关键词： PER3   棕榈酸   足细胞   氧化应激   炎症因子  

摘要： 目的:高脂诱导足细胞损伤是导致肥胖相关性肾病(obesity relatedglomerulopathy,ORG)的重要因素之一,但机制并不明确。本研究探讨昼夜节律时钟基因3(period circadianclock 3,PER3)在抑制棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导的小鼠足细胞氧化应激及炎症因子分泌中的作用和机制。方法:正常及高脂饮食喂养C57BL/6J小鼠16周,取小鼠肾组织,采用蛋白印迹法检测正常体重组和肥胖组PER3的表达;以不同体积浓度(0、50、150和300μmol/L)PA分别干预足细胞48 h,检测各浓度组PER3 mRNA及蛋白质的表达;以150μmol/L PA分别干预足细胞0、24、36及48 h,检测各时间点PER3 mRNA及蛋白质的表达;在足细胞中转染腺病毒(adenovirus,Ad)-PER3或小干扰RNA(small interferingRNA,siRNA)-PER3后48 h,再以150μmol/L PA干预48 h,检测PA组、Ad-PER3+PA组和siRNAPER3+PA组足细胞中三酰甘油(triglyceride,TG)的含量;利用RNA测序(RNA sequencing,RNA-seq)检测siRNA-PER3组和siRNA-对照组差异基因的表达;在足细胞中转染Ad-PER3或Ad-对照48 h后再以150μmol/L PA干预48 h,检测Ad-PER3+PA组和Ad-对照+PA组肾病蛋白(nephrin)、足蛋白(podocin)、足细胞标记蛋白(podocalyxin)、肾小球足突细胞膜黏蛋白(podoplanin)、超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase 1,SOD1)、谷胱甘肽过氧化物酶1(glutathione peroxidase 1,GPX1)、过氧化氢酶(catalase,CAT)的表达,以及足细胞内丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosisfactor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)及白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)的含量。结果:在肥胖组小鼠肾组织中,PER3的表达较正常体重组小鼠下调(P<0.05);150μmol/L PA干预足细胞48 h较0、24、36 h PER3 mRNA表达均显著下调(均P<0.01);与PA组相比,Ad-PER3+PA组足细胞内TG含量显著减少,相反,siRNA-PER3+PA组足细胞内TG的含量增加(均P<0.05);在足细胞转染siRNA-PER3后,siRNA-PER3组较siRNA-对照组差异基因在氧化磷酸化、细胞外基质受体的相互作用、TNF-α信号通路、游离脂肪酸代谢及游离脂肪酸降解通路中富集(均P<0.05);Ad-PER3+PA组在足细胞标志基因(nephrin、podocin、podocalyxin和podoplanin)、足细胞内的氧化应激(SOD1、GPX1、CAT和GSH)及炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-2)的分泌较PA组均显著下调(均P<0.05)。结论:PER3可通过抑制足细胞内的脂质合成而减少PA诱导的氧化应激及炎症因子分泌。

关键词： 慢性肾脏病   昼夜节律   时钟基因  

摘要： 研究表明,昼夜节律在维持肾脏正常生理功能中起着重要作用,而睡眠问题或其他不良生活习惯引起的昼夜节律紊乱可能是导致慢性肾脏病(CKD)发生发展的重要因素。生物钟的核心时钟元件由经典时钟基因组成,时钟基因表达紊乱可能通过自噬失调、炎症反应、氧化应激及诱导肾纤维化等机制参与CKD的发生发展。在针对CKD的治疗中,昼夜节律是不可忽视的因素,深入了解时钟基因在CKD发生发展中的分子机制可以为临床上改进治疗策略提供参考。

关键词： 昼夜节律   基因   非酒精性脂肪性肝病  

摘要： 近年来昼夜节律与代谢性疾病的关系逐渐受到人们重视。大量临床研究表明,经常熬夜、轮班的人群非酒精性脂肪性肝病的发生风险明显高于作息规律的人群。基于现有数据,重点从脂质代谢、葡萄糖代谢、肠道菌群、氧化应激、内质网应激五个方面总结了昼夜节律基因在非酒精性脂肪性肝病中的作用机制。

关键词： 动脉粥样硬化   昼夜节律   生物钟  

摘要： 地球上几乎所有的生命都存在昼夜节律,控制昼夜节律的生物钟具有重要的生理功能,同时也是疾病的重要调节器。昼夜节律与动脉粥样硬化关系密切。研究表明受损的生物钟会影响造血过程和糖脂代谢,并改变局部斑块病变中的细胞功能。在分子水平上,昼夜节律可以通过Toll样受体(TLR)通路调节动脉粥样硬化炎症状态和血管重塑,通过蛋白激酶B(Akt)通路改善内皮功能和胰岛素信号传导,并通过CCL2-CCR2信号轴影响单核细胞的招募与淋巴细胞的活化。本篇综述讨论了动脉粥样硬化中昼夜节律的作用及分子机制,以及动脉粥样硬化与生物钟系统的联系。

关键词： 酒精有害使用   昼夜节律基因   睡眠   多导睡眠监测  

摘要： 目的:探讨酒精有害使用(HUA)对昼夜节律相关基因mRNA表达及其对睡眠行为的影响。方法:收集网络招募的22例HUA者(HUA组)及21名健康对照者(对照组)的基本信息,并对入组者进行匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)评估、多导睡眠监测(PSG)及外周血白细胞中昼夜节律相关基因[钟基因(Clock)、周期基因1(Per1)、Per2、Per3、大脑和肌肉ARNT样蛋白-1基因(Bmal1)]mRNA表达测定;对结果进行组间比较,分析昼夜节律相关基因mRNA表达及其对睡眠行为的影响。结果:HUA组Clock、Per3、Bmal1基因mRNA表达明显低于对照组(P<0.05或P<0.01);PSQI总分及睡眠效率评分明显高于对照组(P均<0.05);PSG观察指标中,总睡眠时间、睡眠效率、非快速眼动2期睡眠及快速眼动期睡眠时间明显低于对照组(P均<0.05),睡眠潜伏期和入睡后清醒时间明显高于对照组(P均<0.05)。HUA组Clock mRNA表达与饮酒年限呈负相关(r=-0.434,P<0.05)。结论:HUA者Clock、Per3、Bmal1基因表达下降,并且出现睡眠时间、效率、睡眠连续性的下降和睡眠起始困难。

关键词： 小鼠实验   睡眠限制   睡眠剥夺   睡眠不足   下丘脑   钟基因   昼夜节律紊乱   组织样本  

摘要： 在本课题组之前的研究中,我们发现短时间(72h)的完全睡眠剥夺能够造成小鼠下丘脑钟基因节律表达的紊乱。相比较于短时间内完全没有睡眠的情况,长时间的睡眠不足在现代社会中更为常见。因此我们利用水平台睡眠剥夺法,设计了为期28d、每天仅4h睡眠的睡眠限制小鼠实验。并在实验结束后从8∶00开始,每隔4h收集小鼠的下丘脑组织,至次日4∶00,共采集6个时间点的组织样本。

关键词： 血压昼夜节律   高血压   基因多态性   ADRB2基因   NEDD4L基因  

摘要： 目的考察ADRB2 rs1042713、NEDD4L rs4149601基因单核苷酸多态性与高血压患者血压昼夜节律的相关性。方法收集原发性高血压患者217例,动态血压监测确定患者血压昼夜节律,其中杓型节律79例,异常血压昼夜节律138例。取血用PCR和Sanger测序检测ADRB2、NEDD4L基因型,以基因型为自变量,患者非杓型血压昼夜节律类型为因变量,Logistic回归分析ADRB2、NEDD4L基因多态性与高血压患者血压昼夜节律的相关性。结果ADRB2 rs1042713携带A等位基因可能是高血压昼夜节律异常的危险因素,ADRB2 rs1042713和NEDD4L rs4149601都携带A等位基因(OR=12.293,95%CI 2.712~55.710)(P<0.05)以及高龄(OR=1.976,95%CI 1.368~2.854)是高血压昼夜节律异常的独立危险因素(P<0.05)。结论ADRB2和NEDD4L基因多态性与高血压患者异常血压昼夜节律密切相关。

关键词： 围绝经期综合征   肝郁证   昼夜节律   时钟基因  

摘要： 目的:探讨围绝经期综合征(PPS)肝郁证大鼠主要时钟基因昼夜表达规律,探求PPS与昼夜节律变化之间的关联。方法:以3月龄雌性SD大鼠为空白对照组,12~13月龄PPS SD大鼠为研究对象,采用自然衰老法和慢性束缚应激法建立PPS肝郁证大鼠模型,采用Real-time PCR方法检测大鼠下丘脑主要时钟基因Clock、Bmal1、Per1、Per2、Cry1和Cry2的表达水平及节律。结果:3组大鼠Per2、Cry1和Cry2的表达量变化呈近日节律,其中PPS肝郁证组Per2和Cry2的表达振幅显著高于空白对照组和PPS组,峰/谷值分别为12.37、7.66,峰值相位均出现在20:00左右。空白对照组和PPS组的Clock、Per1表达呈近日节律,PPS肝郁证组Clock、Per1的近日节律消失。3组大鼠的Bmal1表达均不能用余弦函数拟合。结论:PPS肝郁证与主要时钟基因表达的异常之间可能存在相互促进关系。

关键词： 老年高血压   血压昼夜节律   颈动脉粥样硬化   颈动脉内膜中层厚度  

摘要： 目的探讨老年高血压患者不同类型的血压昼夜节律与颈动脉粥样硬化之间的关系。方法选取2019年2月—2020年2月在西安交通大学第一附属医院治疗的老年高血压患者128例为研究对象,根据24 h动态血压监测结果将患者分为杓型组(32例)和异常昼夜节律组(96例),再将异常昼夜节律组分为非杓型组(68例)和反杓型组(28例)。检测各组患者左、右侧颈总动脉内膜中层厚度(IMT)和斑块发生情况,并测定各组患者的24 h收缩压、24 h舒张压、昼间收缩压、昼间舒张压、夜间收缩压和夜间舒张压,统计一般临床资料和相关生化指标。比较各组患者的临床指标。结果异常昼夜节律组患者夜间收缩压、夜间舒张压明显高于杓型组患者(均P<0.01);异常昼夜节律组患者斑块检出率明显高于杓型组患者(P<0.01);异常昼夜节律组患者左、右两侧IMT值均明显高于杓型组患者(均P<0.01)。反杓型组患者夜间收缩压、夜间舒张压明显高于非杓型组患者(均P<0.01);非杓型组与反杓型组患者左侧颈总动脉斑块检出率和左侧IMT均明显高于同组右侧(均P<0.05)。结论老年高血压患者异常血压昼夜节律变化主要为夜间收缩压和舒张压之间存在明显差异;其血压昼夜节律与颈动脉粥样硬化具有密切关系,异常血压昼夜节律对靶器官的损伤更大;非杓型和反杓型患者的异常血压昼夜节律对左侧颈动脉内膜的损害程度较右侧更加明显。

关键词： 正常高值血压   清道夫受体   CD36基因缺陷   血压昼夜节律   代谢性指标  

摘要： 目的探讨清道夫受体CD36基因缺陷对正常高值血压患者血压昼夜节律及代谢性指标的影响。方法纳入200例初诊正常高值血压患者,通过实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)筛选CD36基因缺陷者31例作为观察组,CD36基因正常者169例作为对照组。比较两组患者24小时动态血压及代谢性指标,分析CD36基因缺陷与血压昼夜节律及代谢性指标的相关性。结果观察组24 h平均动脉压(24h MAP)、非杓型血压患者比例及甘油三酯(TG)水平、BMI、胰岛素抵抗指数均高于对照组(P<0.05)。Logistic多元逐步回归分析结果显示,CD36基因缺陷与正常高值血压患者动态血压节律改变、24h MAP升高、肥胖、高TG血症、胰岛素抵抗具有相关性(P<0.05)。结论清道夫受体CD36基因缺陷可能对正常高值血压患者的血压昼夜节律及部分代谢性指标产生影响,有必要对CD36基因缺陷的正常高值血压患者进行有效的干预措施。