关键词:
马齿苋生物碱
溃疡性结肠炎
Toll样受体4
核因子kappa-B
Nod样受体蛋白3
摘要:
目的探讨马齿苋生物碱(purslane alkaloids,PA)对小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的治疗作用及调节机制。方法将35只小鼠随机分为空白对照组、模型组、药物治疗组(马齿苋生物碱低、中、高剂量组,美沙拉嗪组,马齿苋生物碱联合美沙拉嗪组)。前7 d空白对照组小鼠给予纯净水,模型组及药物治疗组给予3%硫酸葡聚糖钠盐(dextran sulfate sodium salt,DSS)溶液,构建UC动物模型。从第8天起,空白对照组及模型组给予生理盐水,药物治疗组小鼠开始接受固定剂量药物灌胃处理,持续14 d。在此期间,每日对小鼠健康状况、体质量、粪便特征及是否有血便进行详细记录。试验结束后计算各组小鼠疾病活动指数(disease activity index,DAI),测量结肠长度;采用苏木素-伊红染色观察结肠组织病理变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清及结肠组织中促炎因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量;蛋白印迹试验(Western blot)、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定结肠组织Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、核因子kappa-B(nuclear factor kappa-B,NF-κB)及Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor3,NLRP3)蛋白及mRNA表达。结果与模型组比较,马齿苋生物碱治疗组及联合组能缓解小鼠症状,增加体质量(P<0.05,P<0.01);降低DAI评分(P<0.05,P<0.01);缓解结肠组织缩短(P<0.01)及病理损伤;降低小鼠血清和结肠组织中IL-1β、IL-6、TNF-α炎症水平(P<0.05,P<0.01),显著下调结肠组织中TLR4、NF-κB和NLRP3蛋白及mRNA表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论马齿苋生物碱对小鼠急性UC有明显治疗作用,能降低UC小鼠结肠组织促炎细胞因子水平,明显缓解病理损伤,其抗炎机制可能与抑制TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路有关。