关键词:
circ-0072309
miR-26a-5p
职业性镉暴露
结直肠癌
恶性生物学行为
摘要:
目的 基于环状RNA-0072309(circular RNA-0072309,circ-0072309)/微小RNA-26a-5p(microRNA-26a-5p,miR-26a-5p)通路探讨职业性镉暴露诱导结直肠癌细胞恶性生物学行为的机制。方法 2024年2—5月在保定市第一中心医院进行实验,设结直肠癌细胞SW480组、50 nmol/L CdCl2组、100 nmol/L CdCl2组、200 nmol/LCdCl2组;培养72 h。实验结束后,测定细胞增殖、单克隆数目、凋亡水平、侵袭迁移水平、上皮细胞-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)水平,RT-PCR法及West-blot法检测细胞circ-0072309、miR-26a-5p、磷酸酯酶与张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10,PTEN)水平。结果 与结直肠癌细胞SW480组比较,50、100、200 nmol/L CdCl2组波形蛋白(Vimentin)水平、单细胞克隆形成数目、迁移距离、miR-26a-5p mRNA水平(0.97±0.16 vs 1.63±0.27、2.48±0.41、3.35±0.59)、存活率、穿膜数上升,PTEN mRNA蛋白水平(3.24±0.54 vs 2.63±0.43、1.89±0.32,1.01±0.16,1.28±0.21 vs 0.95±0.16、0.60±0.10,0.23±0.05)、上皮钙黏蛋白(epithelial cadherin,E-cadherin)水平、circ-0072309 mRNA水平(3.59±0.61 vs 2.89±0.48,2.12±0.35、1.35±0.23)、凋亡率下降,差异均有统计学意义(均P<0.05);且随着CdCl2暴露剂量的增加,50、100、200 nmol/L CdCl2组Vimentin水平、单细胞克隆形成数目、迁移距离、miR-26a-5p mRNA水平、存活率、穿膜数呈上升趋势,PTEN mRNA蛋白水平、E-cadherin水平、circ-0072309mRNA水平、凋亡率呈下降趋势,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 职业性Cd暴露通过抑制circ-0072309表达,解除其对miR-26a-5p的吸附,导致miR-26a-5p过表达并靶向下调PTEN基因,激活PI3K/AKT通路,从而以剂量依赖性方式(50~200 nmoVL)促进结直肠癌细胞增殖、侵袭迁移及EMT进程(Vimentin ↑/E-cadherin↓),抑制凋亡;本研究首次阐明circ-0072309/miR-26a-5p/PTEN轴在镉致癌中的ceRNA调控机制,为职业镉暴露相关结直肠癌的分子干预和circRNA生物标志物开发提供参考依据。