关键词： 节律基因   细胞周期   DNA损伤   磷酸化  

摘要： 昼夜节律钟与细胞周期是两个重要的生物过程。昼夜节律钟是机体的分子时间调节系统;而细胞分裂周期调节细胞的发展和细胞更新。一些细胞周期相关基因的表达在节律钟的调控下被其复合物所调节。其中包括NPAS2/CLOCK和BMAL1/CLOCK二聚体复合物。这些复合物调节PER1/PER2的转录。近期的研究表明,节律基因PER1和PER2在DNA损伤反应通路中表现明显,诱导PER1和PER2在癌细胞中可以抑制细胞增殖和提高调亡率。另外在人类的许多癌症中存在PER1和PER2蛋白的丢失和失调。最新研究证实PER1和PER2参与了ATM-chk1/chk2的DNA损伤反应通路,并且预示作为一肿瘤抑制因子起作用。现将PER1和PER2在肿瘤的研究进展综述如下。

关键词： 基因   血压   高血压   血压昼夜节  

摘要： 目的研究血管紧张素转换酶(ACE)、醛固酮合成酶(CYP11B2),α-内收蛋白((α-adducin)基因多态性与高血压患者血压昼夜节律变化的关系。方法根据动态血压昼夜节律变化,将238例高血压患者分为杓型与非杓型两组,分析ACE、CYP11B2、α-adducin基因不同基因型在杓型血压组和非杓型血压组的分布;统计学处理用卡方检验和方差分析。结果杓型组与非杓型组ACE基因多态性的分布存在显著差异,P<0.05;杓型组以II型的分布频率为主,而卡方分割表明非杓型组ID+DD基因型的分布高于杓型组(P<0.01);而CYP11B2、α-adducin基因多态性与高血压患者血压节律变化无关联。结论ACE(I/D)基因多态性与高血压患者昼夜血压节律变化有关,携带D等位基因的患者可能更易发生夜间血压升高。

摘要： Circadian rhythms are the daily biological and physiological processes that cycle with a period of about 24 hours. In recent years, the circadian field has progressed significantly from the discovery of many genes involved in the core circadian function. The first mammalian circadian gene that was cloned, Clock, was shown to be a transcription factor that is critical for the proper functioning of the circadian system in mammals. Many studies have been conducted with the Clock Delta19 mutation and how ubiquitous perturbations in Clock gene function affect the circadian system at both the behavioral and molecular levels. However, the tissue specific role of the Clock gene in controlling circadian rhythms has not been addressed. In addition, circadian studies have not been conducted with a mouse model that contains a loss of expression of the Clock gene. In this study, we have attempted to address these two issues using a variety of different methods. First, we utilized the tetracycline transactivator system and showed that expression of wild-type Clock and mutant Clock Delta19 transgenes in the SCN/brain is sufficient to alter circadian locomotor behavior in darkness. Second, we created Clock gene knockout mice from ES cells containing a genetrap in the Clock locus in order to determine the absence of Clock gene expression on circadian locomotor behavior and the circadian molecular machinery. From these set of experiments, we have found that the loss of Clock expression does not severely attenuate the expression levels and oscillations of the core circadian transcripts. As a result, the circadian free running period and wheel running rhythmicity of Clock knockout mice are not severely compromised as it is in Clock Delta19 mutant mice. Third, we investigated the light resetting properties of the circadian system in the absence of Clock gene expression. From these experiments, we found that the light resetting properties were significantly altered in Clock knocko

关键词： 高血压   血管紧张素受体   基因   多态性   血压昼夜节律  

摘要： 目的:探讨血管紧张素Ⅱ-1型受体(angiogenesisⅡtype1receptor,AT1R)基因1166位点多态性与原发性高血压(EH)及血压昼夜节律的关系。方法:选择EH患者100例,血压正常者80例,采用聚合酶链反应、限制性内切酶酶解及电泳分型的方法对AT1R基因1166位点的多态性进行分析;同时检测24h动态血压。结果①EH组中1166C等位基因频率明显高于对照组(P<0.05)。②非杓型者比杓型者夜间收缩压、舒张压均增高(P<0.05),1166C等位基因频率亦明显增高(P<0.05)。结论:AT1R基因1166位点多态性与EH相关,1166C等位基因是EH发病的危险因素;AT1R基因A1166C多态性与血压昼夜节律的调节相关。

关键词： 乙型肝炎病毒   转基因小鼠   昼夜节律表达基因   dbp  

摘要： 目的验证HBsAg阳性转基因小鼠肝脏中昼夜节律表达基因dbp(coding for the D site albumin promoter binding protein)转录水平的变化。方法用实时荧光定量聚合酶链式反应方法对比研究雌、雄及个体HBsAg阳性转基因小鼠及对照鼠肝脏dbp转录水平的变化。研究不同时间点HBsAg阳性转基因小鼠及对照鼠肝脏dbp转录水平的变化。结果#59及#10品系组HBsAg阳性转基因小鼠肝组织中dbp转录水平均较对照组动物上调,但个体间差别较大。初步结果显示雌性正常小鼠dbp转录水平较雄性高。而在雌性HBsAg阳性转基因小鼠中dbp上调进一步增强。与此相反,雄性转基因小鼠dbp上调则较同性对照鼠更弱。转基因小鼠dbp转录在8:00及14:00时平均水平均高于对照鼠,然而在20:00及2:00时与对照鼠相当。结论本研究首次报道HBsAg阳性转基因小鼠肝脏中dbp表达的上调,提供了乙型肝炎病毒蛋白表达与昼夜节律基因变化有所联系的证据。至于本研究在转基因鼠中的发现是否在乙型肝炎患者中存在及其意义还有待在患者中作进一步临床验证与研究。

关键词： 昼夜节律钟基因   细胞周期   肿瘤  

摘要： 昼夜节律钟基因(circadian clock genes)在分子水平构成生物钟,使得生物体的细胞分裂、免疫和内分泌等各项生命活动呈现周期性、有序性和协同性。昼夜节律钟基因控制着细胞周期,昼夜节律紊乱会增加癌症发病率;时辰化疗较之常规化疗能够进一步提高治疗指数,减少不良反应,改善患者生活质量;昼夜节律是肿瘤患者重要的生存预后指标;抗肿瘤免疫调节制剂给药也需遵循时间规律。昼夜节律钟基因与细胞周期关系的进一步阐明可能带来对于癌症成因、播散和转移机制认识的深化,并可能带来择时诊疗的新模式。

关键词： 针刺镇痛   昼夜节律   免疫抑制   细胞因子   褪黑激素   阿片肽受体  

摘要： 目的:探讨电针抗创伤痛效应在昼夜24小时周期中不同时段的时辰差异，明确电针对创伤性疼痛的镇痛作用及抗免疫抑制作用是否具有明显的昼夜节律特征，以及这种节律是否与机体的时间中枢视交叉上核内per2基因的转录具有一定的相关性。\n 方法：经过痛阈筛选的192只SD大鼠，将动物随机分为24组，每组8只，其中每4组作为1个观察时间点，分别于8：00(ZT0)、12：00(ZT4)、16：00(ZT8)、20：00(ZT12)、24：00(ZT16)、4:00(ZT20)这6个时间点用甩尾法测定动物痛阈后，分别在相应的时间点对动物进行处理：空白对照组（不截肢，不电针）、空白电针对照组（不截肢，仅电针）、截肢模型组（只截肢，不电针）、截肢电针组（截肢，同时处以电针），电针穴位选择为健侧的足三里穴、环跳穴。处理结束后立即测定动物的术后痛阈，计算实验前后的痛阈改变率。24 h后在相应时间点处死动物，用免疫组化方法测定不同时间点各组大鼠脊髓腰段c-fos基因表达的情况，放射免疫法测定血浆IL-10、IL-6的浓度，ELISA法测定血浆褪黑激素水平，PR-PCR法半定量海马μ-阿片肽受体基因1（MOR1）的转录水平及视交叉上核内Per2基因的转录水平，并探讨以上指标的相关性。实验时同一时间点的4个组的手术、电针及动物处死、取样均同时进行。\n 结果：正常大鼠痛阈具有明显的昼夜节律，其峰值在16点左右，谷值在24点左右，即明期痛阈较高，暗期痛阈较低；创伤痛大鼠痛阈明显降低，尤其以早晨8点左右痛阈下降明显；不同时辰电针能提高相对应时间点创伤痛大鼠痛阈，且以早晨8点的镇痛效果最佳；电针对正常动物及创伤痛动物痛阈的昼夜节律均有影响。\n 空白对照组脊髓中c-fos基因表达量极低，且具有明显的昼夜节律；截肢后表达量明显上升，且呈现无节律的变化趋势；与截肢模型组比较，截肢后施加电针，以中午12点和晚上20点c-fos表达量减少最为明显。\n 正常大鼠血浆抗炎/促炎细胞因子之比(IL-10/IL-6) 具有明显的昼夜节律，针刺对正常动物的免疫系统功能有较小的影响，但对创伤痛所致的免疫抑制，则具有较强的调整作用，且具有昼夜差异，在不同的时间点，作用不同。与截肢模型组比较，截肢电针组在早晨8点对IL-10的提高较大，夜间20点IL-6水平降低较明显，电针对IL-10/IL-6比值的影响则以早晨8点和夜间20点最为显著。另外，电针可提高创伤痛大鼠的胸腺指数，但不同的时间点具有不同的效应，以中午12点和晚上20点提高率最大。\n 正常大鼠血MT浓度具有明显的昼夜节律；截肢后血浆MT浓度明显降低，节律出现双峰的变化趋势；截肢同时施加电针对血浆MT浓度较截肢模型组有所升高，昼夜节律与空白电针组相近。\n 正常大鼠MOR1受体表达量呈现双峰变化趋势；截肢组大鼠MOR1的mRNA的表达量明显降低，截肢同时施以电针，可增加MOR1的mRNA的表达量。\n 正常大鼠SCN内per2基因的转录水平具有明显的昼夜节律，电针对正常动物的per2基因转录水平的昼夜节律影响不大；截肢后，创伤痛大鼠的昼夜节律发生改变，SCN内per2基因整体转录水平有所升高，峰值转移；电针对创伤痛大鼠的SCN中Per2基因的转录水平，不同的时间点作用不同，能够使Per2基因的转录水平的昼夜节律逐渐接近正常动物的节律。在不同时间点不同的分组情况下，SCN内per2基因的转录水平及血浆MT水平与大鼠痛阈、IL-6等具有明显的偏相关性。\n 结论：痛阈具有明显的昼夜节律，电针可对抗创伤痛，并对创伤痛所致的免疫抑制具有调节作用，电针抗创伤痛的效应具有一定的昼夜节律变化，不同的时间点的针刺镇痛效果不同。电针抗创伤痛效应的昼夜节律，可能与针刺能够影响机体“SCN（Per基因）-松果体（MT）-阿片受体”轴的功能有关，提示生物钟基因表达的改变，通过调节松果体分泌MT的水平，从而引起其一系列下游基因（如MOR1）表达的节律改变，是针刺抗创伤痛效应出现明显的时辰差异的中枢机制之一。这一结论可为临床减少手术创伤所致的疼痛而选择合理的时机进行手术（择期手术）和进行针药复合麻醉，以及对种种原因导致的疼痛择时进行针刺镇痛（择时针刺）的治疗提供较好的实验依据。

关键词： 帕金森氏病   昼夜节律   视交叉上核   时钟基因   多巴胺能神经元   神经元损伤  

摘要： 目的:研究MPTP制备的PD小鼠组织中昼夜节律相关基因—时钟基因的表达变化及其发生机制,并探讨多巴胺能神经元损伤对机体节律相关基因及昼夜节律的影响.结论:MPTP作用使未定带-下丘脑多巴胺系统-A13多巴胺能神经元受损,多巴胺释放减少,可能通过多巴胺受体影响到SCN及下丘脑的功能,导致中枢和周围组织细胞内节律振荡器改变,时钟基因表达时相发生改变,使脑组织mPer1表达增加,心脏mPer1以及肝脏mPer1、mPer2表达时相提前,但表达幅度未变.提示多巴胺与昼夜节律密切相关,可能是导致PD非运动症状的原因.

关键词： 基因组   腾冲嗜热厌氧菌   SARS早期诊断   外周生物钟  

摘要： 该论文由三部分组成:一、利用\"全基因组霰弹法测序\"策略,测定了腾冲嗜热厌氧菌(MB4<\'T>)全基因组序列.在序列初步拼接后,获得了由189个DNA contigs(DNA序列连接群)组成的基因组框架图.二、SARS是一种新发现的急性传染病,其病原体为SARS-CoV.我们对照株SARS-CoV进行了基因组序列测定,与已有的SARS-CoV全基因组序列相比,共发现137个单核苷酸突变.三、该文同时探讨了血红素对小鼠外周生物钟基因表达节律的影响.

关键词： 电针   自发性活动   mPer1   mPer2   昼夜节律   相位反应曲线   定量RT-PCR  

摘要： 生物节律是生命的基本属性之一.近年来的基因研究方法,使我们迎来了理解哺乳类动物昼夜节律震荡子分子基础的新纪元.果蝇与哺乳类动物一系列基因的发现,为我们提供了一个昼夜节律机制的分子框架,这个分子框架就是转录-翻译负反馈自动调节环路,它是生物节律的核心要素,这个核心要素使我们对外界授时因子的性质、光性和非光性授时因子的相位反应曲线、昼夜节律基因及其调控原理、有了新的认识.本文在我们原有研究发现针灸能调节军人昼夜节律相位的基础上,采用Aschoff的导引方法及荧光定量RT-PCR技术,就在昼夜节律时相点CTO、CT3、CT6、CT9、CT12、CT15、CT18、CT21电针、光照对金黄地鼠自发性活动昼夜节律影响及其相位反应曲线特点做了进一步深入研究,并观察了引起金黄地鼠自发性活动昼夜节律超前的CT6时相点间脑中节律基因mPer1、mPer2表达水平.实验结果显示:(1)在LD(light-dark)条件下动物的自发性活动都表现出明显的近似昼夜节律(P<0.01).(2)在DD自由运转状态下,动物的自发性活动显示出明显的近似昼夜节律(P<0.01),节律的峰相位每天向前迁移6~8度.(3)电针能调整金黄地鼠的自发性活动节律的峰相位,但有明显的依时相性,表现为在CT6刺激,峰相位向前迁移(相对迁移值为21.58度),在CT18刺激,峰相位向后迁移(相对迁移值为28.27度),其他时相点刺激无相位迁移.(4)光照能调整金黄地鼠的自发性活动节律的峰相位,也有明显的依时相性,表现为在CT15光照,峰相位向后迁移(相对迁移值为35.29度),在CT21光照,峰相位向前迁移(相对迁移值为25.53度),其他时相点光照无相位迁移.(5)电针的相位反应曲线呈现非光性.(6)在CT6电针,间脑中mPer1、mPer2基因表达水平显著降低.本研究提示电针与光照都能依时相性调节昼夜节律,但两者的作用途径与原理可能不同,因此选择合理的电针时间是应用电针治疗节律混乱与节律障碍性疾病的重要条件.