关键词： B淋巴细胞   调节作用   效应性B细胞   调节性B细胞   综述  

摘要： 随着调节性B淋巴细胞的发现,效应性和调节性B细胞的功能作用逐渐被深入研究。本文针对效应性和调节性B细胞作用机制,从两者的活化、对T细胞的作用以及相关信号通路进行综述,分析两群B细胞对免疫反应和调节的区别与联系,重点介绍调节性B细胞调节作用的分子机制及其在免疫疾病中的研究现状,同时介绍了调节性B细胞活化与分离的方法,以期为进一步对调节性B细胞的应用研究提供理论和方法学依据。

关键词： 癌症   B细胞   调节性B细胞   肿瘤免疫  

摘要： 调节性B细胞(Breg)是继调节性T细胞后免疫领域研究的新热点,Breg是通过白细胞介素(IL)-10、IL-35,转化生长因子(TGF)-β产生免疫抑制作用的一类细胞。Breg通过阻止致病性T细胞和其他促炎性淋巴细胞扩增,从而发挥抑制免疫病理损伤作用。研究已证实,Breg在炎症、自身免疫性疾病以及癌症进展、转归和预后中发挥一定作用。本文就Breg与癌症的关系及其研究进展作一综述。

关键词： 调节性B淋巴细胞   儿童   新诊断   血小板减少症  

摘要： 目的探讨调节性B淋巴细胞（Breg）在儿童新诊断免疫性血小板减少症（ITP）外周血的表达及意义。方法选取2014年1月至12月在郑州大学第一附属医院儿科病房收治的新诊断ITP患儿35例为研究对象，以同期体检的20例健康儿童为健康对照组，分别留取静脉血3mL。采用流式细胞仪检测新诊断ITP患儿及对照组儿童外周血Breg细胞的表达水平，实时荧光定量聚合酶链反应检测外周血细胞因子白细胞介素-10（IL-10）和转化生长因子-β1（TGF-β1）mRNA的表达，Pearson相关分析检测Breg细胞比值与IL-10、TGF-β1mRNA表达的相关性。结果新诊断ITP患儿外周血Breg细胞比值[（2．37±0．67）％]显著低于健康对照组[（4．92±1．32）％]，差异有统计学意义（t=一7．47，P=0．000），IL-10mRNA的表达水平（0．202±0．059）显著低于健康对照组（0．415±0．212），差异有统计学意义（t=一5．175，P=0．000），TGF．131mRNA的表达水平（1．587±0．823）明显高于健康对照组（0，619±0．322），差异有统计学意义（t=4，081，P=0．001）。Breg细胞比值与IL-10mRNA的表达水平呈正相关（rs：0．828，P〈0．05），与TGF-β1mRNA的表达水平无相关性（rs=0．527，P=0．117）。结论新诊断ITP患儿外周血Breg细胞降低，Breg细胞异常表达可能在儿童ITP的免疫学发病过程中起重要作用。

关键词： 系统性红斑狼疮   调节性B细胞   Tfh   Treg  

摘要： SLE是一种累及多系统的自身免疫病。近年来,调节性B细胞在SLE中的作用受到广泛的关注。调节性B细胞主要通过分泌IL-10等细胞因子发挥负向调节作用而参与免疫耐受,抑制炎症反应,影响SLE的病程发展。本文主要综述调节性B细胞亚群在SLE中的数量和功能及其与Tfh、Treg细胞的相互作用。

关键词： 脊柱炎,强直性   血小板功能试验   T淋巴细胞,调节性   血沉  

摘要： 目的观察强直性脊柱炎(AS)患者血小板参数的变化及外周血B、T淋巴细胞衰减因子(BTLA)、调节性T细胞(Treg)的表达。方法选取60例AS患者,检测患者血小板参数,采用流式细胞术检测外周血BTLA及Treg的表达,观察AS患者血小板变化及其影响因素。结果 AS患者存在血小板参数异常变化,表现为PLT、PCT的升高。与正常组比较,AS患者外周血BTLA及Treg的表达降低;与BTLA正常者比较,BTLA异常组血小板参数PLT、PCT升高;与Treg正常者比较,Treg异常者血小板参数PLT、PCT升高,MPV降低(P<0.05 or P<0.01)。血小板参数与BTLA、Treg及C3、hs-CRP、IGG存在一定相关性(P<0.05 or P<0.01)。结论 AS患者外周血BTLA、Treg表达降低可能是引起血小板参数异常的原因。

关键词： 免疫性血小板减少   利妥昔单克隆抗体   Th1/Th2   调节性B细胞   调节性T细胞   Th17细胞  

摘要： 目的:评估利妥昔单克隆抗体和地塞米松联合环磷酰胺治疗复发难治的免疫性血小板减少症(ITP)的有效性、安全性及其可能的作用机制。方法:前瞻性纳入12例复发难治的ITP患者,给予利妥昔单克隆抗体375 mg/m^2,每周1次,连用4周;地塞米松40 mg,连用4d环磷酰胺500 mg/m^2,两周1次,连用2周。用ELISA法检测患者治疗前后外周血IFN-r和IL-4水平,流式细胞术检测治疗前后调节性淋巴细胞Breg、Treg和Th17的水平,同时观察治疗前后血小板计数的变化,监测不良反应。结果:12例患者中6例(50.00%)获得完全缓解,4例(33.33%)部分缓解,总有效率为83.33%。治疗前血小板计数的平均值为(12.83±6.01)×10~9/L,治疗后血小板的平均峰值为(115.42±76.60)×10~9/L,二者差异有显著统计学意义(P<0.001)。治疗后IFN-r/IL-4比值(5.89±2.30)较治疗前(7.00±2.73)下降,差异均有显著统计学意义(P=0.002)。治疗后外周血Breg细胞(21.27±4.28)%较治疗前(15.48±1.67)%升高(P<0.001),Treg/Th17比值(3.07±1.50)较治疗前(0.98±0.45)升高(P<0.001),差异均有显著统计学意义。不良反应为输液反应(1例),继发性高血压和高血糖(1例),呼吸道感染(2例)。结论:利妥昔单克隆抗体和地塞米松联合环磷酰胺可改善复发难治ITP患者的疗效,且患者耐受性较好,其机制可能为促使辅助T细胞亚群及调节性淋巴细胞达到平衡。

关键词： 实验性自身免疫性脑脊髓炎   雌激素   调节性B细胞   炎性因子   程序性死亡受体-1/配体  

摘要： 目的检测雌激素在小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)中的预防性治疗作用并初步探讨其体内作用机制。方法用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG_(35-55))和完全弗氏佐剂(CFA)免疫C57BL/6J小鼠制备EAE模型;雌激素于建模始每日皮下注射50μmol/L进行治疗,通过发病指数评分、脊髓病理分析、炎症因子水平检测,并应用流式细胞仪(FACS)及实时荧光定量PCR(q PCR)评价治疗效果;进一步通过分析小鼠脾细胞及脊髓相关功能分子CD4/PD-1、CD19/PD-L1、CD4/CD25/Foxp3、CD19/CD21/CD23及CD19/CD5/CD1d^(high)的表达变化,探讨雌激素可能的作用机制。结果雌激素预防性治疗可有效延缓EAE小鼠的发病,减轻脱髓鞘病变。病理结果显示,雌激素治疗能减少小鼠脊髓组织炎性细胞的浸润,同时下调外周炎性因子TNF-a及IL-17A的分泌表达(P<0.01);与模型组相比,雌激素治疗下调T淋巴细胞表面活化分子CD69的表达(P>0.05)并可显著上调CD4^+T细胞表面PD-1的表达(P<0.05);同时,雌激素治疗后PD-1的配体CD19+B细胞表面PD-L1的表达明显上调(P<0.01),脾细胞中CD19^+CD21^(high)CD23^(low)(P<0.01)及CD19^+CD5^+CD1d^(high)(P<0.01)的比例也有不同程度的升高,但对脾细胞中CD4^+CD25^+Foxp3^+的表达无明显作用。结论雌激素预防性治疗可延缓EAE小鼠的发病进程,其作用机制可能与上调PD-1/PD-L1通路并上调调节性B细胞水平有关。

关键词： 肝炎,丙型,慢性   调节性B细胞   调节性T细胞  

摘要： 目的：探讨慢性丙型肝炎患者外周血IL-10＋CD1＋9调节性B细胞（regulatory B cells，Breg）和CD ＋4 CD ＋25 high 调节性 T 细胞（regulatory T cells，Treg）的表达及其相互关系。方法选取慢性丙肝患者45例，健康对照者25例。流式细胞术分析外周血 Breg 和 Treg 的表达情况，并进行相关性分析，ELISA 测定血清IL-10和 TGF-β水平。结果慢性丙肝组 Breg 较健康对照组显著升高，差异有统计学意义[3．55％（2．40％～4．14％）比1．66％（1．24％～2．02％），t ＝6．78，P ＜0．01]，同时慢性丙肝组 Treg 也显著高于对照组，差异有统计学意义[4．55％（3．35％～5．88％）比2．05％（1．39％～2．61％），t ＝7．17，P ＜0．01]。丙肝组 Breg 与 Treg存在正相关关系（r ＝0．374，P ＝0．019），对照组则无此相关性。慢性丙肝组血清 IL-10表达水平显著高于对照组，差异有统计学意义[（78．65±17．21）pg／mL 比（53．21±11．47）pg／mL，t ＝7．51，P ＜0．001]。结论Breg 和 Treg 可能在 HCV 慢性感染过程中通过分泌 IL-10发挥免疫抑制作用，促进 HCV 的持续感染和特异性T 细胞的功能缺失。

关键词： B淋巴细胞   调节性B细胞   肿瘤   肿瘤免疫  

摘要： B淋巴细胞作为体液和细胞免疫的重要组成部分,能够通过多种调控方式发挥正性免疫调节作用。然而,越来越多的研究表明,B淋巴细胞亦可通过多种途径参与机体的免疫抑制调节,其中在肿瘤中以免疫抑制作用为主。目前研究多关注于B淋巴细胞特殊亚型-调节性B细胞(regulatory B cells,Bregs)在肿瘤中发挥的免疫抑制性作用,并通过分泌多种细胞因子、调控T细胞的作用以及直接作用于恶性肿瘤细胞等多途径影响肿瘤的发生发展进程。本文就B淋巴细胞在肿瘤免疫抑制机制研究的最新进展作一综述,为B淋巴细胞作为抗肿瘤潜在治疗靶点及治疗策略提供新的思路。

关键词： 系统性红斑狼疮   白介素35   调节性B细胞   发病机制  

摘要： 研究背景：\n 系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)是一种表现有多系统损害慢性自身免疫疾病，其临床特征是产生大量自身抗体和多系统、器官受累。该病女性发病率高于男性，比例约为9:1，且多见于育龄期妇女，对患者的健康和生活质量造成了重大危害，但SLE的发病机制尚不明确，遗传、环境、雌激素、免疫等因素都可能与之相关，免疫失衡贯穿整个发病过程，B细胞和T细胞是SLE发病的重要参与者。既往认为B细胞主要通过分泌大量自身抗体，形成免疫复合物，参与体液免疫或直接对机体造成损害。但最近几年发现在实验性自身免疫性脑脊髓膜炎(EAE)小鼠模型中，缺乏B细胞和CDl9-/-的小鼠病情更加严重，提示B细胞可以缓解病情，推测B细胞有负性调节作用。2006年，Mizoguchi等提出通过分泌IL-10、TGF-β、IL-35等负性调节因子，发挥负性免疫调节作用的B细胞群体称为调节性B细胞（Bregs）。Bregs可以通过调节Thl/Th2平衡抑制有害免疫应答，或可以直接减缓免疫细胞介导的炎症反应。Bregs已成为近几年研究热点，在多种疾病（如多发性硬化、类风湿关节炎、炎性肠病、肿瘤、移植、感染、慢性肝炎等）中参与免疫调节，与疾病的发生、发展、转归密切相关。\n 近年的研究发现，调节性B细胞还有一种新的亚群—白介素35阳性调节性B细胞（IL-35+Bregs）,一些研究证明IL-35和IL-35+Bregs在多种动物实验模型中参与发病，如在缺乏表达IL-35+Bregs的实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠模型中调节性B细胞丧失功能，出现神经系统的脱髓鞘病变[5]。动物实验提示IL-35+Bregs主要通过分泌IL-35发挥免疫作用，IL-35是IL-12家族中的新成员，由EB病毒诱导基因3（Epstein-Barr virus-induced gene3，EBI3）蛋白和IL-12p35（IL-12A）亚基组成的异源二聚体， IL-35可反复诱导IL-35+Bregs细胞及IL-35的再分泌，形成正反馈机制。IL-35也可由调节性T细胞（Tregs）分泌，与Bregs可能有协同作用。IL-35+Bregs作为一种新的负性免疫调节的关键细胞，在体内发挥强有力的抗炎作用。事实上，IL-35可以抑制Th17细胞，在小鼠胶原性关节炎（CIA）、实验性自身免疫性脑炎(EAE)、实验性自身免疫性心肌炎(EAM)中缓解病情，提示IL-35在自身免疫性疾病中起着重要免疫调节的作用，另在MRL/PrA鼠模拟的系统性红斑狼疮模型研究经IL-35治疗的鼠肾炎指标可以得到改善。在SLE患者中血浆IL-35表达下调，与病情活动程度呈负相关，提示IL-35可能参与SLE的发病，而IL-35+Bregs通过分泌IL-35发挥重要的免疫调节作用。\n 因此，我们初步推测IL-35+Bregs可能参与SLE的发生、发展。本研究采用流式细胞术检测SLE患者和健康对照者外周血中CD19+IL-35+Bregs细胞及D4+CD25+F OXP3+Tregs细胞的比例，同时应用ELISA技术检测细胞培养上清中IL-35水平，分析其与疾病活动的关系，探讨IL-35+Bregs细胞及其效应细胞因子在SLE发病机制中的作用。\n 研究目的：\n 检测系统性红斑狼疮患者外周血中IL-35+CD19+Bregs细胞的表达，探讨IL-35+CD19+Bregs细胞在SLE发病机制的作用。\n 研究方法：\n 选择50例SLE患者（其中活动期30例，稳定期20例）和20例健康对照者为研究对象，分离外周血单个核细胞(PBMCs)，以LPS和hINF-γ刺激 PBMCs并进行培养，用流式细胞术分析外周血IL-35+CD19+Breg细胞CD4+CD25+FOXP3+Tregs细胞的表达；ELISA方法检测培养上清中白细胞介素（IL）-35的水平。\n 研究结果：\n 一、外周血IL-35+CD19+Bregs细胞检测结果：\n 1、外周血IL-35+CD19+Bregs细胞的表达：\n 外周血IL-35+CD19+Bregs细胞的表达(IL-35+CD19+Bregs／CD19+B细胞)：活动期SLE患者外周血中IL-35+CD19+Bregs细胞的表达为(1.43±0.67)％，稳定期SLE患者组为(2.27±0.68)％，两组比较P＜0.01；活动期SLE组和正常对照组[(4.24±1.11)％]比较P＜0.01；稳定期SLE患者组与正常对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01)。\n 2、外周血IL-35+CD19+Bregs细胞的表达与疾病活动程度的相关性：\n SLE患者外周血C