关键词： 肺癌   补肾益肺解毒法   调节性T细胞   Foxp3   B7-H3蛋白   小鼠  

摘要： 目的:研究补肾益肺解毒法对Lewis肺癌小鼠CD4^+CD25^+调节性T细胞(T regulatory cell,Treg)、转录因子Foxp3及共刺激因子B7-H3表达的影响。方法:建立32只6~8周龄C57BL/6雄性小鼠Lewis肺癌细胞皮下移植瘤模型后,将32只造模后小鼠随机分为模型组、中药组、化疗组及综合组,每组各8只,单笼饲养。模型组以0.4 m L生理盐水灌胃14 d,并分别在第1天、第3天、第5天腹腔注射生理盐水1 m L;中药组以0.4 m L中药液灌胃14 d,并分别在第1天、第3天、第5天腹腔注射生理盐水1 m L;化疗组以0.4 m L生理盐水灌胃14 d,分别在第1天、第3天、第5天腹腔注射DDP溶液1 m L;综合组以0.4 m L中药液灌胃14 d,在第1天、第3天、第5天腹腔注射DDP溶液1 m L。给予药物干预14d后,观察小鼠的一般状况、饲料消耗量、体质量、去瘤体质量、移植瘤质量等,流式细胞术检测各组小鼠外周血和移植瘤CD4^+CD25^+Treg细胞的比例、Foxp3以及B7-H3的含量。结果:补肾益肺解毒法可改善肺癌小鼠的行为体征,增加饲料消耗量、体质量和去瘤体质量,减少移植瘤重量,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。补肾益肺解毒法治疗可显著降低Lewis肺癌小鼠外周血和移植瘤CD4^+CD25^+Treg细胞、Foxp3以及B7-H3的水平,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾益肺解毒法通过降低CD4^+CD25^+Treg细胞、Foxp3以及B7-H3的水平增强机体的抗肿瘤免疫应答发挥抑瘤作用。

关键词： 系统性红斑狼疮   B细胞活化因子   调节性T细胞   白细胞介素-35  

摘要： 目的研究B细胞活化因子(B cell activation factor of the tumor necrosis factor family,BAFF)对调节性T细胞(Tregs)分泌抑制性细胞因子白细胞介素-35(interleukin-35,IL-35)的影响,验证系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)中BAFF对免疫反应的双向调节机制。方法磁珠分选狼疮模型鼠Tregs,经BAFF刺激后采用qRT-PCR及流式细胞术检测其分泌IL-35浓度。比较正常对照鼠、狼疮模型鼠及经尾静脉注射抗BAFF蛋白后狼疮模型鼠脾脏Tregs频率及分泌IL-35情况。结果BAFF能够有效促进Tregs分泌IL-35。相对于正常对照鼠,狼疮模型鼠(血清中BAFF升高)脾脏Tregs分泌较高浓度的IL-35,而中和其循环中BAFF后,Tregs分泌IL-35减少。结论在SLE发病机制中,BAFF不仅是重要的致病因素,还能够通过促进Tregs细胞分泌IL-35发挥负向免疫调节效应。

关键词： B淋巴细胞亚群   实体器官移植   调节性   自身免疫性疾病   移植物排斥反应   分泌细胞因子   免疫调节功能   移植免疫耐受  

摘要： B淋巴细胞被人们熟知是通过产生抗体、向T淋巴细胞提呈抗原、分泌细胞因子从而在免疫应答中发挥重要作用.然而近年来,越来越多的研究发现了一群特定的具有调节功能的B淋巴细胞亚群,即所谓的调节性B淋巴细胞（regulatory B cells,Breg细胞）.在自身免疫性疾病、慢性感染、肿瘤以及移植物排斥反应等以免疫系统失衡为特征的疾病中,Breg细胞具有免疫调节功能,因而扮演着重要的角色.在小鼠器官移植模型中,Breg细胞表现出了参与器官移植免疫耐受的诱导[1-2].与鼠类动物相似,在人类中也发现了具有免疫调节作用的B淋巴细胞.在过去十年中尽管已有众多有关Breg细胞的文章陆续发表,然而有关Breg细胞的问题尚不完全清楚.本文拟就Breg细胞的发现,目前对Breg细胞已知的表型鉴定,Breg细胞在实体器官移植中可能的作用做一综述.

关键词： 梅毒患者   CD19+CD24hiCD38hiB细胞   CD19+CD24hiCD27+B细胞   苄星青霉素  

摘要： 目的探讨未经治疗的一期梅毒、二期梅毒和隐性梅毒患者外周血调节性B细胞亚群(CD19+CD24hi CD38hi B细胞、CD19+CD24hi CD27+B细胞)的百分比,及其在治疗后的变化情况。方法根据《梅毒诊疗指南(2014)》标准,2016年9月至2017年3月,在北京大学地坛医院教学医院皮肤性病科门诊的43例梅毒患者及8例健康对照。在治疗前及苄星青霉素治疗后2个月进行随访,对每次随访患者利用流式细胞技术检测外周血CD19+CD24hi CD38hi B细胞、CD19+CD24hi CD27+B细胞的百分比。结果 43例梅毒患者中,一期梅毒13例,二期梅毒16例,隐性梅毒14例。与健康对照组相比,未经治疗的一期、二期梅毒患者外周血CD19+CD24hi CD38hi B细胞百分比显著升高,CD19+CD24hi CD27+B细胞百分比显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);隐性梅毒患者与健康对照之间均无明显差异(P>0.05)。治疗后,一期梅毒、二期梅毒及隐性梅毒患者外周血CD19+CD24hi CD38hi B细胞百分比均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);而CD19+CD24hi CD27+B细胞百分比均无明显改变,差异均无统计学意义(P>0.05)。相关性分析结果:梅毒患者外周血CD19+CD24hi CD38hi B细胞百分比与TRUST滴度呈正相关(P<0.01);CD19+CD24hi CD27+B细胞百分比与TRUST滴度呈负相关(P<0.01)。结论CD19+CD24hi CD38hi B细胞有可能是一期、二期梅毒患者的重要免疫学变化指标之一。苄星青霉素治疗能快速有效降低一期、二期梅毒患者外周血CD19+CD24hi CD38hi B细胞百分比。

关键词： Hashimoto's thyroiditis   insulin resistance   islet function   regulatory B cell  

摘要： Hashimoto's thyroiditis (HT) is typically associated with insulin resistance. The aim of the present study was to investigate the role of regulatory B cells (Bregs) in insulin resistance in patients with HT. A total of 52 female patients with type I HT and 35 matched healthy volunteers were enrolled. Demographic and laboratorial data were collected. A 75 g oral glucose tolerance test was performed on each subject. Flow cytometry was performed to evaluate the levels of CD19(+)CD24(hi)CD38(hi) Bregs in peripheral blood. Patients with HT exhibited significantly higher postprandial insulin levels (P<0.01), but normal glucose levels. The level of CD19(+)CD24(hi)CD38(hi) Bregs in patients with HT decreased significantly (P=0.0002) compared with the controls. Pearson's linear correlation model revealed a significant, negative association between anti-thyroid peroxidase antibodies (TPOAb) and homeostasis model assessment of beta cell (r=-0.313, P=0.014). The same correlation model revealed a significant, negative association between TPOAb and the disposition index (DI;r=-0.305, P=0.017), and between anti-thyroglobulin antibodies and DI (r=-0.321, P=0.013). Patients with a decreased ratio of CD19(+)CD24(hi)CD38(hi) Bregs to CD19(+) lymphocytes exhibited higher levels of total cholesterol and low-density lipoprotein cholesterol. A decrease in the ratio of CD19(+)CD24(hi)CD38(hi) Bregs to lymphocytes was a significant independent risk factor for hyperinsulinemia (odds ratio=1.372, P=0.035). A decrease in peripheral blood CD19(+)CD24(hi)CD38(hi) Bregs is associated with insulin resistance in HT patients, and was an independent risk factor for postprandial hyperinsulinemia. The present study provided a novel insight into the development of effective therapeutic strategies targeting immune mechanisms associated with HT.

关键词： 类风湿关节炎   B细胞   调节性   免疫调节功能   T细胞活化   高亲和力   自身抗体   免疫耐受  

摘要： 长期以来，在类风湿关节炎（RA）中B细胞通常被认为是产生高亲和力、特异性的自身抗体并诱导T细胞活化的致病细胞之一。近年来，一类具有免疫调节功能的B细胞，在RA的病因学研究中受到越来越多的关注。调节性B细胞是一类发挥负性调控功能并维持机体免疫耐受的B细胞，

关键词： 脓毒症   调节性B细胞   预后   老年  

摘要： 目的 探讨外周血CD20＋CD24hi CD38hi调节性B细胞（Bregs）水平对老年脓毒症患者预后的评估价值.方法 采用前瞻性研究方法,选择2016年4月至2017年2月入住同济大学附属东方医院急诊内科和急诊重症加强治疗病房（ICU）符合Sepsis-3诊断标准、年龄〉65岁的老年脓毒症患者.常规检测降钙素原（PCT）、C-反应蛋白（CRP）和动脉血乳酸（Lac）水平,并根据24 h内指标最差值计算急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ（APACHEⅡ）评分和序贯器官衰竭评分（SOFA）;于入院1、3、7 d采用流式细胞仪检测外周血CD20＋CD24hi CD38hi Bregs表达水平.根据28 d预后将患者分为存活组和死亡组,比较两组各指标的差异;对差异有统计学意义的变量进行二元logistic回归分析;用Spearman法分析Bregs与各指标的相关性;用受试者工作特征曲线（ROC）分析Bregs对老年脓毒症患者预后的评估价值.结果 入选58例患者,其中男性38例,女性20例;年龄（79.91±7.97）岁;脓毒症32例,脓毒性休克26例;死亡35例,病死率为60.3%.死亡组APACHEⅡ评分、SOFA评分显著高于存活组〔APACHEⅡ（分）：18.14±4.52比14.91±3.56,SOFA（分）：8.80±4.56比6.35±3.00,均P〈0.05〕,1、3、7 d外周血Bregs表达水平均显著低于存活组〔个/μL：0.70（0.20,1.40）比1.50（0.70,2.20）,0.54（0.20,1.00）比1.42（1.10,2.12）,0.25（0.10,0.50）比0.80（0.50,1.00）,均P〈0.05〕.老年脓毒症患者入院1 d外周血Bregs与APACHEⅡ评分呈显著负相关（r=-0.351,P=0.007）,与PCT、CRP、Lac和SOFA评分无相关性.二元logistic回归分析显示,Bregs〔优势比（OR）=1.865,P=0.028〕和APACHEⅡ评分（OR=0.853,P=0.026）是影响老年脓毒症患者预后的独立危险因素.ROC曲线分析显示,入院1、3、7 d Bregs和APACHEⅡ评分对老年脓毒症患者预后的预测价值均较高,ROC曲线下面积（AUC）和95%可信区间（95%CI）为0.842（0.647~0.954）、0.770（0.564~0.911）、0.888（0.703~0.977）和0.855（0.661~0.961）,均P〈0.01;入院7 d Bregs的AUC最大,截断值为0.50个/μL时敏感度为72.73%,特异度为86.67%.结论 外周血CD20＋CD24hi CD38hi Bregs表达水平在一定程度上可以用于判断老年脓毒症患者的预后.

关键词： CD19+CD24highCD27+调节性B细胞   IL-10传染性单核细胞增多症   儿童  

摘要： 目的探讨调节性B细胞(Breg)在儿童传染性单核细胞增多症(IM)中的作用。方法应用流式细胞术检测53例IM患儿外周血T淋巴细胞亚群,CD19^+CD24^(high)CD27^+Breg细胞表达情况。用荧光定量PCR检测血浆EBV-DNA。同时用ELISA方法分析血清IL-10、TGF-β分泌水平。以50例健康儿童为对照。结果 IM急性期组与对照组比较CD3^+CD4^+T细胞明显降低(t=19.99,P<0.01),CD3^+CD8^+T细胞明显增高(t=17.47,P<0.01),CD4/CD8比值降低(t=16.79,P<0.01)。IM恢复期组与急性期组比较,CD3^+CD4^+T细胞明显增高(t=21.54,P<0.01),CD3^+CD8^+T细胞明显降低(t=17.47,P<0.01),CD4/CD8比值增高(t=16.68,P<0.01)。IM急性期组CD19^+CD24^(high)CD27^+Breg细胞表达水平13.4%±1.87%,与对照组比较显著降低,差异有统计学意义(t=14.61,P<0.01)。IM急性期组CD19^+CD24^(high)CD27^+Breg细胞表达水平与EBV-DNA病毒载量呈负相关(r=-0.52,P<0.01)。经治疗后IM恢复期组CD19^+CD24^(high)CD27^+Breg细胞表达水平18.3%±2.11%与IM急性期组比较显著增高,差异有统计学意义(t=12.61,P<0.01)。IM急性期组血清IL-10较对照组明显降低,差异有统计学意义(t=11.50,P<0.01)。治疗后IM恢复期组IL-10较IM急性期组明显增高,差异有统计学意义(t=9.40,P<0.01)。结论IM急性期存在明显免疫失衡,即CD3^+CD8^+T细胞增多,CD4/CD8比值降低,可能与Breg细胞表达减低导致的免疫抑制功能不足有关。

关键词： 免疫性血小板减少症   调节性T细胞   B细胞活化因子  

摘要： 目的了解B细胞活化因子(BAFF)及调节性T(Treg)细胞在免疫性血小板减少症(ITP)发病中的作用。方法采集34例ITP及28例健康对照者外周血,用流式细胞术检测外周血Treg细胞数,ELISA检测血浆BAFF水平。结果 ITP+患者外周血Treg细胞/CD4细胞比值低于对照者[(1.55±vs1.13)%(2.73±0.83)%,P<0.01],而血浆BAFF水平高于对照者[(1 426.14±vs1 280.67)μg/L(644.29±307.97)μg/L,P<0.01]。结论 BAFF与Treg细胞可能存在相互作用,从而参与ITP发病。

关键词： T淋巴细胞亚群细胞   IL-10   手足口病   儿童  

摘要： 目的探讨调节性B细胞(Breg)在儿童手足口病中的作用,为临床治疗提供参考依据。方法选取2015年4月-2015年7月就诊的手足口病患儿71例为观察组,另选取50例健康儿童为对照组,治疗康复后的62例为康复组;用流式细胞术检测手足口病患儿外周血T淋巴细胞亚群细胞表达情况。同时用ELISA方法分析血清白细胞介素(IL-10)、转化生长因子-β(TGF-β)分泌水平。结果手足口病患儿T淋巴细胞亚群CD_3^+CD_8^+CD_(28)^+细胞毒T细胞的表达,重症患儿和普通型患儿组较对照组增高(P<0.01),重症患儿又显著高于普通型患儿组(P<0.01);相关性分析显示,手足口病患儿Breg细胞表达水平与血清IL-10呈显著正相关(r=0.75,P<0.01),与血清TGF-β无相关性,与CD_3^+CD_8^+CD_(28)^+细胞毒T细胞表达水平呈显著性负相关(r=-0.74,P<0.01)。结论手足口病患儿存在显著免疫失衡,即CD_3^+CD_8^+CD_(28)^+细胞毒T细胞显著增多,可能与Breg细胞表达减低导致的免疫抑制功能不足有关;Breg细胞表达水平分析有助于手足口病的诊断、进展和预后评估。