关键词： 过敏性哮喘   调节性B细胞   调节性T细胞   特异性免疫治疗  

摘要： 目的：探讨CD19+CD24highCD27+调节性B淋巴细胞(Regulatory B Lympho-cyte，Breg)及相关细胞因子在儿童哮喘过敏原特异性免疫治疗过程中的早期变化及机制。　　方法：纳入41例过敏性哮喘非急性发作期患儿，同年龄20例健康儿童为对照组，41例中20例行AIT并完成初始治疗。所有患儿于入组时取血备检，AIT治疗患儿于初始治疗完成后再次取血。(1)采用流式细胞术检测外周血CD24highCD27+Breg、Th1、Th2、Th17、Treg细胞比例及Breg相关细胞因子CD80、CD86、CD1d表达;(2)通过实时荧光定量PCR检测IL-10、TGF-β、IFNG、T-bet、IL-4、GATA3、IL-17A、RORγt、FOXP3mRNA水平;(3)采用ELISA检测外周血浆IL-10、TGF-β浓度。　　结果：　　(1)哮喘非急性发作期患儿的外周血中CD19+CD24highCD27+Breg比例降低(14.12±2.98vs7.96±4.11)，其表面细胞因子CD86、CD1d表达下降(P＜0.05)，CD80表达升高(P＜0.05)。AIT初始阶段完成后Breg比例增加(7.53±4.37vs11.46±3.95，P＜0.05);但其表面共刺激分子CD80、CD86、CD1d与治疗前相比无统计学差异(P＞0.05);CD19+B细胞中IL-10mRNA的表达水平升高[(0.87±1.07)×10-1vs(1.50±0.78)×10-1，P＜0.05];TGF-β的表达水平有升高趋势[(4.33±4.15)×10-1vs(6.33±10.47)×10-1，P＞0.05]。　　(2)哮喘非急性发作期患儿的外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg(7.03±4.63vs2.32±2.01)、Th1(21.43±8.04vs13.24±11.41)比例下降(P＜0.05)，Th2(1.56±0.64vs4.58±3.75)、Th17(0.88±0.60vs2.71±2.28)比例升高(P＜0.05)。AIT初始治疗阶段完成后，Th1、Th2、Th17和Treg比例均无明显改变(P＞0.05);AIT治疗后T-bet[(6.30±5.55)×10-2vs(3.43±1.63)×10-2]、GATA3[(16.56±11.69)×10-2vs(8.18±6.15)×10-2]、RORrt[(19.89±24.22)×10-2vs(2.90±5.44)×10-2]表达水平均下降(P＜0.05)，IFNG、IL-4、IL-17A和FOXP3mRNA差异不大(P＞0.05)。　　(3)哮喘非急性发作期患儿的外周血中IL-10与对照组无差异，AIT治疗初始完成后患儿外周血浆中IL-10(4.87±2.42vs7.07±2.55)pg/ml、TGF-β(469.18±182.14vs560.16±163.98)pg/ml含量明显升高(P＜0.05)。　　结论：CD19+CD24highCD27+Breg在哮喘非急性发作期明显降低，进行AIT的哮喘患儿在初始治疗完成后即有Breg比例的升高及其分泌IL-10功能的恢复，而CD4+T细胞Th1、Th2、Th17和Treg差异无统计学意义，提示儿童哮喘的AIT早期可能主要通过对Breg的数量及分泌功能的调节发挥作用。

关键词： 转化生长因子β   人羊膜间充质干细胞   外周异种神经移植   免疫耐受   调节性T细胞   调节性B细胞  

摘要： 研究背景:外周神经缺损是临床上比较常见的疾病,异种神经移植是其中的一种手术治疗方法,而外周神经异种移植最主要障碍是急性免疫排斥。hAMSCs移植已在角膜修复、脊髓损伤等临床治疗取得较好的结果,且具有调节免疫炎症的功能,可能是治疗异种神经移植的潜在方法。同时hAMSCs表达TGF-β1,而TGF-β1是重要的免疫调节因子,在早期免疫炎症反应中发挥不可替代的作用,可能是hAMSCs发挥免疫炎症调节的关键分子。目的:为了干预外周神经异种移植后急性免疫排斥反应,本研究对hAMSCs的治疗潜力进行摸索,并探讨TGF-β1在hAMSCs干预异种移植产生的急性免疫排斥反应的作用,从而为促进临床应用异种神经移植提供理论依据。方法:将SD大鼠的坐骨神经移植到成年雄性C57 BL/6小鼠的坐骨神经中完成异种神经移植造模。在第一个实验中,将hAMSCs(实验组)或用磷酸盐缓冲盐水(PBS;对照组)尾静脉注射到异种神经移植小鼠体内。在治疗后的第7天、第14天和第28天通过CatWalk步态行为学分析评估小鼠的坐骨神经功能情况。在第二个实验中,构建稳定高表达和低表达TGF-β1的hAMSC细胞,将稳定表达高或低水平TGF-β1的hAMSCs(实验组)或未经修饰的hAMSCs(对照组)尾静脉注射到异种神经移植小鼠体内。在移植治疗后的第14天,评估各实验小鼠组的坐骨神经功能指数(SFI)、Treg细胞和Breg细胞的比例变化、血清中TGF-β1和IL-10的含量变化和神经移植物组织中TGF-β1和IL-10 mRNA的表达情况。最后评估坐骨神经功能指数的改善情况与免疫细胞比例和血清中细胞因子之间的相关性。结果:1.相对于PBS治疗组,hAMSC移植治疗改善了异种神经移植小鼠的坐骨神经功能指数。2.与低表达和正常表达TGF-β1治疗组小鼠相比,高表达TGF-β1的hAMSCs治疗组能更进一步改善异种神经移植小鼠的坐骨神经功能指数,同时增加了 Treg细胞和Breg细胞的比例,提高了血清中TGF-β1和IL-10的含量。3.在hAMSCs治疗后的第14天,SFI与Treg细胞、Breg细胞、外周血清中的TGF-β1、IL-10呈正相关关系。结论:***尾静脉移植能够改善异种神经移植小鼠的坐骨神经功能,可能成为一种新的治疗策略。***可能通过TGF-β1介导Treg和Breg和外周血清中的TGF-β和IL-10调节免疫排斥反应,促进外周神经异种移植后的功能恢复。3.在异种神经移植小鼠中,hAMSC细胞中的TGF-β1可能是Treg细胞和Breg细胞发挥免疫耐受作用的关键调节因子。

关键词： 自身免疫性溶血性贫血   CD5分子   B淋巴细胞   调节性B细胞   调控  

摘要： 自身免疫性溶血性贫血（autoimmune hemolytic anemia,AIHA）/Evans综合征是一种由免疫系统对抗自身红细胞和/或血小板,导致红细胞和/或血小板寿命明显缩短、破坏增多的免疫性血细胞减少症,B淋巴细胞在AIHA/Evans综合征中具有重要作用,目前公认B细胞是异质性群体,除主要分泌抗体为主的B细胞群,还具有分泌细胞因子、发挥免疫调节作用的B细胞,这类B细胞被称为调节性B细胞（Bregs）[1]。B淋巴细胞据其细胞表面CD5的表达情况,可分为CD5+（B1）和CD5-（B2）B淋巴细胞两个亚群,CD5+B淋巴细胞亚群具有重要功能[2]。CD5+B细胞在许多研究中被认为具有调节性,因此被纳入Breg细胞家族。既往研究发现CD5+B淋巴细胞在AIHA/Evans综合征患者中数量增高,且与疾病的严重程度相关[3];主要分泌IL-10[4],推测其在AIHA/Evans综合征患者体内发挥免疫调节作用。CD5+B细胞是否通过CD5发挥免疫调控作用?是否还存在如Foxp3、PD-L1等调控细胞群?本论文拟检测AIHA/Evans综合征患者外周血B、T淋巴细胞表面CD5分子表达和血清CD5分子水平及临床意义,同时检测CD5+B淋巴细胞表面Foxp3、PD-L1、PD-L2及Fas L的表达,并分析以上检测指标与临床指标的相关性,研究AIHA/Evans综合征患者CD5+B淋巴细胞发挥调控作用可能的环节。第一部分AIHA/Evans患者外周血CD5分子水平及临床意义目的:了解AIHA/Evans综合征患者外周血CD5分子水平及临床意义方法:应用流式细胞术（FCM）检测18例溶血发作AIHA/Evans综合征患者,12例缓解AIHA/Evans综合征患者外周B、T淋巴细胞CD5表达的平均荧光强度（MFI）;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法测血清CD5浓度,以13名健康对照者为阴性对照,6例CLL患者为阳性对照,并分析上述指标与临床指标的相关性。结果:1、AIHA/Evans综合征患者溶血发作组CD19+B淋巴细胞CD5MFI[（41.67±14.44）%]高于缓解组[（20.50±9.75）%,P=0.0005]及健康对照组[（18.43±15.80）%,P=0.018]。AIHA/Evans综合征患者CD19+B淋巴细胞CD5 MFI与RBC（R=-0.624,P=0.002）、HB（R=-0.668,P=0.0005）呈负相关,与RET%（R=0.97,P<0.0001）呈正相关。2、AIHA/Evans综合征患者溶血发作组CD4+T淋巴细胞CD5平均荧光强度[（16029±4892）%]低于缓解组[（22895±4892）%,P<0.01]及健康对照组[（22967±5372）%,P<0.01],高于CLL组[（8834±6043）%,P<0.05],差异均具有统计学意义。3、AIHA/Evans综合征患者溶血发作组CD8+T淋巴细胞CD5 MFI[（10876±3765）%]低于缓解组[（14779±4165）%,P<0.05]及健康对照组[（5096±4271）%,P<0.05],高于CLL组[（5096±4271）%,P<0.05]。4、AIHA/Evans综合征患者血清CD5浓度[（4.08±5.80）ng/ml]高于健康对照组[（1.44±1.77）ng/ml,（P<0.05）]。AIHA/Evans综合征患者溶血发作组血清CD5浓度[（5.87±7.74）ng/ml]高于缓解组[（2.30±1.72）ng/ml,P=0.097]及健康对照组[（1.44±1.77）ng/ml,（P<0.01）],溶血发作组与健康对照组差异有统计学意义。AIHA/Evans综合征患者血清CD5浓度与Ret绝对计数（R=0.415,P=0.023）,补体C4（R=0.430,P=0.036）,CRP（R=0.896;P<0.0001）呈正相关。结论:CD5在AIHA/Evans综合征患者在不同淋巴细胞上的表达强度不同,B淋巴细胞上增强,T淋巴细胞表面下降;血清游离CD5浓度增高。第二部分AIHA/Evans患者CD5+B淋巴细胞调节功能研究目的:了解AIHA/Evans综合征患者外周血CD5+B淋巴细胞免疫调控作用方法:应用流式细胞术（FCM）检测19例溶血AIHA/Evans综合征患者,12例缓解AIHA/Evans综合征患者以及健康对照者外周血CD19+CD5+和CD19+CD5-B淋巴细胞Foxp3、PD-L1、PD-L2及Fas L的表达,RT-PCR方法测CD19+B淋巴细胞Foxp3、PD-L1、PD-L2及Fas L m RNA水平,并分析其与临床指标的相关性。结果:1、AIHA/Evans综合征患者溶血发

关键词： Th17细胞   调节性B细胞   分化   调控  

摘要： 目的:探讨Th17细胞对体外调节性B(Breg)细胞分化的调控作用。方法:分离小鼠脾脏单个核细胞,进一步分选初始T细胞,利用转化生长因子(TGF)-β和白细胞介素(IL)-6诱导其向Th17细胞分化后,与初始B细胞共培养,体外利用脂多糖(LPS)或抗-IgM抗体诱导初始B细胞向Breg分化。检测Th17细胞对CD19^+CD5^+CD1d^+和CD19^+CD11b^+Breg细胞分化的影响,以及对其分泌IL-10等细胞因子和免疫球蛋白的影响。结果:Th17细胞可抑制CD19^+CD5^+CD1d^+Breg细胞分化,并抑制IL-10的分泌,对TGF-β、免疫球蛋白IgG、IgM和IgA分泌并无明显影响。结论:Th17细胞体外可抑制Breg细胞分化和IL-10的分泌。

关键词： 器官移植   免疫耐受   颗粒酶B   调节性B细胞   调节性T细胞   免疫调节   围手术期管理   免疫抑制剂   病毒   肿瘤  

摘要： 器官移植术后的排斥反应以及长期使用免疫抑制所致的代谢性疾病、肾功能不全、感染、肿瘤复发等并发症,严重影响着受者的长期生存和生活质量。因此,诱导器官移植术后免疫耐受是移植科医师所追求的最终目标。目前研究发现,调节性B细胞(Breg)在移植术后免疫耐受的形成中发挥了重要作用。本文主要从分泌颗粒酶B(GrB)的Breg(GrB^+Breg)的发现和特点、GrB发挥免疫调节作用的方式、GrB^+Breg在器官移植术后的免疫调节作用以及常用免疫抑制剂对GrB^+Breg的作用进行文献综述。

关键词： 关节炎,类风湿   调节性B细胞   白细胞介素-10   免疫抑制   治疗   综述  

摘要： 调节性B细胞(Bregs)的主要免疫抑制作用是经分泌白细胞介素-10产生的。人类Bergs的表型主要是CD19+CD24hiCD38hi和CD19+CD24hiCD27+。目前,研究Bregs的调控主要经过Toll样受体、BAFF/APRIL这两条信号通路。Bregs在类风湿关节炎中数量减少,功能受损,与疾病活动性相关。Bregs有可能帮助判断类风湿关节炎预后和生物制剂选择,并可能成为治疗的新靶点。

关键词： 乳腺浸润性导管癌   肿瘤浸润淋巴细胞   调节性T淋巴细胞   细胞毒性T淋巴细胞   叉状头/翅膀状螺旋转录因子   CD8  

摘要： 目的检测叉状头/翅膀状螺旋转录因子(FoxP3)和CD8在Lumina B型乳腺癌组织的表达,探讨FoxP3+调节性T淋巴细胞(Treg)和CD8+细胞毒性T淋巴细胞(CTL)与Lumina B型乳腺癌患者预后之间的关系。方法免疫组织化学方法检测乳腺癌组织石蜡切片中FoxP3和CD8在肿瘤间质的表达量;独立样本t检验分析FoxP3和CD8的表达水平与患者年龄、肿瘤大小、淋巴结状态、组织病理分级的关系。Kaplan-Meier Log-rank法分析CD8和FoxP3的表达与乳腺癌患者总体生存率和无病生存率的关系。结果CD8的高表达与肿瘤病灶≤2 cm、淋巴结转移阴性以及较低的病理分级(Ⅰ/Ⅱ级)有关(P<0.05);FoxP3高表达与肿瘤病灶>2 cm、淋巴结转移阳性有关(P<0.01)。另外,FoxP3的高表达明显降低乳腺癌患者的无病生存率(P<0.05),而CD8的高表达提高患者的无病生存率(P<0.01)。结论肿瘤浸润的CD8+CTL与良好预后有关,而肿瘤浸润的FoxP3+Treg与不良预后明显相关。

关键词： 2型糖尿病   Roux-en-Y胃旁路术   血糖   调节性B细胞   胃肠激素   应激激素  

摘要： 目的研究2型糖尿病患者Roux-en-Y胃旁路术(RYGB)术后血糖水平、调节性B细胞(Breg)、胃肠激素、应激激素的相关性。方法选择2015年6月至2018年6月住院行RYGB的T2DM患者103例,术后根据疗效分为完全缓解组(n=88)和改善组(n=15),检测患者手术前后血糖水平、Breg、胃肠激素、应激激素,分析术后各指标间的相关性。结果完全缓解组术后12个月空腹血糖(FPG)、皮质醇(Cor)、去甲肾上腺素(NE)、胃饥饿素(Ghrelin)、瘦素(Leptin)明显低于改善组,Breg明显高于改善组(P<0.05)。两组治疗前、治疗后12个月胰高血糖素样肽(GLP)-1水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。Breg与FPG、体重指数(BMI)呈正相关(r=0.842,0.703,均P<0.05),Ghrelin与FPG、BMI呈负相关(r=-0.659,-0.582,均P<0.05),Leptin与FPG、BMI呈负相关(r=-0.720,-0.697,均P<0.05),Cor、NE与FPG呈负相关(r=-0.347,-0.334,均P<0.05)。结论2型糖尿病患者RYGB术后Breg、胃肠激素、应激激素与血糖水平、BMI相关。

关键词： 调节性B细胞   吉兰-巴雷综合征   细胞因子   白介素  

摘要： 目的探讨调节性B细胞及相关细胞因子在吉兰-巴雷综合征(GBS)患者中的表达。方法纳入新疆医科大学第一附属医院神经内科自2018年10月至2019年6月收治的44例GBS患者进行研究,设为GBS组。同时选择同期该院健康体检者44例进入研究,设为对照组。应用流式细胞术检测2组被试外周血单个核细胞中CD19^+CD24^hiCD38^hi调节性B细胞、CD19^+CD24^hiCD27^+调节性B细胞在CD19^+淋巴细胞中所占比例。应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测2组被试血清中白介素(IL)-10、IL-35和转化生长因子-β1(TGF-β1)含量。结果与对照组比较,GBS组CD19^+CD24^hiCD38^hi调节性B细胞、CD19^+CD24^hiCD27^+调节性B细胞在CD19^+B淋巴细胞中的占比均明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,GBS组IL-10、IL-35含量均明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05);TGF-β1含量有所上升,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论调节性B细胞通过IL-10、IL-35细胞因子途径在GBS发病过程中发挥作用。