关键词： 原发性干燥综合征   调节性B细胞(Breg)   CD69   CD80   B细胞激活因子受体(BAFF-R)  

摘要： [背景和目的] B细胞异常改变是干燥综合征(primary Sjogren syndrome, pSS)特征性表现之一。调节性B细胞(Regulatory B cell, Breg)是一组具有抑制免疫应答反应的新成员,在保持机体免疫功能平衡和耐受中具有重要作用。目前关于Breg的研究以动物模型为主,已知的Breg亚群有CD5+B-la细胞、CD19hiCDldhiCD5+B细胞、CD19+CD21hiCD23+CD24hi CD93+T2-MZP Breg细胞以及CD19hiCDldwCD5+B10细胞(IgM+CD21+CD23"CD24hi CD93-)[7]等,分泌IL-10是其发挥免疫调节功能的标志[8-11] Breg在人体中的研究不多；目前发现人外周血CD19+CD24hiCD38hiB细胞[12]具有免疫调节功能；CD19+CD5+Fox3+B细胞可能为潜在的Breg亚群。Breg在pSS发病机制中的作用及其与pSS临床表现方面的关系仍不明确。本研究中,我们尝试评价外周血Breg匕例、CD69、 CD80、 BAFF-R等B细胞活化标记的外周表达在pSS、系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus, SLE)患者及健康对照(Healthy Control, HC)间的差异及其与临床特征的相关性,并对Breg亚群的功能进行探索,尝试解释Breg在pSS发病机制中的作用。 [方法] 明确pSS诊断患者34例、明确SLE诊断10例,健康对照19例。采集抗凝外周静脉血分离单个核细胞(PBMC)。 流式细胞术检测外周血PBMC中Breg (CD19+CD24hiCD38hi)在淋巴细胞及CD19+B细胞中的比例；检测各组CD69、 CD80、 BAFF-R在CD19+B细胞Breg表达百分比及强度。 收集患者临床相关资料,按照2009年EULAR干燥综合征疾病活动评分(ESSDAI)评价pSS患者疾病活动度。根据治疗(初治组、免疫抑制治疗组和其他治疗组)、有无口眼干症状、ESSDAI评分及血清IgG水平对pSS患者进行分组。 流式细胞分选去除Breg细胞,CD3单抗刺激培养3天后检测去除Breg组和未去除Breg组CD4+IFN-Y+Thl细胞及CD19+IL-10+B细胞表达水平。Elisa法检测细胞培养上清中IL-10、IFN-γ浓度。 [结果] 1、pSS患者外周血Breg细胞占CD19+B细胞百分比(2.63+2.65%)高于SLE患者(0.93±1.18%,p=0.024)和HC组(1.32±±1.32%,p=0.025)；各治疗组间无显著性变化。初治pSS患者组Breg占CD19+B细胞百分比(3.544±3.01%)高于SLE组(p=0.005)和HC组(p=0.001)。初治pSS患者组Breg占淋巴细胞百分比(0.17±±0.21%)高于免疫抑制治疗组(0.10±±0.15%,p=0.026)和其他治疗组(0.05+0.04%,p=0.032)、SLE组(p=0.000)及HC组(p=0.004)。 2、有口干症状患者Breg细胞占淋巴细胞百分比(0.08±0.06%)低于无口干患者(0.25±±0.28%,p=0.029)；占CD19+B细胞百分比前组(1.88±±2.06%)亦显著低于后组(4.62±±3.11%,p=0.004)。有眼干症状患者Breg细胞占淋巴细胞百分比(0.09±±0.11%)低于无眼干症状患者(0.19±0.25%,p=0.014)。轻度活动(ESSDAI≤6)pSS患者和中度以上活动组(ESSDAI>6)间Breg无显著性差异。血清IgG>20g/L组Breg占CD19+B细胞百分比(3.82±3.34%)明显高于IgG≤20g/L组(1.63±1.31%,p=0.045)。 3、pSS患者Breg细胞表面BAFF-R表达百分比(87.42±±28.84%)和强度(10065.20±6526.50)均高于SLE组(43.73±±48.19%,p=0.009,2295.35±2580.39,p=0.000),低于HC组(99.38±1.52%,p=0.001,34017.21±56136.49,p=0.010)。 4、各治疗分组间Breg细胞表面CD69表达百分比(p=0.008)、强度(p=0.023)、CD80表达强度(p=0.025)、BAFF-R表达强度(p=0.003)均存在显著性差异。免疫抑制治疗Breg细胞表达CD69百分比(p=0.021)、CD80强度(p=0.020)及BAFF-R强度(p=0.038)较初治组均降低。 5、初治pSS患者Breg占淋巴细胞百

关键词： 英国诺丁汉大学   寄生虫感染   人体免疫系统   B细胞   调节性   影子   验证   多发性硬化  

摘要： 据2010年6月7日《参考消息》援引美国趣味科学网站6月2日报道，人罹患多发性硬化症（MS）后，免疫系统会像对待“外来”细胞一样攻击人体自身的细胞。最近的几项实验显示，感染寄生虫能缓解MS病人的炎症反应并降低复发率。据此，英国诺丁汉大学的克里斯·康斯坦丁内斯库及其同事计划让32名MS病人感染钩虫。

关键词： 调节性T细胞   供体特异性输血   可诱导共刺激分子   心脏移植耐受  

摘要： 目的 观察阻断ICOS/B7h信号的供体特异性输血（DST）对异基因小鼠心脏移植术后体内CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）的影响.方法 按陈氏方法建立小鼠颈部异位心脏移植模型,实验分3组,异基因组及同基因组：供心分别来源于BALB/C和C57BL/6小鼠,受体均为C57BL/6小鼠,未予治疗.治疗组：移植当天给予受体鼠（C57BL/6）尾静脉注射5×106 ICOS-Fc靶定的供体（BALB/C）脾B淋巴细胞,d0～6连续给予受体鼠尾静脉注射ICOS-Fc 200 μg/d.术后统计各组移植物的存活时间,通过流式细胞术检测受体鼠外周血中CD4＋CD25＋Treg的亚群比例,利用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测移植物中FOXP3的mRNA表达,在混合淋巴细胞反应中检测CD4＋CD25＋Treg对CD4＋CD25-效应T细胞（Teff）的增殖抑制效率.结果 与异基因组比较,治疗组心脏移植物存活时间明显延长[（84.38±29.14）d比（7.00±0.76）d,P＜0.01].各组中,治疗组受体外周血中CD4＋CD25＋Treg亚群比例显著上调[（15.60±5.69）%,P＜0.01].与其他两组比较,治疗组心脏移植物中FOXP3 mRNA表达显著上调.以正常鼠为对照,耐受鼠脾脏中获取的CD4＋CD25＋Treg能够更高效地抑制CD4＋CD25-Teff在混合淋巴细胞培养中的增殖效应.结论 通过阻断ICOS/B7h信号的DST可以诱导异基因小鼠心脏移植耐受,CD4＋CD25＋Treg在耐受的形成与维持中均起着重要作用.

关键词： HLA-B27   调节性T细胞   流式细胞术  

摘要： 目的了解CD4+CD25+调节性T细胞在HLA-B27阳性患者外周血中的表达水平及其对患者细胞免疫和体液免疫的影响。方法用流式细胞仪采用直接免疫荧光法测定37例HLA-B27阳性患者和20例健康对照者外周血淋巴细胞表面CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD19+及CD4+CD25+细胞的表达情况。用颗粒增强散射免疫比浊法测定血清中免疫球蛋白IgG、IgA和IgM的水平。结果 (1)HLA-B27阳性患者CD3+、CD3+CD4+、CD19+细胞较正常对照组显著增高(P<0.05),CD3+CD8+细胞较正常对照组显著降低(P<0.05);(2)HLA-B27阳性患者CD4+CD25+调节性T细胞较对照组显著降低(P<0.01);(3)HLA-B27阳性患者血清中2种免疫球蛋白IgG、IgA的水平均较对照组显著增高(P<0.05)。结论 CD4+CD25+调节性T细胞数量明显减少,对CD4+和CD8+T细胞活化和增殖的抑制能力下降,是HLA-B27阳性患者体内细胞免疫和体液免疫亢进的原因之一。

关键词： B淋巴细胞   调节性   生物学   皮肤疾病  

摘要： 调节性B细胞是一类具有免疫调节功能的B细胞亚群，目前已经在小鼠体内得到证实。该细胞亚群的起源与表型目前分歧较大。调节性B细胞主要通过细胞间直接接触和分泌IL-10、转化生长因子-β等方式下调免疫反应。现已发现这种B细胞亚群与SLE、接触性超敏反应等皮肤病相关，还参与多种疾病或生物学过程。对调节性B细胞的发现、起源、功能及作用机制、与疾病的关系、研究前景和挑战进行概述。

关键词： B细胞   调节性   免疫耐受   自身抗体   免疫功能   抗原递呈   细胞因子   细胞亚群  

摘要： B细胞的典型特征是可产生包括自身抗体的各种抗体. 然而,B细胞还有其他的免疫功能,例如产生各种细胞因子和次级抗原递呈[1]. 与T细胞一样,B细胞中也有致病性和调节性的细胞亚群. 研究发现抗CD45RB抗体可诱导稳定的免疫耐受模型,在诱导免疫耐受时需有宿主B淋巴细胞的参与[2]. 最近研究表明,体内确实存在能产生白细胞介素10(IL-10)或转化生长因子β1(TGF-β1)等细胞因子的调节性B细胞(regulatory B cells,Bregs). Bregs通过产生抑制性细胞因子或分泌抑制性抗体影响其他免疫细胞,在免疫耐受中发挥作用[1]. 本文将对Bregs在免疫耐受中的作用机制做一综述

关键词： 调节性B细胞   自身免疫病   IL-10  

摘要： 以往认为，B淋巴细胞在自身免疫病中作为致病性淋巴细胞发挥作用。近年却发现，在自身免疫病小鼠模型中，采用B细胞清除疗法会加重疾病进程，提示B细胞具有免疫调节功能。调节性B细胞（Breg）是新近发现的一群新的B细胞亚群，它存在于B细胞多个亚型中。Breg通过刺激其表面分子，诱导释放调节性细胞因子如IL-10发挥调节作用。在不同自身免疫性疾病中，各种免疫细胞都可以成为Breg作用的靶细胞，表明Breg在自身免疫病复杂网络中的强大调节作用。

关键词： 地塞米松   B细胞活化因子   调节性T细胞   紫癜,血小板减少性  

摘要： 目的研究大剂量地塞米松治疗前后特发性血小板减少性紫瘕（ITP）患者B细胞活化因子（BAFF）和调节性T（Treg）细胞的变化，以及BAFF对Treg细胞的作用。方法用ELISA方法检测21例慢性活动性ITP患者治疗前后血浆BAFF水平；用流式细胞术检测患者治疗前后及外周血单个核细胞培养体系中Treg细胞的比例。结果治疗前ITP患者的BAFF水平[（599．70±199．40）pg／m1]较正常对照[（454．50±132．50）pg／m1]明显升高（P〈0．05），Treg细胞比例明显降低[（1．56±6．73）％]（P〈0．01）；大剂量地塞米松治疗后，ITP患者的BAFF水平[（296．9±119．7）pg／ml]较治疗前明显下降（P〈0．01），且低于正常对照组（P〈0．01）；Treg细胞比例明显升高[（5．94±2．22）％]（P〈0．01），且高于正常对照[（4．08±1．08）％]（P〈0．01）。ITP患者BAFF水平和Treg比例与血小板计数无相关性（P〉0．05）。体外实验显示，rhBAFF0组和rhBAFF20组Treg数量无明显改变（P〉0．05）。结论慢性ITP患者的BAFF水平增高，Treg细胞数量减少。大剂量地塞米松可降低患者的BAFF水平，增加Treg细胞的数量。BAFF对Treg细胞无明显影响。

关键词： 烧伤   T淋巴细胞,调节性   白细胞介素2   免疫   高迁移率族蛋白B1   细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4  

摘要： 目的 探讨严重烫伤大鼠延迟复苏后脾脏高迁移率族蛋白B1（HMGB1）表达对调节性T淋巴细胞（Treg）表型及其介导T淋巴细胞免疫功能的影响.方法 将104只Wistar大鼠按随机对照表法分为正常对照组8只、假烫组32只、烫伤组32只、丙酮酸乙酯（EP）治疗组32只.后2组大鼠造成30%TBSAⅢ度烫伤,伤后6 h腹腔注射林格液或EP液延迟抗休克,伤后12 h起每隔12 h给予4 mL林格液或EP液至伤后48 h;假烫组除于37℃模拟烫伤外其余处理同烫伤组.于伤后1、3、5、7 d处死各致伤组大鼠,另处死正常对照组大鼠,免疫磁珠法分离大鼠脾脏CD4~＋CD25~＋Treg,ELISA法检测脾脏HMGBI含量及T淋巴细胞上清液中IL-2水平,采用流式细胞仪检测Treg表面分子细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）表达,同时检测T淋巴细胞增殖活性（数据以吸光度值表示）.对数据进行多组间方差分析和2组独立样本间的t检验.结果 （1）烫伤组大鼠脾脏HMGBI含量伤后1～7 d显著高于假烫组,其中第1天达峰值[（46.7±8.3）ng/mg蛋白];EP治疗组大鼠脾脏HMGBI含量伤后1～7 d明显低于烫伤组.（2）与假烫组比较,烫伤组大鼠伤后1～5 d CTLA-4表达明显增强（t值分别为10.459、12.051、4.029,P〈0.05或P〈0.01）;EP治疗组伤后1～7 d CTLA-4表达较烫伤组显著降低（t值分别为2.796、9.913、9.581、10.022,P〈0.05或P〈0.01）.（3）与假烫组比较,烫伤组大鼠伤后1～7 d脾脏T淋巴细胞增殖活性明显受抑,其中伤后1 d达低谷（0.167±0.059）;IL-2水平伤后1～7 d显著下降,其中伤后5 d达低谷（44±24）pg/mL.与烫伤组比较,EP治疗组伤后各时相点脾脏T淋巴细胞增殖受抑状态明显缓解,且IL-2水平明显上升.结论 严重烫伤后HMGB1产生可诱导Treg向成熟发展,从而介导T淋巴细胞增殖反应低下,免疫功能抑制.EP通过抑制HMGB1的合成与释放,改善烫伤延迟复苏大鼠的细胞免疫功能紊乱.

关键词： 调节性T细胞   高迁移率族蛋白B1   Toll样受体4   白细胞介素-10  

摘要： 目的 探讨腹腔注射高迁移率族蛋白B1（HMGB1）后不同基因型小鼠天然调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）免疫功能的改变及其受体作用机制.方法 分别给C3H/HeN和C3H/HeJ[分别为Toll样受体4（TLR4）野生型（TLR4^＋/＋）和天然突变型（TLR4^-/-]小鼠腹腔注射不同剂量HMGB1（0、10、20μg/只）,饲养48 h后采用免疫磁珠法分离小鼠脾脏CD4^＋CD25^＋Treg.体外培养12 h后采用流式细胞仪检测CD4^＋CD25^＋Treg表达细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4（CTLA-4）表达强度,并应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测CD4^＋CD25^＋Treg生成白细胞介素（IL）-10量.结果 与对照组比较,20 μg HMGB1攻击后C3H/HeN小鼠CD4^＋CD25^＋Treg表达CTLA-4水平显著下降（78.70±11.42与60.76±7.64,P〈0.01）,同时细胞牛成IL-10量也明显降低[（96.89±6.25）ng/L与（47.11±4.25）ng/L,P〈0.01];但不同剂量HMGB1攻击可引起C3H/HeJ小鼠CD4^＋CD25^＋Treg表达CTLA-4明显上调和生成IL-10量不同程度地增加（P〈0.01）.结论 HMGB1攻击可显著影响CD4^＋CD25^＋Treg介导的免疫状态,TLR4在HMGB1诱导CD4^＋CD25^＋Treg免疫活性过程中发挥了重要负向调控作用.