关键词： 心肌炎   肠道病毒属   炎症   CD19+   CDld^hi   CD5+B细胞   调节性B细胞  

摘要： 目的观察病毒性心肌炎小鼠不同时间点调节性B淋巴细胞(Breg)亚群的变化,探讨其在病毒性心肌炎发病中的作用。方法将小鼠随机分为实验组和对照组,实验组腹腔注射柯萨奇病毒B3(CVB3),对照组注射等量磷酸盐缓冲液(PBS)。依据注射后的时间,实验组和对照组均设1周和2周时间点亚组。应用苏木素伊红染色后观察心肌病理改变并计算心肌病理积分,采用RT-PCR法检测心肌组织中CVB3 mRNA的表达水平,采用流式细胞术检测小鼠脾脏Breg细胞亚群占CD19+细胞的比例。结果实验组心肌炎症水平及CVB3 mRNA表达水平均明显高于对照组;实验组1周亚组心肌组织病理积分低于2周亚组,但实验组1周亚组心肌CVB3 mRNA表达水平却高于2周亚组,差异均有统计学意义(P<0.05)。实验组小鼠脾Breg细胞比例均高于对照组,且实验组1周亚组小鼠脾Breg细胞比例高于2周亚组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论病毒性心肌炎小鼠中调节性B细胞表达增高,其可能参与病毒性心肌炎的发病过程。

关键词： 白细胞介素35   调节性B淋巴细胞   川崎病   调节性T淋巴细胞   免疫调节  

摘要： 目的探讨白细胞介素（IL）-35＋调节性B淋巴细胞（IL-35＋Breg）在川崎病（KD）免疫发病机制中的作用。方法急性期KD患儿32例，同年龄体检健康儿童28例为健康对照组。KD患儿分别于治疗前、治疗后取血备检。采用流式细胞术检测外周血IL-35＋Breg、调节性T淋巴细胞（Treg）比例及程序性死亡因子配体1（PD—LI）、CD16q、程序性死亡因子1（PD-1）、CD43、IL-12p35、EB病毒诱导基因3（IL-27EBl3）、IL-12受体B2（IL-12Rβ2）、IL-27受体α（IL-27Rα）、磷酸化信号转导和转录活化因子1（pSTATI）、磷酸化信号转导和转录活化因子3（pSTAT3）蛋白表达水平；实时荧光定量PCR检测CD19-细胞Src同源2结构域蛋白酪氨酸磷酸酶2（SHP-2）、磷酸酶及张力蛋白同源物（PTEN）、vav1鸟嘌呤核苷酸交换因子（Vav）mRNA表达；酶联免疫吸附法检测血浆中IL-35、肿瘤坏死因子α（TNF—α）、IL-12水平。结果1．急性期KD患儿外周血IL-35＋Breg细胞比例较健康对照组显著降低[（5．79±2．60）％比（12．65±5．34）％；F=19．23，P〈0．05]，其胞内IL-12p35、IL-27EBI3、IL-10表达水平明显低于健康对照组（F=9．70、14．30、7．08，P均〈0．05），经静脉注射丙种球蛋白（IVIG）治疗后显著上调[IL-35＋Breg：（10．52±4．95）％；P〈0．05]。2．急性期KD患儿Treg比例及其胞内IL-12p35、IL-27EBl3表达水平明显低于健康对照组[Treg：（4．12±1．51）％比（8．06±3．32）％；F=19．70、17．69、38．22，P均〈0．05]，其中Treg与IL-35＋Breg细胞比例呈正相关（r：0．69，P〈0．05），血浆IL-35水平及CD19＋B淋巴细胞IL-12Rβ2、IL-27Rα、pSTAT1、pSTAT3表达水平均显著降低（F=8．09、7．54、7．69、5．89、12．59，P均〈0．05），经IVIG治疗后明显增高[Treg：（7．39±2．85）％；P均〈0．05]。3．急性期KD患儿CD14＋细胞过表达PD—L1、CD169（F=24．94、16．53，P均〈0．05），CD19＋细胞表面相关配体PD-1、CD43及其下游分子SHP-2、PTEN、Vav表达显著降低（F=6．43、5．57、19．52、10．37、11．37，P均〈0．05），血浆TNF-α、IL-12水平明显高于健康对照组（F=34．71、19．51，P均〈0．05），经IVIG治疗后均明显恢复（P均〈0．05）。结论IL-35＋Breg细胞数量及功能异常可能是导致急性期KD患儿免疫功能紊乱的重要因素之-。

关键词： 血小板减少   白细胞介素10   调节性B细胞  

摘要： 目的 探讨免疫性血小板减少症（ITP）患者外周血中调节性B细胞（Breg）数量及功能变化.方法 选取2013年11月至2014年10月天津医科大学总医院血液科住院的初诊ITP患者35例、完全缓解ITP患者32例及健康志愿者30名.采用流式细胞术检测其外周血Breg数量（CD19^＋ CD24^hiCD38^hi/CD19^＋）及其功能分子白细胞介素10（IL-10）表达量,并将Breg与ITP患者的免疫状态及血小板计数进行相关性分析.结果 外周血Breg占CD19^＋淋巴细胞比例：ITP初诊患者（3.09％±2.57％）显著低于完全缓解患者（7.78％±6.59％,P =0.002）和健康对照（5.42％±3.31％,P=0.003）.外周血Breg中IL-10^＋细胞比例：初诊患者比例（32.30％±12.71％）低于完全缓解患者（71.73％±18.08％,P=0.000）和健康对照（51.01％ ±17.08％,P=0.026）,完全缓解患者高于健康对照（P =0.026）.Breg与髓样树突细胞（mDC）数量呈正相关（r=0.644,p=0.003）,与外周血血小板计数呈正相关（r=0.327,P=0.006）.结论 Breg参与了ITP的发病,是其潜在的治疗靶点.

关键词： WAS综合征   肺出血   自身免疫性疾病   调节性B细胞  

摘要： 目的探讨1例湿疹血小板减少伴免疫缺陷综合征（Wiskott-Aldrich syndrome,WAS）伴肺出血患儿临床分子特点。方法对1例疑似WAS的男性患儿,采用流式细胞技术检测WAS蛋白表达,PCR结合测序方法进行WAS基因分析,同时检测患儿调节性B细胞（B10）比例,并对其进行随访。结果患儿出生后即有眼眶及耳道周围湿疹,1月龄发现血小板减少（80×10^9/L）,伴有反复呼吸道和消化道感染。8月龄入我院免疫科治疗。入院时血小板计数5×10^9/L,伴中度贫血,Coom’S实验阳性。骨髓检查未见产板巨核细胞。实验室检测患儿WAS蛋白为阴性,WAS基因分析显示第2内含子有剪切位点突变（c.274-2A〉C）。患儿调节性B细胞比例明显低于正常对照。住院第2天,患儿颜面部出现紫癜样皮疹,四肢、双足背出现明显肿胀,并逐渐加重,伴有反复便血和尿血。第11天无明显诱因突发心率下降至80~100次/分、呼吸不规则,伴咯血,抢救中自气管插管内吸出100 ml鲜血,最终抢救无效死亡。结论通过临床表现、蛋白检测和基因分析,确诊1例WAS患儿,发现1个WAS基因新型剪切位点突变。对早发自身免疫性疾病的WAS患儿,需警惕内脏出血的可能,包括肺出血,并及早预防。

关键词： 红斑狼疮   系统性   调节性B细胞   白细胞介素-10  

摘要： 目的 分析系统性红斑狼疮（SEE）患者外周血中调节性B细胞（Bregs）的表达,探讨Bregs在SLE发病机制的作用.方法 选择60例SLE患者（其中活动期38例,稳定期22例）和20例健康对照者为研究对象,分离外周血单个核细胞（PBMC）,以CD40L及CPG寡核苷酸刺激PBMC并进行培养,用流式细胞术分析外周血IL-10＋ CD19＋ Breg和CD19＋ CD24hi CD38hi Breg的表达;ELISA方法检测培养上清中白细胞介素（IL）-10的水平.结果 （1）活动期SLE患者外周血中IL-10＋ CD19＋Breg细胞的表达为（1.54±0.64）％,稳定期SLE患者组为（2.42±0.75）％,两组比较P＜0.01;活动期和稳定期SLE组IL-10＋ CD19＋ Breg细胞的表达均低于正常对照组[（4.35±1.00）％]（P＜0.01）.（2）活动期SLE患者外周血中CD19＋ CD24hi CD38hi Breg细胞的表达为（1.26±0.45）％,稳定期SLE患者组为（2.01±0.61）％,两组比较P ＜0.01;活动期和稳定期SLE组CD19＋ CD24hiCD38hiBreg细胞的表达均低于正常对照组[（3.14±0.87）％]（P＜0.01）.（3）活动期SLE患者细胞培养上清中IL-10的水平低于稳定期SLE患者组（P＜0.05）和正常对照组（P＜0.01）;SLE患者外周血IL-10＋CD19＋ Breg和CD19＋ CD24hiCD38hiBreg细胞的表达与细胞培养上清中IL-10的水平呈正相关（r=0.652,r =0.574,均P＜0.01）.结论 活动期SLE患者外周血中IL-10＋ CD19＋ Breg和CD19＋ CD24hiCD38hiBreg显著降低,提示调节性B细胞可能参与SLE的发病.

关键词： 桥本甲状腺炎   调节性B淋巴细胞   抑制性T细胞  

摘要： 目的探讨桥本甲状腺炎（HT）患者外周血调节性B淋巴细胞（regulatoryBcell，Bregs）、抑制性T细胞（suppressor T ***）的比例变化。方法人组18～60岁桥本甲状腺炎患者61例，性别年龄相匹配的健康组38名。应用流式细胞技术检测外周血CD19＋ CD24＋ CD27＋B细胞、CD19＋ CD24hi CD38aiBB细胞、CDl9＋白细胞介素．10＋B细胞及CD8＋CD28-T细胞比例变化。结果与对照组相比，HT组CD19＋ CD24＋ CD27＋B细胞亚群显著升高（P〈0．05）。随着甲状腺过氧化物酶抗体的升高，CD19＋ CD24hi CD38aiBB细胞显著降低（P〈0．05）；随着甲状腺球蛋白抗体（TGAb）的升高CD8＋CD28-T细胞显著降低（P〈0．05）。三碘甲状腺原氨酸（TT4）与CD19＋ CD24hi CD38aiBB细胞则呈显著正相关；甲状腺素（TT4）与CD8＋CD28-T细胞呈显著负相关，与CD19＋ CD24＋ CD27＋B细胞则呈显著正相关（P〈0．05）。Logistic回归分析发现，TGAb和游离甲状腺素（n）是CD8＋CD28-T细胞在淋巴细胞中比例降低的独立危险因素（P〈0．05）；促甲状腺素（TSH）是CD19＋ CD24hi CD38aiBB细胞比例降低的独立危险因素，FT4是CD19＋ CD24＋ CD27＋B细胞比例升高的独立危险因素（P〈0．05）。结论HT患者外周血Ts显著降低，不同表型的Bregs比例变化则不同，甲状腺自身抗体和甲状腺功能均与HT的免疫改变相关。

关键词： 系统性红斑狼疮   B淋巴细胞   相关性   调节性   发病机制   器官损伤   免疫复合物   自身免疫性  

摘要： 系统性红斑狼疮（SLE）的发病机制目前仍不十分清楚,但可以明确的是T细胞和B细胞与其发病相关。在SLE中存在B细胞过度活化,产生大量自身反应性抗体,与相应自身抗原结合形成免疫复合物,沉积在各个组织、器官,并激活补体系统,引发一系列炎症反应,最终导致广泛的组织、器官损伤。B细胞在SLE发生、发展中发挥重要作用。因为B细胞可以产生抗体而被认为在自身免疫性疾病发生、

关键词： 细胞分化   B细胞   自身免疫病   多功能干细胞   免疫调节   免疫反应   细胞因子   体液免疫   抗原提呈细胞   自身免疫性疾病  

摘要： B淋巴细胞来源于骨髓的多功能干细胞。既往认为其主要通过产生抗体、呈递抗原、分泌细胞因子及活化T细胞等执行机体体液免疫,正向推动免疫反应。2006年,Mizoguchi等正式提出了＂调节性B细胞（regulatory B cells,Bregs）＂这一概念,Bregs通过产生负向细胞因子（如IL-10、IL-35和TGF-β）参与免疫调节。

关键词： 调节性B细胞   类风湿性关节炎   IL-10  

摘要： 研究发现某些B细胞能够通过产生调节性的细胞因子(如IL-10、TGF-β)或者直接与病原性的T细胞相互作用抑制免疫反应,这类B细胞亚群被定义为regulatory B(Breg)cells。类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以关节滑膜炎为特征的、伴随骨和软骨结构进行性破坏、最终导致关节破坏和畸形的慢性炎症疾病。已证实Breg在关节炎小鼠模型(collageninduced arthritis,CIA)以及类风湿性关节炎患者中发挥了免疫抑制作用。本文主要总结了近年来国内外有关Breg在RA疾病方面的研究进展,阐述其在RA中可能的作用机制,为RA疾病的预防、治疗提供新思路。

关键词： 视神经脊髓炎   调节性B细胞   多发性硬化   水通道蛋白4抗体  

摘要： 目的检测视神经脊髓炎(NMO)患者外周血中CD1dhiCD5+CD19+调节性B细胞的比例,探讨CD1dhiCD5+CD19+调节性B细胞能否作为NMO和多发性硬化(MS)鉴别诊断的生物标志物。方法采用流式细胞术检测44例NMO患者,38例MS患者和30例健康正常人外周血中CD1dhiCD5+CD19+调节性B细胞的比例。采用间接免疫荧光法检测NMO患者水通道蛋白4抗体(AQP4-Ab)的表达情况。结果 NMO患者外周血中CD1dhiCD5+CD19+调节性B细胞占CD19+B细胞及淋巴细胞的比例较MS患者和健康正常人明显减低,而MS患者与健康正常人比较,差异无统计学意义。AQP4-Ab阳性NMO患者较AQP4-Ab阴性NMO患者CD1dhiCD5+CD19+调节性B细胞占CD19+B细胞及淋巴细胞的比例明显减低。结论外周血中CD1dhiCD5+CD19+调节性B细胞数量是NMO和MS鉴别诊断的一种生物标志物。