关键词： 调节性B细胞   乙型肝炎   肝硬化   原发性肝癌   流式细胞术  

摘要： 目的检测乙肝肝硬化、原发性肝癌患者外周血调节性B细胞(Breg)的比率,了解Breg与肝硬化、肝癌疾病之间的关系。方法以CD19+CD5+CD1d+作为Breg标记,流式细胞术检测24例乙肝肝硬化患者、28例肝癌患者和20名健康对照者外周血Breg占B淋巴细胞的比率。结果肝硬化患者组Breg比率(29.90±9.19)%和肝癌患者组Breg比率(31.34±8.99)%均显著高于健康对照组(22.50±6.52)%,分别为P=0.016和P=0.003;肝硬化患者组和肝癌患者组间Breg比率无统计学意义(P>0.05)。结论与对照组比较,Breg比率在肝硬化、肝癌患者外周血中显著升高,提示Breg细胞增加,与肝硬化、肝癌B细胞免疫调节紊乱相关。

关键词： 高迁移率族蛋白B1   调节性T细胞   黄芪甲苷   免疫抑制   脓毒症  

摘要： 目的在前期实验基础上,明确经高迁移率族蛋白B1(HMGB1)刺激的小鼠调节性T细胞(Treg)对CD4+CD25-T淋巴细胞免疫功能的影响,观察黄芪甲苷(AST IV)对HMGB1介导Treg免疫功能的拮抗作用。方法随机将CD4+CD25-T细胞分为对照组、Treg组、(HMGB1+Treg)组、(HMGB1+AST IV+Treg)组。4组均于培养后72 h检测脾脏CD4+CD25-T细胞增殖活性及CD4+CD25-T细胞孵育上清液中IL-4、IFN-γ表达水平。结果 Treg组CD4+CD25-T细胞增殖活性受到抑制(P<0.01),其上清中IFN-γ表达水平较对照组明显下降(P<0.01),IL-4表达水平较对照组显著增加(P<0.01);HMGBI+Treg组CD4+CD25-T细胞增殖活性受抑制程度明显逆转(P<0.01),与Treg组比较,(HMGB1+Treg)组IFN-γ表达水平明显升高(P<0.01),IL-4表达水平显著下降(P<0.01);与(HMGB1+Treg)组比较,(HMGB1+AST IV+Treg)组CD4+CD25-T细胞增殖受抑制程度显著加重(P<0.01),IFN-γ表达水平明显降低(P<0.01),IL-4水平显著上升(P<0.01)。结论 HMGB1在体外可明显降低小鼠Treg免疫抑制能力,而黄芪甲苷可拮抗此抑制作用,表明其对HMGB1介导的促炎效应具有治疗作用。

关键词： 调节性B细胞   1型糖尿病   Th1细胞   Th17细胞   调节性T细胞  

摘要： 目的：观察非肥胖性糖尿病（ non-obese diabetic， NOD）小鼠自然病程不同阶段CD19＋CD5＋CD1dhigh B细胞及Th1、Th17细胞数量的变化，探讨B10细胞与NOD小鼠自身免疫性糖尿病发生的关系。方法采用流式细胞术分别检测4周（A组，n＝10）、8周（B组，n＝10）及糖尿病（C组，n＝10）NOD小鼠及同龄C57BL／6小鼠（对照组，n＝20）脾脏、肠系膜淋巴结、外周淋巴结、胰腺淋巴结中CD19＋CD5＋CD1dhigh B、CD19＋IL-10＋B、CD4＋IFN-γ＋Th1、CD4＋IL-17＋Th17细胞及CD4＋CD25＋Foxp3＋T细胞的比例；分离NOD小鼠胰腺组织作病理切片以评估胰岛炎的严重程度。结果（1）胰腺组织HE切片：A组无胰岛炎，4周；B组发生胰岛炎，8周；C组发生明显胰岛炎且无完整胰岛，糖尿病。（2）不同病程阶段NOD小鼠B10细胞比较：B及C组B10细胞较A组增高，而C组B10细胞则较B组显著下降，差异有统计学意义（P＜0．01）；A组B10细胞各组织间无明显差异（P＞0．05），B组B10细胞以胰腺淋巴结最高，C组B10细胞以外周淋巴结最高且胰腺淋巴结B10细胞较B组显著下降，差异有统计学意义（P＜0．01）。（3）不同病程阶段NOD小鼠效应性T细胞比较：C组Th1及Th17细胞较A、B组显著增加，差异有统计学意义（P＜0．01）。（4）不同病程阶段CD4＋CD25＋Foxp3＋T细胞比较：C组Treg较A、B组无明显变化，且NOD小鼠Treg较同龄C57BL／6小鼠亦无明显变化（ P＞0．05）。结论随NOD小鼠年龄增长及胰岛炎进展，B10细胞存在数量变化及组织分布的差异；B10细胞数量减少可能参与NOD小鼠自身免疫性糖尿病的发生。

关键词： Graves病   调节性T细胞   辅助性T细胞   调节性B细胞   树突状细胞  

摘要： 目的观察Graves病(GD)患者外周血各种免疫调节细胞及其亚群的变化。方法采用流式细胞术(FCM)分别检测32例GD患者及30例健康人外周血调节性T细胞(Treg)、Th1细胞、Th2细胞、调节性B细胞(Breg)、树突状细胞(DC)等免疫细胞亚群,并进行比较。结果与正常对照组相比,GD患者Treg比例降低,Th1细胞、Th2细胞数量增加;Breg数量减少;DC数量下降,髓样DC(mDC)占DC比例下降,而浆细胞样DC(pDC)比例升高,成熟型DC比例升高。结论 GD患者外周血中存在免疫调节细胞的失衡,可能在GD的发生、发展中起一定作用。

关键词： 高迁移率族蛋白B1   调节性T细胞   黄芪甲苷   免疫抑制   脓毒症  

摘要： 目的：观察高迁移率族蛋白B1（HMGB1）刺激的小鼠调节性T细胞（CD4＋CD25＋Treg）对CD4＋CD25-T细胞免疫功能的影响及黄芪甲苷（AST Ⅳ）对HMGB1介导Treg免疫功能的拮抗作用。方法采用清洁级BALB/c小鼠，活杀后分离脾脏的CD4＋CD25＋Treg、CD4＋CD25-T细胞，将CD4＋CD25-T细胞在48孔板上随机分为4组（每组12孔）培养，对照组：单纯CD4＋CD25- T细胞；Treg实验组：CD25＋∶CD25-按照1∶10比例加入100μl CD4＋CD25＋Treg与CD4＋CD25-T细胞共同培养；HMGB1＋Treg组：按CD25＋∶CD25-比例为1∶10加入100μl经HMGB1（1μg/ml）刺激72 h的Treg与CD4＋CD25-T细胞进行共培养；HMGB1＋AST IV＋Treg组： CD25＋∶CD25-按照1∶10比例加入100μl经HMGB1（1μg/ml）、AST IV（100μg/ml）刺激72 h的CD4＋CD25＋Treg与CD4＋CD25-T细胞共同培养。以上4组均于培养后72 h重新分离收集CD4＋CD25-T细胞及其上清液，采用噻唑蓝（MTT）法检测脾脏CD4＋CD25-T细胞增殖活性；ELISA法检测CD4＋CD25-T细胞活化核因子（NFAT）活性、孵育上清液IL-2表达。结果将CD4＋CD25＋Treg加入CD4＋CD25-T细胞培养后，CD4＋CD25-T细胞增殖活性受到抑制（0.166±0.039），P＜0.01，NFAT活性（0.156±0.035）、IL-2水平（2.38±0.58）pg/ml均较对照组下降（P＜0.01）。加入经HMGB1刺激的Treg后，CD4＋CD25-T细胞增殖活性受抑制程度逆转（0.477±0.097），P＜0.01。与CD4＋CD25＋Treg组比较，HMGB1＋Treg组NFAT活性（0.409±0.094）、IL-2（4.55±0.96）pg/ml均升高（P＜0.01）。与HMGB1＋Treg组比较，HMGB1＋AST Ⅳ＋Treg组CD4＋CD25-T细胞增殖受抑制程度加重（0.287±0.052）、NFAT活性（0.261±0.046）、IL-2水平（2.73±0.62）pg/ml降低（P＜0.01）。结论 HMGB1在体外可抑制小鼠Treg免疫功能发挥，而ASTⅣ可拮抗HMGB1对Treg免疫功能的抑制作用，表明其对HMGB1介导的促炎效应具有治疗作用。

关键词： B细胞   调节性   类风湿关节炎   全身性自身免疫病   免疫调节作用   过度炎症反应   细胞亚群   免疫应答  

摘要： RA 是一种以慢性、进行性、侵蚀性为特征的全身性自身免疫病，其发病率、致残率高，发病机制尚未完全明确。作为体液免疫的重要部分，B 细胞能够针对自身抗原产生相应抗体，在自身免疫病的发生和发展中起着重要的正向免疫调节作用，已被广泛认识。近来研究表明，B 细胞中也存在一种可以调节免疫应答的细胞亚群，通过分泌 IL-10或 TGF-β及其他机制介导免疫耐受，抑制过度炎症反应，这种具有负向调控免疫应答的 B 细胞亚群被命名为调节性 B 细胞。本研究就调节性 B 细胞在 RA 中的研究进展做一综述。

关键词： B细胞   调节性B细胞   移植耐受   免疫治疗  

摘要： 传统认为,在移植免疫中B细胞作为抗原提呈细胞可加重T淋巴细胞介导的同种异体反应.但近期研究发现,某些B细胞亚群,如调节性B细胞（Bregs）具有免疫耐受性,在移植排斥反应中发挥负向调控作用,进而延缓同种异体移植排斥进程.因而研究B细胞在移植免疫中的调节作用,阐述B细胞发挥负向免疫调节机制及以B细胞为靶细胞的诱导移植耐受新策略具有重大意义.

关键词： 关节炎,类风湿   B淋巴细胞   细胞因子类  

摘要： 类风湿关节炎(RA)是以对称性多关节炎为主要临床表现的系统性自身免疫性疾病。其发病机制尚不明确。调节性细胞对于RA免疫平衡和自身稳定的维持有重要作用。具有负性调节功能的B细胞(Breg)可通过产生白细胞介素10(IL-10)或转化生长因子β(TGF-β)等抑制性细胞因子介导免疫耐受,抑制RA炎性反应,尤其对活动期RA有显著免疫抑制作用。本文主要讨论Breg在RA中的作用及其可能机制。

关键词： 树突状细胞   体外光化学方法   调节性B细胞   白细胞介素-10  

摘要： 目的探讨未成熟树突状细胞(imDC)吞噬经补骨脂素长波紫外线(PUVA)处理的小鼠脾B淋巴细胞(PUVA-SP)后,将B淋巴细胞诱导为高分泌白细胞介素(IL)-10(IL-10+)的调节性B细胞的可行性。方法培养小鼠骨髓来源DC,小鼠脾淋巴细胞经PUVA光源照射得到PUVA-SP,在体外将PUVA-SP与骨髓来源的imDC共同培养,后者吞噬PUVA-SP后形成PUVA-SP DC。应用CD19磁珠分选小鼠脾脏B淋巴细胞,将不同的DC与B淋巴细胞共同培养48 h。采用酶链免疫吸附试验(ELISA)检测B淋巴细胞、imDC、imDC+B淋巴细胞、PUVA-SP DC、PUVA-SP DC+B淋巴细胞的培养上清液中干扰素(IFN)-γ、转化生长因子(TGF)-β、IL-12p70、IL-10等细胞因子的含量。流式细胞仪分析B淋巴细胞、imDC+B淋巴细胞、mDC+B淋巴细胞、PUVA-SP DC+B淋巴细胞共培养后IL-10+调节性B细胞数量。结果与其他4组细胞培养液比较,PUVA-SP DC+B淋巴细胞上清液中的IL-10含量明显升高(均为P<0.05)。与其他各组相比,PUVA-SP DC+B淋巴细胞中IL-10+调节性B细胞数量明显增多。结论 PUVA-SP DC可以诱导脾脏B淋巴细胞分化为IL-10+调节性B细胞。

关键词： 调节性B细胞   白细胞介素-10   自身免疫性疾病   免疫耐受  

摘要： 自身免疫性疾病是指机体对自身成分产生免疫应答所致的一种疾病状态,这种自身免疫反应会影响相应器官的功能.在大多数自身免疫性疾病中,B淋巴细胞（简称B细胞）能产生自身抗体,因此一般被认为是自身免疫性疾病的”罪魁祸首”.最近大量研究发现,一类特殊的B细胞亚群即调节性B细胞（Bregs）能下调免疫反应,很好地维持免疫稳态,它们的丢失或缺乏会导致更加严重的自身免疫性疾病,且这种免疫调节功能主要通过自身分泌白细胞介素-10（IL-10）来实现.Bregs的起源、与其分化和功能相关的分子及其在自身免疫性疾病的作用将被进一步讨论.