关键词： 自身免疫性肝炎   B淋巴细胞   白细胞介素10   调节性B细胞  

摘要： 目的自身免疫性肝炎（Autoimmune Hepatitis,AIH）是一种免疫过度活跃介导的以肝脏为靶器官的获得性自身免疫性疾病。传统观念中B细胞主要通过产生特异性抗体及提呈抗原正向调节免疫反应参与自身免疫疾病的发病[1,2]。随着研究的深入,一类被命名为调节性B细胞（Regulatory B cells,Bregs）的具有负向免疫调节功能的B细胞亚群进入人们的视野,其主要通过产生IL-10等免疫抑制性细胞因子发挥作用[3]。研究发现,多种自身免疫性疾病的发生均和异常的B细胞数目及功能相关。目前B细胞亚群参与AIH发病的机制尚不明确,因此本研究通过对AIH患者及健康对照者外周血经典B细胞亚群、Bregs细胞的变化及相关抑制性细胞因子IL-10的表达进行检测,初步探讨其在AIH发病机制中的意义。方法选取2016年10月至2017年12月于天津医科大学总医院消化科就诊的AIH患者30名,患者均尚未接受免疫治疗,并排除其他免疫疾病或恶性肿瘤病史。阴性对照组为30名从天津医科大学总医院查体中心随机抽取的与AIH组信息（性别、年龄等）相匹配,且既往无肝功能损害、自身免疫性疾病或恶性肿瘤病史的体检者。收集受试者空腹外周静脉血,提取单个核细胞,在LPS+淋巴细胞刺激液（BD公司）刺激下培养5小时。第一部分AIH患者外周血B细胞及经典B细胞亚群数量分析流式细胞术检测并比较AIH组及阴性对照组外周血B细胞占淋巴细胞比例,及四种经典B细胞亚群(CD19+CD27-CD38++未成熟B细胞、CD19+CD27-CD38-/+幼稚B细胞、CD19+CD27+CD38-/+记忆B细胞、CD19+CD27+CD38++浆细胞)的比例差异。第二部分AIH患者外周血IL-10表达水平采用酶联免疫吸附试验（ELSIA）法,检测AIH组及阴性对照组外周血清中的IL-10水平。第三部分AIH患者外周血调节性B细胞表型鉴定及亚群分析流式细胞术检测并比较AIH组及阴性对照组外周血CD19+IL-10+调节性B细胞比例,确定AIH患者外周血调节性细胞亚群表型,检测并比较AIH组和阴性对照组外周血调节性B细胞亚群比例的差异。结果（1）AIH患者外周血CD19+B细胞占淋巴细胞的比例为（7.29%±2.59%）,与阴性对照组（8.28%±2.13%,P=0.11）比较无统计学差异。AIH患者外周血CD19+CD27-CD38++未成熟B细胞占CD19+B细胞的比例为（6.78%±1.78%）,与阴性对照组（7.28%±1.25%,P=0.215）比较无统计学差异;CD19+CD27+CD38++浆细胞占CD19+B细胞的比例为（4.43%±1.11%）,显著高于阴性对照组（1.75%±0.64%,P<0.001）;CD19+CD27+CD38-/+记忆B细胞占CD19+B细胞的比例为（31.63%±6.76%）,显著高于阴性对照组（21.29%±5.19%,P<0.001）;CD19+CD27-CD38-/+幼稚B细胞占CD19+B细胞的比例为（57.16%±7.87%）,显著低于阴性对照组（69.18%±5.19%,P<0.001）。（2）AIH患者外周静脉血清中IL-10水平为[（45.31±8.06）pg/ml],低于阴性对照组[（52.85±7.52）pg/ml,P=0.044]。（3）AIH患者外周血CD19+B细胞中CD19+IL-10+细胞的比例为（0.84%±0.28%）,显著低于阴性对照组（2.34%±0.62%,P<0.001）。AIH患者外周血CD19+B细胞中CD19+CD24hiCD38hi（调节性B细胞）的比例为（3.17%±0.92%）,显著低于阴性对照组（5.93%±1.12%,P<0.001）;CD19+CD24hiCD27+（前调节性B细胞+调节性B细胞）的比例为（6.05%±1.21%）,显著低于阴性对照组（10.37%±1.25%,P<0.001）。结论AIH患者相较于阴性对照组,外周血B细胞比例无明显差别,但其亚群的构成比存在差异。其中记忆B细胞、浆细胞比例显著增高,幼稚B细胞比例显著降低。AIH患者体内抑制性细胞因子IL-10水平降低,Bregs细胞数量及功能降低,导致其不能有效的抑制炎症反应,提示B细胞亚群数量和功能的失衡可能参与了AIH的发病。

关键词： 艾拉莫德   调节性B细胞   白细胞介素-10(IL-10)   转化生长因子-β(TGF-β)  

摘要： 目的:通过艾拉莫德治疗大鼠胶原诱导性关节炎(CIA),研究对白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子(TGF-β)、Foxp3、Bcl-6的影响变化情况。方法:6-8周龄健康清洁级雌性Wistar大鼠30只,体质量(180-220)g,随机分成空白对照组、模型对照组、艾拉莫德组,每组10只大鼠进行实验。模型对照组、艾拉莫德组均给予牛Ⅱ型胶原(CⅡ)与完全弗氏佐剂(CFA)0.3ml/只诱导成CIA模型,治疗28天后,观察CIA大鼠体重变化情况;通过HE染色观察滑膜组织病理变化情况;利用ELISA法检测血清中IL-10、TGF-β含量;通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测滑膜组织中IL-10mRNA、TGF-βmRNA及脾脏中Foxp3mRNA、Bcl-6mRNA的表达水平。结果:⑴经治疗后,艾拉莫德组大鼠体重明显增加,性情变温顺;模型对照组大鼠体重增加缓慢,性情焦躁;⑵关节滑膜经HE染色后,艾拉莫德组见关节滑膜细胞层为4层(正常时为1-3层),未见明显增生及炎性细胞浸润;模型对照组关节滑膜细胞层增加到10层,可见明显增生及大量炎性细胞浸润。⑶血清IL-10含量:艾拉莫德组与模型对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。⑷血清TGF-β含量:艾拉莫德组与模型对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。⑸关节滑膜IL-10mRNA表达水平:艾拉莫德组与模型对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);⑹关节滑膜TGF-βmRNA表达水平:艾拉莫德组与模型对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);⑺脾脏中Foxp3mRNA表达水平:艾拉莫德组与模型对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);⑻脾脏中Bcl-6mRNA表达水平:艾拉莫德组与模型对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:⑴经艾拉莫德治疗后,大鼠体重呈明显增长趋势,性情变温顺;⑵经艾拉莫德治疗后,血清、关节滑膜中IL-10、TGF-β的表达及脾脏中Foxp3、Bcl-6的表达未见明显变化。⑶经艾拉莫德治疗后,Breg是否通过其他细胞因子或信号通路影响类风湿关节炎的发生发展有待进一步验证。

关键词： 日本血吸虫   调节性B细胞   miRNA-21   巨噬细胞   SEA  

摘要： 日本血吸虫病是一种重要的人兽共患寄生虫病,仍是我国主要的公共卫生问题之一。血吸虫感染免疫的一个基本特征是在成虫产卵后,宿主逐渐表现出免疫下调的状态,使感染呈现慢性化。以往的研究认为这种免疫负调节性与调节性T细胞(Tregs)、DC和Mcp等相关。调节性B细胞(Bregs)是一类具有调节功能的B细胞,在自身免疫病、慢性炎症、肿瘤、寄生虫感染等疾病中发挥着免疫负向调控作用。MicroRNA(miRNA)是一类内生的、长度约为20-25个核苷酸的小RNA,不编码蛋白但其在细胞内具有多种重要的调节作用。近来研究发现,microRNA在B细胞的活化、分化和发挥功能过程中起着关键作用,但目前仍不清楚miRNA是否在B细胞发挥调节性功能中发挥重要作用。本课题组前期研究已经证实日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)在体内外均能诱导产生Bregs并分泌高水平的IL-10,并且在日本血吸虫感染过程中,可以诱导产生CD19+Tim-1+分泌IL-10的B细胞。那么,是否miRNA参与日本血吸虫感染诱导Bregs发育分化仍不清楚。日本血吸虫病主要病理改变为肝脏肉芽肿,在慢性期导致肝脏纤维化。研究表明在肝脏肉芽肿形成过程中,B细胞发挥了重要作用。但是,目前仍不清楚调节性B细胞是否参与了肝脏的病理改变。因此,我们对日本血吸虫感染小鼠后调节性B细胞的产生及其作用进行了初步研究。研究内容分为以下3个部分:1、miRNA-21在日本血吸虫诱导调节性B细胞分化过程中的作用目的:探索miRNA-21在日本血吸虫感染小鼠后调节性B细胞分化及体外SEA刺激后调节性B细胞的产生中的作用。方法:构建日本血吸虫感染C57BL/6小鼠模型,分别取感染13W和正常小鼠脾脏CD19+ B细胞,qPCR检测miRNA-21和IL-10 mRNA表达水平。体外用SEA、LPS分别刺激正常小鼠CD19+ B细胞72 h,荧光定量PCR检测CD19+ B细胞miRNA-21和IL-10的mRNA水平。体外miRNA-21-Inhibitor转染正常小鼠CD19+ B细胞后用SEA、LPS刺激72 h,流式检测IL-10+ B细胞的比例,ELISA检测上清中IL-10的水平。结果:日本血吸虫感染后,小鼠脾脏B细胞miRNA-21和IL-10的mRNA的表达水平较正常小鼠明显升高;体外SEA、LPS刺激CD19+ B细胞后miRNA-21和IL-10的mRNA水平也明显升高;体外miRNA-21-Inhibitor转染正常小鼠CD19+B细胞后用SEA、LPS刺激72 h,IL-10+B细胞比例及IL-10分泌量显著降低。结论:日本血吸虫感染后,miRNA-21参与了调节性B细胞的产生和IL-10分泌。2、日本血吸虫感染诱导肝脏肉芽肿形成过程中调节性B细胞的动态变化目的:通过体内实验观察日本血吸虫感染不同阶段CD19+Tim-1+IL-10+ B细胞的动态变化。方法:构建日本血吸虫感染C57BL/6小鼠模型,分别在感染第OW,3W,6W,13W分离小鼠脾脏单个核细胞和肝脏淋巴细胞,流式检测CD19+Tim-1+IL-10+B细胞比例,同时取感染不同阶段的小鼠肝脏免疫组化分析CD19+Tim-1+细胞的变化。结果:小鼠日本血吸虫感染后第6W、13W脾脏CD19+Tim-1+IL-10+B细胞比例显著增加;感染后第3W、6W,小鼠肝脏CD19+Tim-1+IL-10+B细胞比例均显著增加;感染第13W,小鼠肝脏CD19+Tim-1+IL-10+B细胞显著减少。肝脏免疫组化分析发现,感染第6W小鼠肝脏有严重的虫卵肉芽肿,并伴随有大量CD19+Tim-1+细胞聚集在肉芽肿周围;感染第13W小鼠肉芽肿体积有所减小,肉芽肿周围CD19+Tim-1+细胞也明显减少。结论:日本血吸虫感染早期和急性期,CD19+Tim-1+IL-10+B细胞参与了日本血吸虫感染诱导的肝脏肉芽肿的发生与发展。3、SEA诱导产生的调节性B细胞对巨噬细胞的作用的初步研究目的:体外实验初步探讨调节性B细胞对巨噬细胞的作用。方法:磁珠分选正常小鼠CD19+B细胞,体外分别用LPS、SEA刺激培养后与小鼠巨噬细胞RAW264.7共培养,检测培养上清中NO和IL-10水平。荧光定量检测共培养后RAW264.7 细胞 iNOS 和 Arg-1 的 mRNA 水平。结果:与阴性对照组相比,经SEA刺激后的B细胞与RAW264.7细胞共培养后,NO表达无明显变化,IL-10表达显著增加,iNOS的mRNA表达水平无明显变化,Arg-1的mRNA水平显著升高。结论:体外SEA刺激的B细胞能够诱导巨噬细胞分化成M2型的巨噬细胞。

关键词： 弥漫大B细胞淋巴瘤   调节性T细胞   犬尿氨酸   R-CHOP  

摘要： 目的:犬尿氨酸（Kynurenine,Kyn）及调节性T细胞（Regulatory T cells,Treg）等能抑制抗肿瘤免疫反应,促进肿瘤细胞的存活、生长,远处迁移和浸润转移,并且参与机体的免疫编辑过程,支持癌细胞逃离人类免疫系统[1-3]。本研究通过检测弥漫大B细胞淋巴瘤患者外周血中Kyn的表达水平及Treg的比例,分析Kyn的表达水平及Treg的比例与弥漫大B细胞淋巴瘤临床病理特征的关系,初步探讨外周血Kyn及Treg对R-CHOP治疗弥漫大B细胞淋巴瘤的影响。方法:收集2017年02月至2017年12月首次就诊于四川省肿瘤医院的未接受任何抗肿瘤治疗的32例弥漫大B细胞淋巴瘤患者初治时、化疗2周期及化疗4周期后外周血及完整临床病例资料,所有入组患者均为初治、CD20阳性、治疗周期数≥3周期。从所收集的外周血中检测Kyn及Treg的表达水平,首先采用流式细胞术检测所收集的外周血中Treg的比例,再采用比色法检测外周血中Kyn的表达水平,初步分析Kyn的表达水平及Treg的比例与弥漫大B细胞淋巴瘤临床病理特征、R-CHOP治疗弥漫大B细胞淋巴瘤的影响。采用SPSS22.0软件进行统计分析,计量资料均采用x±s表示。两组计量资料比较服从正态分布的使用两独立样本T检验,不服从正态分布的使用Wilcoxon符号秩和检验,治疗前后的比较采用配对检验,变化量服从正态分布的采用配对T检验,不服从正态分布的采用相关样本秩检验。分类计数资料采用频数或率表示,比较采用Pearson卡方检验,样本量小于40时采用Fisher确切概率法。结果:（1）从入组的32例弥漫大B细胞淋巴瘤初治患者组外周血中检测到Kyn的平均水平为4.89±0.82,较健康成年人组外周血中Kyn的平均水（4.43±0.49）高,差异有统计学意义（t=2.459,p=0.018）;从入组的32例弥漫大B细胞淋巴瘤初治患者组外周血中检测到Treg的平均水平为5.33±2.68,较健康成年人组外周血中Treg的平均水平（0.58±0.93）高,差异有统计学意义（t=8.955,p<0.001）。（2）32名弥漫大B细胞淋巴瘤患者化疗前后外周血中Kyn平均水平差异有统计学意义（t=2.090,p=0.041）;化疗后外周血中Treg的平均水平明显低于化疗前外周血中Treg的平均水平,差异有统计学意义（t=2.037,p=0.046）。（3）经过4周期化疗后,32名患者中达到完全缓解（CR）的有9人,占28.13%,达到部分缓解（PR）的有16人,占50.00%,治疗无效的有7人,占21.87%。比较不同预后患者的外周血中Kyn的表达水平及Treg的比例情况显示,化疗后CR组患者外周血中Kyn表达水平及Treg的比例明显低于化疗无效组患者外周血中Kyn表达水平及Treg的比例,差异均有统计学意义（p=0.005,p=0.001）;化疗后PR组患者外周血中Kyn的表达水平及Treg的比例明显低于治疗无效组患者外周血中Kyn表达水平及Treg的比例,差异有统计学意义（p=0.046,p=0.032）;化疗后CR组患者外周血中Kyn的表达水平及Treg的比例与PR组患者外周血中的Kyn的表达水平及Treg的比例相比较,差异有统计学意义（p=0.007,p=0.046）。（4）Kyn的表达水平及Treg的比例之间具有相关性,P<0.05,相关性具有显著性。（5）Kyn的表达水平及Treg的比例与患者的年龄、临床分期、Hans分型、B症状、NCCN-IPI评分、LDH、双表达及Ki-67等临床特征无相关性。结论:（1）Kyn及Treg在DLBCL患者外周血中表达升高与R-CHOP治疗弥漫大B细胞淋巴瘤的疗效具有一定的相关性。（2）Kyn及Treg在弥漫大B细胞淋巴瘤患者外周血中的表达越低,其运用R-CHOP方案治疗疗效越好,可推测Kyn及Treg可以预测R-CHOP治疗DLBCL患者的疗效。

关键词： 狼疮鼠   BAFF   IL-35   CD5+CD1dhiFcg RIIbhiB细胞   Tregs   MZ B细胞   BAFFR   TACI   NF-κB1通路   抗BAFF治疗   Bregs   SLE患者   皮损  

摘要： 第一部分外源性BAFF对狼疮鼠Bregs/Tregs分泌IL-35的影响【目的】研究BAFF是否影响狼疮鼠脾脏中Bregs/Tregs分泌IL-35及相关机制。【方法】采用磁珠分选法分选狼疮鼠及对照鼠脾脏边缘区及滤泡区(MZ&FO)B细胞、CD4+CD25-T细胞以及CD4+CD25+Tregs;经流式细胞术、Western-blotting及real time RT-PCR分别检测不同处理组B细胞内IL-35两亚基p35、EBI3的蛋白及m RNA水平的变化并通过ELISA法检测培养上清中IL-35的分泌水平;采用流式细胞术分析产IL-35 B细胞的表型、T细胞表面BAFF受体表达情况以及不同处理组T细胞内p35、EBI3的变化;流式分选CD5+CD1dhi Fcg RIIbhi B细胞亚群并与CD4+CD25-T细胞或CD4+T细胞1:1共培养,经流式细胞术检测T细胞胞内IFN-γ、TNF-α及IL-35的表达水平。【结果】与对照鼠相比,狼疮鼠脾脏B细胞表达更高水平的IL-35,且在一定浓度范围内,外源性BAFF可促进狼疮鼠及对照鼠脾脏B细胞分泌IL-35;BAFF诱导的产IL-35的B细胞主要来源MZ B细胞亚群且具有CD5+CD1dhi Fcg RIIbhi独特的细胞表型;该群CD5+CD1dhi Fcg RIIbhi B细胞通过分泌IL-35抑制CD4+CD25-T细胞分泌炎性细胞因子IFN-γ及TNF-α,诱导CD4+CD25+Tregs增殖并促进CD4+T细胞进一步分泌IL-35从而形成正反馈环路,发挥显著的免疫抑制效应。此外,Tregs表达BAFF受体(BAFF-R及TACI)且外源性BAFF能有直接促进Tregs分泌IL-35。【结论】在狼疮鼠中,BAFF不仅是重要的致病因子,更能够在一定条件下通过诱导CD5+CD1dhiFcg RIIbhi B细胞及Tregs分泌IL-35而发挥免疫调节功能,体现了调节免疫的双面性。第二部分BAFF体外促进狼疮鼠Bregs产生IL-35的作用机制【目的】探讨BAFF诱导狼疮鼠脾脏中Bregs分泌IL-35的相关信号通路。【方法】磁珠分选法分选狼疮鼠脾脏MZ B细胞;采用BAFF受体及NF-κB通路拮抗剂处理细胞后经流式细胞术及Western-blotting检测不同处理组B细胞内p35、EBI3的蛋白水平;并经ELISA法检测不同处理组培养上清液中IL-35的分泌水平。【结果】阻断BAFF-TACI结合后,B细胞胞内p35、EBI3的表达明显下降,而阻断BAFF-BAFFR结合后p35、EBI3的表达仅轻度下降且无统计学差异。然而,封闭BAFF-R或TACI后细胞培养上清中IL-35的分泌水平均下降明显;进一步阻断胞内总NF-κB及经典的NF-κB1通路后,胞内p35、EBI3的表达以及细胞培养上清中IL-35的分泌水平均明显降低。【结论】BAFF与TACI受体结合并通过经典的NF-κB1通路促进B细胞分泌IL-35。第三部分体内验证BAFF对狼疮鼠脾脏Bregs/Tregs分泌IL-35的影响【目的】体内验证狼疮鼠脾脏中BAFF对Bregs分泌IL-35的影响及相关机制。【方法】向狼疮鼠尾静脉注射PBS或抗BAFF蛋白,10天后终止动物实验,收集10天前后狼疮鼠眼球外周血。采用ELISA法检测狼疮鼠治疗前后及不同处理组血清BAFF及IL-35的水平;流式细胞术检测并分析脾脏中产IL-35 B/T细胞的比率变化及表型;经共聚焦显微镜直接观察不同处理组脾脏组织中产IL-35 B细胞的变化。【结果】相对于对照鼠,狼疮鼠血清中BAFF及IL-35的水平均明显升高且二者呈正相关,脾脏中产IL-35的CD19+B细胞、CD4+CD25+Foxp3+Tregs、产IL-35的CD4+T细胞比率均高于对照鼠;抗BAFF治疗后狼疮鼠血清中BAFF水平明显下降,而血清IL-35的水平虽有轻度下降但无统计学差异;脾脏中产IL-35的CD19+B细胞及CD5+CD1dhiFcg RIIbhi B细胞比率均明显降低,CD4+CD25+Foxp3+Tregs、产IL-35的CD4+T细胞比率亦可见显著下降;此外,脾脏中产IL-35的B细胞具有CD21+CD23-细胞表型,与MZ B细胞的表面标志相符。【结论】实验表明BAFF可诱导MZ B细胞转化为产IL-35的CD5+CD1dhi FcγRIIbhi B细胞,而抗BAFF治疗能够明显减少产IL-35的Bregs及Tregs,解释了临床上贝利单抗治疗效果不佳的原因,揭示了BAFF在自身免疫性疾病中的新的免疫调节功能。第四部分体内验证狼疮鼠及SLE患者皮损内BAFF对IL-35的影响【目的】体内验证狼疮鼠及SLE患者皮损内BAFF、IL-35以及产IL

关键词： 复方苦参注射液   晚期肺癌   调节性T、B淋巴细胞  

摘要： 目的探讨复方苦参注射液联合化疗对晚期肺癌患者外周血调节性T、B淋巴细胞的影响。方法收集我院肿瘤科晚期肺癌患者46例,随机分为复方苦参注射液联合化疗组(A组)、单纯化疗组(B组)各23例,观察并比较两组治疗前后外周血CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(Tregs)和CDl9(+)IL-10(+)调节性B淋巴细胞(Bregs)的变化特征。结果化疗前两组患者Tregs、Bregs水平差异无统计学意义(P>0.05);与治疗前比较,两组Tregs均较治疗前有所下降,差异有统计学意义(P<0.05),Bregs变化差异无统计学意义(P>0.05);A组治疗后Tregs水平高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论晚期肺癌患者化疗后免疫功能降低,化疗时配合复方苦参注射液能提高机体免疫力,改善患者生活质量。

关键词： 狼疮性肾炎   中医证型   调节性B细胞   细胞因子  

摘要： 目的:研究狼疮性肾炎(LN)患者中医证型与外周血IFN-α、BlyS水平变化及B淋巴细胞活化的关系。方法:以流式细胞仪检测外周血CD19^+CD69^+水平及CD19^+AV凋亡率(AV),以双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法测定LN患者外周血中Bly S和IFN-α水平。结果:阴虚内热型和热毒炽盛型LN患者CD19^+CD69^+、CD19^+AV水平显著高于健康组(P<0.01);热毒炽盛型LN患者CD19^+CD69^+、CD19^+AV显著高于阴虚内热型(P<0.01)。结论:阴虚内热型和热毒炽盛型LN患者B淋巴细胞活化率及凋亡率均增多。

关键词： 急性B淋巴细胞白血病   T淋巴细胞   调节机制   酶联免疫吸附试验  

摘要： 目的分析儿童急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)调节性T淋巴细胞变化及调节机制。方法在2016年2月23日~2017年2月23日期间选取50例健康体检者(对照组)、50例急性B淋巴细胞白血病患儿(观察组)为实验对象,对两组受检者均进行分离外周血CD4^+T细胞、荧光定量PCR(RT-PCR、REAL-TIME PCR、总RNA定量和提取、RT-PCR产物鉴定)、酶联免疫吸附试验、流式细胞术检测,随后对比两组受检者各项检测结果。结果观察组患儿的CD28/CD4^+Foxp3^+(524.86±28.42)、ICOS/CD4^+CD25^(high)Foxp3^+(725.69±15.74)、TGF-βRII/CD4^+(61.75±10.08)、Mtge-β(58.44±10.85)、IL-35p35(326.84±35.46)、IL-35EB13(128.56±12.74)、TGF-β(81.46±5.43)、IL-10(135.75±12.75)、ICOS^+/CD4^+CD25^(high)Foxp3(3.86±1.75)%、Foxp3(812.43±56.32)、CD4^+CD25^(high)Foxp3(9.85±2.45)%均高于对照组健康体检者的CD28/CD4^+Foxp3^+(158.33±21.06)、ICOS/CD4^+CD25^(high)Foxp3^+(352.12±10.03)、TGF-βRII/CD4^+(28.42±5.89)、Mtge-β(23.17±5.33)、IL-35p35(154.28±26.31)、IL-35EB13(48.31±6.52)、TGF-β(29.51±6.38)、IL-10(24.91±5.22)、ICOS^+/CD4^+CD25^(high)Foxp3(2.45±0.85)%、Foxp3(322.41±18.75)、CD4^+CD25^(high)Foxp3(4.12±1.75)%(P<0.05)。结论导致急性B淋巴细胞白血病患儿出现亚群比例失调的主要原因为转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、分化群28(Cluster of Differentiation 28)、ICOS过度活化。

关键词： 复方   苦参/投药和剂量   注射剂   癌   非小细胞肺/药物疗法   癌   非小细胞肺/免疫学   T淋巴细胞   B淋巴细胞  

摘要： 【目的】探讨复方苦参注射液联合化疗对晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血调节性T、B淋巴细胞的影响。【方法174例晚期NSCLC患者随机分为了两组，各37例。对照组给予化疗治疗，观察组在对照组基础上给予复方苦参注射液治疗。21d为1个化疗周期，治疗2个周期后评估两组疗效及化疗毒副作用，比较其相关指标变化。【结果】观察组治疗总有效率为72．97％（27／37），略高于对照组的56．76％（21／37），但差异无显著性（P〉0．05）；观察组化疗后CD4＋CD25＋调节性T细胞、CD19＋CD5＋B淋巴细胞占CD19＋B细胞比例、CD19＋CD5＋CD1d＋Breg细胞占CDαB细胞比例、白介素10（IL-10）、血浆转化生长因子α（TGF-α）水平低于对照组，CD8＋CD28＋T细胞水平高于对照组（P〈0．05）；观察组化疗后癌胚胎抗原（CEA）、碳水化合物抗原（CA125）、细胞角质蛋白19（CYFRA21—1）水平低于对照组，且差异有显著性（P〈0．05）；两组胃肠道反应、血小板减少、脱发发生率比较差异无显著性（P〉0．05），观察组Ⅲ～Ⅳ级白细胞减少的几率为10．81％（4／37），低于对照组的32．43％（13／37）（P〈0．05）。【结论】复方苦参注射液联合化疗治疗晚期NSCLC患者可改善外周血调节性T、B淋巴细胞免疫功能，降低血清肿瘤标志物，减少化疗毒副反应。

关键词： 肺癌   补肾益肺解毒法   调节性T细胞   Foxp3   B7-H3蛋白   小鼠  

摘要： 目的:研究补肾益肺解毒法对Lewis肺癌小鼠CD4^+CD25^+调节性T细胞(T regulatory cell,Treg)、转录因子Foxp3及共刺激因子B7-H3表达的影响。方法:建立32只6~8周龄C57BL/6雄性小鼠Lewis肺癌细胞皮下移植瘤模型后,将32只造模后小鼠随机分为模型组、中药组、化疗组及综合组,每组各8只,单笼饲养。模型组以0.4 m L生理盐水灌胃14 d,并分别在第1天、第3天、第5天腹腔注射生理盐水1 m L;中药组以0.4 m L中药液灌胃14 d,并分别在第1天、第3天、第5天腹腔注射生理盐水1 m L;化疗组以0.4 m L生理盐水灌胃14 d,分别在第1天、第3天、第5天腹腔注射DDP溶液1 m L;综合组以0.4 m L中药液灌胃14 d,在第1天、第3天、第5天腹腔注射DDP溶液1 m L。给予药物干预14d后,观察小鼠的一般状况、饲料消耗量、体质量、去瘤体质量、移植瘤质量等,流式细胞术检测各组小鼠外周血和移植瘤CD4^+CD25^+Treg细胞的比例、Foxp3以及B7-H3的含量。结果:补肾益肺解毒法可改善肺癌小鼠的行为体征,增加饲料消耗量、体质量和去瘤体质量,减少移植瘤重量,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。补肾益肺解毒法治疗可显著降低Lewis肺癌小鼠外周血和移植瘤CD4^+CD25^+Treg细胞、Foxp3以及B7-H3的水平,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾益肺解毒法通过降低CD4^+CD25^+Treg细胞、Foxp3以及B7-H3的水平增强机体的抗肿瘤免疫应答发挥抑瘤作用。