关键词： 脓毒症   高迁移率族蛋白质类   免疫耐受   调节性T细胞  

摘要： 目的观察不同剂量黄芪甲苷（astragaloside IV，ASTIV）对高迁移率族蛋白B1（high mobility groupbox-1protein，HMGBl）介导小鼠调节性T细胞（regulatory T cells，Treg）免疫功能的拮抗效应并探讨其药物作用机制。方法采用清洁级BALB／c小鼠，处死后分离脾脏CD4^＋CD25^＋Treg，在72孔板上按随机数字表法将Treg分为4组进行培养（每组18孔）：（1）正常对照组：单纯Treg；（2）HMGBl组：HMGBl（1μg／m1）＋Treg；（3）HMGBl＋AST IV治疗I组：HMGBl（1μg／m1）＋ASTIV（50μg／m1）＋Treg；（4）HMGBl＋ASTIV治疗Ⅱ组：HMGBl（1μg／m1）＋ASTIV（100μg／m1）＋Treg。以上4组再各分为3个亚组（每组6孔），分别于HMGBl刺激后24，48，72h收集Treg。采用流式细胞仪及荧光定量PCR法检测Treg胞内叉头翼状螺旋转录因子p3（Foxp3）蛋白和基因表达水平，ELISA法检测Treg细胞孵育上清液中IL-10及TGF-B分泌水平。结果HMGBl刺激Treg后，Foxp3蛋白及基因表达水平在24-72h均较对照组有所下降（P〈0．01），其中以作用72h下调尤为明显，细胞培养上清中IL-10及TGF-B水平呈现与Foxp3相同的变化趋势；而ASTIV治疗组Foxp3蛋白及基因表达水平在给药后24～72h均较HMGBl组明显升高（P〈0．05），且HMGBl＋ASTIV治疗Ⅱ组Foxp3蛋白及基因表达水平在给药后24-72h明显高于HMGBl＋ASTIV治疗I组（P〈0．05），细胞培养上清中IL-10及TGF-B水平亦呈现与Foxp3相同的变化趋势。结论不同剂量ASTIV在体外均可拮抗HMGBl对小鼠Treg免疫功能的影响，呈剂量依赖性，提示其对HMGBl介导的促炎效应具有显著抑制作用。

关键词： 调节性B细胞   川崎病   共刺激分子   IL-10   调节性T细胞  

摘要： 目的：探讨调节性B细胞（ Breg）在川崎病（ KD）免疫发病机制中的作用。方法急性期KD患儿28例，正常同年龄对照组28例，KD患儿分别于静脉丙种球蛋白（ IVIG）治疗前后直接取血备检。采用流式细胞术分别检测外周血CD19＋CD24 hi CD38 hi Breg、CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞（ Treg）比例及Breg细胞表面共刺激分子CD80、CD86、PD-L1的表达；酶联免疫吸附实验检测培养上清中IL-10蛋白浓度；实时荧光定量PCR （real-time PCR）检测外周血B细胞中IL-10，CD4＋T细胞中Foxp3、CTLA-4和GITR mRNA的表达。结果（1）急性期KD患儿外周血CD19＋CD24hiCD38hi Breg细胞比例及B细胞IL-10表达均明显低于同年龄对照组（P＜0．05），经IVIG治疗后显著上升（P＜0．05）；经体外LPS刺激培养48 h后，急性期KD患儿B细胞培养上清中IL-10浓度仍明显低于同年龄正常对照组[（31．06±8．26） pg/ml vs （46．32±13．91） pg/ml， P＜0．05]；（2）急性期KD患儿CD19＋CD24hiCD38hi Breg细胞表面共刺激分子CD80、CD86、PD-L1表达明显下调（P＜0．05），经IVIG治疗后，CD80和CD86表达虽有所增加，但仍低于同年龄对照组（P＜0．05），PD-L1表达无明显改变（P＞0．05）；（3）急性期KD患儿外周血CD4＋CD25＋Treg细胞比例及相关分子Foxp3、CTLA-4和GITR基因转录水平明显低于正常对照组（P＜0．05），其中CD4＋CD25＋Treg细胞比例与CD19＋CD24hiCD38hi Breg细胞比例呈正相关关系（r＝0．62，P＜0．05），经IVIG治疗后显著上升（P＜0．05）。结论 Breg细胞数量及功能异常可能是导致急性期KD患儿免疫功能紊乱的重要原因之一。

关键词： 调节性B细胞   类风湿关节炎   IL-10   TGF-β  

摘要： 调节性B细胞(regulatory B cells,Bregs)是一类对自身免疫性炎症反应有负性调节作用的B细胞亚群。Bregs可通过产生白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、转化生长因子-β(transforming growth factor,TGF-β)等抑制性细胞因子以及细胞间的接触发挥免疫调节作用。进一步研究Bregs与其他调节性免疫细胞之间的相互作用及其在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)炎症免疫反应中的负性调节功能,有助于深入认识此亚群细胞的功能,阐明RA的发病机制,寻找新的RA治疗策略。

关键词： B淋巴细胞   调节性   变态反应性疾病   免疫调节  

摘要： 目前的研究发现B细胞和T细胞一样具有"调节性亚群",发挥重要的负向免疫调节功能,这种功能不仅体现在自身免疫性疾病中,也体现在接触性超敏反应、变应性气道炎性反应等多种变态反应性疾病中。对调节性B细胞在变态反应性疾病中的作用进行深入研究,将有助于进一步理解变态反应性疾病的发生机制,并为其治疗提供新思路。

关键词： 大鼠   间质干细胞   B淋巴细胞   免疫耐受  

摘要： 目的研究骨髓间充质干细胞（MSC）诱导调节性B淋巴细胞（Breg细胞）的免疫负调节作用。方法取DA大鼠MSC和Lewis大鼠B淋巴细胞共培养后，酶联免疫吸附试验（EUSA）检测MSC和B淋巴细胞混合培养组上清液中白细胞介素10（IL-10）的水平和分泌因子的变化；采用流式细胞技术分析B淋巴细胞增殖、凋亡、表型的变化和对抗原特异性T淋巴细胞增殖的影响，采用激光共聚焦显微镜观察Breg细胞对免疫复合物吞噬能力的变化。结果MS（2成功诱导产生高分泌IL-10的Breg细胞产生，表型为CDl9＋CDld＋CD5＋，MSC显著抑制B淋巴细胞的增殖，Breg细胞能抑制抗原特异性T淋巴细胞的增殖，并增加对免疫复合物的吞噬能力。结论MS（2诱导的Breg细胞具有明显的免疫负调节作用。

关键词： 约氏疟原虫   Tim-1   T细胞   调节性B细胞  

摘要： Tim-1分子表达在T细胞和调节性B细胞表面,具有促进Th2应答的作用。为探讨Tim-1分子在抗疟疾免疫应答中的作用,利用致死型约氏疟原虫(Plasmodium yoelii)感染鼠疟模型研究了Tim-1分子表达与小鼠感染结局和免疫应答模式的关系。结果显示,BALB/c小鼠对***易感,在感染后6～7 d全部死亡,感染后第3、5天脾内细胞因子IFN-γmRNA水平明显低于对***抵抗的DBA2小鼠,而脾IL-10 mRNA水平显著高于DBA2小鼠。BALB/c小鼠脾内Tim-1+T、B细胞百分比在感染后第3、5天显著升高,而DBA2小鼠感染前后脾内Tim-1+T、B细胞百分比没有显著变化。结果提示,Tim-1分子参与抗***免疫应答的调节,可能与易感鼠产生高水平Th2型细胞因子有关。

关键词： 调节性B细胞   自身免疫性疾病   感染性疾病   肿瘤  

摘要： B细胞主要通过递呈抗原和分泌各种抗体发挥免疫学作用。近来研究发现,在B细胞中存在一种新的细胞亚群调节性B细胞,它们可以通过分泌白细胞介素-10和转化生长因子-β1等抑制性细胞因子抑制获得性免疫介导的炎症反应发展和(或)加快炎症的恢复。相关研究表明这种细胞在感染性疾病、自身免疫性疾病、肿瘤中发挥重要作用。本文综述了调节性B细胞的发现与来源、免疫调节作用机制及其与相关疾病的研究进展。

关键词： 淋巴瘤,非霍奇金   CD163   Foxp3   巨噬细胞   T淋巴细胞   免疫组织化学   预后  

摘要： 目的分析弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者肿瘤组织中M2型巨噬细胞和调节性T细胞（Tregs）的含量及其对预后的影响。方法回顾性分析经病理确诊并有完整的临床和随访资料的92例DLBCL患者资料。以CD163作为M2型巨噬细胞标记，以Foxp3作为Tregs细胞标记，采用免疫组化sP法检测肿瘤组织和癌旁组织中CD163和Foxp3蛋白的表达，分析CD163和Foxp3蛋白的表达与DLBCL临床病理特征的关系及其对患者预后的影响。结果CD163蛋白在DLBCL组织中的高表达率为59．8％，明显高于癌旁组织（15．2％，P=0．02）。Foxp3蛋白在DLBCL组织中的高表达率为41．3％，明显高于癌旁组织（20．7％，P=0．04）。在DLBCL组织中，CD163蛋白与Foxp3蛋白的表达呈正相关（r=2．012，P〈0．05）。单因素分析的结果显示，CD163和Foxp3蛋白的表达均与DLBCL的结外受侵有关。Cox多因素分析的结果显示，CD163和Foxp3蛋白的表达水平均为影响DLBCL患者预后的独立因素（均P〈0．05）。结论联合检测DLBCL组织中CD163和Foxp3蛋白的表达，进而评价M2型巨噬细胞和Tregs的含量可更准确地预测DLBCL患者的预后。

关键词： 溃疡性结肠炎   黄芩苷   调节性B细胞   B1   B10   流式细胞术  

摘要： 目的:检测与分析溃疡性结肠炎(UC)患者外周血CD19+CD5+B细胞(B1)及CD19+CD5+CD1d+B细胞(B10)的比例,探讨黄芩苷对其体外表达的影响。方法:收集并分离活动期UC患者其外周血单核细胞(PBMC),以年龄性别相匹配的正常人PBMC为对照,经脂多糖(LPS)+黄芩苷体外刺激淋巴细胞,流式细胞术检测刺激前后外周血B1和B10细胞比例。结果:UC患者外周血中B1和B10细胞占CD19+B细胞的比例(4.83%±3.26%,0.97%±0.48%)低于正常对照组(16.16%±11.89%,5.99%±3.59%),P<0.05,LPS+黄芩苷体外刺激能上调UC患者B10淋巴细胞的比例(P=0.02),但对正常人该淋巴细胞亚群未见明显影响。结论:B1和B10细胞可能在UC病程中发挥免疫调节作用,黄芩苷可能对UC患者的B10细胞有上调作用。