关键词:
离子色谱法
脊髓灰质炎灭活疫苗
多离子
摘要:
目的采用离子色谱法测定脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated poliomyelitis vaccine,IPV)中的多离子含量,并对方法进行验证及初步应用,以期对疫苗中的多离子实行质量控制。方法色谱条件:采用阴离子交换分析柱(4 mm×250 mm),上样量:25μL,用30 mmol/L KOH淋洗液等度洗脱,流速:1.0 mL/min,柱温:25℃,电导检测器检测,检测时间:15 min,用Chromeleon色谱工作站记录并分析数据。对建立的方法进行系统适用性、专属性、线性、准确性、重复性验证,并确定该方法的最低检出限和最小定量限。采用建立的方法检测10批Sabin株IPV(sIPV)。结果连续进样8次,氟离子、氯离子、硫酸根离子、硝酸根离子、磷酸根离子峰面积相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均小于2.0%;该方法检测氯离子、氟离子、硝酸根离子、磷酸根离子、硫酸根离子专属性较强;在2.5~150μg/mL范围内,上述离子与色谱峰面积呈良好的线性关系,r^(2)均大于0.995;向sIPV滤出液中分别添加低(10μg/mL)、中(25μg/mL)、高(50μg/mL)浓度的多离子混标溶液,重复测定6次的回收率在93.69%~106.70%之间,RSD在0.05%~0.7%之间;氟离子、氯离子、硫酸根离子、硝酸根离子、磷酸根离子的最低检出限分别为8.3、2.5、5.1、0.025、0.021μg/mL,最小定量限分别为0.025、8.3、0.025、0.45、0.063μg/mL。采用建立的方法在10批sIPV中均未检出氟离子、硫酸根离子和硝酸根离子,但检出了氯离子和磷酸根离子。结论离子色谱法测定IPV中多离子浓度变化简便、快捷、灵敏、重现性好,是一种有效的检测手段,可帮助企业内控该种疫苗的质量。