸次碱质量分数为0.06%～0.21%;中花规格吴茱萸药材柠檬苦素质量分数为3.53%～3.68%;吴茱萸碱质量分数为1.79%～2.51%;吴茱萸次碱质量分数为0.58%～0.72%;混伪品3种成分的含量普遍较正品吴茱萸药材低。结论:叶绿体全基因组序列可作为超级条形码用于吴茱萸属药用植物准确鉴定,筛选的叶绿体基因组高变区可作为吴茱萸药材分子鉴定的特异性条形码。本研究结果支持《Flora of China》将吴茱萸、疏毛吴茱萸、石虎、密果吴萸和少果吴萸合并为一个种,但是不支持楝叶吴萸与臭辣吴萸合并为一个种。指纹图谱结合化学模式识别可以用于区分不同规格吴茱萸药材并全面地评价吴茱萸药材质量。

关键词： 吴茱萸碱   食管鳞癌(Esophageal Squamous Cell Carcinoma,ESCC)   PI3K/AKT/mTOR信号通路   凋亡  

摘要： 目的:本研究选用两株人食管鳞癌细胞株TE-1、KYSE150以及BALB/C裸鼠皮下瘤模型作为体内外研究的对象,观察吴茱萸碱（Evodiamine,Evo）对食管鳞癌细胞增殖、凋亡以及迁移侵袭等恶性生物学行为的影响。初步探讨吴茱萸碱抑制食管鳞癌细胞增殖的潜在机制,以期为今后治疗食管鳞癌提供一种新思路。 方法:CCK-8法检测吴茱萸碱对食管鳞癌细胞的增殖抑制作用,同时计算出吴茱萸碱对两种食管鳞癌细胞株的IC50值;克隆形成实验检测吴茱萸碱在食管鳞癌细胞株增殖过程中的作用;采用流式细胞术对吴茱萸碱处理后食管鳞癌细胞进行细胞周期分布和凋亡分析,应用细胞划痕实验和transwell迁移侵袭实验检测吴茱萸碱在体外对食管鳞癌细胞迁移及侵袭能力的影响。Western blot检测周期、凋亡、迁移侵袭以及与分子机制有关的蛋白表达水平。最后,在裸鼠皮下瘤实验中体内验证吴茱萸碱对食管鳞癌细胞的增殖抑制作用。 结果:吴茱萸碱呈时间和浓度依赖性抑制TE-1和KYSE150细胞增殖（P<0.05或P<0.01）;与对照组比较,吴茱萸碱可显著诱导细胞凋亡（P<0.001或P<0.01）,使细胞周期阻滞于G2/M期（P<0.001或P<0.05）,明显抑制了细胞的迁移和侵袭能力（P<0.001或P<0.01）,同时使凋亡相关蛋白Cleaved-PARP、Cleaved-caspase-3的表达增加,下调了PI3K/AKT/m TOR信号通路相关蛋白p-PI3K、p-AKT、p-m TOR的表达水平,上调了p-PTEN的表达水平（P<0.001或P<0.01）,上述作用均表现出浓度依赖性。裸鼠皮下异位移植瘤模型的研究结果显示,与对照组比较,吴茱萸碱治疗对肿瘤生长具有明显的抑制作用,并且使裸鼠皮下异位移植瘤体积减少（P<0.001）。 结论:吴茱萸碱对食管鳞癌细胞增殖具有抑制作用,使细胞周期阻滞在G2/M期,诱导细胞凋亡,对细胞的迁移与侵袭也有一定的抑制作用,其作用机制可能与其对PI3K/AKT/m TOR信号通路的抑制作用相关。体内实验与细胞实验结果一致:吴茱萸碱对裸鼠皮下瘤的生长有一定的抑制作用,其作用机制可能与其对PI3K/AKT/m TOR信号通路的抑制作用相关。

关键词： 血小板   凋亡   氧化应激  

摘要： 【目的】吴茱萸是芸香科植物吴茱萸的成熟果实,是临床常用中药。吴茱萸生物碱类化合物是吴茱萸发挥镇痛抗炎、抗心肌缺氧、抗肿瘤、保护消化系统等作用的主要有效成分,已有研究证实吴茱萸生物碱类化合物,可以有效抑制血小板的活化,但其是否能通过凋亡、自噬途径调控血小板功能,尚无研究报道。本研究主要旨在探讨吴茱萸生物碱类化合物对活性氧引起的血小板损伤有无保护作用及可能机制。【方法】以H2O2处理血小板作为阳性对照组,比较不同浓度吴茱萸生物碱类化合物处理后是否可以减少血小板损伤,采用酶标仪测定活性氧（Reactive Oxygen Species,ROS）水平;流式细胞术检测血小板膜磷脂酰丝氨酸（phyosphatidylserine,PS）外翻及线粒体膜电位下降情况;RT-PCR检测Bcl-2m RNA的相对表达量;蛋白印迹法检测血小板凋亡相关蛋白表达及磷酸化水平。【结果】1.吴茱萸次碱及吴茱萸碱能够降低血小板的ROS水平;2.吴茱萸次碱能够抑制血小板的膜磷脂酰丝氨酸外翻;3.吴茱萸次碱能够抑制血小板凝溶胶蛋白（gelsolin,GSN）表达;4.吴茱萸次碱能够抑制H2O2引起血小板线粒体膜电位改变;5.吴茱萸次碱可以抑制H2O2引起的Bcl-2 m RNA的相对表达量上调;6.吴茱萸次碱能够抑制细胞色素C（cytochrome C）的表达;吴茱萸次碱对P53的表达没有影响,但高浓度条件下可以抑制其磷酸化。【结论】吴茱萸生物碱类化合物能够抑制活性氧的引起血小板损伤。

关键词： 吴茱萸汤   抑郁症   抑郁样行为   P2X7R   NLRP3  

摘要： 吴茱萸汤起源于《伤寒论》,是温里剂的代表方剂之一,主治肝胃虚寒,浊阴上逆证。近年来,已有临床研究表明,吴茱萸汤在治疗抑郁症方面同样具有较好的疗效。抑郁症是临床常见的精神疾病,主要表现为持续的情绪低落、焦虑、食欲不振、不寐甚至伴有认知能力下降等临床症状,具有高自杀率、自残率和复发率。针对那些阳气不足,阴寒凝结,浊邪内生导致痰瘀互结,郁遏阳气的抑郁症患者,以温,补,降为基本的治疗原则,选用具有温中补虚、降逆止呕功效的吴茱萸汤加减化裁给予治疗,临床应用中获得了较好疗效。然而,目前对于吴茱萸汤在治疗抑郁症中的具体作用机制研究尚显不足,有待进一步深入探讨。目的:本研究通过动物实验对行为学和病理学变化做出对比分析,探讨《伤寒论》经典方剂吴茱萸汤抗抑郁的作用机制。方法:实验研究法。采取了动物实验法,对实验小鼠采用慢性不可预知温和应激(CUMS)进行造模,通过分析糖水偏爱实验、水迷宫实验,旷场实验和强迫游泳实验等数据指标,对抑郁模型小鼠的抑郁样行为进行系统评价;再通过苏木素-伊红染色法测定抑郁模型小鼠海马组织的病理损伤;最后,通过免疫组织化学染色法检测小鼠海马组织的嘌呤受体P2X配体门控离子通道7(P2X7R)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)的表达。另外,通过查阅中医药古籍、中外相关理论文章,加深了对抑郁症的病机的认识,梳理了吴茱萸汤的用药方解以及P2X7R、NLRP3蛋白与抑郁症的关系,拓宽了抑郁症治疗的视野。结果:结果表明,与模型组小鼠相比,吴茱萸汤对小鼠的抑郁样行为具有明显的改善作用。表现为:双瓶饮水实验中糖水偏爱比例提高,水迷宫实验中进入平台位置的次数增加,旷场实验中小鼠走格数和站立次数增加,在强迫游泳中小鼠的挣扎时间增加。此外,吴茱萸汤改善了抑郁模型小鼠海马组织的病理损伤。免疫组织化学染色法检测到灌胃吴茱萸汤后可见小鼠海马组织中P2X7R、NLRP3蛋白水平降低。结论:吴茱萸汤具有较好的抗抑郁作用,对CUMS模型中抑郁模型小鼠的抑郁样行为有明显改善。包括快感缺失得到改善、学习记忆变差得到改善、焦虑状况得到缓解并提高自身活力、小鼠绝望状态得到纠正等。此外,吴茱萸汤还减轻了抑郁模型小鼠海马组织的病理学损伤,这一作用机制可能与P2X7R和NLRP3蛋白有关。

关键词： 活动空间   民间信仰   祭祀   游神   玉江村  

摘要： 论文以漳州角美玉江村为研究对象,从建筑学视野,研究民间信仰及其活动空间在村落的形成、发展和调适的历程。通过对玉江村民间信仰活动文化特征的传承、祭祀仪式与巡境仪式过程的了解,揭示玉江村民间信仰活动空间蕴含的文化积淀。 首先,介绍漳州角美玉江村历史发展背景及民间信仰和活动空间的形成过程。玉江村民间信仰文化融合了文化传统及地方空间特征,不断接纳地方自然、人文、社会制度的改造,继承了漳州宗教文化传统,最终形成百姓生活的重要部分。 其次,通过呈现庙会活动仪式的表达过程,揭示仪式行为与空间蕴含的文化意义,重新审视村落物理空间与非物质文化的互动机制。阐述玉江村民间信仰活动的仪式表达和空间的分布情况,玉江村民间信仰是融合了地域文化的一种造物,它包括信仰内容、祭祀的神灵、仪式器物、一整套动作和科仪程序等等,都体现了人们的创造力。 再次,通过祭祀仪式与巡境仪式这两部分活动的过程,归纳其活动空间模式和使用特点。以宫庙空间为核心的祭祀活动,激发村落整体活动空间的活力形成良好的公共秩序。以街巷和港道空间为骨架的游神巡境活动,是对村落边界的进一步确认,起到了社区宗族的整合作用。在特定时间的庙会节庆下,仪式活动在空间中得到了延续,潜移默化地推动着活动空间的演变。 最后,阐述活动空间在城镇化背景中不断产生适应性的调整。这种调整仍然保留着民间信仰与其祭祀仪式活动空间所附有的地方性,并且随着新时代的发展,也在不断吸收新的文化特征。民间信仰给地方社会与群众带来乡愁与地方归属感,能够在城市进程中长盛不衰,成为地方人地关系持续的重要关系纽带。