关键词:
苦豆子
内生真菌
喹诺里西啶生物碱
槐定碱
摘要:
【目的】明确宁夏苦豆子不同器官可培养内生真菌的群落结构及其多样性,筛选能产喹诺里西啶生物碱的资源菌株,为苦豆子内生真菌资源开发利用提供理论依据。【方法】以宁夏回族自治区盐池县花马池镇天然草场的健康苦豆子为材料,采用组织分离法分别从苦豆子根、茎、叶和种子中分离可培养内生真菌,明确苦豆子可培养内生真菌的群落结构及其多样性。基于酸性染料比色法、薄层色谱法和高效液相色谱法,筛选产喹诺里西啶生物碱的内生真菌菌株,并利用多基因联合分析法明确其分类地位。【结果】采用组织分离法从苦豆子不同器官中分离得到可培养内生真菌394株,分离率为109.44%,定殖率为79.44%,隶属于18属,其中镰刀菌属(Fusarium)和链格孢属(Alternaria)为优势类群。苦豆子不同器官内生真菌群落组成与分布存在明显差异。根中优势属为镰刀菌属(Fusarium),相对分离频率为91.09%;茎中优势属为光黑壳属(Preussia),相对分离频率为74.03%;叶中优势属为座坚壳属(Rosellinia),相对分离频率为22.22%;种子中优势属为链格孢属(Alternaria),相对分离频率为59.26%。叶内生真菌群落多样性最高且分布最均匀,茎内生真菌群落丰富度最高,根中内生真菌群落多样性、丰富度和均匀度均最低。采用酸性染料比色法、薄层色谱法和高效液相色谱法从394株内生真菌中筛选出102株产喹诺里西啶生物碱的内生真菌菌株,占内生真菌总数的25.89%,产碱类型为槐定碱,产碱量为0.65~20.32 mg/g。其中镰刀菌属占产碱菌株的24.51%,包括尖孢镰刀菌(***)、变红镰刀菌(***)和茄病镰刀菌(***);链格孢属占产碱菌株的18.63%,均为互隔链格孢(***)。【结论】苦豆子中蕴藏着丰富的内生真菌资源,且内生真菌分布具有组织特异性。筛选产槐定碱内生真菌的种属多样,具有良好的开发潜力和应用前景。