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关键词： BLOC1S1   过表达   山羊   布鲁氏菌   生物安全  

摘要： 旨在制备BLOC1S1基因过表达山羊，并探究其生物安全性，为抗布鲁氏菌病模型建立和转基因动物遗传育种提供研究模型与平台。本研究以5只经产、健康雌性陕北白绒山羊（2～3岁）为供体进行超数排卵，公羊本交后经输卵管冲胚获得原核胚，通过显微注射系统将BLOC1S1慢病毒浓缩液注射至原核胚透明带间隙后继续培养待其发育至2细胞，再移植至15只经产陕北白绒山羊受体（2～3岁）输卵管内；产羔后，利用PCR、实时荧光定量PCR和Western blotting技术对F0代羔羊进行BLOC1S1基因过表达山羊鉴定，对BLOC1S1基因过表达与野生型山羊的血液生理生化、体重和体高等生长性状指标监测比较。结果显示，原核胚胎显微注射后移植共获得13只羔羊，经PCR检测鉴定，7只为阳性BLOC1S1基因过表达山羊，阳性率为53.8%；qRT-PCR结果显示，BLOC1S1基因在大脑（P < 0.01）、脾脏（P < 0.001）和肺脏（P < 0.05）组织mRNA表达量均显著上调，脾脏组织蛋白水平表达量显著上调（P < 0.001）；与野生型山羊相比，BLOC1S1基因过表达山羊WBC、Neu等血液生理指标和TBIL、GLU等血液生化指标均无显著差异（P > 0.05）；生长发育速度监测分析结果显示，BLOC1S1基因过表达与野生型山羊初生重、1 ～ 6月龄体重和3～ 6月龄生长性状指标相比无显著差异（P > 0.05）。本研究成功生产BLOC1S1基因过表达山羊，且基因过表达山羊的生长发育、血液生理生化指标与野生型山羊相比无显著差异，进一步为抗布鲁氏菌病模型建立和生物安全评价体系提供理论依据。

关键词： 酮病   昼夜节律   糖脂代谢   调控机制  

摘要： 酮病是围产期奶牛糖脂代谢失衡而导致的一种营养代谢性疾病,主要表现为体内酮体的积累和游离性脂肪酸的升高,同时伴随血糖、胰岛素浓度异常和胰高血糖素浓度的升高。该病严重危害奶牛的健康和生产性能,给奶牛养殖业造成巨大损失。酮病发生的核心环节是糖脂代谢紊乱,生物钟作为哺乳动物重要的内源性稳态调控系统,可通过调节糖脂代谢相关激素分泌、限速酶基因与核受体基因的表达来调控机体糖脂代谢的昼夜节律稳态。笔者对奶牛酮病与糖脂代谢紊乱的联系、生物钟在哺乳动物糖脂代谢昼夜节律稳态调控中的作用、生物钟调控奶牛代谢生理的昼夜节律和酮病对奶牛糖脂代谢昼夜节律的影响进行了综述,以期从时间生物学的角度更全面地认识奶牛酮病的发病机制,为探究精准、高效的酮病防控与治疗策略提供新的思路。

关键词： 超声辅助双水相   响应面   抗氧化   抑菌   梧桐花   总黄酮  

摘要： 试验旨在用超声辅助聚乙二醇(PEG)600-硫酸铵双水相的方法优化梧桐花总黄酮的提取工艺,并对其抗氧化和抑菌活性进行评价。结果表明:①超声辅助PEG 600-硫酸铵双水相法提取梧桐花总黄酮最佳提取条件为PEG 600质量分数为37%、硫酸铵质量分数为38%、料液比为1∶60 g/mL、超声时间为41 min;该优化工艺条件下,总黄酮实际提取率为22.507 mg/g,显著高于乙醇提取方法(P<0.05)。②梧桐花总黄酮对DPPH自由基清除力的IC_(50)为0.013 mg/mL,优于抗坏血酸的清除效果,对Fe^(3+)的还原能力也优于抗坏血酸。③梧桐花总黄酮对金黄色葡萄球菌具有抑菌作用,梧桐花总黄酮浓度为0.890~1.780 mg/mL时抑菌效果较好。综上所述,超声辅助PEG 600-硫酸铵双水相的方法提取梧桐花总黄酮是可行的,其提取效果优于乙醇提取法,而且梧桐花总黄酮具有一定的抗氧化和抑菌活性。

关键词： 德尔菲法   少数民族   养老机构   照护质量   评估指标  

摘要： 目的:构建滇西少数民族地区养老机构照护质量评估指标体系,为滇西少数民族地区养老机构照护质量评估指标体系构建提供最小数据集。方法:通过文献分析法、头脑风暴法、德尔菲法构建滇西少数民族地区养老机构照护质量评估指标体系,应用客观赋权法确定指标权重。结果:2轮专家函询的有效回收率均为100%;2轮专家权威程度系数(Cr)分别为0.913,0.930;第2轮专家协调系数为0.086~0.182(均P<0.05)。最终形成包括3项一级指标、10项二级指标及33项三级指标的滇西少数民族地区养老机构照护质量评估指标体系。结论:构建的滇西少数民族地区养老机构照护质量评估指标体系具有科学性和可靠性,可为滇西少数民族地区养老机构照护质量提供质量评价和质量改进依据。

关键词： 硫酸乙酰肝素   生物合成   合成后修饰   生物学功能  

摘要： 硫酸乙酰肝素(HS)是一类由多个高度硫酸化的糖醛酸和葡糖胺二糖重复单元组成的线性异构多糖。HS可作为细胞表面受体,与细胞因子和包括口蹄疫病毒(FMDV)在内的多种病毒粒子结合,发挥重要且广泛的生物学功能。功能性HS大分子的合成包括胞内的生物合成过程以及胞外的合成后修饰过程,涉及多种酶的参与。通过概述HS的多糖聚合以及蛋白修饰,分析HS生物合成及修饰过程,总结参与其中的关键酶及功能,以期为HS的生物学功能研究和化学酶学合成提供理论参考。

关键词： 滤食性鱼类   千岛湖沉积物   N_(2)O排放通量   氮循环   微生物机制   鲢  

摘要： 为了解滤食性鱼类粪便对湖泊沉积物N_(2)O排放的影响,收集千岛湖沉积物、水与鲢(Hypophthalmichthys molitrix)粪便,按照不同的配比设置3个实验组,开展为期90d的模拟封闭培养转化实验。通过分析N_(2)O的通量特征、水和沉积物混合物的理化指标、氮代谢酶活性与微生物序列,确定影响氮转化的主要环境因素及关键微生物类群。结果表明,在鱼粪的影响下,水-气界面的N_(2)O排放通量在45d达到最高,随后迅速下降,于45—60d由排放转化为吸收,沉积物中鱼粪的添加比例越大,培养后期对N_(2)O的吸收量越多。鱼粪的添加会显著提高循环系统中可溶性碳与氨氮的浓度,同时降低水体中的DO,显著提高沉积物中4种相关氮转化酶的活性。沉积物的16S rRNA分析表明,添加鱼粪会显著提高沉积物中变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidota)的相对丰度,其中芽孢杆菌属(Bacillus)丰度的提高可能是使沉积物表现出更强的N_(2)O吸收效率的主要原因,为湖泊滤食性鱼类增殖的N_(2)O减排机制提供了理论参考。

关键词： 土壤微生物   结构方程模型   分子生态网络   固碳潜力   自然恢复  

摘要： 在全球碳中和目标的大背景下,土壤固碳作为陆地生态系统碳循环的关键环节,其研究备受关注。采煤沉陷区作为典型的人为干扰生态系统,土壤结构破坏、肥力下降及微生物群落失衡等问题突出。近年来,针对采煤沉陷区人工修复对土壤固碳潜力和菌群结构的影响已被广泛关注,但自然恢复过程中农田土壤微生物固碳潜力的演变特征尚不清楚。为此,以采煤沉陷区为研究对象,系统采集不同自然恢复时间的采煤塌陷区农田土壤样品,综合运用高通量测序技术、结构方程模型和分子生态网络分析等方法,分析固碳菌群结构动态变化规律及其与土壤固碳潜力的内在联系。研究结果表明,自然恢复可帮助采煤沉陷区农田土壤理化性质和酶活性的有效恢复,自然恢复过程中农田土壤的固碳潜力主要受变形菌门(Proteobacteria)和酸杆菌门(Acidobacteria)控制。农田土壤受损程度随着自然恢复时间不断缓解,pH和有机质(SOM)含量的变化调控了过氧化氢酶(CAT)和β-葡糖苷酶(BG)活性,从而干预了Proteobacteria和Acidobacteria中的固碳基因丰度,进而影响了农田土壤固碳潜力。与未塌陷土壤相比,自然恢复初期,固碳菌群与环境因子的互作网络相对简单,生态系统稳定性较弱;而随着恢复进程推进,土壤受损程度不断缓解,网络中的节点数量显著增加,节点间的连接更加紧密,垂构连通度和聚类系数持续升高,表明生态系统的复杂性和稳定性逐步增强。研究首次系统揭示了采煤沉陷区自然恢复过程中农田土壤固碳潜力的演变特征及调控机制,为全面评估自然恢复的生态效益提供了新视角。研究结果不仅丰富了采煤沉陷区生态修复领域的理论基础,也为我国碳中和目标的实现提供了科学依据,对指导采煤沉陷区土地资源可持续利用和生态环境修复提供了参考。

关键词： 冠心病   N^(6)-甲基腺苷修饰   生物标志物   冠状动脉狭窄  

摘要： 目的评估外周血中总RNA N6-甲基腺苷(m^(6)A)和脂滴相关蛋白2(PLIN2)mRNA特定位点(chr9∶19116312)m^(6)A修饰水平作为冠心病新型分子生物标志物的临床价值。方法连续选取2023年6—12月于东部战区总医院确诊的冠心病患者74例和同期健康体检60名(对照组)进行回顾性病例对照研究。采用RNA甲基化定量试剂盒检测外周血总RNA m^(6)A修饰水平;采用单碱基延伸和连接的qPCR定量技术检测PLIN2特定位点(chr9∶19116312)m^(6)A修饰水平;检测总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等血脂指标, 中性粒细胞计数、血小板计数等血液常规指标, 进一步结合冠状动脉造影结果采用Gensini评分和SYNTAX评分系统评估冠状动脉病变特征。根据冠状动脉造影血管病变支数, 将冠心病组分为单支病变亚组(25例)和多支病变亚组(49例)。采用Spearman相关性分析、受试者工作特征(ROC)曲线和Logistic回归分析探讨外周血总RNA m^(6)A和PLIN2特定位点(chr9∶19116312)m^(6)A修饰水平对冠心病辅助诊断和病情评估的价值。结果与对照组比较, 冠心病组外周血总RNA m^(6)A和PLIN2特定位点(chr9∶19116312)m^(6)A修饰水平均较低(P均<0.05);且单支、多支病变亚组外周血总RNA m^(6)A较低(P均<0.05), 多支病变亚组外周血PLIN2特定位点(chr9∶19116312)m^(6)A修饰水平较低(P<0.05)。Spearman相关性分析显示, 冠心病组及多支病变亚组的外周血总RNA m^(6)A修饰水平均与HDL-C(r=0.246、0.289, P<0.05)呈正相关, 而与SYNTAX评分(r=-0.261、-0.322, P<0.05)和中性粒细胞计数(r=-0.246、-0.466, P<0.05)呈负相关;冠心病单支病变亚组的PLIN2特定位点(chr9∶19116312)m^(6)A修饰水平与Gensini评分(r=-0.566, P<0.05)呈负相关, 冠心病多支病变亚组的PLIN2特定位点(chr9∶19116312)m^(6)A修饰水平与血小板计数(r=-0.313, P<0.05)呈负相关。ROC曲线分析显示, 外周血总RNA m^(6)A联合PLIN2特定位点(chr9∶19116312)m^(6)A修饰水平分析区分冠心病和冠状动脉多支病变的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.915和0.918, 特异度分别为83.3%和95.0%、敏感度分别为85.1%和75.5%。多因素Logistic回归分析显示, 在校正年龄、性别、糖尿病和高血压及TC混杂因素的影响后, 外周血总RNA m^(6)A修饰水平(OR=0.691, P<0.001;OR=0.694, P<0.05)、PLIN2特定位点(chr9∶19116312)m^(6)A修饰水平(OR=0.345, P<0.05;OR=0.143, P<0.01)仍然与冠心病及冠状动脉多支病变发生风险独立相关。结论外周血总RNA m^(6)A联合PLIN2特定位点(chr9∶19116312)m^(6)A修饰水平分析, 有助于冠心病及冠状动脉多支病变患者的辅助诊断和病情评估。

关键词： 气候变化   碳汇   全球碳循环   分布格局  

摘要： 海洋是人为二氧化碳重要的汇区,吸收了自工业革命以来约26%的人为二氧化碳(Global Carbon Projec, 2024),在全球碳循环中扮演着关键角色,是全球气候变化研究的核心内容.海洋碳汇在储碳周期上最高可达数百年乃至上千年,比草原、森林等陆地生态系统碳汇大一个数量级(Hansell, 2013),因此,海洋碳汇在全球碳循环中发挥着极其重要的长期储碳作用.

关键词： 绿色健康   文化传承   高校民族传统体育   课程改革   适切性  

摘要： 在全民健身上升为国家战略、高校体育教学亟需改革创新的背景下,本文立足于绿色健康与文化传承创新视角,提出了高校民族传统体育课程改革的四大策略:整合多元资源,优化课程体系;创新教学技法,拓展授课形式;深挖文化内涵,融入人文教育;搭建多元平台,推动成果转化。这些举措旨在培养学生终身体育锻炼习惯,提升身心健康水平,传承弘扬中华优秀传统文化,为健康中国战略实施提供人才支撑和智力保障。