关键词:
二维液相色谱法
贝达喹啉
N-单甲基代谢物
血药浓度
方法学
临床应用
摘要:
目的:为临床开展贝达喹啉的治疗药物监测工作提供可行的技术支持。方法:(1)一维液相色谱,一维色谱柱为Aston SX1(3.5 mm×25.0 mm,5.0μm),流动相为乙腈-甲醇-40 mmoL/L磷酸水溶液(V∶V∶V=3∶1∶4),二乙胺调pH=7.0,流速为1.0 mL/min;(2)二维液相色谱,二维色谱柱为Aston SCB(4.6 mm×100.0 mm,5.0μm),流动相为乙腈-异丙醇-45 mmol/L磷酸水溶液(V∶V∶V=7∶1∶5),二乙胺调pH=5.8,流速为1.2 mL/min;(3)中间柱为Aston SCB(4.6 mm×10.0 mm,3.5μm),辅助流动相为纯水,流速为0.01 mL/min。样本检测波长为235 nm/225 nm,柱温为40℃,进样体积为200μL。结果:贝达喹啉及其代谢产物N-单甲基代谢物(M2)的浓度分别为0.233~10.494、0.236~10.640μg/mL时,与峰面积呈良好的线性关系,其回归方程为Y=(2.91394×10^(6))X-21600.2(R=0.9998);贝达喹啉、M2的定量下限分别为0.233、0.236μg/mL,检测限分别为0.046、0.047μg/mL;批内、批间精密度考察结果显示,贝达喹啉和M2的RSD均<3%。准确度考察结果显示,贝达喹啉实测浓度与理论浓度的偏差在93.42%~104.06%范围内,M2的偏差在95.86%~101.27%范围内;稳定性考察结果显示,不同条件下的贝达喹啉和M2的RSD均<3.00%;贝达喹啉、M2的提取回收率分别为98.01%~98.56%、98.64%~99.01%,转移回收率分别为95.22%、99.00%。结论:基于二维液相色谱法的贝达喹啉和M2血药浓度测定方法具有灵敏度高、重现性好、自动化程度高及样品前处理简单等特点,符合血浆样品检测需求,为临床患者治疗提供了崭新且实用的疗效监测手段,也为减少抗结核新药贝达喹啉耐药性的发生提供了技术支持。