关键词:
常山酮
过氧化物酶体增殖物激活受体γ
白血病抑制因子
巨噬细胞
子宫内膜异位症
子宫内膜异位基质细胞
摘要:
目的探究常山酮(halofuginone,HF)通过调控过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptor gamma,PPARG)-白血病抑制因子(LIF interleukin 6 family cytokine,LIF)轴影响巨噬细胞极化进而调控子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)基质细胞生物学行为的分子机制。方法不同浓度的HF干预正常子宫内膜基质细胞(normal endometrial stromal cells,NESCs)与异位子宫内膜基质细胞(ectopic endometrial stromal cells,EESCs),CCK8检测细胞增殖活力,TUNEL检测细胞凋亡。生物信息学分析HF、EMs、巨噬细胞靶点的交集。构建巨噬细胞与EESCs的共培养系统,分为M0+EESCs组、M2+EESCs组、M2+EESCs^(HF)组、M0+EESCs^(oe-PPARG)组、M0+EESCs^(sh-PPARG)组、M0+EESCs^(oe-PPARG+oe-LIF)组、M0+EESCs^(oe-PPARG+HF)组。ELISA检测细胞上清液中M1型巨噬细胞标志物(iNOS、IL-6)与M2型巨噬细胞标志物(Arg-1、TGF-β);CCK8检测和TUNEL分别检测以上EESCs的增殖和凋亡。结果HF对NESCs增殖活力无明显影响(F=0.195,P=0.959),但能够明显抑制EESCs增殖,并促进细胞凋亡(P<0.05)。与M0+EESCs组相比,M2+EESCs组细胞上清液中iNOS、IL-6浓度降低,Arg-1、TGF-β浓度升高,并且EESCs增殖活力增强、凋亡减少,而HF干预则逆转了上述结果(P<0.05)。通过生物信息学分析及文献检索选取PPARG作为本研究关键靶点。与M0+EESCs组相比,M0+EESCs^(oe-PPARG)组细胞上清液中iNOS、IL-6浓度降低,Arg-1、TGF-β浓度升高,EESCs增殖活力增强、凋亡减少(P<0.05);而M0+EESCs^(sh-PPARG)组得到相反的结果(P<0.05)。此外,与M0+EESCs^(oe-PPARG)组相比,上调LIF表达或者HF干预后细胞上清液中iNOS、IL-6浓度升高,Arg-1、TGF-β浓度降低,EESCs增殖活力下降、凋亡增加(P<0.05)。结论HF通过调控PPARG-LIF信号通路从而抑制巨噬细胞M2型极化,抑制EESCs细胞增殖并促进细胞凋亡。