关键词:
小白薇提取物
肝癌
增殖
胆固醇
生物合成
摘要:
目的:探讨小白薇提取物对肝癌细胞的增殖抑制作用及机制,为其应用于临床抗癌提供依据。方法:应用CCK-8分析、平板克隆试验、PI/Calcein AM染色、流式细胞分析、JC-1染色等方法,观察小白薇提取物对Huh7和Hep G2人肝癌细胞活力、克隆形成、死活比例、细胞周期及线粒体膜电位的影响;运用试剂盒检测肝癌细胞总胆固醇和游离胆固醇水平;并观察添加外源性胆固醇能否拮抗小白薇提取物对细胞活力、克隆形成及细胞周期的影响;基于临床数据库分析调控胆固醇生物合成的主要代谢酶及相关性;Western Blot分析小白薇提取物对胆固醇生物合成主要代谢酶蛋白表达的影响。采用液质联用分析小白薇提取物中的主要成分。结果:小白薇提取物能明显抑制两种肝癌细胞的增殖活力和克隆形成,升高死细胞比例,诱导细胞周期阻滞,降低细胞总胆固醇和游离胆固醇水平,但对线粒体膜电位无明显影响。外源性胆固醇可明显拮抗小白薇提取物对肝癌细胞活力和克隆形成的抑制作用,并可逆转其细胞周期阻滞作用。临床数据库分析表明,肝癌组织中胆固醇合成关键限速酶SQLE表达显著升高,其与主要代谢酶MVK、FDPS、TM7SF2、DHCR24表达呈明显正相关。小白薇提取物可显著降低SQLE、MVK、FDPS、DHCR24蛋白表达。由于目前对小白薇化学成分的研究有限,本研究所得小白薇提取物正负总离子流图与化合物库比对,未核对出已知化合物。结论:小白薇提取物通过抑制胆固醇生物合成,减少胆固醇在细胞中的累积,导致细胞周期阻滞,从而抑制肝癌细胞增殖。