关键词： 寄生虫   免疫调节   调节性B细胞  

摘要： 寄生虫病是一种在全球范围内广泛流行的传染性疾病,对人类和家畜的健康造成了严重威胁。寄生虫入侵宿主后,会激活机体免疫系统。宿主通过先天免疫反应和获得性免疫反应来对抗寄生虫感染,并通过多种调节机制来保护自身,以防止过度的免疫反应。调节性B细胞(regulatory B cells, Bregs)是一类在寄生虫感染过程中具有免疫抑制功能的B细胞亚群。其在自身免疫性疾病、癌症和过敏反应中研究较为广泛。目前,越来越多的研究表明,寄生虫感染可诱导Bregs的产生,并且Bregs可以通过分泌抑炎细胞因子白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)抑制炎症反应,从而减轻寄生虫感染对宿主的伤害。然而,关于Bregs增殖的信号通路以及激活机制目前还不清楚,仍需要进一步的探究。作者简要介绍了不同类型的Bregs及其表型,并对Bregs在疟原虫(Plasmodium)、血吸虫(Schistosoma)、利什曼原虫(Leishmania)、弓形虫(Toxoplasma)和锥虫(Trypanosoma)感染过程中发挥的免疫调节作用进行总结,以期为寄生虫的治疗和预防策略提供新的见解。

关键词： 弥漫大B细胞淋巴瘤   流式细胞术   B细胞稳态   调节性B细胞  

摘要： 目的:评估初诊弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者是否存在外周血B细胞稳态失衡,分析及其与临床特征和预后的相关性,并明确DLBCL患者接受利妥昔单抗联合化疗治疗后外周血B细胞各亚群的重建情况。 方法: 1.回顾性分析2017年2月至2023年6月就诊于济宁市第一人民医院的67例初诊DLBCL患者的外周血B细胞计数及其他临床资料,包括初诊时性别、年龄、确诊时间、病理分型、Lugano分期、结外病灶数量、乳酸脱氢酶（LDH）、β2-微球蛋白（β2-MG）、血沉、各项免疫指标包括免疫球蛋白、类风湿因子（RF）、抗链球菌溶血素O（ASO）、C反应蛋白（CRP）、抗核抗体定量（ANA）、抗核抗体谱、淋巴细胞亚群、IPI评分及治疗方案等。根据初诊时外周血B细胞计数,将67例患者分为低B细胞计数组（B<0.1×10～9/L,n=34）和高B细胞计数组（B≥0.1×10～9/L,n=33）,比较两组患者的临床特征和治疗疗效,并采用Kaplan-Meier法和Cox回归模型进行无进展生存期（PFS）和总生存期（OS）的比较。 2.以48例初诊DLBCL患者为研究对象,16例健康人为对照组,分别采集外周血2ml,采用流式细胞术检测外周血中Ig D+CD27+非类别转换的记忆B细胞、Ig D+CD27-初始B细胞、Ig D-CD27-双阴性B细胞、Ig D-CD27+类别转换的记忆性B细胞、CD38+CD27+浆母细胞、CD38+CD27-过渡性B细胞、CD38-CD27-初始B细胞、CD38-CD27+记忆B细胞、CD38hiCD24hi及CD27hiCD24hi调节性B细胞（Bregs）的比例。同时采集患者的临床资料,分析各B细胞亚群的比例与临床特征（包括性别、年龄、病理分型、Lugano分期、结外病灶数量、IPI评分、LDH、β2-MG、血沉、各项免疫指标）的相关性。 3.采集12例DLBCL患者初诊时及免疫化疗治疗后6～12个月时外周血各2ml,采用流式细胞术检测Ig D+CD27+非类别转换的记忆B细胞、Ig D+CD27-初始B细胞、Ig D-CD27-双阴性B细胞、Ig D-CD27+类别转换的记忆B细胞、CD38+CD27+浆母细胞、CD38+CD27-过渡性B细胞、CD38-CD27-初始B细胞、CD38-CD27+记忆B细胞、CD38hiCD24hi及CD27hiCD24hiBregs的比例,比较治疗前后外周血B细胞各亚群比例的变化。 结果: 1、低B细胞计数（<0.1×10～9/L）组Lugano分期III～IV期、LDH升高、β2-MG升高及IPI评分3-5分的患者比例高于高B细胞计数（≥0.1×10～9/L）组（P=0.033,0.000,0.023,0.001）。高B细胞计数组患者的ORR及CR率均显著高于低B细胞计数组（P=0.032,0.013）。单因素分析显示,初诊DLBCL患者外周血低B细胞计数与PFS缩短（HR=1.018,P=0.002）和OS缩短（HR=8.218,P=0.006）相关;进一步多因素分析显示,低B细胞计数是PFS缩短（HR=3.116,P=0.037）的独立预后因素。 2、与健康对照组相比,初诊DLBCL患者外周血Ig D+CD27-及CD38-CD27-初始B细胞的比例显著降低（P=0.031,0.006）,而CD38-CD27+记忆B细胞的比例显著升高（P=0.013）,Ig D-CD27+类别转换的记忆B细胞的比例亦显著升高（P=0.007）。初诊DLBCL患者外周血中CD38hiCD24hiBreg、CD27hiCD24hiBreg的比例与对照组无显著统计学差异（P=0.303,0.334）。初诊DLBCL患者外周血CD38+CD27+浆母细胞比例升高与IPI评分3-5分、Lugano分期III-IV期、LDH升高相关（P=0.018,0.029,0.016）。而CD38hiCD24hiBreg比例升高亦与Lugano分期III-IV期相关（P=0.049）。 3、与初诊时相比,DLBCL患者免疫化疗治疗结束后6～12个月时外周血中Ig D+CD27-初始B细胞（P<0.01）及CD38-CD27-初始B细胞（P=0.005）的比例显著升高,而CD38-CD27+记忆B细胞的比例显著减低（P<0.01）,Ig D+CD27+非类别转换记忆B细胞（P<0.01）、Ig D-CD27-双阴性B细胞（P=0.002）及Ig D-CD27+类别转换的记忆B细胞（P=0.005）的比例亦显著减低。此外,DLBCL治疗结束后6～12个月外周血CD27hiCD24hiBreg的比例显著降低（P<0.01）,而CD38hiCD24hiBreg的比例有升高趋势（P=0.051）。 结

关键词： 多发性骨髓瘤   免疫微环境   调节性B细胞   白细胞介素   肿瘤坏死因子-α   干扰素-γ  

摘要： 目的：多发性骨髓瘤（Multiple myeloma, MM）是第二大常见的血液系统恶性肿瘤，研究表明，免疫微环境紊乱在MM发病机制中起到重要作用。目前对T细胞相关免疫研究较为深入，但对B细胞在MM中的作用研究较少，尤其是调节性B细胞（Regulatory B cells, Bregs）。本研究通过分析 Bregs 及五种细胞因子在MM中的表达水平及其相关性，探讨Bregs在MM中的免疫作用。　　方法：选取2021年12月至2023年12月在兰州大学第二医院就诊的MM患者共 44 例，其中新诊断多发性骨髓瘤（Newly diagnosed multiple myeloma, NDMM）组 28 例，复发/难治多发性骨髓瘤（Relapsed/refractory multiple myeloma, RRMM）组 16 例，纳入健康对照组 14 例。采用流式细胞术检测外周血及骨髓Bregs 细胞比例，流式微球捕获芯片法检测血清细胞因子白细胞介素-6 （Interleukin-6, IL-6）、IL-8、IL-10、肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α, TNF-α）及干扰素-γ（Interferon-γ, IFN-γ）浓度。采集 β2-微球蛋白（β2-Microglobulin, β2-MG）、乳酸脱氢酶（Lactate dehydrogenase, LDH）、血红蛋白（Haemoglobin, Hb）及骨髓浆细胞（Bone marrow plasma cell, BMPC）比例等临床指标，应用 R 4.2.1分析Bregs比例与细胞因子、临床指标的相关性。　　结果：1.与健康对照组相比，NDMM组和RRMM组外周血Bregs细胞比例无明显差异（P＞0.05），但两组骨髓Bregs比例均升高（P＜0.05）。进一步分析发现，NDMM组和RRMM组骨髓Bregs比例均明显高于外周血（P＜0.001），其中NDMM组骨髓和外周血Bregs比例均高于RRMM组（P＜0.05）。2.与健康对照组相比，NDMM组IL-6、IL-8、IL-10表达水平升高（P＜0.05），TNF-α、IFN-γ降低（P＜0.05）;RRMM组IL-6、IL-8水平升高（P＜0.05），TNF-α降低（P＜0.05）。RRMM组TNF-α水平高于NDMM组（P＜0.05），两组其余四种细胞因子水平无明显差异（P＞0.05）。3.对MM临床分期及危险度分层分析显示，在NDMM中， ISS Ⅰ期患者骨髓 Bregs 比例高于 ISS Ⅲ期，两两比较发现 ISS Ⅱ期 Bregs 比例与Ⅰ期及Ⅲ期均无明显差异（P＞0.05）。NDMM 标危组骨髓 Bregs 比例高于高危组（P＜0.05）。4.相关性分析表明，NDMM骨髓Bregs比例与IL-6、IL-8、IL-10水平呈正相关，与TNF-α、IFN-γ无相关性;与临床指标β2-MG、LDH呈负相关，与Hb呈正相关，与BMPC无相关性。　　结论：1. Bregs 及细胞因子 IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α在 MM 患者中异常升高或降低，提示Bregs 等免疫因素可能参与了 MM 的发生、发展。2. NDMM 组和RRMM组骨髓中的Bregs比例均高于外周血，提示检测骨髓中的Bregs比检测外周血更具价值。

关键词： 调节性B细胞   IL-10   肝细胞癌   免疫抑制  

摘要： 背景:肝恶性肿瘤是全球癌症相关死亡率的第三大主要原因,肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）是其最常见的一种病理类型。然而,肝细胞癌的免疫机制目前尚不明确。近年来,新发现的调节性B细胞（regulatory B cells,Bregs）是B淋巴细胞的一种细胞亚群,具有免疫调节作用,其负向免疫调节作用最早在小鼠模型中被证实。白细胞介素-10（Interleukin-10,IL-10）是Breg细胞发挥作用的关键介质。随着研究的深入,越来越多的实验证据表明,Breg细胞与肿瘤免疫反应密切相关,其能够抑制免疫系统发挥抗肿瘤的免疫反应,从而促进肿瘤发生和发展。然而,Breg细胞在HCC中的作用报道较少。 目的:CD19+CD24hiCD38hiB细胞是Breg细胞中的一种重要表型,已有研究表明其在乙肝、肺癌、结肠癌中发挥免疫抑制作用,但其在HCC中的作用机制尚不明确。本项研究的目的是检测HCC患者体内CD19+CD24hiCD38hiB细胞数量和血清IL-10表达水平,探索Breg细胞在肝癌患者免疫应答中的作用,并为开发以Breg细胞为靶点的治疗肝癌的新型免疫疗法打下基础。 方法:收集2022年11月至2023年12月在云南省第三人民医院就诊的病例60例,其中慢性乙型病毒性肝炎（chronic hepatitis B patients,CHB）患者15例,不同分期的乙肝相关性肝癌患者（HBV-infected HCC patients HBV-HCC）15例（其中I/II期患者5名,III期患者5名,IV期患者5名）,非乙肝性肝癌患者（HBV-uninfected HCC patients,NHBV-HCC）15例,健康人15例。采用流式细胞术检测各组外周血CD19+CD24hiCD38hiB细胞、CD19+IL-10+Breg细胞比例和肝癌患者肿瘤组织内部的肿瘤浸润CD19+CD24hiCD38hiB细胞比例。采用微量样本多指标流式蛋白定量技术（cytometric bead array,CBA）测定受试者的血清IL-10水平。收集数据,统计学方法分析各组之间的差异性及相关性。 结果:比较各组外周血中的CD19+CD24hiCD38hiB细胞频率、CD19+IL-10+Breg细胞频率和血清IL-10水平,HBV相关性肝癌患者组与非HBV相关性肝癌患者组均高于健康对照组（P<0.05）,且HBV相关性肝癌患者组均高于CHB组（P<0.05）,CHB组均高于健康对照组（P<0.05）,HBV相关性肝癌组均高于非HBV相关性肝癌组（P<0.05）;三个变量在不同分期的肝癌患者中表达不同,晚期较前中期均显著升高（P<0.05）。而且,各组内的三个变量两两之间呈线性正相关（P<0.05）。此外,同一肝癌患者肿瘤组织中的CD19+CD24hiCD38hiB细胞的数量显著高于外周血（P<0.05）,且两者之间呈线性正相关（P<0.05）;HBV相关性肝癌组肿瘤组织内的CD19+CD24hiCD38hiB细胞频率高于非HBV相关性肝癌组（P<0.05）;不同分期的肝癌患者肿瘤组织中的CD19+CD24hiCD38hiB细胞频率不同,晚期较前中期显著升高（P<0.05）。 结论:本研究表明Breg细胞频率和血清IL-10水平在肝癌患者外周血中明显升高,且在晚期患者中升高更加显著,表明Breg细胞与IL-10可能参与了肝癌的发病进程。同一肝癌患者肿瘤组织内浸润的Breg细胞的频率显著高于外周血,且与外周血的Breg细胞的频率和水平呈正相关,表明肿瘤微环境中的Breg细胞可能在肝癌疾病进展中发挥更为主要的作用,且外周血中Breg细胞的数量变化在一定程度上可以反映肿瘤内部的情况。同时,外周血中Breg细胞的频率和血清IL-10的水平呈正线性相关,表明Breg细胞可能通过分泌IL-10促进肿瘤免疫逃逸。

关键词： 妊娠期高血压疾病   妊娠高血压   子痫   调节性B淋巴细胞   白细胞介素-10   流式细胞术  

摘要： 目的探讨CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi)调节性B淋巴细胞及其分泌的细胞因子白细胞介素-10(IL-10)在妊娠期高血压疾病中的表达及意义。方法选取该院2020年9月至2021年5月收治的15例妊娠期高血压患者(妊娠期高血压组)、11例子痫前期患者(子痫前期组),另选取同期12例正常妊娠孕妇(对照组)。应用流式细胞术分别检测3组孕妇终止妊娠前外周血CD19^(+)B淋巴细胞、CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi)调节性B淋巴细胞及IL-10的表达。结果3组血清CD19+B淋巴细胞百分比比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3组血清CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi)调节性B淋巴细胞百分比两两比较,对照组>妊娠期高血压组>子痫前期组,且对照组与妊娠期高血压组、子痫前期组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。3组血清IL-10表达水平两两比较,对照组>妊娠期高血压组>子痫前期组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi)调节性B淋巴细胞及其分泌的IL-10在妊娠期高血压疾病孕妇中异常表达,可能与妊娠期高血压疾病的发生、发展相关。

关键词： 自身免疫性肝炎   标准的免疫抑制疗法   异甘草酸镁   调节性B细胞   治疗  

摘要： 目的观察应用标准免疫抑制疗法联合异甘草酸镁治疗自身免疫性肝炎(AIH)患者的疗效及其外周血调节性B细胞的变化。方法2017年4月~2022年4月我院收治的108例AIH患者被分为对照组54例和观察组54例,分别接受标准的免疫抑制治疗方案或在此治疗的基础上加用异甘草酸镁口服治疗半年。采用免疫浊度试验法检测血清免疫球蛋白,使用流式细胞仪检测外周血B细胞和调节性B细胞百分比。结果在治疗半年末,观察组生化学应答率为85.2%,显著高于对照组的66.7%(P<0.05);观察组血清ALT、AST和ALP水平分别为(51.2±7.6)U/L、(46.2±8.6)U/L和(67.4±2.4)U/L,均显著低于对照组【分别为(80.3±8.5)U/L、(75.7±6.4)U/L和(89.7±2.6)U/L,P<0.05】;两组血清IgG、IgM和血清GLO水平与对照组比无显著性统计学差异(P>0.05);观察组外周血CD19^(+)B细胞、CD19^(+)IL-10^(+)B细胞、CD19^(+)CD24^(hi)CD38^(hi)调节性B细胞和CD19^(+)CD24^(hi)CD27^(+)调节性B细胞百分比分别为(7.1±2.6)%、(0.6±0.2)%、(2.9±1.0)%和(5.7±1.3)%,均显著高于对照组【分别为(5.2±1.8)%、(0.4±0.1)%、(2.2±0.9)%和(4.3±1.2)%,P<0.05】,而CD19^(+)CD27^(+)CD38^(++)浆细胞和CD19^(+)CD27^(-)CD38^(-/+)幼稚B细胞百分比分别为(4.2±1.2)%和(56.2±7.9)%,均显著低于对照组【分别为(6.5±1.7)%和(70.5±7.4)%,P<0.05】。结论应用标准的免疫抑制联合异甘草酸镁治疗AIH患者可提高生化学应答率,有助于改善肝功能,可能与对外周血调节性B细胞具有调节作用有关。

关键词： 肿瘤浸润性B细胞   三级淋巴结构   调节性B细胞   肿瘤免疫反应  

摘要： 肿瘤浸润性B细胞在不同肿瘤中表现出相反的免疫功能。归纳总结肿瘤浸润性B细胞在抗肿瘤与促肿瘤两个方面的研究进展及机制。研究发现:B细胞的抗肿瘤作用主要依赖肿瘤特异性抗原的识别以及三级淋巴结构的形成,并指征良好的预后;B细胞的促肿瘤作用主要依赖调节性B细胞分泌的各类细胞因子,进而发挥免疫抑制作用致使细胞毒性T细胞耗竭。对肿瘤浸润性B细胞的功能研究与作用机制解析,有助于进一步理解肿瘤微环境中的免疫应答,并指导不同癌症的早期诊断与临床应用。

关键词： 器官移植   免疫耐受   排斥反应   细胞治疗   调节性T细胞   调节性B细胞   髓源性抑制细胞   嵌合抗原受体  

摘要： 排斥反应和长期使用免疫抑制药所带来的不良反应严重影响器官移植受者的生存率和生活质量,诱导免疫耐受是提高器官移植受者生存率,改善生活质量的关键。近年来,调节性细胞过继回输治疗取得了巨大的进展。本文就调节性T细胞(Treg)、髓源性抑制细胞(MDSC)以及调节性B细胞(Breg)在动物实验及临床应用中的进展进行综述,并总结调节性细胞过继回输临床上所面临的主要问题、嵌合抗原受体Treg的应用情况及免疫评估的细胞治疗概念,以期加深广大研究者对调节性细胞治疗的理解,促进调节性细胞在器官移植免疫耐受中的应用,改善器官移植效果和受者生存质量。

关键词： 调节性B细胞   白细胞介素10   慢性乙型肝炎  

摘要： 目的通过利妥昔单抗破坏小鼠HBV感染的免疫耐受状态,了解Bregs细胞在慢性乙型肝炎发病机制中的作用。方法用流式细胞仪动态观察慢性HBV感染小鼠模型中Bregs细胞的数量,同时测量血清IL-10水平、肝功能和凝血功能,并分析Bregs、IL-10和肝功能之间的相关性。结果利妥昔单抗破坏的小鼠肝脏、脾脏和外周血中Bregs细胞低于没有利妥昔单抗破坏的小鼠分别为0.54(0.49,0.71)%比1.34(1.15,1.54)%、3.19(2.90,3.57)%比4.75(3.92,5.32)%、2.50(2.29,2.64)%比3.35(3.07,3.58)%(P<0.05);与对照组相比,利妥昔单抗破坏的小鼠血清IL-10水平也较低为21.51(14.70,28.28)pg/mL比32.87(27.76,35.82)pg/mL(P<0.05)。此外,实验组中Bregs细胞的变化与IL-10呈正相关(r=0.73、0.74、0.71,P<0.05)。实验组的ALT和AST水平高于对照组;实验组的IL-10水平与ALT和AST水平之间存在负相关关系。结论Bregs细胞在慢性乙型肝炎的发病机制中通过分泌IL-10抑制炎症活动。