关键词： 弥漫大B细胞淋巴瘤   调节性T细胞   犬尿氨酸   R-CHOP  

摘要： 目的:犬尿氨酸（Kynurenine,Kyn）及调节性T细胞（Regulatory T cells,Treg）等能抑制抗肿瘤免疫反应,促进肿瘤细胞的存活、生长,远处迁移和浸润转移,并且参与机体的免疫编辑过程,支持癌细胞逃离人类免疫系统[1-3]。本研究通过检测弥漫大B细胞淋巴瘤患者外周血中Kyn的表达水平及Treg的比例,分析Kyn的表达水平及Treg的比例与弥漫大B细胞淋巴瘤临床病理特征的关系,初步探讨外周血Kyn及Treg对R-CHOP治疗弥漫大B细胞淋巴瘤的影响。方法:收集2017年02月至2017年12月首次就诊于四川省肿瘤医院的未接受任何抗肿瘤治疗的32例弥漫大B细胞淋巴瘤患者初治时、化疗2周期及化疗4周期后外周血及完整临床病例资料,所有入组患者均为初治、CD20阳性、治疗周期数≥3周期。从所收集的外周血中检测Kyn及Treg的表达水平,首先采用流式细胞术检测所收集的外周血中Treg的比例,再采用比色法检测外周血中Kyn的表达水平,初步分析Kyn的表达水平及Treg的比例与弥漫大B细胞淋巴瘤临床病理特征、R-CHOP治疗弥漫大B细胞淋巴瘤的影响。采用SPSS22.0软件进行统计分析,计量资料均采用x±s表示。两组计量资料比较服从正态分布的使用两独立样本T检验,不服从正态分布的使用Wilcoxon符号秩和检验,治疗前后的比较采用配对检验,变化量服从正态分布的采用配对T检验,不服从正态分布的采用相关样本秩检验。分类计数资料采用频数或率表示,比较采用Pearson卡方检验,样本量小于40时采用Fisher确切概率法。结果:（1）从入组的32例弥漫大B细胞淋巴瘤初治患者组外周血中检测到Kyn的平均水平为4.89±0.82,较健康成年人组外周血中Kyn的平均水（4.43±0.49）高,差异有统计学意义（t=2.459,p=0.018）;从入组的32例弥漫大B细胞淋巴瘤初治患者组外周血中检测到Treg的平均水平为5.33±2.68,较健康成年人组外周血中Treg的平均水平（0.58±0.93）高,差异有统计学意义（t=8.955,p<0.001）。（2）32名弥漫大B细胞淋巴瘤患者化疗前后外周血中Kyn平均水平差异有统计学意义（t=2.090,p=0.041）;化疗后外周血中Treg的平均水平明显低于化疗前外周血中Treg的平均水平,差异有统计学意义（t=2.037,p=0.046）。（3）经过4周期化疗后,32名患者中达到完全缓解（CR）的有9人,占28.13%,达到部分缓解（PR）的有16人,占50.00%,治疗无效的有7人,占21.87%。比较不同预后患者的外周血中Kyn的表达水平及Treg的比例情况显示,化疗后CR组患者外周血中Kyn表达水平及Treg的比例明显低于化疗无效组患者外周血中Kyn表达水平及Treg的比例,差异均有统计学意义（p=0.005,p=0.001）;化疗后PR组患者外周血中Kyn的表达水平及Treg的比例明显低于治疗无效组患者外周血中Kyn表达水平及Treg的比例,差异有统计学意义（p=0.046,p=0.032）;化疗后CR组患者外周血中Kyn的表达水平及Treg的比例与PR组患者外周血中的Kyn的表达水平及Treg的比例相比较,差异有统计学意义（p=0.007,p=0.046）。（4）Kyn的表达水平及Treg的比例之间具有相关性,P<0.05,相关性具有显著性。（5）Kyn的表达水平及Treg的比例与患者的年龄、临床分期、Hans分型、B症状、NCCN-IPI评分、LDH、双表达及Ki-67等临床特征无相关性。结论:（1）Kyn及Treg在DLBCL患者外周血中表达升高与R-CHOP治疗弥漫大B细胞淋巴瘤的疗效具有一定的相关性。（2）Kyn及Treg在弥漫大B细胞淋巴瘤患者外周血中的表达越低,其运用R-CHOP方案治疗疗效越好,可推测Kyn及Treg可以预测R-CHOP治疗DLBCL患者的疗效。

关键词： 复方苦参注射液   晚期肺癌   调节性T、B淋巴细胞  

摘要： 目的探讨复方苦参注射液联合化疗对晚期肺癌患者外周血调节性T、B淋巴细胞的影响。方法收集我院肿瘤科晚期肺癌患者46例,随机分为复方苦参注射液联合化疗组(A组)、单纯化疗组(B组)各23例,观察并比较两组治疗前后外周血CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(Tregs)和CDl9(+)IL-10(+)调节性B淋巴细胞(Bregs)的变化特征。结果化疗前两组患者Tregs、Bregs水平差异无统计学意义(P>0.05);与治疗前比较,两组Tregs均较治疗前有所下降,差异有统计学意义(P<0.05),Bregs变化差异无统计学意义(P>0.05);A组治疗后Tregs水平高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论晚期肺癌患者化疗后免疫功能降低,化疗时配合复方苦参注射液能提高机体免疫力,改善患者生活质量。

关键词： 狼疮性肾炎   中医证型   调节性B细胞   细胞因子  

摘要： 目的:研究狼疮性肾炎(LN)患者中医证型与外周血IFN-α、BlyS水平变化及B淋巴细胞活化的关系。方法:以流式细胞仪检测外周血CD19^+CD69^+水平及CD19^+AV凋亡率(AV),以双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法测定LN患者外周血中Bly S和IFN-α水平。结果:阴虚内热型和热毒炽盛型LN患者CD19^+CD69^+、CD19^+AV水平显著高于健康组(P<0.01);热毒炽盛型LN患者CD19^+CD69^+、CD19^+AV显著高于阴虚内热型(P<0.01)。结论:阴虚内热型和热毒炽盛型LN患者B淋巴细胞活化率及凋亡率均增多。

关键词： 急性B淋巴细胞白血病   T淋巴细胞   调节机制   酶联免疫吸附试验  

摘要： 目的分析儿童急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)调节性T淋巴细胞变化及调节机制。方法在2016年2月23日~2017年2月23日期间选取50例健康体检者(对照组)、50例急性B淋巴细胞白血病患儿(观察组)为实验对象,对两组受检者均进行分离外周血CD4^+T细胞、荧光定量PCR(RT-PCR、REAL-TIME PCR、总RNA定量和提取、RT-PCR产物鉴定)、酶联免疫吸附试验、流式细胞术检测,随后对比两组受检者各项检测结果。结果观察组患儿的CD28/CD4^+Foxp3^+(524.86±28.42)、ICOS/CD4^+CD25^(high)Foxp3^+(725.69±15.74)、TGF-βRII/CD4^+(61.75±10.08)、Mtge-β(58.44±10.85)、IL-35p35(326.84±35.46)、IL-35EB13(128.56±12.74)、TGF-β(81.46±5.43)、IL-10(135.75±12.75)、ICOS^+/CD4^+CD25^(high)Foxp3(3.86±1.75)%、Foxp3(812.43±56.32)、CD4^+CD25^(high)Foxp3(9.85±2.45)%均高于对照组健康体检者的CD28/CD4^+Foxp3^+(158.33±21.06)、ICOS/CD4^+CD25^(high)Foxp3^+(352.12±10.03)、TGF-βRII/CD4^+(28.42±5.89)、Mtge-β(23.17±5.33)、IL-35p35(154.28±26.31)、IL-35EB13(48.31±6.52)、TGF-β(29.51±6.38)、IL-10(24.91±5.22)、ICOS^+/CD4^+CD25^(high)Foxp3(2.45±0.85)%、Foxp3(322.41±18.75)、CD4^+CD25^(high)Foxp3(4.12±1.75)%(P<0.05)。结论导致急性B淋巴细胞白血病患儿出现亚群比例失调的主要原因为转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、分化群28(Cluster of Differentiation 28)、ICOS过度活化。

关键词： 复方   苦参/投药和剂量   注射剂   癌   非小细胞肺/药物疗法   癌   非小细胞肺/免疫学   T淋巴细胞   B淋巴细胞  

摘要： 【目的】探讨复方苦参注射液联合化疗对晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血调节性T、B淋巴细胞的影响。【方法174例晚期NSCLC患者随机分为了两组，各37例。对照组给予化疗治疗，观察组在对照组基础上给予复方苦参注射液治疗。21d为1个化疗周期，治疗2个周期后评估两组疗效及化疗毒副作用，比较其相关指标变化。【结果】观察组治疗总有效率为72．97％（27／37），略高于对照组的56．76％（21／37），但差异无显著性（P〉0．05）；观察组化疗后CD4＋CD25＋调节性T细胞、CD19＋CD5＋B淋巴细胞占CD19＋B细胞比例、CD19＋CD5＋CD1d＋Breg细胞占CDαB细胞比例、白介素10（IL-10）、血浆转化生长因子α（TGF-α）水平低于对照组，CD8＋CD28＋T细胞水平高于对照组（P〈0．05）；观察组化疗后癌胚胎抗原（CEA）、碳水化合物抗原（CA125）、细胞角质蛋白19（CYFRA21—1）水平低于对照组，且差异有显著性（P〈0．05）；两组胃肠道反应、血小板减少、脱发发生率比较差异无显著性（P〉0．05），观察组Ⅲ～Ⅳ级白细胞减少的几率为10．81％（4／37），低于对照组的32．43％（13／37）（P〈0．05）。【结论】复方苦参注射液联合化疗治疗晚期NSCLC患者可改善外周血调节性T、B淋巴细胞免疫功能，降低血清肿瘤标志物，减少化疗毒副反应。

关键词： 肺癌   补肾益肺解毒法   调节性T细胞   Foxp3   B7-H3蛋白   小鼠  

摘要： 目的:研究补肾益肺解毒法对Lewis肺癌小鼠CD4^+CD25^+调节性T细胞(T regulatory cell,Treg)、转录因子Foxp3及共刺激因子B7-H3表达的影响。方法:建立32只6~8周龄C57BL/6雄性小鼠Lewis肺癌细胞皮下移植瘤模型后,将32只造模后小鼠随机分为模型组、中药组、化疗组及综合组,每组各8只,单笼饲养。模型组以0.4 m L生理盐水灌胃14 d,并分别在第1天、第3天、第5天腹腔注射生理盐水1 m L;中药组以0.4 m L中药液灌胃14 d,并分别在第1天、第3天、第5天腹腔注射生理盐水1 m L;化疗组以0.4 m L生理盐水灌胃14 d,分别在第1天、第3天、第5天腹腔注射DDP溶液1 m L;综合组以0.4 m L中药液灌胃14 d,在第1天、第3天、第5天腹腔注射DDP溶液1 m L。给予药物干预14d后,观察小鼠的一般状况、饲料消耗量、体质量、去瘤体质量、移植瘤质量等,流式细胞术检测各组小鼠外周血和移植瘤CD4^+CD25^+Treg细胞的比例、Foxp3以及B7-H3的含量。结果:补肾益肺解毒法可改善肺癌小鼠的行为体征,增加饲料消耗量、体质量和去瘤体质量,减少移植瘤重量,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。补肾益肺解毒法治疗可显著降低Lewis肺癌小鼠外周血和移植瘤CD4^+CD25^+Treg细胞、Foxp3以及B7-H3的水平,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾益肺解毒法通过降低CD4^+CD25^+Treg细胞、Foxp3以及B7-H3的水平增强机体的抗肿瘤免疫应答发挥抑瘤作用。

关键词： 系统性红斑狼疮   B细胞活化因子   调节性T细胞   白细胞介素-35  

摘要： 目的研究B细胞活化因子(B cell activation factor of the tumor necrosis factor family,BAFF)对调节性T细胞(Tregs)分泌抑制性细胞因子白细胞介素-35(interleukin-35,IL-35)的影响,验证系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)中BAFF对免疫反应的双向调节机制。方法磁珠分选狼疮模型鼠Tregs,经BAFF刺激后采用qRT-PCR及流式细胞术检测其分泌IL-35浓度。比较正常对照鼠、狼疮模型鼠及经尾静脉注射抗BAFF蛋白后狼疮模型鼠脾脏Tregs频率及分泌IL-35情况。结果BAFF能够有效促进Tregs分泌IL-35。相对于正常对照鼠,狼疮模型鼠(血清中BAFF升高)脾脏Tregs分泌较高浓度的IL-35,而中和其循环中BAFF后,Tregs分泌IL-35减少。结论在SLE发病机制中,BAFF不仅是重要的致病因素,还能够通过促进Tregs细胞分泌IL-35发挥负向免疫调节效应。

关键词： B淋巴细胞亚群   实体器官移植   调节性   自身免疫性疾病   移植物排斥反应   分泌细胞因子   免疫调节功能   移植免疫耐受  

摘要： B淋巴细胞被人们熟知是通过产生抗体、向T淋巴细胞提呈抗原、分泌细胞因子从而在免疫应答中发挥重要作用.然而近年来,越来越多的研究发现了一群特定的具有调节功能的B淋巴细胞亚群,即所谓的调节性B淋巴细胞（regulatory B cells,Breg细胞）.在自身免疫性疾病、慢性感染、肿瘤以及移植物排斥反应等以免疫系统失衡为特征的疾病中,Breg细胞具有免疫调节功能,因而扮演着重要的角色.在小鼠器官移植模型中,Breg细胞表现出了参与器官移植免疫耐受的诱导[1-2].与鼠类动物相似,在人类中也发现了具有免疫调节作用的B淋巴细胞.在过去十年中尽管已有众多有关Breg细胞的文章陆续发表,然而有关Breg细胞的问题尚不完全清楚.本文拟就Breg细胞的发现,目前对Breg细胞已知的表型鉴定,Breg细胞在实体器官移植中可能的作用做一综述.

关键词： 梅毒患者   CD19+CD24hiCD38hiB细胞   CD19+CD24hiCD27+B细胞   苄星青霉素  

摘要： 目的探讨未经治疗的一期梅毒、二期梅毒和隐性梅毒患者外周血调节性B细胞亚群(CD19+CD24hi CD38hi B细胞、CD19+CD24hi CD27+B细胞)的百分比,及其在治疗后的变化情况。方法根据《梅毒诊疗指南(2014)》标准,2016年9月至2017年3月,在北京大学地坛医院教学医院皮肤性病科门诊的43例梅毒患者及8例健康对照。在治疗前及苄星青霉素治疗后2个月进行随访,对每次随访患者利用流式细胞技术检测外周血CD19+CD24hi CD38hi B细胞、CD19+CD24hi CD27+B细胞的百分比。结果 43例梅毒患者中,一期梅毒13例,二期梅毒16例,隐性梅毒14例。与健康对照组相比,未经治疗的一期、二期梅毒患者外周血CD19+CD24hi CD38hi B细胞百分比显著升高,CD19+CD24hi CD27+B细胞百分比显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);隐性梅毒患者与健康对照之间均无明显差异(P>0.05)。治疗后,一期梅毒、二期梅毒及隐性梅毒患者外周血CD19+CD24hi CD38hi B细胞百分比均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);而CD19+CD24hi CD27+B细胞百分比均无明显改变,差异均无统计学意义(P>0.05)。相关性分析结果:梅毒患者外周血CD19+CD24hi CD38hi B细胞百分比与TRUST滴度呈正相关(P<0.01);CD19+CD24hi CD27+B细胞百分比与TRUST滴度呈负相关(P<0.01)。结论CD19+CD24hi CD38hi B细胞有可能是一期、二期梅毒患者的重要免疫学变化指标之一。苄星青霉素治疗能快速有效降低一期、二期梅毒患者外周血CD19+CD24hi CD38hi B细胞百分比。

关键词： Hashimoto's thyroiditis   insulin resistance   islet function   regulatory B cell  

摘要： Hashimoto's thyroiditis (HT) is typically associated with insulin resistance. The aim of the present study was to investigate the role of regulatory B cells (Bregs) in insulin resistance in patients with HT. A total of 52 female patients with type I HT and 35 matched healthy volunteers were enrolled. Demographic and laboratorial data were collected. A 75 g oral glucose tolerance test was performed on each subject. Flow cytometry was performed to evaluate the levels of CD19(+)CD24(hi)CD38(hi) Bregs in peripheral blood. Patients with HT exhibited significantly higher postprandial insulin levels (P<0.01), but normal glucose levels. The level of CD19(+)CD24(hi)CD38(hi) Bregs in patients with HT decreased significantly (P=0.0002) compared with the controls. Pearson's linear correlation model revealed a significant, negative association between anti-thyroid peroxidase antibodies (TPOAb) and homeostasis model assessment of beta cell (r=-0.313, P=0.014). The same correlation model revealed a significant, negative association between TPOAb and the disposition index (DI;r=-0.305, P=0.017), and between anti-thyroglobulin antibodies and DI (r=-0.321, P=0.013). Patients with a decreased ratio of CD19(+)CD24(hi)CD38(hi) Bregs to CD19(+) lymphocytes exhibited higher levels of total cholesterol and low-density lipoprotein cholesterol. A decrease in the ratio of CD19(+)CD24(hi)CD38(hi) Bregs to lymphocytes was a significant independent risk factor for hyperinsulinemia (odds ratio=1.372, P=0.035). A decrease in peripheral blood CD19(+)CD24(hi)CD38(hi) Bregs is associated with insulin resistance in HT patients, and was an independent risk factor for postprandial hyperinsulinemia. The present study provided a novel insight into the development of effective therapeutic strategies targeting immune mechanisms associated with HT.