关键词： 脓毒症   调节性B淋巴细胞  

摘要： 目的探讨可调节免疫应答的B淋巴细胞亚群评估老年急性脓毒症患者预后的价值。方法选取2015年6~12月三二O一医院急诊科收治的老年急性脓毒症患者;常规检测血常规、血肌酐、总胆红素、血清降钙素原、C反应蛋白、电解质、血气、动脉血乳酸值(Lac)情况,根据入院1 d内指标最差值计算急性生理与慢性健康评分量表(APACHEⅡ)评分和序贯器官衰竭评分;分别于入院后1、3、7 d采用流式细胞术检测外周血CD20^+CD24hi CD38hi调节性B淋巴细胞(Bregs)表达水平。根据患者30 d预后情况分为存活组、死亡组,比较两组患者上述各项指标。结果共入选116例患者,存活组46例,死亡组70例;死亡组APACHEⅡ评分、序贯器官衰竭评分明显高于存活组(均P<0.05);两组患者入院7 d CD20+CD24hi CD38hi Bregs水平均明显低于入院1、3 d(均P<0.05);入院1 d和3 d CD20^+CD24hi CD38hi Bregs水平之间差异无统计学意义(P>0.05)。入院1 d时老年急性脓毒症患者外周血CD20^+CD24hi CD38hi Bregs水平与APACHEⅡ评分呈负相关(P<0.05),与总胆红素、血肌酐、血清降钙素原、C反应蛋白、Lac、序贯器官衰竭评分之间均无明显相关性(P>0.05)。二元Logistic回归分析显示,CD20^+CD24hi CD38hi Bregs和APACHEⅡ评分是影响老年急性脓毒症患者预后的独立危险因素。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,入院后1、3、7 d CD20^+CD24hi CD38hi Bregs水平、APACHEⅡ评分对老年急性脓毒症患者预后的预测价值均较高(AUC 0.8~0.9),其中入院7 d CD20^+CD24hi CD38hi Bregs水平的预测价值最高(AUC=0.992)。结论外周血CD20^+CD24hi CD38hi Bregs表达水平可用于评估老年急性脓毒症患者的预后,具有较好的敏感度和特异度。

关键词： 白细胞介素35   调节性T细胞   调节性B细胞   器官移植免疫   免疫抑制药物  

摘要： 白细胞介素35(IL-35)是近年发现并命名的IL-12家族细胞因子,它可由调节性T(Treg)细胞和调节性B(Breg)细胞特异性产生,是Treg和Breg细胞介导的负向免疫调节作用所必需的细胞因子。研究表明IL-35在器官移植免疫中发挥重要作用,针对IL-35的临床研发药物及细胞药物治疗可为抗移植排斥反应甚至诱导移植免疫耐受提供新的靶点和研究方向。

关键词： 日本血吸虫   B细胞   调节性B细胞   免疫调节分子  

摘要： 目的探讨日本血吸虫感染C57BL/6小鼠脾脏不同亚群调节性B细胞的含量。方法使用日本血吸虫尾蚴经腹部感染C57BL/6小鼠,5周后分离感染组及正常对照组小鼠脾细胞,制备单个细胞悬液。使用细胞表面染色的方法,通过流式细胞术检测小鼠CD19^+B细胞含量及表达免疫调节相关分子CD5、CD11b以及PD-1的B细胞亚群的含量。结果 C57BL/6小鼠感染日本血吸虫后,脾脏B细胞的百分比含量及数目明显增多,差异有统计学意义(P<0.01);CD5^+和CD11b^+B细胞的含量明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);而PD-1^+B细胞的含量变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。结论日本血吸虫感染能在C57BL/6小鼠体内诱导CD5^+和CD11b^+调节性B细胞产生。

关键词： 自身免疫性溶血性贫血   调节性B细胞   白细胞介素-10  

摘要： 目的:探讨自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者外周血中调节性B细胞(Bregs)的表达及其在该病发病中的意义。方法:选择16例自身免疫性溶血性贫血患者和14例健康志愿者为研究对象,用流式细胞术分析外周血CD19^+IL-10^+调节性B细胞及CD19^+CD24^(hi)CD27^+调节性B细胞的表达;ELISA方法检测培养上清液中IL-10的水平。结果:自身免疫性溶血性贫血患者外周血中CD19^+IL-10^+调节性B细胞、CD19^+CD24^(hi)CD27^+调节性B细胞的表达分别为(1.27±0.39)%、(9.85±2.18)%,健康志愿者组分别为(2.92±0.71)%、(26.47±4.31)%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);自身免疫性溶血性贫血患者细胞培养上清中IL-10的水平低于健康志愿者组(P<0.05)。结论:自身免疫性溶血性贫血患者外周血中CD19^+IL-10^+调节性B细胞及CD19^+CD24^(hi)CD27^+调节性B细胞比例降低,提示调节性B细胞可能参与自身免疫性溶血性贫血的发病过程。

关键词： 类风湿关节炎   胶原诱导性关节炎   诱导的调节性T细胞   B细胞   共刺激分子  

摘要： 目的:探讨胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠炎症条件下,诱导的调节性T细胞(i Tregs)与B细胞的相互作用模式。方法:分别从正常DBA1/J和免疫后第35天的关节炎小鼠的脾脏细胞分选出CD19+细胞(N-B和CIA-B细胞),以此细胞作为抗原提呈细胞观察其诱导Tregs生成的差异;经典方法制备i Tregs,将CIA-B细胞与i Tregs共培养,观察其对i Tregs自身的增殖及i Tregs表达CTLA-4的影响;观察i Tregs对CIA-B细胞共刺激分子(CD80,CD86)和MHCⅡ类分子表达的影响,并设立Transwell实验探讨作用机制。结果:CIA-B较N-B诱导更多Tregs的生成;CIA-B促进i Tregs的增殖并上调i Tregs细胞表面CTLA-4的表达,后者的作用是通过细胞直接接触的途径实现;同时,i Tregs促进CIA-B细胞表面共刺激分子和MHCⅡ类分子的表达且该作用也通过细胞直接接触途径而实现。结论:在CIA炎症条件下,i Tregs通过与B细胞的相互作用来发挥其免疫抑制作用,两者的相互作用通过细胞直接接触实现。

关键词： 免疫治疗   调节性   细胞特性   机体免疫反应   免疫性疾病   应用   分泌细胞因子   调控作用  

摘要： 人体内存在一类对于机体免疫反应起负向调控作用的B细胞，这类B细胞被称为调节性B细胞（Bregs）。通过对不同免疫疾病模型的研究发现，人体内存在着多种类型、表型特点各异的Bregs，并可通过分泌细胞因子颗粒酶和细胞表面分子间的相互作用来介导对于机体免疫反应的负向调节。目前主要认为Bregs是由分化发育不同阶段的B细胞接受不同信号刺激转化而来的。在多种免疫性疾病中可以检测到Bregs的数量和功能缺陷；对于免疫进程的负向调控作用有望使Bregs成为免疫治疗的新靶点，为许多难治性慢性感染、肿瘤和免疫性疾病提供治疗思路。

关键词： 调节性B细胞   白细胞介素-10   移植耐受   慢性移植物抗宿主病   免疫调节  

摘要： 慢性移植物抗宿主病（chronic graft versus host disease,cGVHD）是异基因造血干细胞移植最重要的死亡原因。该病与供者免疫活性细胞引起的免疫平衡紊乱及移植免疫耐受异常有关[1]。cGVHD发生率高达40%-70%,近年来因临床造血干细胞移植治疗方案的不断完善以及治疗技术的不断提高,移植早期死亡率逐渐减低,患者长期存活率逐渐增高,cGVHD发病率也有所升高。cGVHD缺乏有效的预防手段,治疗疗程长,生活质量差,故探索有效、

关键词： IL-10   调节性B细胞   IL-10受体1   CD19单链抗体可变区  

摘要： 目的：CD19单链抗体可变区（single-chain fragment variable）sc Fv能特异性识别结合B细胞表面的CD19分子,白细胞介素-10（interleukin-10,IL-10）是调节性B细胞（Breg）的主要特征之一。旨在构建CD19sc Fv和IL-10受体1（IL-10R1）胞外段的重组融合蛋白,拟用该融合蛋白捕捉和封闭Breg细胞分泌的IL-10。方法：CD19sc Fv和IL-10R1胞外段克隆到p ET-28a原核质粒上,*** BL21（DE3）工程菌表达蛋白通过镍柱富集和纯化蛋白,SDS-PAGE和Western blot对表达蛋白进行鉴定,Pull down实验验证蛋白与CD19分子和IL-10细胞因子的结合。结果：成功表达CD19sc Fv-IL-10R1融合蛋白,该融合蛋白能在体外同时结合CD19和IL-10分子。结论：CD19sc Fv-IL-10R1融合蛋白在体外可以同时结合CD19分子和IL-10分子,具有潜在应用前景可作为特异性抑制Breg的生物小分子。

关键词： 艾滋病   艾滋病病毒-1   B细胞超活化   调节性B细胞  

摘要： 艾滋病（AIDS）是由艾滋病病毒-1（HIV-1）感染后引起的一种严重危害人类健康的重大传染病。除了进行性的CD4＋T淋巴细胞减少,HIV-1感染还造成多种免疫细胞的功能改变,这些功能改变极大地影响艾滋病的疾病进展。B细胞是人体免疫系统中重要的免疫细胞,其不但能介导体液免疫,还是重要的免疫调节细胞。然而HIV-1感染会在多个方面造成B细胞的功能缺陷。文章分析了HIV-1感染对B细胞免疫超活化、B细胞亚群组成以及调节性B细胞的影响及这些影响与艾滋病疾病进展的关系。

关键词： 脓毒症   B细胞   肠道免疫   调节性B细胞   IL-10  

摘要： 研究背景:脓毒症被定义为机体应对感染时的失控反应所导致的威胁生命的器官功能障碍。迄今为止其发病机制尚没有完全阐明,临床上暂时没有良好的治疗方案。脓毒症患者外周血的B细胞总数量减少,多种B细胞的群体数量或比例发生改变,B细胞缺陷小鼠脓毒症的死亡率升高。然而,B细胞影响脓毒症的机制尚未完全阐明,B细胞在脓毒症中的作用仍有待进一步深入研究。肠道是人体重要的免疫器官之一,肠道屏障被破坏后脓毒症持续并加重;脓毒症肠系膜淋巴液注射可造成正常动物急性肺损伤;脓毒症中肠集合淋巴管B220+B细胞凋亡增加。这提示肠道启动并参与到脓毒症中,并与器官损伤相关。调节性B细胞(Regulatory B cell,Breg)是指具有免疫抑制作用的B细胞群体。目前脓毒症中肠道Breg的变化及其与脓毒症的关系未有明确研究和报导。目的:研究脓毒症小鼠中B细胞基因表达和肠道Breg亚群的变化情况,探究脓毒症小鼠中B细胞以及肠道调节性B细胞在疾病的发生发展中的作用;从而更深入阐明脓毒症的发病机理,为临床上脓毒症的诊断治疗提供参考依据。方法:小鼠腹腔注射LPS构建脓毒症小鼠模型,记录死亡时间及体温变化;ELISA法检测外周血中IFN-γ的含量变化;q-PCR法检测脓毒症小鼠肺脏中炎症相关分子IL-6、IL-1β、IFN-γ的变化;HE染色法检测脓毒症小鼠中器官的炎症浸润程度;对脓毒症小鼠的脾脏CD19+B细胞进行转录组差异分析;流式细胞术检测肠系膜淋巴结CD5+CD1dhi及CD19+CD9+Breg亚群数量及其功能分子IL-10的表达变化情况。结果:1.脓毒症模型小鼠体内存在炎症反应,产生大量炎症介质。2.脓毒症模型小鼠CD19+B细胞转录组差异分析显示其表面分子CD40、CD80、CD86、PD-L1等上调,CD5、CD1d1、CD1d2等Breg相关分子下调;趋化因子CCL5、CXCL10等上调,趋化因子受体CXCR3等下调;细胞因子IL-3、IL-33、IL-6、TNF-α、INF-γ、IL-17A 等上调,TGF-β1、MFG-E8 下调;补体系统相关因子C3、C4a等上调,Cr2、C6等下调;脂质代谢相关分子Lif、LCN2上调。3.脓毒症模型小鼠肠系膜淋巴结中CD5+CD1dhi及CD19+CD9+ Breg亚群分泌的IL-10降低。结论:脓毒症模型小鼠死亡率高且体内存在强烈的炎症反应,B细胞的炎症、代谢等相关基因表达升高,Breg相关分子表达降低,这些改变可能参与疾病的发展;进一步研究发现脓毒症模型小鼠肠系膜淋巴结中CD5+CD1dhi及 CD19+CD9+Breg亚群分泌的IL-10降低,提示脓毒症肠道调节性B细胞的功能可能缺陷,并且加重疾病的炎症反应。