关键词:
生物活性脂类
淫羊藿苷
卡里丁
炎症基因
可塑性相关基因蛋白1
脑卒中
神经功能
摘要:
目的探讨生物活性脂类调节炎症基因和可塑性相关基因蛋白1(plasticity related gene 1,PRG-1)促进脑卒中神经功能恢复的机制。方法将小鼠(n=30)随机分为5组:假手术组、大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)小鼠模型组、MCAO联合依达拉奉组、MCAO联合淫羊藿苷(icariin,ICA)组和MCAO联合卡里丁(caridin,ICT)组。比较各组神经学评分,进行梗死体积的测定和组织病理学检测,用Tunel测定晚期凋亡细胞的DNA片段,用蛋白质印迹法分析凋亡蛋白(cleavedcaspase-3、cleaved-PARP、Bcl-2和Bax)、炎症基因(catalase、SOD1、caveolin-1、e-NOS和i-NOS)和PRG-1,用TBARS检测试剂盒检测MDA的水平。结果MCAO组体质量(19.56%±2.65%)减轻、梗死体积(占对侧面积百分比)(63.12%±3.05%)和mNSS评分[(12.32±1.13)分]均显著增加,ICA治疗后,小鼠体质量(9.51%±1.61%)、梗死面积(6.51%±1.21%)、mNSS(3.51±1.01)显著降低;ICT治疗后,小鼠体质量(7.51%±1.61%)、梗死体积(5.55%±1.21%)、mNSS(3.01±1.21)显著降低。在MCAO小鼠的脑海马体和皮层中明显观察到Tunel阳性细胞,经ICA和ICT治疗均可有效逆转。MCAO组皮质和海马体中裂解半胱天冬酶-3(3.78±3.05)(16.72±2.19)、裂解PARP(4.12±3.11)(3.82±3.95)和Bax(5.92±2.15)(3.52±1.15)的蛋白表达水平均显著升高,而MCAO组皮质和海马体中Bcl-2蛋白(0.12±0.05)(0.31±0.09)的表达水平均显著降低。ICA治疗后,小鼠皮质和海马体中裂解半胱天冬酶-3(1.54±0.61)(6.21±1.01)、Bax(2.12±0.67)(0.98±0.85)显著降低、Bcl-2蛋白(0.51±0.11)水平显著升高。ICT治疗后,小鼠皮质和海马体中裂解半胱天冬酶-3[(1.31±1.11)(4.52±1.21)]、Bax[(2.12±0.85)(1.08±0.25)]均显著降低、Bcl-2蛋白(0.51±0.06)水平显著升高。MCAO小鼠皮层和海马体中过氧化氢酶(0.68±0.07)(0.42±0.19)和SOD-1[(0.44±0.08)(0.47±0.11)]的蛋白表达水平显著降低,用ICA和ICT处理均显著逆转了SOD-1蛋白表达水平的降低,同时部分逆转了过氧化氢酶蛋白表达水平的降低。与假手术组比较,MCAO组caveolin-1蛋白的表达水平[(0.48±0.07)(0.62±0.11)]降低,而eNOS[(3.45±1.05)(3.02±0.87)]和iNOS[(3.78±0.85)(2.72±1.01)]蛋白的表达水平均升高,ICT预处理有效逆转了MCAO小鼠皮层和海马体中eNOS和iNOS蛋白表达水平的变化。此外,MCAO小鼠大脑中脂质过氧化产物MDA的水平在MCAO小鼠中显著升高,ICA和ICT处理均可逆转。MCAO小鼠皮层和海马体中PRG-1的蛋白表达水平显著降低,ICA和ICT处理均显著逆转了PRG-1蛋白表达水平的降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论ICA和ICT治疗可以预防缺血性卒中损伤相关的氧化/亚硝化应激、细胞凋亡和增加PRG-1表达,ICA和ICT可能具有神经保护作用。