关键词： 免疫性血小板减少症   CD19+CD24hiCD38hi   B细胞   Th1细胞   T2细胞   Th17细胞   Treg细胞   细胞因子  

摘要： 目的:本研究旨在探讨调节B细胞(Breg)在免疫性血小板减少症(ITP)发病中的作用及其临床意义。方法:采用流式细胞术检测40例ITP患者(ITP组)的Breg、Th1、Th2、Th17以及Treg细胞的细胞量,应用AimPlex流式高通量技术检测IL-10、TGF-β、CD40以及CD40L的水平,选择20例健康正常人作为对照(对照组)。结果:与对照组相比较,ITP患者Breg细胞的细胞数量显著少于对照组(P <0.05),IL-10、TGF-β以及CD40L的水平亦显著低于对照组(P <0.05)。Th1细胞数量显著增多(P <0.05),而Th2、Th17以及Treg细胞量均显著减少(P <0.05)。结论:Breg细胞在ITP发病机制中可能具有重要作用。

关键词： 血小板减少   T淋巴细胞亚群   B淋巴细胞亚群   免疫调节   神经纤毛蛋白质1   调节性T细胞   调节性B细胞  

摘要： 免疫性血小板减少症(ITP)为一种获得性自身免疫性出血性疾病,该病以患者对自身抗原的免疫失耐受导致免疫介导的血小板破坏增多与生成不足为特征。近年来,研究发现调节性T细胞(Treg)、调节性B细胞(Breg)等免疫抑制性细胞亚群数量和(或)功能的异常,在ITP的发生、发展中发挥重要作用。阐明Treg、Breg与ITP发病的关系,有望为ITP的治疗提供新思路。因此,笔者拟就Treg与Breg的免疫调节机制,及其在ITP发病机制中的作用的研究进展进行综述。

关键词： 脑梗死   卒中   B淋巴细胞   白细胞介素10   转化生长因子β1   动脉粥样硬化   炎症  

摘要： 目的探讨脑梗死患者外周血调节性B细胞(Bregs)水平变化及其与颈动脉粥样硬化严重程度的相关性。方法选取2017-09-01—2018-05-01十堰市太和医院收治的动脉粥样硬化性脑梗死患者50例,并选择同期健康体检者50名为对照组。采用流式细胞术(FCM)检测外周血B细胞中CD19+CD5+CD1d+B细胞(Bregs)所占B细胞的比例;采用ELISA法测定Bregs培养液上清中白细胞介素-10(IL-10)及转化生长因子-β1(TGF-β1)水平。分析脑梗死患者外周血Bregs水平变化以及其与颈动脉粥样硬化程度的关系。结果脑梗死患者外周血Bregs水平及其分泌的IL-10、TGF-β1水平较对照组降低(P<0.05);随颈动脉粥样硬化严重程度加重,脑梗死患者外周血Bregs水平及IL-10、TGF-β1水平逐渐降低(均P<0.05)。结论动脉粥样硬化性脑梗死患者外周血Bregs水平低于健康人;Bregs水平与动脉粥样硬化性脑梗死患者颈动脉粥样硬化严重程度密切相关;外周血Bregs水平的降低以及功能的丧失参与了脑梗死的发生和发展,其机制可能与机体免疫平衡被打破有关。

关键词： 调节性B细胞   类风湿关节炎   白细胞介素-10   转化生长因子β  

摘要： 目的探讨调节性B细胞(regulatory B cells,Breg)及其相关细胞因子在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)治疗前后表达率。方法选取2016年10月至2016年12月期间就诊于内蒙古医科大学附属医院风湿免疫科初诊的RA患者36例,另选取30名年龄性别相匹配的健康志愿者作为对照组。采用流式细胞术检测外周血单个核细胞中CD19+CD24hiCD38hi Breg细胞。酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测Breg细胞相关细胞因子。分别观察并记录基线期及第2、4、12 W临床表现、实验室检查及影像学检查结果,分析Breg细胞及相关细胞因子与其相关性。结果基线期RA患者CD19+CD24hiCD38hi Breg细胞及其细胞因子白细胞介素(interleukin,IL)-10和转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)表达明显低于正常对照组(t=-17.38,P<0.05)。随着治疗时间的延长,RA患者关节压痛、肿胀等临床症状、实验室检查及影像学指标均改善,RA患者CD19+CD24hiCD38hi Breg表达率逐渐增多。治疗后RA患者CD19+CD24hiCD38hiBreg的表达率与RA的活动度呈负相关:用药2 W后与28项关节疾病活动评分(Disease Activity Score in 28 Joints,DAS28)、简化的疾病活动指数(Simple Disease Activity Index,SDAI)呈负相关(r值分别为-0.69,-0.48;P<0.05);用药4 W后与临床疾病活动指数(Clinical Disease Activity Index,CDAI)、SDAI呈负相关(r值分别为-0.58,-0.76;P<0.05);用药12 W后与DAS28、CDAI呈负相关(r值分别为-0.90,-0.67;P<0.05)。结论基线期,RA患者外周血中CD19+CD24hiCD38hi Breg细胞及其相关细胞因子的表达水平均明显低于健康人。随着治疗时间的延长,RA患者的CD19+CD24hiCD38hiBreg表达率逐渐增多,且CD19+CD24hiCD38hiBreg表达率与病情活动性评分呈负相关,推测CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞负向调控作用的缺失可能参与了RA发病机制。

关键词： 调节性B细胞   前列腺癌   IL-10   免疫治疗  

摘要： 调节性B细胞(regulatory B cell,Breg)是机体内分泌IL-10的主要细胞,在肝癌等恶性肿瘤免疫中发挥重要作用。研究将2015年6月至2017年12月来河北医科大学第四医院就诊的前列腺癌和良性前列腺增生患者纳入研究范围,免疫组化法检测良、恶性组织中IL-10水平和Ki-67增殖指数;流式细胞术检测外周血CD19^+IL-10^+Breg百分比;MTT实验检测前列腺癌细胞增殖率;Transwell侵袭实验检测前列腺癌细胞侵袭能力。免疫组化结果显示良性前列腺增生组织中IL-10平均光密度(average optical density, AOD)为12.60±2.72,Ki-67增殖指数为(3.00±0.84)%,前列腺癌组织中IL-10的AOD为86.10±11.49,Ki-67增殖指数为(45.30±4.11)%(t=6.23,P<0.000 1;t=10.08,P<0.000 1);流式细胞术检测结果显示良性前列腺增生患者外周血中Breg百分比为(0.14±0.03)%,前列腺癌患者外周血中Breg百分比为(0.41±0.04)%(t=5.082,P<0.000 1);相关性分析结果显示前列腺癌患者和良性前列腺增生患者外周血Breg百分比与组织中IL-10表达水平和Ki-67增殖指数均呈显著正相关(r=0.701 9,P=0.000 6;r=0.784 3,P<0.000 1);MTT及Transwell实验结果显示Breg促进前列腺癌细胞增殖和侵袭,IL-10在其中发挥重要作用。综上,Breg在前列腺癌患者外周血中所占比例显著升高,能够通过分泌IL-10促进前列腺癌细胞增殖和侵袭,这可能为前列腺癌的免疫治疗提供新靶点。

关键词： 复发性流产   抗磷脂综合征   Breg细胞   IFN-γ   TNF-α   Th细胞  

摘要： 目的探讨调节性B细胞(Breg)在复发性流产(RM)合并抗磷脂综合征(APS)中的作用。方法应用流式细胞术检测11例对照女性、18例复发性流产合并抗磷脂综合征患者(APS/RM)和37例无抗磷脂综合征的复发性流产患者(Non-APS/RM)外周血CD19^+CD24^(hi)CD38^(hi) Breg细胞比例及表达IFN-γ或TNF-α的辅助性T细胞(Th)的比例。结果与对照组相比较,CD19^+CD24^(hi)CD38^(hi) Breg细胞比例在APS/RM组[(3.42±1.31)%vs.(7.16±1.28)%,P<0.01]和Non-APS/RM组[(4.79±1.10)%vs.(7.16±1.28)%,P<0.01]显著降低,外周血表达IFN-γ的Th细胞比例在APS/RM组[(29.20±8.01)%vs.(20.60±2.63)%,P<0.01]和Non-APS/RM组[(25.00±6.06)%vs.(20.60±2.63)%,P<0.01]中均显著增高,表达TNF-α的Th细胞比例在APS/RM组[(46.30±7.36)%vs.(29.70±3.94)%,P<0.01]和Non-APS/RM组[(39.70±9.35)%vs.(29.70±3.94)%,P<0.01]中亦显著增高。与Non-APS/RM组相比,外周血CD19^+CD24^(hi)CD38^(hi) Breg细胞比例在APS/RM组显著降低(P<0.01),而表达IFN-γ或TNF-α的Th细胞比例显著增加(P<0.05)。相关性分析结果显示,在对照组中CD19^+CD24^(hi)CD38^(hi) Breg细胞比例与表达IFN-γ(r2=0.38,P<0.05)或TNF-α(r2=0.49,P<0.05)的Th细胞比例呈显著负相关性,而在APS/RM组和Non-APS/RM组中无显著相关性(P>0.05)。结论 APS/RM患者存在明显免疫失衡,即表达IFN-γ或TNF-α的Th细胞比例显著增加,可能与CD19^+CD24^(hi)CD38^(hi) Breg细胞表达减低导致的免疫抑制功能不足有关。

关键词： 乳腺癌   调节性B细胞   B10   IL-10  

摘要： 目的检测乳腺癌患者和健康对照者外周血中调节性B细胞CD5^+CD19^+IL-10(B10)表达量的差异,探讨B10在乳腺癌发生、发展中的作用。方法收集50例乳腺癌患者和50例健康体检者外周血,用流式细胞仪检测调节性B细胞的表达情况。结果乳腺癌患者外周血中B10的数量明显高于健康对照者(P<0.05),且Ⅲ-Ⅳ期乳腺癌患者外周血B10的百分率(3.50±0.20)%高于Ⅰ～Ⅱ期的患者(1.85±0.25)%,均高于健康对照组(1.30±0.50)%。结论乳腺癌临床分期越高,B10含量逐渐升高,表明B10细胞与乳腺癌的发展存在着一定的相关性。

关键词： 调节性B细胞   肿瘤   细胞因子  

摘要： 调节性B细胞(Bregs)是新近发现的B细胞子集,其在抑制肿瘤免疫和促进肿瘤细胞的增殖和转移中起重要作用。Bregs可通过分泌IL-10、IL-35和TGF-β等细胞因子抑制多种细胞亚型,从而抑制抗肿瘤免疫应答。

关键词： 乙型肝炎病毒   慢性HBV感染   慢性化   B细胞   调节性   慢性感染   人类健康   肝硬化  

摘要： 乙型肝炎病毒(HBV)慢性感染是在我国乃至全球都非常普遍的问题,据统计,全球有超过20亿人曾感染过HBV[1]。慢性HBV感染和肝硬化、肝癌的发生发展密切相关,并导致每年约70万人死亡[2],严重危害人类健康。

关键词： 原发免疫性血小板减少症   动物模型   抗血小板特异性抗体   调节性B细胞   细胞因子  

摘要： 目的:1.观察基于“脾肾气火相关病机”的健脾滋肾泻火方及其拆方对ITP小鼠模型的治疗效果。2.探讨健脾滋肾泻火方及其拆方对ITP小鼠的作用环节。3.阐明健脾滋肾泻火方与Breg相关的作用机理及ITP“脾肾气火相关”病机的科学内涵。方法:1.模型建立采用改良后的抗CD41单克隆抗体被动免疫诱导法。通过第1天注射200ul 68ug/kg浓度、第2天注射200ul 102ug/kg浓度、第3天至第13天以每天注射200ul 136ug/kg浓度的抗小鼠CD41单抗（MWReg30）于Balb/c小鼠腹腔的方式诱导ITP动物模型。2.实验分组及处理干预:（1）空白对照组:PBS腹腔注射+生理盐水灌胃处理;（2）模型对照组:抗CD41抗体腹腔注射+生理盐水灌胃处理;（3）强的松对照组:抗CD41抗体腹腔注射+强的松灌胃处理;（4）中药处理组:（1）健脾益气组:抗CD41抗体腹腔注射+健脾益气方处理;（2）滋养肾阴组:抗CD41抗体腹腔注射+滋肾养阴方处理;（3）清热泻火组:抗CD41抗体腹腔注射+清热泻火方处理;（4）健脾滋肾泻火组:抗CD41抗体腹腔注射+健脾滋肾泻火方处理。持续灌胃给药10天（能够满足实验要求的最长给药时间）。3.造模及给药处理期间动态观察并记录小鼠的一般状态、体重以及小鼠皮肤黏膜出血等情况;同时在模型建立的第0天、第3天以及在药物干预的第10天（给药周期结束）通过小鼠尾静脉取20ul全血进行血小板计数检测与分析;并于模型建立成功后随机取各组小鼠股骨骨髓进行巨核细胞总数以及产板巨核细胞数量观察与记录,进行模型评价以及健脾滋肾泻火方及其拆方治疗ITP动物模型的疗效分析。4.给药结束当天采用颈椎脱臼法处死小鼠后无菌取脾脏,200目无菌滤网研磨,红细胞裂解液裂红后制得脾组织单个核细胞悬液。选择公认的小鼠调节性B细胞（Breg）表型CD1dhiCD19+CD5+B细胞亚群为观察对象,采用流式细胞分析仪进行空白对照组、模型对照组、强的松对照组以及中药各处理组治疗后脾组织内CD1dhiCD19+CD5+Breg细胞占淋巴B细胞比重分析;磁珠分选技术分选出调节性B细胞（Breg）后采用Real-time PCR进行各组间Breg细胞IL-10m RNA表达量分析;将分选后所得包含Breg与不含Breg的脾组织单个核细胞体系分别加入CD3/CD28功能性抗体微珠,共培养72小时后取培养上清,ELISA法进行各组间脾组织单个核细胞体系中Breg细胞存在与不存在条件下培养上清中相关炎性因子IFN-γ、TNF-α分泌量的检测。结果:1.造模期间:（1）体重比较:空白对照组小鼠体重表现为:造模前后体重比较不具有统计学意义（Z=-1.918,P=0.055>0.05）,造模前后体重无差别。模型诱导各组小鼠体重表现为:造模前后体重比较,t=4.097,P=0.0001<0.001,有显著统计学意义,造模后体重较造模前减轻。（2）血小板计数比较:空白对照组造模前后血小板计数比较（Z=-0.757,P=0.449>0.05）无差异;模型诱导各组造模前后血小板计数比较（t=66.871,P=0.0001）有显著差异,造模后血小板计数明显降低（3）一般状态比较:模型诱导各组一般情况较正常对照组差,主要表现为精神状态较差以及活动度减低、毛发脏乱、饮食量下降、皮肤黏膜出血情况多见且难以主动吸收等方面;正常对照组未见明显皮下出血。（4）巨核细胞与产板巨核细胞情况:与正常对照组比较模型诱导各组小鼠骨髓中巨核细胞呈现巨核细胞总数增多,产板巨核减少趋势。2.给药期间:（1）体重比较:与模型对照组比较,空白对照组（P=0.0001）、健脾益气组（P=0.0001）、健脾滋肾泻火组（P=0.0001）以及强的松组（P=0.027）体重均有所增加,且均有P<0.05,差异具有统计学意义;滋养肾阴组（P=0.443）、清热泻火组（P=0.999）与模型对照组比较无统计学差异（P>0.05）。（2）血小板计数比较:空白对照组血小板计数（1046±75.01）高于其余各组（P<0.001）;模型对照组血小板计数（549±75.49）低于清热泻火组（713±54.78）(P<0.001)、健脾滋肾泻火组（735±54.78）(P<0.001)以及强的松组（783±49.00）(P<0.001);与健脾益气组（605±66.57）、滋养肾阴组（605±66.57）比较无统计学差异（P>0.05）;各处理组比较:强的松组血小板计数高于健脾滋肾泻火组以及清热泻火组（P<0.05）,健脾滋肾泻火组与清热泻火组血小板计数比较无统计学差异（P>0.05）。（3）一般情况比较:模型对照组、滋养肾阴组小鼠表现为精神状态差,反应迟钝,饮食量少以及皮肤黏膜出血且主动愈合时间长等情况;健脾益气组较