关键词:
植物乳杆菌
分离鉴定
生物学特性
安全性
肉鸭
摘要:
【目的】本研究旨在分离筛选1株鸭源益生菌,探究其生物学特性,选育应用于肉鸭生产的益生菌株,为开发新型益生菌制剂提供参考依据。【方法】试验从鸭盲肠内容物中分离纯化了1株细菌,通过钙溶圈法、革兰染色镜检、生化试验和16S rDNA检测对该菌进行了分离鉴定,测定其生长特性、耐酸性和胆盐耐受性,游离氨基酸产量和有机酸产物含量,检测其对大肠杆菌、鸭疫里默氏杆菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌、猪链球菌和副鸡嗜血杆菌的抑制率和凋亡率,电镜法观察抑菌形态,超滤法分离鸭源植物乳杆菌胞外蛋白,液相色谱串联质谱分析其中的抑菌成分,并评估对肉鸭使用的安全性。【结果】分离得到1株革兰阳性杆状的无芽孢杆菌,通过生化鉴定试验确定其为乳杆菌属,再经16S rDNA检测确定其为植物乳杆菌。该株鸭源植物乳杆菌与泡菜源植物乳杆菌相比,能够快速进入对数生长期和平缓期,具有较好的耐酸和耐胆盐特性;可产生较多游离氨基酸、乳酸和乙酸(P<0.05);在1∶1添加比例下对大肠杆菌和副鸡嗜血杆菌有显著抑制效果(P<0.05);在1∶4添加比例下对大肠杆菌、鸭疫里默氏杆菌和沙门菌的生长均有显著抑制作用(P<0.05),在1∶9添加比例下对大肠杆菌和鸭疫里默氏杆菌有显著抑制作用(P<0.05),1∶4添加比例下,大肠杆菌、鸭疫里默氏杆菌、猪链球菌和副鸡嗜血杆菌的凋亡率显著升高(P<0.05)。经液相色谱串联质谱分析,共检测出10种蛋白,其中2种蛋白与抑菌作用相关,分别为肽聚糖结合蛋白和乙酸激酶;对肉鸭安全性试验表明,该菌对肉鸭安全、无毒副作用。【结论】本试验分离筛选出了1株鸭源植物乳杆菌,其具有良好的生长特性、耐酸性、胆盐耐受性、产游离氨基酸和有机酸特性以及较好的抑菌效果,其抗菌机制可能通过抑菌蛋白及有机酸协同发挥作用,破坏细胞壁和细胞膜导致菌体死亡,对肉鸭安全、无毒副作用,具备作为益生菌饲料添加剂的潜力。