关键词： 夏氏疟原虫   调节性B细胞   IL-10  

摘要： 调节性B细胞(regulatory B cells,Bregs)是近年来发现的通过分泌IL-10发挥免疫调节作用的B细胞,其在疟疾免疫应答中的作用尚不清楚。利用血液阶段夏氏疟原虫(Plasmodium chabaudi AS,P.c AS)感染的BALB/c小鼠,观察了感染过程中Bregs数量变化及其表面分子表达情况。结果显示,BALB/c小鼠感染P.c AS后红细胞感染率逐渐升高,于感染后第9天达到30%,多数小鼠死亡。脾组织细胞因子IL-10 mRNA水平在感染后显著升高,感染后第5天达到高峰,感染后第8天仍为正常小鼠的10倍左右。CD4+细胞中IL-10+细胞百分比和绝对数量在感染后第5天达到峰值,于感染后第8天回落至正常水平;而CD19+细胞中IL-10+细胞(Bregs)百分比在感染后持续上升,在感染后第8天达到CD19+细胞的5%左右;感染后第5天,脾中CD4+IL-10+细胞绝对数量高于CD19+IL-10+细胞,至感染后第8天,CD19+IL-10+细胞绝对数量显著高于CD4+IL-10+细胞(P﹤0.01),约90%Bregs为CD5-细胞。结果提示,P.c AS感染过程中Bregs显著活化,是感染1周后IL-10的主要产生细胞。

关键词： 免疫性血小板减少症   CD19+   CD24hi   CD38hi   B细胞   IL-10   TGF-β1  

摘要： 本研究旨在探讨调节B细胞(Breg)在免疫性血小板减少症(ITP)发病中的作用及其临床意义。采用流式细胞术检测35例已确诊的ITP患者及20例正常对照的CD19+CD24hiCD38hiB细胞的表达率,应用RT-PCR检测患者IL-10 mRNA、TGF-β1 mRNA细胞因子的表达水平。结果表明,初诊ITP患者外周血CD19+CD24hiCD38hiB细胞的表达率明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后血小板数升高的ITP患者的CD19+CD24hi CD38hiB细胞的表达率高于治疗前的ITP患者,且差异有统计学意义(P<0.05);初诊ITP患者IL-10 mRNA的表达明显低于正常对照组(P<0.05),治疗后的ITP患者IL-10 mRNA的表达明显升高,且与治疗前相比差异有统计学意义(P<0.05);初诊ITP患者TGF-β1 mRNA的表达高于正常对照组(P<0.05),ITP患者经治疗后TGF-β1mRNA的表达下降,且差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:Breg细胞通过体液免疫及对T淋巴细胞的调节在ITP发病机制中可能有重要作用。

关键词： 特应性皮炎   调节性B细胞   Th22细胞   Th17细胞   细胞因子  

摘要： 目的研究特应性皮炎(Atopic Dermatitis,AD)患儿外周血中调节性B细胞(Breg)的变化,分析其与Th22、Th17的关系,并探讨在AD患儿免疫学机制中的作用。方法选择28例AD患儿,分离外周血单核细胞(PBMC),采用流式细胞术(FCM)检测调节性B细胞与Th22、Th17的变化,用ELISA测定培养上清中IL-10、IL-22及IL-17水平,与同期选择的健康对照组比较。结果 AD患儿PBMC中CD19+IL-10+调节性B细胞数量低于健康对照组[(1.15±0.31)%vs(2.36.±0.82)%,P<0.05],Th22、Th17细胞的数量均高于健康对照组,培养液上清中细胞因子IL-10的水平也低于健康对照组,IL-22与IL-17水平高于对照组,差别有统计学意义(P<0.05)。结论 AD患儿外周血调节性B细胞与以及相关的细胞因子IL-10的的下调,以及Th22、Th17细胞上调,可能共同参与了AD的免疫学机制,它们免疫紊乱的调节可为AD的临床治疗提供了新思路。

关键词： 胃癌   协同刺激分子   叉状头   翅膀状螺旋转录因子  

摘要： 目的 探讨协同刺激分子B7-H1、B7-H4和转录因子叉状头/翅膀状螺旋转录因子（Foxp3）在胃癌中的表达及其临床意义.方法 应用免疫组织化学染色法检测B7-H1、B7-H4和Foxp3在100例胃癌组织及癌旁组织中的表达,分析B7-H1、B7-H4和Foxp3的表达与临床病理参数的关系.结果 B7-H1、B7-H4在胃癌组织中高表达,阳性表达率分别为65.0％和71.0％,其表达水平与浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关,差异有统计学意义（P＜0.05）.Foxp3＋调节性T细胞（Treg）在胃癌组织中高表达,并与淋巴结转移有关,差异有统计学意义（P＜0.05）.B7-H1、B7-H4的表达水平和Foxp3＋ Treg细胞数量呈正相关,相关系数分别为：r=0.437,P＜0.05;r=0.456,P＜0.05.B7-H1、B7-H4及Foxp3高表达患者的预后差于低表达者（P＜0.05）.结论 B7-H1、B7-H4和Foxp3＋ Treg细胞在胃癌组织中高表达,并与胃癌患者淋巴结转移和预后有关.

关键词： 急性B淋巴细胞白血病   调节性T细胞   Foxp3   ICOS   CD28  

摘要： 目的：探讨急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）患儿CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T细胞（ Treg）亚群改变及其在B-ALL免疫逃逸机制中的作用。方法急性期B-ALL患儿42例，正常同年龄对照组28例，分别于化疗前直接取血备检。采用流式细胞检测外周血CD4＋CD25 high Foxp3＋、CD4＋CD25high ICOS＋Foxp3＋、CD4＋CD25high ICOS-Foxp3＋细胞比例及IL-10、TGF-β、IL-35、TGF-βRII、ICOS、CD28蛋白表达水平；荧光定量PCR （ real-time PCR）检测CD4＋T细胞Smad3/4、TIEG1、Itch等mRNA表达；ELISA检测血浆中TGF-β浓度。结果（1）急性B-ALL患儿CD4＋CD25high Foxp3＋Treg细胞比例显著升高（P＜0．05），其中ICOS＋Foxp3＋和ICOS-Foxp3＋细胞比例均明显高于对照组（P＜0．05）， ICOS＋Foxp3＋/ICOS -Foxp3＋比值低于对照组（0．73±0．21 vs 1．87±0．59，P＜0．05）；（2）急性期B-ALL患儿ICOS＋Foxp3＋细胞转录因子Foxp3及抑制性细胞因子IL-10、IL-35和TGF-β表达水平显著上调（P＜0．05），ICOS-Foxp3＋细胞Foxp3表达略有增加，但差异无统计学意义（P＞0．05），其mTGF-β表达明显高于对照组（ P＜0．05）；（3）急性B-ALL患儿血浆TGF-β浓度明显高于对照组[（25.83±12．65） ng/ml vs （8．59±5．73） ng/ml， P＜0．05]，CD4＋T细胞表面TGF-βRII及下游信号分子Smad3/4、TIEG1、Itch表达水平显著上调（P＜0．05），CD4＋CD25highFoxp3＋Treg细胞表面ICOS、CD28表达亦明显增高（P＜0．05）。结论 TGF-β、ICOS、CD28信号过度活化可能是导致急性B-ALL患儿CD4＋CD25highFoxp3＋Treg细胞异常及其亚群比例失调的重要因素。

关键词： 白血病,B细胞,急性   调节性T淋巴细胞   白细胞介素2   白细胞介素6   转化生长因子-β  

摘要： 目的 探讨儿童急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）调节性T淋巴细胞变化及调节机制.方法 B-ALL患儿18例,健康同年龄对照组15例,分别于化疗前直接取血备检.采用荧光实时定量PCR（real-time PCR）检测CD4＋T淋巴细胞Foxp3、CTLA4、GITR、LAG3、IL-2Rβ/γ、IL-6Rα/β、Smad3/4、RUNXl/3等mRNA表达;流式微球阵列术检测血浆中IL-6、TGF-β的蛋白水平;流式细胞术检测外周血CD4＋ CD25high Foxp3＋调节性T淋巴细胞（Treg）的比例及CD4＋T淋巴细胞IL-2Rα、TGF-βRII、pSTAT3、pSTAT5蛋白表达水平.结果 1.B-ALL患儿外周血CD4＋ CD25high Foxp3＋ Treg细胞比例及转录因子Foxp3表达显著升高（P＜0.05）,其抑制功能相关分子CTLA4、GITR、LAG3表达水平亦明显高于对照组（P ＜0.05）;2.B-ALL患儿CD4＋T淋巴细胞IL-2Rα/β及下游信号分子pSTAT5表达升高（P＜0.05）,且pSTAT5表达与CD4＋ CD25high Foxp3＋细胞比例呈正相关（r=0.17,P＜0.05）,IL-2Rγ表达无统计学差异（P ＞0.05）;3.B-ALL患儿外周血TGF-β水平、CD4＋T淋巴细胞TGF-βRⅠ/Ⅱ及下游信号分子Smad3/4表达显著上调（P＜0.05）,但RUNX1/3表达水平低于对照组（P＜0.05）,其中Smad3、RUNX1表达与CD4＋ CD25high Foxp3＋细胞比例均呈正相关（r=0.87、0.60,P＜0.05）.B-ALL患儿外周血IL-6水平明显增高（P＜0.05）,但IL-6Rα/β表达无统计学差异（P＞0.05）,下游pSTAT3表达显著降低（P＜0.05）,且与CD4＋ CD25high Foxp3＋细胞比例呈负相关（r=-0.39,P＜0.05）.结论 儿童B-ALL调节性T淋巴细胞异常可能与IL-2/pSTAT5、TGF-β/Smad信号过度活化及pSTAT3表达不足有关.

关键词： 肝炎,乙型,慢性   B淋巴细胞,调节性   T淋巴细胞,调节性   白细胞介素10   抗原,CDl9  

摘要： 目的分析慢性乙型肝炎患者外周血中IL-10＋CDl9＋调节性B淋巴细胞（Breg）的表达及其免疫调节机制。方法病例对照研究。收集2011年6月-2012年10月常熟市第二人民医院住院患者，急性乙型肝炎（AHB）患者28例，慢性乙型肝炎（CHB）患者31例和健康对照25名。分离外周血单个核细胞（PBMC），经含CpG序列的寡脱氧核苷酸CpGODN2006和佛波醇酯（PMA）体外作用后，流式细胞术分析IL-10＋CD19＋Breg、CD4＋CD25high调节性T淋巴细胞（Treg）的表达及其相关性，ELISA分析培养上清IL-10水平。Mann—WhitneyU检验分析两组问差异，Spearman相关分析两组连续变量问的相关性。结果CHB组外周血Breg[1．28％（1．05％～2．20％）]高于AHB组[0．87％（0．55％一1．22％）]和HCs组[0．89％（0．51％-1．37％）]（P值分别为0．001和0．006），AHB和HCs组间差异无统计学意义（P=0．669）。CpGODN2006和PMA作用后CHB组Bregl14．30％（10．70％-16．70％）]较AHB组[10．30％（7．05％～13．30％）]和HCs组[10．40％（6．85％～12．60％）]显著升高（P值分别为0．003和0．001）；CHB组Treg[5．80％（4．20％～9．10％）]较AHB组[4．05％（2．53％～5．40％）]和14Cs组[4．50％（2．55％～5．50％）]也显著增高（P值分别为〈0．001和0．005）。AHB和HCs组间差异均无统计学意义（Breg：P=0．796；Treg：P=0．227）。Spenrman相关性分析发现CHB组Breg与Treg存在正相关关系（r=0．50，P=0．004），而AHB和HCs组无此相关性（r=-0．15，P=0．462；r=0．09，P=0．669）。CHB组IL-10表达高于AHB和HCs组（P〈0．001）。AHB和HCs组间差异无统计学意义（P=0．341），Spearman相关性分析表明CHB组IL-10与Breg存在正相关关系（r=0．409，P=0．005）。结论B淋巴细胞Breg和调节性T淋巴细胞在慢性乙型肝炎患者中表达升高，Breg可能通过IL—10的分泌在HBV慢性感染过程中发挥免疫调节作用。（中华检验医学杂志．2014。37：100—104）

关键词： 调节性B细胞   慢性乙型肝炎   调节性T细胞   IL—10  

摘要： 目的:分析慢性乙型肝炎患者外周血IL-10+CD19+调节性B细胞(regulatory B cells,Breg)与CD4+CD25high调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的比例及两者的相互作用。方法:收集急性乙肝(acute hepatitis B,AHB)患者28例,慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者31例和健康体检者(健康组)25例。分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),经CpG ODN 2006和佛波酯体外作用后,流式细胞术分析Breg、Treg的表达及其相关性,ELISA检测培养上清IL-10水平。通过免疫磁珠剔除CD4+CD25+T细胞后分析Breg与Treg表达频率间的相关性。结果:CpG ODN 2006和佛波酯作用后CHB组Breg和Treg百分率较AHB组和健康组均明显升高(Breg:P值分别为0.003和0.001;Treg:P值分别为<0.001,0.005),AHB组和健康组间两类细胞表达频率差异无统计学意义(Breg:P=0.796;Treg:P=0.227);Spearman相关性分析显示CHB组Breg与Treg表达百分比存在正相关关系(r=0.50,P=0.004),而AHB组和健康组无此相关性(r=-0.15,P=0.462;r=0.09,P=0.669)。CHB组IL-10表达高于AHB组和健康组(Z值分别为-6.596、-6.373,P均<0.001),AHB组和健康组间差异无统计学意义(Z=-0.952,P=0.341)。Spearman相关性分析表明CHB组IL-10与Breg存在正相关关系(r=3.303,P=0.005)。CHB组患者Breg和IL-10的表达在剔除CD4+CD25+T细胞前后间的差异无统计学意义。结论:Breg和Treg在CHB患者中表达频率升高,Breg可能通过IL-10的分泌参与慢性乙肝的免疫调节,且该作用不依赖于Treg。

关键词： 慢性移植物抗宿主病   异基因造血干细胞移植术   发病机制   调节性B细胞  

摘要： 目的：检测异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）术后慢性移植物抗宿主病（cGVHD）患者调节性B细胞（Bregs）、调节性T细胞（Tregs）及相关细胞因子的水平，初步探讨其在cGVHD发病机制中的作用。\n 方法：观察26例allo-HSCT患者是否伴有cGVHD的临床表现，并采集其外周血，采用流式细胞术检测外周血中Bregs（CD19+CD24hiCD38hiB细胞）及Tregs（CD4+CD25+Foxp3+T细胞）的比例；采用ELISA检测血浆中炎症抑制因子白介素-10（IL-10）及纤维生成相关因子-β1（TGF-β1）的水平。实验数据采用均数±标准差表示，进行计量资料t检验。\n 结果：（1）26例allo-HSCT患者中12例发生cGVHD，14例无cGVHD；（2）allo-HSCT术后发生cGVHD的患者与未发生cGVHD的患者比较，Bregs水平显著降低(P=0.028)；发生cGVHD的患者与未发生cGVHD的患者比较，Tregs水平显著降低(P=0.026)；Bregs与Tregs水平之间具有正相关性(r=0.55,P=0.042)；（3）发生cGVHD的患者与未发生cGVHD的患者比较，IL-10水平显著下降(P=0.044)；TGF-β1水平无显著差异(P=0.765)；（4）cGVHD组Bregs与IL-10水平之间具有正相关性(r=0.903,P=0)，non-cGVHD组Bregs与IL-10水平之间也具有正相关性(r=0.764,P=0.001)。\n 结论：allo-HSCT术后发生cGVHD的患者外周血不仅Tregs水平显著降低，Bregs水平亦显著降低，与Bregs免疫抑制活性相关的细胞因子IL-10水平显著下降。除Tregs外，Bregs可能亦参与cGVHD的发病机制，Bregs可能通过IL-10在抑制、减轻cGVHD过程中起到重要作用，为临床cGVHD的预防、早期诊断及治疗提供了初步的临床实验依据。

关键词： B淋巴细胞   调节性   白介素10   转化生长因子β1   多发性硬化  

摘要： 调节性B细胞(Bregs)主要来源于边缘区B细胞和B1细胞,炎症微环境是其分化/激活所必需的。Bregs通过产生白介素10(IL-10)、转化生长因子β1(TGF-β1)等抑制性细胞因子和通过与T细胞等其他免疫细胞的相互作用来介导免疫耐受。在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)/多发性硬化(MS)中,Bregs通过产生IL-10及抑制病理性Th1/Th17细胞的应答,增强Th2细胞的负性调节作用来控制疾病的启动和减轻疾病的严重性。