关键词： 自身免疫性溶血性贫血   调节性B细胞   细胞因子  

摘要： 目的研究自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者外周血中CD19+Tim-1+调节性B细胞亚群数量和细胞因子的变化,探讨其在AIHA发病机制中的作用。方法选择30例AIHA患者,分离外周血单核细胞(PBMC),采用流式细胞术(FCM)检测调节性B细胞的数量,用ELISA测定培养上清中IL-10及TGF-β1水平,与同期选择的健康对照组比较。结果 AIHA患者PBMC中CD19+Tim-1+B细胞数量低于健康对照组([1.15±0.62)%vs(2.86.±0.67)%,P<0.05],培养液上清中细胞因子IL-10的水平也低于健康对照组,TGF-β1的变化无统计学意义。结论CD19+Tim-1+调节性B细胞与相关的细胞因子的变化可能参与AIHA患者的免疫学发病机制。

关键词： 调节性B细胞   炎症反应   白细胞介素-10  

摘要： B淋巴细胞能够分化成熟为分泌免疫球蛋白的浆细胞，在体液免疫中发挥重要作用，同时亦可作为抗原提呈细胞递呈抗原参与细胞免疫。近十几年来，研究人员在动物实验中发现了一种新的B细胞亚群——调节性B细胞（Breg），并发现其与系统性红斑狼疮、炎症性肠病等多种疾病有关，还可参与免疫耐受的形成及移植物抗宿主病的调控等，而作用机制主要是通过分泌白细胞介素-10、转化生长因子-β等细胞因子或通过细胞间相互接触等方式发挥作用，但对于其分化、起源及表型特点尚无明确定论。本文主要对Breg的发现与发展、分化、作用机制及与疾病的关系进行概述。

关键词： 树突细胞   皮肤移植   调节性B细胞  

摘要： 目的探讨吞噬了供者凋亡淋巴细胞的未成熟树突细胞(imDC)对皮肤移植受体小鼠外周血IL-10+CD19+调节性B细胞(Breg)比例及移植物存活时间的影响。方法以C57BL/6小鼠作为受者,BALB/c小鼠为供者,建立小鼠皮肤移植模型。分离C57BL/6小鼠骨髓细胞,经小鼠重组白细胞介素4(IL-4)和粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)共同诱导,制备并培养imDC。分离BALB/c小鼠脾淋巴细胞(SP),经光化学照射方法(PUVA)处理,得到供者小鼠脾淋巴细胞(PUVA-SP)。在体外将PUVA-SP与C57BL/6小鼠骨髓来源的imDC共同培养,得到PUVA-SP DCs。根据受体小鼠术前接受的静脉输注成分将其随机分为4组(n=14):PUVA-SP DC组、imDC组、成熟树突细胞(maDC)组和PBS对照组。于手术前7d分别从尾静脉注入1×l06个(0.2ml)PUVA-SP DC、imDC、maDC或0.2ml PBS。于移植术后观察受体小鼠的移植物存活时间、外周血IL-10+CD19+Breg比例及IL-10的表达情况。结果移植术后,受体小鼠外周血IL-10+CD19+Breg细胞占CD19+B细胞的比例在PUVA-SP DC组为7.48%,明显高于imDC组(4.12%)、maDC组(3.01%)和PBS对照组(2.37%)。PUVA-SP DC组小鼠血清中IL-10表达水平为58.2±0.9ng/ml,与maDC组(20.1±1.6ng/ml)、imDC组(26.2±1.3ng/ml)及PBS对照组(19.0±0.6ng/ml)比较显著升高(P<0.01)。PUVA-SP DC组移植物存活时间为62.3±2.6d,显著长于maDC组(20.7±1.9d)、imDC组(12.1±1.0d)和PBS对照组(11.0±1.3d,P<0.01)。结论移植术前输注PUVA-SP DCs可显著延长移植物存活时间,增加受者体内IL-10的表达水平,诱导产生较多分泌IL-10的调节性B细胞。

关键词： 哮喘   维生素A   卡介苗   细胞免疫   发病机制  

摘要： 目的探讨口服维生素A(VitA)联合新生期接种卡介苗(BCG)对实验性哮喘大鼠外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)及肺组织匀浆核因子(NF-κB)、白介素(IL)-4的影响,观察哮喘发作的情况,比较各组Treg数量变化及肺组织匀浆NF-κB、IL-4水平变化,从而为口服VitA联合新生期接种BCG在支气管哮喘中的防治提供理论根据。方法将57只1周龄SD大鼠随机分为4组:A组(n=15):口服VitA+腹腔注射BCG;B组(n=15):仅腹腔注射BCG;C组(n=15):哮喘对照组;D组(n=12):正常对照组。A、B、C 3组均致敏激发制作成哮喘模型,于激发后7、28、35 d取血50μl,检测Treg,取血后立即处死大鼠,切取肺组织块匀浆后以ELISA法检测IL-4及NF-κB水平。结果①哮喘大鼠体内的Treg较正常大鼠明显下降,同时伴有肺组织匀浆IL-4及NF-κB水平的持续性升高,到激发后35 d各值不能恢复正常;②肺组织匀浆IL-4水平与NF-κB水平呈显著相关性。结论①哮喘大鼠体内存在T细胞免疫功能紊乱;NF-κB可能是通过增强Th2类细胞反应参与哮喘的发病;②新生期接种BCG有利于纠正Th1/Th2失衡,起到调节免疫紊乱的作用;③Vit A可增强BCG调节免疫,具有协同作用。

关键词： 晶状体上皮细胞   调节性容积回缩   低渗刺激   细胞离子通道  

摘要： 背景调节性容积回缩（RVD）现象在生物界各种细胞中普遍存在，它不仅与细胞容积的稳定性相关，还参与多种细胞的生理功能和病理过程，但迄今为止，关于晶状体上皮细胞（LECs）的RVD机制研究仍较少。目的观察低渗刺激下人LECs系HLE B-3细胞株RVD的过程，并探讨其可能的作用机制及影响因素。方法应用氢离子缓冲剂（HEPES）将林格液分别配成质量分数45％、35％、25％和15％的低渗液（实际渗透压分别为165、195、225和255mOsm／kg），用NaOH将pH值调至7．4或6．8。HLE B-3在含质量分数10％胎牛血清（FBS）的DMEM／F12培养基中进行体外培养，待细胞贴壁后稳定生长时，将HLEB一3细胞置于特制的培养板内，分别用不同质量分数的低渗林格液灌流培养，观察其对细胞RVD的影响。以45％低渗林格液刺激细胞作为对照组，通过Cl^-、K^＋通道阻断剂干预，分别用无HCO3^＋、无Ca^2＋、无Cl^-或高K^＋林格液灌流改变细胞外液离子成分或酸化溶液pH，在Image-Pro Plus6．0图像处理软件控制下实现时滞拍摄固定视野内的活细胞图像，分析细胞RVD的动态变化。结果在低渗刺激下细胞容积膨胀，随后即出现了RVD过程。45％低渗林格液刺激细胞产生RVD为（59．1±7．8）％，随着林格液渗透压的逐渐降低，细胞容积逐渐膨胀，细胞的RVD能力逐渐增强，细胞最大膨胀容积与RVD存在s形正相关（r=0．990，P〈0．05），当细胞最大膨胀容积在115％～135％时，RVD对其变化敏感。10mmol／L K^＋通道阻断剂四乙基氯化铵（TEA）、5mmol／LBaCl2、100μmol／L5-硝基-2（3-苯丙胺），苯甲酸（NPPB）和相同浓度的氯Cl^-通道阻断剂二异硫氰基芪-2，2^＋-二磺酸（DIDS）可分别使RVD减少（16．5±1．6）％、（14．7±2．28）％（P〈0．01）。当细胞外液为高K^＋及无Cl-的环境时，RVD分别减少（5．8±1．6）％和（2．7±0．8）％，差异有统计学意义（P〈0．01），而在无Ca^2＋条件下，RVD几乎消失。细胞外液为pH6．8时，仅能暂时延缓细胞的RVD过程，而非明显的抑制，尤其是在容积回缩的前10min内，pH6．8的45％低渗林格液刺激时细胞的RVD速率为（0．86±0．24）％／min，明显低于pH7．4的45％低渗林格液刺激时的RVD速率（3．24±0．84）％／min，两组间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论低渗刺激下人LECs可产生RVD，细胞内一定量的ca“存在是RVD激活的前提，而K^＋和Cl^-是HLE B-3 RVD过程的关键性离子，Cl^-、K^＋离子通道则是与细胞容积变化相关性Cl^-、K^＋外流的一个重要途径，同时低渗液的酸化也可以延缓RvD的过程。

关键词： 调节性B细胞   白细胞介素10   免疫调节   血液系统疾病  

摘要： 与传统B细胞不同，调节性B细胞（Bregs）亚群具有抑制免疫反应的功能，通过分泌细胞因子如白细胞介素10（IL-10）或转化生长因子p1（TGF-β1），扩增调节性T细胞（Tregs）等方式发挥重要的免疫调节功能。虽然目前对Bregs的细胞表面分子标记尚未达成共识，也没有在Bregs中鉴定出标志性的转录因子，但在多种人类或动物疾病模型中已经证实Bregs的存在及其在维持机体免疫平衡中不可或缺的作用。在诸如免疫性血小板减少症、淋巴瘤、异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）后移植物抗宿主病（GVHD）等血液系统疾病中，Bregs的作用也已经得到重视，并进一步引发对临床运用去B细胞策略治疗相关疾病的再思考。

关键词： 调节性B细胞   免疫分子   细胞因子   自身免疫病  

摘要： 调节性B细胞在维持人体免疫平衡中的作用愈来愈受到重视,本文主要总结了部分自身免疫病中调节性B细胞的表型及相关功能分子、细胞因子的研究现状,阐述其在不同自身免疫疾病中发挥调节功能的复杂性等。

关键词： 特发性血小板减少性紫癜   调节性B细胞   白细胞介素-10   转化生长因子  

摘要： 目的研究特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血中调节性B细胞(regulatory B cells,Breg)亚群和相关细胞因子的变化及其相关性,探讨Breg在ITP发病机制中的作用。方法选择30例ITP患者,分离外周血单个核细胞(PBMC),用流式细胞术(FCM)检测CD19+B、CD5+CD19+B、CD1d(hi)CD5+CD19+B细胞亚群的比例变化;用ELISA法测定PBMC培养液上清中白细胞介素-10(IL-10)及转化生长因子-β1(TGF-β1)水平,与同期选择的健康人对照组比较。结果与对照组相比,ITP患者外周血中CD19+B、CD5+CD19+B细胞亚群的比例均升高,而CD1d(hi)CD5+CD19+Breg的比例降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。ITP患者PBMC培养液上清IL-10、TGF-β1的水平低于健康人对照组(P<0.05)。患者Breg的比例与IL-10表达水平呈正相关(r=0.717,P<0.05),而与TGF-β1水平无相关性(r=0.073,P>0.05)。结论 CD1d(hi)CD5+CD19+Breg及相关细胞因子IL-10的下调可能参与ITP的免疫调节紊乱机制。

关键词： 蠕虫   血吸虫   免疫调节   调节性B细胞   IL-10   综述  

摘要： 蠕虫感染过程中免疫系统的各种免疫细胞和免疫分子之间可以通过相互作用、相互制约使机体对蠕虫抗原产生最适应的应答,从而发挥免疫调节作用。研究发现,在蠕虫诱导的免疫调节过程中,IL-10是核心细胞因子,这些IL-10可能由调节性T细胞和调节性B细胞分泌。其中调节性T细胞在蠕虫感染中的研究较多,但有实验表明调节性T细胞的减少有时不会影响宿主的免疫反应。近年来越来越多的研究表明调节性B细胞在自身免疫病、慢性炎症、肿瘤及寄生虫感染等疾病中发挥着重要的作用。本中主要综述了蠕虫感染过程中宿主的免疫调控以及调节性B细胞所发挥的免疫调节功能。

关键词： Rankl单克隆抗体   多发性骨髓瘤   调节性T细胞  

摘要： 目的观察核因子一KB受体活化因子配体（Rankl）单克隆抗体对骨髓瘤小鼠体内调节性T细胞（Treg）分化的影响。方法用Rankl单克隆抗体通过尾静脉注射干预人骨髓瘤小鼠皮下模型后，检测肿瘤局部Treg浸润及Rankl的表达，小鼠模型分空白对照组A、高剂量组B、低剂量组C。结果抗体干预后，3组小鼠腹部皮下包块直径：A组（0．970±0．216）cm，B组（0．560±0．164）cm，C组（0．4104-0．152）CiTI（P〈0．05）；流式细胞分析小鼠外周血Treg比率：A组（8．19±1．27）％，B组（6．32-t-O．74）％，C组（3．84．4-0．43）％（P〈0．05）；逆转录一聚合酶链反应（1it—PCR）检测肿块局部RanklmRNA表达（ACt值）：A组0．565±0．029，B组3．390-4-0．333，C组1．041-4-0．083（P〈0．01）。结论骨髓瘤细胞可能通过表达Rankl促进Treg的分化，抑制机体正常免疫，利用Rankl单克隆抗体阻断这一信号通路可以减少Treg的分化。