关键词： 酒精有害使用   昼夜节律基因   睡眠   多导睡眠监测  

摘要： 目的:探讨酒精有害使用(HUA)对昼夜节律相关基因mRNA表达及其对睡眠行为的影响。方法:收集网络招募的22例HUA者(HUA组)及21名健康对照者(对照组)的基本信息,并对入组者进行匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)评估、多导睡眠监测(PSG)及外周血白细胞中昼夜节律相关基因[钟基因(Clock)、周期基因1(Per1)、Per2、Per3、大脑和肌肉ARNT样蛋白-1基因(Bmal1)]mRNA表达测定;对结果进行组间比较,分析昼夜节律相关基因mRNA表达及其对睡眠行为的影响。结果:HUA组Clock、Per3、Bmal1基因mRNA表达明显低于对照组(P<0.05或P<0.01);PSQI总分及睡眠效率评分明显高于对照组(P均<0.05);PSG观察指标中,总睡眠时间、睡眠效率、非快速眼动2期睡眠及快速眼动期睡眠时间明显低于对照组(P均<0.05),睡眠潜伏期和入睡后清醒时间明显高于对照组(P均<0.05)。HUA组Clock mRNA表达与饮酒年限呈负相关(r=-0.434,P<0.05)。结论:HUA者Clock、Per3、Bmal1基因表达下降,并且出现睡眠时间、效率、睡眠连续性的下降和睡眠起始困难。

关键词： 小鼠实验   睡眠限制   睡眠剥夺   睡眠不足   下丘脑   钟基因   昼夜节律紊乱   组织样本  

摘要： 在本课题组之前的研究中,我们发现短时间(72h)的完全睡眠剥夺能够造成小鼠下丘脑钟基因节律表达的紊乱。相比较于短时间内完全没有睡眠的情况,长时间的睡眠不足在现代社会中更为常见。因此我们利用水平台睡眠剥夺法,设计了为期28d、每天仅4h睡眠的睡眠限制小鼠实验。并在实验结束后从8∶00开始,每隔4h收集小鼠的下丘脑组织,至次日4∶00,共采集6个时间点的组织样本。

关键词： 血压昼夜节律   高血压   基因多态性   ADRB2基因   NEDD4L基因  

摘要： 目的考察ADRB2 rs1042713、NEDD4L rs4149601基因单核苷酸多态性与高血压患者血压昼夜节律的相关性。方法收集原发性高血压患者217例,动态血压监测确定患者血压昼夜节律,其中杓型节律79例,异常血压昼夜节律138例。取血用PCR和Sanger测序检测ADRB2、NEDD4L基因型,以基因型为自变量,患者非杓型血压昼夜节律类型为因变量,Logistic回归分析ADRB2、NEDD4L基因多态性与高血压患者血压昼夜节律的相关性。结果ADRB2 rs1042713携带A等位基因可能是高血压昼夜节律异常的危险因素,ADRB2 rs1042713和NEDD4L rs4149601都携带A等位基因(OR=12.293,95%CI 2.712~55.710)(P<0.05)以及高龄(OR=1.976,95%CI 1.368~2.854)是高血压昼夜节律异常的独立危险因素(P<0.05)。结论ADRB2和NEDD4L基因多态性与高血压患者异常血压昼夜节律密切相关。

关键词： 围绝经期综合征   肝郁证   昼夜节律   时钟基因  

摘要： 目的:探讨围绝经期综合征(PPS)肝郁证大鼠主要时钟基因昼夜表达规律,探求PPS与昼夜节律变化之间的关联。方法:以3月龄雌性SD大鼠为空白对照组,12~13月龄PPS SD大鼠为研究对象,采用自然衰老法和慢性束缚应激法建立PPS肝郁证大鼠模型,采用Real-time PCR方法检测大鼠下丘脑主要时钟基因Clock、Bmal1、Per1、Per2、Cry1和Cry2的表达水平及节律。结果:3组大鼠Per2、Cry1和Cry2的表达量变化呈近日节律,其中PPS肝郁证组Per2和Cry2的表达振幅显著高于空白对照组和PPS组,峰/谷值分别为12.37、7.66,峰值相位均出现在20:00左右。空白对照组和PPS组的Clock、Per1表达呈近日节律,PPS肝郁证组Clock、Per1的近日节律消失。3组大鼠的Bmal1表达均不能用余弦函数拟合。结论:PPS肝郁证与主要时钟基因表达的异常之间可能存在相互促进关系。

关键词： 老年高血压   血压昼夜节律   颈动脉粥样硬化   颈动脉内膜中层厚度  

摘要： 目的探讨老年高血压患者不同类型的血压昼夜节律与颈动脉粥样硬化之间的关系。方法选取2019年2月—2020年2月在西安交通大学第一附属医院治疗的老年高血压患者128例为研究对象,根据24 h动态血压监测结果将患者分为杓型组(32例)和异常昼夜节律组(96例),再将异常昼夜节律组分为非杓型组(68例)和反杓型组(28例)。检测各组患者左、右侧颈总动脉内膜中层厚度(IMT)和斑块发生情况,并测定各组患者的24 h收缩压、24 h舒张压、昼间收缩压、昼间舒张压、夜间收缩压和夜间舒张压,统计一般临床资料和相关生化指标。比较各组患者的临床指标。结果异常昼夜节律组患者夜间收缩压、夜间舒张压明显高于杓型组患者(均P<0.01);异常昼夜节律组患者斑块检出率明显高于杓型组患者(P<0.01);异常昼夜节律组患者左、右两侧IMT值均明显高于杓型组患者(均P<0.01)。反杓型组患者夜间收缩压、夜间舒张压明显高于非杓型组患者(均P<0.01);非杓型组与反杓型组患者左侧颈总动脉斑块检出率和左侧IMT均明显高于同组右侧(均P<0.05)。结论老年高血压患者异常血压昼夜节律变化主要为夜间收缩压和舒张压之间存在明显差异;其血压昼夜节律与颈动脉粥样硬化具有密切关系,异常血压昼夜节律对靶器官的损伤更大;非杓型和反杓型患者的异常血压昼夜节律对左侧颈动脉内膜的损害程度较右侧更加明显。

关键词： 正常高值血压   清道夫受体   CD36基因缺陷   血压昼夜节律   代谢性指标  

摘要： 目的探讨清道夫受体CD36基因缺陷对正常高值血压患者血压昼夜节律及代谢性指标的影响。方法纳入200例初诊正常高值血压患者,通过实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)筛选CD36基因缺陷者31例作为观察组,CD36基因正常者169例作为对照组。比较两组患者24小时动态血压及代谢性指标,分析CD36基因缺陷与血压昼夜节律及代谢性指标的相关性。结果观察组24 h平均动脉压(24h MAP)、非杓型血压患者比例及甘油三酯(TG)水平、BMI、胰岛素抵抗指数均高于对照组(P<0.05)。Logistic多元逐步回归分析结果显示,CD36基因缺陷与正常高值血压患者动态血压节律改变、24h MAP升高、肥胖、高TG血症、胰岛素抵抗具有相关性(P<0.05)。结论清道夫受体CD36基因缺陷可能对正常高值血压患者的血压昼夜节律及部分代谢性指标产生影响,有必要对CD36基因缺陷的正常高值血压患者进行有效的干预措施。

关键词： 尼罗罗非鱼   肝脏   Nr1d1   Ulk1b   昼夜节律性表达  

摘要： 为了探究GSK4112对生物钟以及自噬基因在尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)肝脏的昼夜表达规律的作用。本试验分别对尼罗罗非鱼注射等量生理盐水和GSK4112,并在注射24 h后的06:00、09:00、12:00、15:00、18:00、21:00、24:00时以及翌日03:00、06:00时采样,采样在一昼夜内完成。每组随机取3尾鱼进行解剖,取其肝脏样品采用RT-qPCR对mRNA表达水平,进行Matlab余弦分析,确定其节律性表达,并将注射前后肝脏样品用透射电镜检测自噬小体数量变化。结果表明:生物钟基因Nr1d1与自噬基因Ulk1b在对照组的尼罗罗非鱼肝脏中表达均具有显著性时间差异(P<0.05),且均呈现节律性振荡(P<0.3);但基因表达趋势不同,且达到峰值的时间亦不同。注射Nr1d1激动剂GSK4112后Nr1d1与Ulk1b在尼罗罗非鱼肝脏中均无昼夜节律性,虽然达到峰值的时间不同,但基因表达趋势相同,mRNA表达水平均表达量受到抑制,振幅和中值减小,且自噬小体数量也减少。这些结论表明了GSK4112在尼罗罗非鱼肝脏中对生物钟基因Nr1d1的表达起到抑制作用,同时影响其生物节律性。通过对下游自噬基因Ulk1b的昼夜节律调控,抑制自噬小体的数量,降低自噬的发生。本研究对鱼类由昼夜节律失调引起的自噬失调可能导致常见的代谢紊乱具有指导作用。

关键词： 昼夜节律基因   甲基化   突变   乳腺癌  

摘要： 目的探讨节律基因在乳腺癌中的表达变化、甲基化和突变情况。方法通过公共数据库中的乳腺癌数据对节律基因的表达和功能进行全面和系统的分析。结果乳腺癌中大多数节律基因均显示出高突变率,超过30%的节律基因在乳腺癌中都发生了显著突变,其中,周期基因2(PER2)在乳腺癌中突变率较高,高达1%。大多数节律基因在乳腺癌样本中呈低表达,大多数节律基因在乳腺癌样本中呈高甲基化。结论乳腺癌中大多数节律基因均显示出高突变率及低表达,表达水平的变化可能是异常甲基化导致的。

关键词： 昼夜节律   相位前移   PDE5抑制剂   基因表达   肝脏  

摘要： 目的研究磷酸二酯酶5(PDE5)抑制剂TF对小鼠昼夜节律相位前移的影响并探讨其对小鼠肝脏生物钟的作用机制。方法(1)跑轮实验:15只小鼠随机分为3组:对照组、西地那非(sildenafil)组和TF组。在小鼠原有节律的基础上将开灯时间提前8 h。改变光照当天ZT18时灌胃给药(30 mg/kg),记录小鼠的昼夜活动相移情况。(2)分子生物学实验:16只小鼠随机分为4组:对照组、西地那非组(30 mg/kg)、TF低剂量组(30 mg/kg)和TF高剂量组(60 mg/kg)。同跑轮实验条件,给药1 h后取小鼠肝脏,实时定量PCR法检测小鼠肝组织生物钟基因mRNA表达水平的变化,并对生物钟基因的蛋白表达产物进行免疫印迹分析。结果动物跑轮实验结果表明,在光照时间提前8 h后,与对照组相比[(9.400±0.548)d],西地那非组小鼠需(7.400±1.517)d、TF组小鼠需(7.200±1.304)d同步化到新的昼夜节律周期,两组均与对照组有显著性差异。在基因水平,与对照组相比,西地那非组和TF组肝组织bmal1、naps2的mRNA表达水平均呈现显著上调,西地那非组和TF组(60 mg/kg)clock的mRNA表达水平呈现显著上调,西地那非组和TF组(30 mg/kg)rorα的mRNA表达水平呈现显著上调,per2和rev-erbαmRNA表达水平均显著下调,而per1、cry1、cry2、dec1的mRNA表达水平无显著变化。与对照组相比,西地那非组和TF组肝组织BMAL1、CLOCK蛋白表达水平显著上调,TF组RORα蛋白表达水平显著上调,西地那非组和TF组(60 mg/kg)NPAS2蛋白表达水平显著上调,西地那非组和TF组PER2、REV-ERBα的蛋白表达水平显著下调。结论TF能促进小鼠昼夜节律相位前移,并可同时在转录和翻译水平改变小鼠肝脏多种核心生物钟基因的表达。