关键词： 艾滋病病毒1型感染者   调节性B细胞   发病机制   白细胞介素-10  

摘要： 目的研究艾滋病病毒1型(HIV-1)感染者外周血中调节性B细胞(Breg)与T淋巴细胞数量、病毒载量及白介素-10(IL-10)的表达水平,分析其相关性并探讨Breg在HIV发病机制中的作用。方法选择30例未经抗病毒治疗的HIV-1感染者,分离外周血单个核细胞(PBMC),用流式细胞术(FCM)检测CD1dhi CD5+CD19+B细胞的比例、CD+4T淋巴细胞(简称CD4细胞)数量、CD+8T淋巴细胞(简称CD8细胞)数量,用酶联免疫吸附试验法(ELISA)测定其PBMC培养液上清中IL-10的表达水平,经反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测病毒载量,与同期选择的健康对照组比较。结果与健康对照组相比,HIV-1感染者的CD1dhi CD5+CD19+B细胞的比例均明显升高(P<0.0001),其培养液上清中IL-10的表达水平也显著升高(P=0.0005)。另外,HIV-1感染者PBMC中的CD1dhi CD5+CD19+B细胞的比例与CD4细胞数量(r=-0.6084,P=0.0004)及CD4细胞/CD8细胞的比值(r=-0.8715,P<0.0001)均呈显著负相关性,与血浆中病毒载量的水平(r=0.6825,P<0.0001)及IL-10的水平均呈正相关性(r=0.7656,P<0.0001),而与CD8细胞数量未见相关性(r=0.1183,P=0.5334)。结论CD1dhi CD5+CD19+B细胞比例与其相关细胞因子IL-10表达水平的上调可能参与HIV的发病机制。

关键词： Breg细胞   IL-10   T细胞   Treg细胞  

摘要： 由于B细胞(Breg cells)在免疫反应中具有介导特异性免疫反应、分泌抗体的作用,一直以来人们都认为B细胞在免疫反应中起到正性的免疫调节作用。然而,越来越多的研究证实B细胞同样具有负性的免疫调节作用。在变应性疾病中,某种具有调节功能的B细胞亚集可以通过分泌IL-10、TGF-I等细胞因子方式促进调节性T细胞(Treg cells)的分化或是直接抑制免疫性T细胞的增殖。这种B细胞的亚集被称作调节性B细胞,即B调细胞。同时,B调细胞所处的微环境对B调细胞的产生、增殖及分泌也起到调节作用。在这篇综述中,我们结合近年来的研究成果,讨论B调细胞在变应性疾病中,对T细胞免疫反应进行调节的可能机制以及B调细胞所处微环境中的某些因素对B调细胞的调节作用,并展望了B调细胞未来的研究方向。

关键词： 急性B前体淋巴细胞白血病   iTR35   IL-35   IL-12p35   IL-27EBI3  

摘要： 目的探讨急性B前体淋巴细胞白血病（BCP-ALL）患儿i TR35调节性T细胞改变及其在BCP-ALL免疫发病机制中的作用。方法以2012年7月至2013年12月深圳市儿童医院血液肿瘤科诊断并住院治疗的BCP-ALL初诊患儿为BCP-ALL组,并分为高危、中危和标危;同期体检的健康儿童为对照组。分离外周血CD4＋T细胞,采用流式细胞术检测外周血CD4＋FOXP3-IL-10-TGF-β-IL-12p35＋IL-27EBI3＋（i TR35）、CD4＋CD25high FOXP3＋（Treg）细胞比例及IL-12p35、IL-27EBI3、p STAT1、p STAT4蛋白表达水平;实时荧光定量PCR检测CD4＋T细胞IL-12Rβ2、gp130 mRNA表达;ELISA检测血浆IL-35、IL-10水平。比较BCP-ALL组和对照组上述指标的差异。结果 1BCP-ALL组48例（男29例）,年龄2.3~11.0岁,平均5.2岁;高危11例,中危21例,标危16例。对照组32例（男21例）,年龄2.6~10.8岁,平均5.1岁。两组年龄和性别构成差异均无统计学意义。2BCP-ALL组外周血i TR35细胞比例显著高于对照组（P〈0.001）,其胞内IL-12p35、IL-27EBI3表达水平亦显著高于对照组（P〈0.001）;3BCP-ALL组Treg细胞比例及其胞内IL-12p35、IL-27EBI3表达水平较对照组明显增高（P〈0.001）,血浆IL-35水平及CD4＋T细胞IL-12Rβ2、gp130、p STAT1、p STAT4表达均上调（P〈0.001）,且血浆IL-35水平与i TR35细胞比例及其IL-12p35、IL-27EBI3表达呈正相关（r〉0.63,P〈0.05）。4BCP-ALL组高、中危患儿血浆IL-35水平和i TR35细胞比例显著高于标危患儿（P分别为〈0.001和0.002）,高危和中危患儿间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 i TR35细胞数量及功能异常可能是导致BCP-ALL患儿免疫功能低下的重要因素之一。

关键词： T淋巴细胞   调节性   B淋巴细胞   免疫调节   皮肤疾病   银屑病   类天疱疮   大疱性  

摘要： 调节性T细胞在系统性红斑狼疮、银屑病、自身免疫性大疱病等疾病的发病机制中研究很多,随着在人体内发现分泌白细胞介素10的调节性B细胞,人们发现分泌白细胞介素10的调节性B细胞和其分泌的白细胞介素10有负向免疫调节作用,对疾病有保护作用.许多研究表明,在这些疾病中,分泌白细胞介素10的调节性B细胞的数量、功能和其分泌的白细胞介素10水平存在异常,认为这些异常与疾病的发病和病情有关.

关键词： 间充质干细胞   调节性树突状细胞   急性移植物抗宿主病  

摘要： 目的:观察间充质干细胞诱导的CD8α+Jagged2highCD11bhigh调节性树突状细胞(MSC-DCregs),对小鼠急性移植物抗宿主病(a GVHD)的影响。方法:体外诱导MSC-DCregs。以C57BL/6(H-2b)小鼠为供鼠、接受清髓性全身照射(TBI)预处理的BALB/c(H-2d)小鼠为受鼠进行移植。分为以下5组:为正常对照组;TBI组;移植组:移植物为1×107骨髓细胞(BMCs);a GVHD组:移植物为1×107BMCs+1×107脾细胞(Sp Cs);MSC-DCregs组:移植物为1×107BMCs+1×107Sp Cs+1×106MSC-DCregs。监测植入情况、H2-Kb嵌合率、a GVHD评分、生存和病理学改变。结果:处理1 0 d后所有小鼠造血恢复,30 d后嵌合率检测转为供鼠型。a GVHD组和MSC-DCregs组中位生存期分别为27 d和33 d,MSC-DCregs组生存期较a GVHD组延长(P<0.01),临床评分比a GVHD组低(P<0.01),33 d的皮肤、肝脏病理学改变均优于a GVHD组。结论:MSC-DCregs具有防治a GVHD的作用,其相关作用机理待进一步研究。

关键词： 脐带   间质干细胞   Graves小鼠   调节性B细胞  

摘要： 目的探讨脐带间质干细胞(UC-MSCs)治疗Graves病(GD)小鼠的作用机制。方法 32只小鼠随机分为正常对照组(G0组)、GD对照组(G1组)和UC-MSCs治疗组(G2组)。留取小鼠血清,化学发光法检测血清游离甲状腺素(FT4)水平,酶联免疫吸附法检测甲状腺刺激抗体(TSAb)浓度。取甲状腺,制备石蜡切片行苏木精-伊红染色。取脾脏,部分制成单个核细胞悬液,行三标记免疫荧光染色、流式细胞分析CD1dhi CD5+CD19+Bregs比例;部分脾脏提取总RNA,实时荧光定量PCR检测Bregs相关细胞因子白细胞介素-10(IL-10)mRNA和转化生长因子-β(TGF-β)mRNA的表达水平。结果 26周时G2组血清中TSAb浓度与脾脏组织中CD19+B细胞较G1组明显降低(P<0.05),B细胞中CD1dhi CD5+CD19+Bregs所占比例和脾组织IL-10mRNA、TGF-βmRNA表达量较G1组却明显上升(P<0.05),且在移植前、后血清TSAb浓度差与脾脏中CD1dhi CD5+CD19+Bregs所占比例变化呈显著负相关,与IL-10、TGF-βmRNA的表达量变化呈显著正相关。结论 UC-MSCs可能通过上调Bregs表达而发挥治疗作用。

关键词： 肺肿瘤   B淋巴细胞,调节性   白细胞介素10   转化生长因子β  

摘要： 目的检测肺癌患者外周血调节性B细胞(CD19+CD5+CD1d+B细胞,Bregs)的表达及其临床意义。方法收集72例肺癌患者和29例健康体检者的外周血,采用流式细胞仪检测Bregs细胞数量,ELISA法检测外周血清IL-10和TGF-β的水平。比较肺癌患者与健康对照,肺癌Ⅰ+Ⅱ期与Ⅲ+Ⅳ期患者Bregs细胞比例、外周血IL-10和TGF-β水平的差异;分析肺癌患者Bregs细胞比例与外周血IL-10和TGF-β水平的相关性。结果肺癌患者外周血Bregs细胞比例明显高于健康对照(5.01%±1.20%vs 2.78%±0.56%,P<0.01),Ⅲ+Ⅳ期患者高于Ⅰ+Ⅱ期患者(5.63%±1.04%vs 4.13%±0.78%,P<0.01)。肺癌患者外周血清IL-10和TGF-β水平明显高于健康对照(2.34±0.79pg/ml vs 1.29±0.51pg/ml,56.64±6.93ng/ml vs 22.42±4.42ng/ml,P<0.01),Ⅲ+Ⅳ期患者高于Ⅰ+Ⅱ期患者(2.79±0.60pg/ml vs 1.71±0.59pg/ml,59.88±6.63ng/ml vs 52.10±4.37ng/ml,P<0.01)。相关分析显示,肺癌患者外周血Bregs细胞比例与IL-10水平呈正相关(r=0.69,P<0.01),而与TGF-β水平无明显相关性。结论肺癌患者外周血Bregs细胞比例及血清IL-10、TGF-β水平增高,提示Bregs细胞可能与肺癌的进展相关。

关键词： 心肌炎   肠道病毒属   炎症   CD19+   CDld^hi   CD5+B细胞   调节性B细胞  

摘要： 目的观察病毒性心肌炎小鼠不同时间点调节性B淋巴细胞(Breg)亚群的变化,探讨其在病毒性心肌炎发病中的作用。方法将小鼠随机分为实验组和对照组,实验组腹腔注射柯萨奇病毒B3(CVB3),对照组注射等量磷酸盐缓冲液(PBS)。依据注射后的时间,实验组和对照组均设1周和2周时间点亚组。应用苏木素伊红染色后观察心肌病理改变并计算心肌病理积分,采用RT-PCR法检测心肌组织中CVB3 mRNA的表达水平,采用流式细胞术检测小鼠脾脏Breg细胞亚群占CD19+细胞的比例。结果实验组心肌炎症水平及CVB3 mRNA表达水平均明显高于对照组;实验组1周亚组心肌组织病理积分低于2周亚组,但实验组1周亚组心肌CVB3 mRNA表达水平却高于2周亚组,差异均有统计学意义(P<0.05)。实验组小鼠脾Breg细胞比例均高于对照组,且实验组1周亚组小鼠脾Breg细胞比例高于2周亚组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论病毒性心肌炎小鼠中调节性B细胞表达增高,其可能参与病毒性心肌炎的发病过程。

关键词： 白细胞介素35   调节性B淋巴细胞   川崎病   调节性T淋巴细胞   免疫调节  

摘要： 目的探讨白细胞介素（IL）-35＋调节性B淋巴细胞（IL-35＋Breg）在川崎病（KD）免疫发病机制中的作用。方法急性期KD患儿32例，同年龄体检健康儿童28例为健康对照组。KD患儿分别于治疗前、治疗后取血备检。采用流式细胞术检测外周血IL-35＋Breg、调节性T淋巴细胞（Treg）比例及程序性死亡因子配体1（PD—LI）、CD16q、程序性死亡因子1（PD-1）、CD43、IL-12p35、EB病毒诱导基因3（IL-27EBl3）、IL-12受体B2（IL-12Rβ2）、IL-27受体α（IL-27Rα）、磷酸化信号转导和转录活化因子1（pSTATI）、磷酸化信号转导和转录活化因子3（pSTAT3）蛋白表达水平；实时荧光定量PCR检测CD19-细胞Src同源2结构域蛋白酪氨酸磷酸酶2（SHP-2）、磷酸酶及张力蛋白同源物（PTEN）、vav1鸟嘌呤核苷酸交换因子（Vav）mRNA表达；酶联免疫吸附法检测血浆中IL-35、肿瘤坏死因子α（TNF—α）、IL-12水平。结果1．急性期KD患儿外周血IL-35＋Breg细胞比例较健康对照组显著降低[（5．79±2．60）％比（12．65±5．34）％；F=19．23，P〈0．05]，其胞内IL-12p35、IL-27EBI3、IL-10表达水平明显低于健康对照组（F=9．70、14．30、7．08，P均〈0．05），经静脉注射丙种球蛋白（IVIG）治疗后显著上调[IL-35＋Breg：（10．52±4．95）％；P〈0．05]。2．急性期KD患儿Treg比例及其胞内IL-12p35、IL-27EBl3表达水平明显低于健康对照组[Treg：（4．12±1．51）％比（8．06±3．32）％；F=19．70、17．69、38．22，P均〈0．05]，其中Treg与IL-35＋Breg细胞比例呈正相关（r：0．69，P〈0．05），血浆IL-35水平及CD19＋B淋巴细胞IL-12Rβ2、IL-27Rα、pSTAT1、pSTAT3表达水平均显著降低（F=8．09、7．54、7．69、5．89、12．59，P均〈0．05），经IVIG治疗后明显增高[Treg：（7．39±2．85）％；P均〈0．05]。3．急性期KD患儿CD14＋细胞过表达PD—L1、CD169（F=24．94、16．53，P均〈0．05），CD19＋细胞表面相关配体PD-1、CD43及其下游分子SHP-2、PTEN、Vav表达显著降低（F=6．43、5．57、19．52、10．37、11．37，P均〈0．05），血浆TNF-α、IL-12水平明显高于健康对照组（F=34．71、19．51，P均〈0．05），经IVIG治疗后均明显恢复（P均〈0．05）。结论IL-35＋Breg细胞数量及功能异常可能是导致急性期KD患儿免疫功能紊乱的重要因素之-。

关键词： 血小板减少   白细胞介素10   调节性B细胞  

摘要： 目的 探讨免疫性血小板减少症（ITP）患者外周血中调节性B细胞（Breg）数量及功能变化.方法 选取2013年11月至2014年10月天津医科大学总医院血液科住院的初诊ITP患者35例、完全缓解ITP患者32例及健康志愿者30名.采用流式细胞术检测其外周血Breg数量（CD19^＋ CD24^hiCD38^hi/CD19^＋）及其功能分子白细胞介素10（IL-10）表达量,并将Breg与ITP患者的免疫状态及血小板计数进行相关性分析.结果 外周血Breg占CD19^＋淋巴细胞比例：ITP初诊患者（3.09％±2.57％）显著低于完全缓解患者（7.78％±6.59％,P =0.002）和健康对照（5.42％±3.31％,P=0.003）.外周血Breg中IL-10^＋细胞比例：初诊患者比例（32.30％±12.71％）低于完全缓解患者（71.73％±18.08％,P=0.000）和健康对照（51.01％ ±17.08％,P=0.026）,完全缓解患者高于健康对照（P =0.026）.Breg与髓样树突细胞（mDC）数量呈正相关（r=0.644,p=0.003）,与外周血血小板计数呈正相关（r=0.327,P=0.006）.结论 Breg参与了ITP的发病,是其潜在的治疗靶点.