关键词： 胰腺癌   调节性B细胞   调节性T细胞  

摘要： 目的:探究调节性B细胞(B regulatory cells,Breg)在胰腺癌患者外周血中的表达频率及其与临床分期间的关系,并分析其与调节性T细胞(T regulatory cells,Treg)间的相关性。方法 :选取明确诊断的胰腺癌患者50例及健康对照者21例,流式细胞术检测外周血CD19^+CD24^(hi)CD38^(hi)Breg和CD4+CD25^(high)Treg细胞表达频率,并分析这两种细胞与临床分期的关联及两者间的相关性。结果:胰腺癌患者CD19^+CD24^(hi)CD38^(hi)Breg显著高于对照者(P<0.05),并与临床分期密切相关;CD4^+CD25^(high)Treg同样在胰腺癌患者中异常上调,随着临床进展而逐渐增加;CD19^+CD24^(hi)CD38^(hi)Breg和CD4^+CD25^(high)Treg细胞频率间呈正相关(P<0.05)。结论:CD19^+CD24^(hi)CD38^(hi)Breg在胰腺癌患者外周血中异常上调,并与临床分期相关,提示该细胞亚群可能在胰腺癌发生发展中发挥重要作用;Breg与Treg细胞间显著正相关性提示异常表达的Breg细胞可能通过Treg细胞参与胰腺癌的致病过程。

关键词： B淋巴细胞   红斑狼疮,系统性   白细胞介素10  

摘要： 系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是由自身免疫介导的,累及多器官、多系统的弥漫性结缔组织病,B细胞在SLE发病中起着重要作用,SLE患者体内B细胞处于高度活化状态,产生大量自身抗体。但是,最近新发现了一种特殊的、具有负向调节免疫应答功能的B细胞亚群,这种B细胞亚群通过分泌白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)、IL-35及转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)抑制致病性T细胞及其他淋巴细胞的增殖,从而抑制自身免疫性疾病中的过度炎症反应;目前将这种具有负向调节免疫应答能力的B细胞群称为调节性B细胞(regulatory B cells,Bregs)。本文就Bregs以及其在SLE中的研究进展及现状作一综述。

关键词： 过敏性鼻炎   调节性B细胞   鼠模型  

摘要： 目的:探讨调节性B细胞(regulatory B cell,Breg细胞)在过敏性鼻炎(allergic rhinitis,AR)鼠模型鼻黏膜中比例变化及意义。方法:16只BALB/C小鼠随机分为两组,每组8只。AR组使用卵清蛋白来构建AR鼠模型,对照组使用生理盐水替代。收取两组小鼠鼻黏膜组织,采用流式细胞术检测两组小鼠鼻黏膜中Breg细胞的比例。结果:在AR组与对照组小鼠鼻黏膜中均检测到Breg细胞,并且A R组中Breg细胞比例(1.15%±0.20%)低于对照组(2.30%±0.46%),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:Breg细胞比例下降在AR的发病中起重要作用。

关键词： 脓毒症   调节性B细胞   IL-10   脂多糖  

摘要： 研究背景:脓毒症是指由感染引发的全身炎症反应综合征,本质上是机体对感染性因素的反应。虽然脓毒症由感染引起,但一旦发生,其病情发展遵循自身的病理过程和规律。脓毒症病情凶险,病死率高,目前其发病机制尚未完全阐明,临床上尚无良好的治疗方案。脓毒症作为一种严重的免疫炎症反应,有报道表明,在B细胞缺陷小鼠中,由细菌感染引发的脓毒症小鼠动物模型死亡率显著升高。这提示我们,B细胞有可能通过抑制炎症反应对细菌感染引发的脓毒症起到保护作用。具有抑制免疫炎症反应功能的B细胞被称为调节性B细胞(Regulatory B cell,Breg)。目前,有多个B细胞群体被称为Breg,其中,CD5+CD1dhi Breg亚群作为较早被确定为有免疫抑制功能的细胞群体之一而被广泛研究。Breg在多种自体免疫性疾病、感染和肿瘤等疾病的发生发展过程中起着重要的调节作用,对其研究,将有助于深入阐述多种临床疾病的发病机制及治疗方案。那么,Breg细胞在脓毒症疾病的发展过程中扮演了怎样的角色?然而,迄今Breg与脓毒症的关系未有明确的研究,CD5+CD1dhi Breg亚群与脓毒症的关联未有报导。目的:研究脓毒症小鼠中脾脏免疫抑制性细胞CD5+CD1dhi Breg亚群及其免疫调节功能相关分子、免疫调节功能变化情况,Breg是否对脓毒症具有治疗意义;从而深入阐明脓毒症的发病机制,为临床上脓毒症的治疗提供依据。方法:采用腹腔注射不同剂量脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)或盲肠结扎穿刺(CLP)构建不同严重程度的小鼠脓毒症模型,取其外周血,Elisa法检测血中IFN-γ含量变化;无菌分离脾细胞或脾脏CD19+B细胞,流式细胞术检测CD5+CD1dhi Breg亚群及其相关功能分子CD25、CD86、FasL、IL-10等表达变化情况。通过流式分选脓毒症小鼠CD5+CD1dhi Breg亚群,与CD4+T细胞共培养,检测其抑制CD4+T细胞增殖情况,判断脓毒症小鼠CD5+CD1dhi Breg亚群免疫抑制功能变化。最后,将分选的IL-10表达的CD5+CD1dhiBreg亚群过继性转移至脓毒症小鼠体内,观察其对脓毒症的治疗作用。结果:1.脓毒症小鼠脾脏CD5+CD1dhi Breg亚群比例降低;***诱发的脓毒症小鼠脾脏细胞CD5+CD1dhi Breg亚群CD25、CD86、FasL表达升高,提示其处于活化状态,参与到了机体的免疫反应中;3.重度脓毒症小鼠脾脏CD5+CD1dhi Breg亚群IL-10分泌降低,轻度脓毒症小鼠脾脏CD5+CD1dhi Breg亚群IL-10分泌升高,提示重度脓毒症小鼠可能因为CD5+CD1dhi Breg亚群分泌的IL-10减少引发免疫抑制功能缺陷;4.重度脓毒症小鼠脾脏CD5+CD1dhi Breg亚群免疫抑制功能减弱;5.过继性转移CD5+CD1dhi Breg亚群后脓毒症小鼠死亡时间延迟结论:在小鼠脓毒症中,CD5+CD1dhi Breg亚群数目减少;IL-10分泌的CD5+CD1dhi Breg在重度的脓毒症模型中出现了降低;并出现了免疫抑制功能的缺陷,该缺陷可能与其Breg激活后IL-10分泌下调有关;活化后分泌IL-10的CD5+CD1dhi Breg亚群对重度脓毒症小鼠具有保护作用,可延长其生存时间。研究表明,该Breg亚群不仅参与脓毒症的发病过程,并且对脓毒症具有治疗作用。

关键词： 哮喘   儿童   调节性B细胞   调节性T细胞   白介素-10  

摘要： 目的:探讨调节性B细胞（Regulatory B cells,Breg）在儿童哮喘发病中可能的作用。方法:选取急性期哮喘患儿23例,平均年龄6.58±2.38岁,男女比例:2.83:1;同年龄健康儿童21例,平均年龄5.43±1.91岁,男女比例2.00:1;（1）采用流式细胞术检测外周血Treg、Th1、Th2、Th17、Breg比例及CD80、CD86、CD1d表达水平;（2）实时荧光定量PCR检测IFN-γ、T-bet、GATA3、IL-17A、IL-17F、RORγt、IL-10、TGF-βm RNA表达;（3）采用ELISA检测血清IL-10浓度;结果:（1）急性期哮喘患儿外周血中CD24hi CD27+Breg细胞比例明显低于正常对照组,共刺激分子CD80、CD86表达水平低于正常对照组（P<0.05）,而CD1d的表达水平有下降趋势（P>0.05）;（2）急性期哮喘患儿的CD4+CD25+Foxp3+Treg比例低于正常对照组（P<0.05）;（3）急性期哮喘患儿外周血清的IL-10浓度低于正常对照组,有统计学意义（P<0.05）;（4）急性期哮喘患儿外周血Th1细胞比例降低,而Th2及Th17细胞比例增高,均有统计学意义（P<0.05）;（5）荧光定量PCR检测观察到急性期哮喘患儿中CD19+B细胞中IL-10的表达无明显差异,而TGF-β的表达水平是升高的有统计学意义（P<0.05）;（6）急性期哮喘患儿CD4+T细胞中T-bet、IFNG、RORγt、IL-17A、IL-17F表达上调,均具有统计学意义（P<0.05）;GATA3表达未见显著性差异（P>0.05）。结论:CD24hi CD27+Breg比例下降及分泌IL-10功能减弱可能是导致急性期哮喘患儿CD4+T细胞诱导分化异常的重要因素,共刺激分子CD80、CD86表达下调可能也影响了急性期哮喘患儿CD24hiCD27+Breg的免疫调节功能。

关键词： 实验性自身免疫性脑脊髓炎   耐受性树突状细胞   调节性B细胞   程序性死亡受体   程序性死亡配体  

摘要： 研究背景及目的意义:多发性硬化(multiple sclerosis,MS)是中枢神经系统慢性炎症性自身免疫疾病,以脑和脊髓的轴突破坏及髓鞘脱失为主要病理特点。MS患者临床表现的严重程度不一,重者可致身体残疾,极大程度地降低患者的生活质量。实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)是MS基础实验研究常用的动物模型。树突状细胞(dendritic cell,DC)作为专职的抗原提呈细胞,在MS的发病过程中起重要作用。耐受性树突状细胞(tolerogenic dendritic cell,t DC)是一种特殊类型的DC,通过诱导调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的形成和促进抑炎因子的分泌,对MS具有潜在的治疗价值。程序性死亡受体(programmed death 1,PD1)和程序性死亡配体1(programmed death ligand 1,PDL1)属于B7超家族,通过发挥负性调节的作用在MS的发病过程中起一定的治疗作用。调节性B细胞(regulatory B cell,Breg)是B细胞的一种,可通过分泌抑炎因子在MS的发病过程中起抑制疾病发展的作用。1,25(OH)2D3是一种免疫调节剂,能够有效诱导t DC(VD3-DC)的形成,并将所诱导VD3-DC回输给发病的EAE小鼠后可发挥一定的治疗作用。本实验课题拟在体外先诱导骨髓来源的单核细胞成为DC,后经过具有免疫调节作用的1,25(OH)2D3诱导形成VD3-DC,检测正常DC和VD3-DC表面PDL1的表达,后将正常DC和VD3-DC回输给已发病的EAE小鼠:(1)观察回输治疗后EAE小鼠临床症状的变化;(2)检测脾脏和淋巴结T细胞表面PD1的表达;(3)检测脾脏和淋巴结B细胞中Breg的比例;(4)采用HE和LFB染色观察小鼠脊髓内炎性细胞浸润以及脱髓鞘病变情况。进而探究Breg、PD1、PDL1通过1,25(OH)2D3诱导的VD3-DC在实验性自身免疫性脑脊髓炎中的治疗作用及机制。研究方法:(1)用MOG35-55加完全弗氏佐剂(complete freund's adjuvant,CFA)的混合乳液,经背部皮下注入C57BL/6小鼠中,于免疫当天和2天后分别经腹腔注射百日咳毒素(pertussis toxin,PTX)建立EAE动物模型;(2)培养基内分别加入白介素-4(interleukin-4,IL-4)和粒细胞巨噬细胞刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)(各10ng/ml)来刺激小鼠股骨和胫骨骨髓来源的单个核细胞诱导DC。诱导DC的同时在其培养基内加入1,25(OH)2D3(10-8M)来诱导形成VD3-DC。然后分别向正常DC、VD3-DC中加入脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激24h,促进其成熟,通过流式细胞术检测DC和VD3-DC表面PDL1的表达;(3)将EAE小鼠分为三组,在DC/VD3-DC诱导的第8天,用MOG抗原孵育4小时后,将MOG抗原洗尽,分别将PBS、DC和VD3-DC经尾静脉回输给EAE小鼠(EAE小鼠诱导第10、13、16天),观察各组小鼠临床症状变化;(4)在回输治疗发病高峰期,分离经过回输治疗后的EAE小鼠脾脏和淋巴结细胞,通过流式细胞术检测细胞表面PD1的表达及Breg的比例;(5)在回输治疗发病高峰期,分离小鼠脊髓,通过苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)和卢克斯快蓝染色(luxol fast blue,LFB),观察对比治疗前后EAE小鼠脊髓炎性细胞的浸润和髓鞘脱失情况。研究结果:(1)根据我们前期实验可知,通过相同的实验方法可以成功诱导出EAE小鼠动物模型和VD3-DC。本实验通过流式细胞术检测可知与正常DC相比,VD3-DC表面PDL1的表达增多,且差异具有统计学意义;(2)与PBS对照组相比,DC和VD3-DC回输给EAE小鼠,可有效减轻其临床症状,且VD3-DC的效果更显著;(3)与PBS对照组相比,VD3-DC组和DC组脾脏和淋巴结T细胞表面PD1的表达均增加,且有统计学意义;但VD3-DC组和正常DC组之间PD1的表达差异无统计学意义;(4)与PBS对照组相比,VD3-DC组脾脏B细胞表面Breg(CD19+CD5+CD1d+)的比例显著增加,而正常DC组脾脏B细胞中Breg的比例减少,差异无统计学意义;同时VD3-DC组和正常DC组淋巴结B细胞中Breg的比例均有所增加,但差异无统计学意义;(5)根据HE和LFB染色可知,与PBS对照组相比,DC和VD3-

关键词： 浸润性乳腺癌   滤泡辅助性T细胞   调节性B细胞   浆细胞   相关性  

摘要： 第一部分乳腺肿瘤患者外周血中滤泡辅助性T细胞、调节性B细胞和浆细胞的分布及相关性目的:研究浸润性乳腺癌和乳腺纤维腺瘤患者外周血中Tfh、Bregs以及浆细胞的表达情况及意义。方法:本研究利用流式细胞计数分析Tfh、Bregs以及浆细胞在76例浸润性乳腺癌外周血中的表达情况以及三者之间的相互关系。结果:(1)浸润性乳腺癌患者外周血中Tfh的百分率明显高于健康人,其差异存在统计学意义(P=0.042)。(2)浸润性乳腺癌患者外周血中Bregs百分率明显高于乳腺纤维腺瘤患者,具有统计学差异(P=0.0365)。(3)浸润性乳腺癌患者外周血中浆细胞的表达最高,明显高于健康人组,且具有统计学意义(P=0.0355)。(4)随着TNM分级的上升,外周血中Tfh百分率也随之提高,ER、PR阳性的乳腺癌患者中Tfh百分率较阴性患者也有增加的趋势,Tfh的百分率与其他病理参数间均无明显统计学意义(P>0.05)。(5)组织学分级II级以上、淋巴结有转移、TNM分级高者以及ER、PR、HER2表达阴性患者外周血中Bregs的百分率均较高,其中,PR表达阴性患者的Bregs百分率高于表达阳性患者,具有统计学意义(P=0.049)。(6)ER阳性浸润性乳腺癌患者外周血中浆细胞百分率高于阴性患者,接近统计学意义(P=0.053),但与其他临床病理参数间均无统计学意义(P>0.05)。(7)浸润性乳腺癌患者外周血中Tfh与浆细胞之间为正相关(P=0.008,r=0.478),而Bregs与浆细胞之间为负相关(P=0.006,r=-0.369),Tfh与Bregs之间则接近负相关(P=0.054,r=-0.335)。结论:浸润性乳腺癌患者外周血表达高水平的Tfh、Bregs和浆细胞,且Tfh与Bregs存在负相关,与浆细胞存在正相关,三者之间的相互关系以及对肿瘤免疫的意义仍需进一步研究。第二部分滤泡辅助性T细胞对浸润性乳腺癌Bregs及浆细胞的影响及生物学意义目的:研究Tfh细胞或CD4+T细胞与乳腺肿瘤患者外周血中B细胞共育后,浆细胞、Bregs以及Tfh细胞的情况和相互间作用。方法:将分选获得Tfh细胞或CD4+T细胞分别与乳腺肿瘤患者外周血中分选的B细胞进行共育、培养,利用流式细胞计数分析浆细胞、Bregs、Tfh细胞的表达情况以及相互间的作用。结果:(1)乳腺纤维腺瘤患者与Tfh和No Tfh共育后,浆细胞的百分率分别为7.01±0.74%和4.36±1.01%(P=0.0258),浸润性乳腺癌患者与Tfh和No Tfh共育后,浆细胞的百分率分别为8.07±0.58%和3.40±0.44%(P=0.0004),均具有统计学意义。(2)对比No Tfh,与扁桃体Tfh细胞共育后,乳腺纤维瘤患者的Bregs的百分率明显提高,具有统计学意义(P=0.0046)。(3)CD4+T细胞与浸润性乳腺癌患者B细胞共育,测得Tfh细胞的百分率为3.635±0.16%,明显低于乳腺纤维腺瘤患者的百分率6.19±0.42%,经统计学分析,具有统计学意义(P=0.0151)。结论:相较于No Tfh,无论是乳腺纤维腺瘤还是浸润性乳腺癌患者的B细胞,Tfh可明显促进B细胞分化成浆细胞;浸润性乳腺癌中,Tfh有可能促进B细胞分化成Bregs,但需加大样本量进一步研究证实;浸润性乳腺癌来源的B细胞能减少Tfh细胞的表达,可能是乳腺癌患者外周血中高水平的Bregs对Tfh起到抑制作用。

关键词： 原发性免疫缺陷病   调节性B细胞   非同源末端连接   DNA连接酶IV  

摘要： 第一部分 DOCK8蛋白缺陷对调节性B细胞功能影响及机制研究　　背景： DOCK8免疫缺陷病（Dedicator of cytokinesis 8 deficiency）是一类以反复感染、血清 IgE 水平显著升高和嗜酸性粒细胞增多为特征的原发性免疫缺陷病;其患者具有明显的过敏症状和自身免疫性疾病表现。DOCK8 蛋白为一种细胞骨架调控分子可激活 Rho-GTP 酶从而参与淋巴细胞发育、迁移及活化等多种细胞功能。调节性 B 细胞（Regulatory B Cell;Breg）是一群可以负性调控T细胞免疫反应的B细胞;主要通过分泌IL-10在多种自身免疫病和过敏及炎症中发挥着缓解疾病的作用。本研究以DOCK8缺陷病患者及DOCK8KO小鼠为模型;拟探究DOCK8缺陷对Breg细胞发育及功能的影响。　　方法：利用流式细胞术检测 DOCK8 缺陷病患者外周血及DOCK8KO小鼠脾脏中Breg细胞的比例和数量。通过 DOCK8KO/WT骨髓嵌合体小鼠模型验证DOCK8蛋白缺陷时Breg缺陷是否固有存在。利用DOCK8KO小鼠脾脏CD4+ na?ve T细胞过继移植到CD4KO小鼠实验;明确DOCK8-/-CD4+T细胞是否影响Breg数量。再对DOCK8KO小鼠进行 IL-21替代治疗并观察其对Breg的影响。　　结果： 3名DOCK8缺陷病患儿外周血中Breg细胞的数量;与同龄正常对照相比明显下降（对照：2.271±0.1514%;n=10;DOCK8 患者：0.4240±0.2987%;n=3;P=0.0001）。DOCK8KO小鼠脾细胞Breg的数量也较WT小鼠降低;且OVA致敏后其下降更为明显（WT：1.477 ±0.1338%;n=3;KO：0.7133±0.1955%;n=3;P=0.03。WT-OVA：1.913±0.04702%;n=3;KO-OVA：0.09593±0.05788%;n=3;P<0.0001）。DOCK8KO/WT 骨髓嵌合体小鼠模型分析结果显示DOCK8-/-Breg数量下降（比例：WT：1.577±0.1618%;n=3;DOCK8KO：0.4267±0.1120%;n=3;P=0.0043;绝对数：WT：273047 ± 51773;n=3;DOCK8KO：45168±9175;n=3;P= 0.0123）;而DOCK8KO/μMT（B细胞缺陷小鼠） 骨髓嵌合体小鼠模型分析结果显示 DOCK8-/-Breg 数量正常（比例：WT：1.173±0.2849%;n=3;DOCK8KO：1.853±0.3032%;n=3;P=0.1775;绝对数：WT：509810±156319;n=3;DOCK8KO：590132 ±241800;n=3;P=0.7941）。将DOCK8KO小鼠或WT小鼠的CD4+na?ve T细胞过继移植到CD4+T细胞缺失（CD4KO）的小鼠中;经OVA或KLH免疫后检测;结果发现接受DOCK8-/-CD4+na?ve T细胞的CD4KO小鼠脾脏细胞Breg数量明显降低（WT-OVA：1.572±0.2849%;n=4;DOCK8KO-OVA：0.654±0.3523%;n=4;P=0.037;WT-KLH：1.260±0.3728%;n=4;DOCK8KO-KLH：0.2005±0.06033%;n=4;P=0.0309）。另一方面;通过给DOCK8KO小鼠补充外源性IL-21;其脾脏细胞Breg数量可恢复至正常。对于LPS诱导CD5+CD1dhi B细胞中的STAT3磷酸化水平;DOCK8KO小鼠较WT下降;而对于IL-21诱导CD5+CD1dhi B细胞中的STAT3磷酸化水平;DOCK8KO小鼠较WT无明显差异。　　结论：DOCK8 蛋白缺陷时 Breg 细胞数量及功能存在固有缺陷;且该缺陷是由于DOCK8蛋白缺失引起CD4+T分泌IL-21功能降低所导致;而外源性补充IL-21可恢复Breg数量至正常。推测其机制是由于DOCK8KO小鼠中LPS诱导STAT3磷酸化缺陷导致LPS诱导Breg分泌IL-10障碍;而IL-21可以通过诱导STAT3磷酸化从而恢复Breg分泌IL-10功能。　　第二部分 DNA连接酶IV综合征患儿临床、免疫学特征及基因突变分析　　背景：DNA 连接酶 IV 缺陷病是一种罕见的常染色体隐性遗传的原发性免疫缺陷病;由LIG4基因突变导致。临床表现为辐射敏感;生长发育迟缓;小头畸形;联合免疫缺陷;自身免疫性疾病和肿瘤等。国内外现有不到30例病例报道;尚无回复突变及其临床转归报道。该病的临床特点、分子和免疫学特征仍未完全阐明。　　方法：本研究纳入 7 名经 Sanger 测序或二代测序确诊具有 LIG4基因突变的病人;并对其临床资料进行分析。对一例疑

关键词： 艾滋病病毒I型感染者/艾滋病患者   调节性B细胞   高效联合抗反转录病毒治疗   发病机制  

摘要： 目的:本研究旨在观察调节性B细胞在HIV-1/AIDS患者外周血中的变化,探讨其在HIV-1/AIDS疾病中的发病机制和疾病发展进程中的作用。研究方法:本项研究以云南省传染病专科医院住院部和门诊部的HIV-1/AIDS患者为实验组,以医疗卫生工作者和健康体检人群为对照组。选择121例未经过抗病毒治疗的HIV-1/AIDS患者,分成两组,其中无症状感染者82人、艾滋病患者39例,接受HAART治疗并长期随访者30例(在121例HIV-1/AIDS患者中选择)。用流式细胞术(FCM)检测其外周血中CD1d hiCD5+CD19+B细胞的比例、CD4+T淋巴细胞数量、CD8+T淋巴细胞数量、CD4细胞/CD8细胞的比值,并与同期选择的36例健康对照者作比较。通过研究HIV-1/AIDS患者和健康对照者横断面队列外周血中T淋巴细胞数量和调节性B细胞比例变化,以及其中的30例HIV-1/AIDS患者在接受HAART前、后不同时期T淋巴细胞数量和Bergs比例的表达水平变化,并且观察30例HIV-1/AIDS患者接受HAART长期随访过程中艾滋病的纵向进展和抗病毒治疗疗效的关系,统计分析组内各变量间的相关性。结果:HIV-1/AIDS患者外周血中CD4细胞数量显著低于健康对照组(P<0.001),AIDS病人的CD4细胞数量显著低于HIV-1感染组(P<0.001)。HIV-1/AIDS患者外周血中CD8细胞数量显著低于健康对照组(P<0.001),而AIDS病人的CD8细胞数量与HIV-1感染者相比无显著差异(P=0.709)。HIV-1/AIDS患者外周血中CD4细胞/CD8细胞比值显著低于健康对照组(P<0.001),AIDS病人的CD4细胞/CD8细胞比值显著低于HIV-1感染者(P<0.001)。HIV-1/AIDS患者外周血中CD1d hiCD5+CD19+B细胞的比例显著高于健康对照组(P<0.01),AIDS患者的外周血中的CD1d hiCD5+CD19+B细胞的比例显著高于HIV-1感染者(P<0.001)。并且HIV-1/AIDS患者外周血中CD1d hiCD5+CD19+B细胞的比例与CD4细胞数量(r=-0.732,r2=0.536,P<0.001)和CD8细胞数量(r=-0.253,r2=0.064,P=0.011)均呈负相关关系,或者与CD4细胞/CD8细胞的比值(r=-0.643,r2=0.414,P<0.001)呈负相关关系。30例接受HAART患者在治疗前、治疗后的2周、1个月、2个月、3个月、6个月CD1d hiCD5+CD19+B细胞的比例均与同时期的CD4细胞数量、CD8细胞数量呈负相关关系,并且在HAART治疗后CD4细胞均值有上升趋势,CD1d hiCD5+CD19+B细胞比例均值有下降趋势。结论:HIV-1/AIDS患者外周血中CD1d hiCD5+CD19+B细胞显著升高,并随着艾滋病的进展而明显增加,经过抗病毒治疗后下降。CD1d hiCD5+CD19+B细胞可能在艾滋病的免疫衰竭中发挥作用,促进了艾滋病的发展进程;针对性降低HIV-1/AIDS患者的CD1d hiCD5+CD19+B细胞比例可能有利于抑制艾滋病的发展进程。

关键词： 红斑狼疮   系统性   调节性B细胞   CD4+T淋巴细胞亚群   相关性  

摘要： 目的:检测并分析不同活动期SLE患者外周血中的CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞、Th17细胞、Treg细胞与细胞因子IL-10的水平;并探讨CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞、细胞因子IL-10与Th17、Treg细胞的相关性。方法:选择符合入组条件的初治SLE患者50例,并选取与SLE患者性别、年龄相近的18例正常人作为对照组,并对选入组的SLE患者进行SLEDAI评分,按评分结果分为稳定期组、轻度活动组、中度活动组、重度活动组。收集所有实验对象空腹外周血,采用流式细胞术（flow cytometry,FCM）检测CD19+CD24hiCD38hiBreg、Treg、Th17细胞水平;同时留取所有实验对象血清,应用酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）测定细胞因子IL-10水平。所有数据结果均用SPSS软件进行分析处理。结果:***患者血清中IL-10水平（408.03±211.25）pg/ul与正常对照组（104.29±30.26）pg/ul相比存在明显增高（p<0.05）;稳定期组（185.02±69.27）pg/ul、轻度活动组（306.98±65.09）pg/ul、中度活动组（431.37±127.50）pg/ul、重度活动组（625.61±201.27）pg/ul四组SLE患者血清中IL-10水平有差异（p<0.05）。SLE患者血清中IL-10与SLEDAI评分呈正相关（r=0.779,p<0.01）。***患者外周血中CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞水平（1.66±1.61）个/ul与正常对照组（6.96±3.58）个/ul相比有明显减少（p<0.05）;稳定期组（3.58±2.20）个/ul、轻度活动组（1.85±1.32）个/ul、中度活动组（1.10±0.56）个/ul、重度活动组（0.66±0.46）个/ul四组SLE患者外周血中CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞水平比较差异有统计学意义（p<0.05）。SLE患者外周血中CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞与SLEDAI评分呈负相关（r=-0.703,p<0.01）;与IL-10呈负相关（r=-0.593,p<0.01）。***患者外周血中Th17细胞的水平（40.76±48.37）个/ul与对照组（6.45±3.98）个/ul相比明显增高（p<0.05）,Treg细胞的水平（4.94±4.19）个/ul与对照组（28.21±15.04）个/ul相比明显减少（p<0.05）;Th17细胞的水平在SLE疾病稳定期组为（10.49±6.52）个/ul、轻度活动组（20.91±16.44）个/ul、中度活动组（42.61±31.50）个/ul、重度活动组（76.65±68.90）个/ul四组有差异（p<0.05）;Treg细胞的水平在SLE疾病稳定期组为（10.08±5.23）个/ul、轻度活动组（5.74±1.83）个/ul、中度活动组（3.70±2.67）个/ul、重度活动组（1.83±2.00）个/ul四组比较有差异（p<0.05）。SLE患者外周血中的Th17细胞与SLEDAI评分呈正相关（r=0.756,p<0.01）;Treg细胞与SLEDAI评分呈负相关（r=-0.733,p<0.01）。Th17细胞与CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞呈负相关（r=-0.410,p<0.01）;Treg细胞与CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞呈正相关（r=0.568,p<0.01）。Th17细胞与IL-10呈正相关（r=0.607,p<0.01）;Treg细胞与IL-10呈负相关（r=-0.477,p<0.01）。结论:CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞、IL-10均参与了SLE发病,其参与机制极有可能涉及了调节Th17、Treg细胞的平衡。