关键词： 关节炎,类风湿   B淋巴细胞   调节性B细胞  

摘要： 目的探讨Netrin-1在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜组织中的表达及作用。方法收集2012年7月至2017年10月来我院就诊的RA患者;免疫组化检测滑膜组织中Netrin-1的表达和B细胞的比例;流式检测外周血中调节性B细胞(Breg)的比例;收集RA患者的外周血,采用人淋巴细胞分离液分离外周血中的淋巴细胞,流式检测CD19+IL-10+Breg的比例。结果免疫组化的结果显示,RA组CD19+B细胞的数目显著高于对照组[(64.24±7.41)vs.(4.40±1.34)]mm^2,差异有统计学意义(t=7.471,P<0.001)。相关性分析的结果显示Netrin-1的表达与B细胞的数目,有明显的负相关性(r=-0.8049,P<0.001)。流式结果显示,RA组外周血中CD19+B细胞的比例显著高于对照组[(2.64±0.38)vs.(1.73±0.22)]%,差异有统计学意义(t=4.013,P<0.001)。RA组CD19+IL-10+Breg数目显著低于对照组[(1.86±0.38)vs.(6.58±0.87)]%,差异有统计学意义(t=6.526,P<0.001)。相关性分析的结果显示Netrin-1的表达与外周血中Breg比例具有显著的正相关性(r=0.7256,P<0.001)。体外实验结果显示,Netrin-1低浓度组及Netrin-1高浓度组B细胞比例均显著低于RA组[(16.27±3.45)vs.(7.33±1.02)vs.(4.24±0.68)]%,差异有统计学意义(t=3.320,P=0.029;t=4.858,P=0.008)。Netrin-1低浓度组及Netrin-1高浓度组Breg比例均显著高于RA组[(2.23±0.25)vs.(3.57±0.39)vs.(4.61±0.86)]%,差异有统计学意义(t=4.899,P<0.001;t=6.887,P<0.001)。结论Netrin-1在RA滑膜组织中低表达,Netrin-1可能通过促进Breg的分化,对RA的治疗具有一定的作用。

关键词： 原发性干燥综合征   高迁移率族蛋白B1   辅助性T细胞17   调节性T细胞  

摘要： 目的探讨原发性干燥综合征(pSS)患者外周血中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平与辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的关系。方法选取2018年5月~2019年5月山西医科大学第二医院风湿免疫科初诊pSS患者40例为pSS组,同期健康体检者20名为对照组。采集肘静脉血,流式细胞仪检测Th17、Treg细胞个数,计算Th17/Treg比值;流式细胞仪微球捕获芯片技术检测血清白细胞介素(IL)-17、IL-6、IL-10水平;酶联免疫吸附测定法检测HMGB1、转化生长因子-β(TGF-β)水平。将上述各指标进行组间比较,并分析HMGB1与上述细胞及相关细胞因子的相关性。结果pSS组HMGB1、Th17、Th17/Treg水平高于对照组,而Treg水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。pSS组IL-17、IL-6、TGF-β水平高于对照组,而IL-10水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析表明HMGB1与Th17、Th17/Treg、IL-17、IL-6水平呈正相关(r=0.738、0.502、0.762、0.578,均P<0.05),与Treg、IL-10水平呈负相关(r=-0.657、-0.686,均P<0.05),与TGF-β水平无明显相关性(P>0.05)。结论pSS患者外周血HMGB1异常高表达,且与健康人相比存在明显的T细胞免疫异常,提示HMGB1可能通过调节Th17/Treg平衡参与pSS的发生、发展。

关键词： 牙周炎   调节性B细胞   宿主免疫   白细胞介素33   转化生长因子β  

摘要： 目的:探讨牙周炎时宿主不同组织内转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)+调节性B细胞的变化特点,比较健康个体与牙周炎模型之间的差异,分析其潜在的作用机制,为进一步揭示牙周炎病理机制提供理论支持。方法:采用SD大鼠建立实验性牙周炎病理模型。采用流式细胞术分析各组不同组织内TGF-β^+调节性B细胞占总淋巴细胞的比例,采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time polymerase chain reaction,Real-time PCR)检测各样本中B细胞发育相关因子B细胞活化因子(B-cellactivatingfactor,BAFF)、增殖诱导配体(aproliferation-inducingligand,APRIL)及白细胞介素-33(interleukin-33,IL-33)的表达水平。结果:与健康组比较,牙周炎大鼠牙龈中TGF-β^+调节性B细胞比例显著上调(P<0.05);而在外周血中两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。在牙龈中,牙周炎大鼠各检测基因的相对表达水平与健康组比较差异显著(P<0.05);在外周血中,牙周炎大鼠与健康组各检测基因的相对表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:牙周炎时宿主牙龈中TGF-β^+调节性B细胞上调,这与局部BAFF、APRIL及IL-33等细胞因子表达水平呈正相关。

关键词： B淋巴细胞   吉兰-巴雷综合征/综合征   治疗结果  

摘要： 目的研究吉兰-巴雷综合征(GBS)患者外周血CD19^+CD24^hiCD38^hiBreg、CD19^+CD24^hiCD27^+Breg细胞的变化。方法选取2018年10月—2019年6月新疆医科大学第一附属医院昌吉分院收治的GBS患者50例作为GBS组,选取同期该院健康体检者50例作为对照组。检测两组外周血CD19^+CD24^hiCD38^hiBreg、CD19^+CD24^hiCD27^+Breg的表达。结果GBS组CD19^+CD24^hiCD38^hiBreg细胞表型比例较对照组低(P<0.05),GBS组CD19^+CD24^hiCD27^+Breg细胞表型比例较对照组低(P<0.05)。结论GBS患者外周血CD19^+CD24^hiCD38^hiBreg、CD19^+CD24^hiCD27^+Breg细胞减少,其可能参与GBS的发病,可作为疗效指标之一。

关键词： 调节性B细胞   免疫抑制   肿瘤治疗  

摘要： 调节性B细胞(regulatory B cell, Breg)是一类具有免疫抑制功能的B细胞亚群,在维持机体免疫平衡中发挥重要作用,主要通过分泌抗炎性细胞因子发挥免疫抑制功能。Breg在炎症、自身免疫性疾病及肿瘤等疾病中发挥重要作用,并逐渐成为肿瘤免疫治疗研究的新焦点。本文介绍了肿瘤微环境中Breg的表型及其作用,综述了近年来以Breg为靶点的肿瘤免疫治疗研究进展,以期为利用Breg提高肿瘤免疫治疗效果提供新思路。

关键词： 三氯乙烯   药疹样皮炎   CD4^+CD25^+调节性T细胞   CD19^+CD24^+CD27^+调节性B细胞  

摘要： 目的研究三氯乙烯(TCE)药疹样皮炎患者外周血调节性T细胞和调节性B细胞的变化特点。方法采用流式细胞术,分别于急性期和临床治愈期对15例TCE药疹样皮炎患者进行外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞(CD4^+CD25^+Tregs)及CD19^+CD24^+CD27^+调节性B细胞(CD19^+CD24^+CD27^+Bregs)检测,并与15例不接触TCE的健康对照者进行比较。结果TCE药疹样皮炎患者急性期外周血CD4^+CD25^+Tregs比值(0.99%±0.55%)及CD19^+CD24^+CD27^+Bregs比值(7.86%±2.35%)均低于对照组(P<0.01);临床治愈期CD4^+CD25^+Tregs比值(2.54%±0.42%)及CD19^+CD24^+CD27^+Bregs比值(23.28%±8.62%)高于急性期(P<0.01),但临床治愈期CD4^+CD25^+Tregs比值(2.54%±0.42%)仍均低于对照组,以上差异均有统计学意义(P<0.01)。结论TCE药疹样皮炎患者急性期调节性T细胞及调节性B细胞数量明显减少,治疗后随病情好转数量明显增高,提示调节性B细胞可能与调节性T细胞一起参与TCE致药疹样皮炎的致病过程。

关键词： 脓毒症   肠屏障   多因素分析   临床预后  

摘要： 目的探究脓毒症患者血液中炎症和免疫指标水平对肠屏障状况及临床预后的影响。方法回顾性分析2015年9月-2018年9月川北医学院附属医院ICU收治的82例脓毒症患者的临床资料,根据患者急性生理与慢性健康评分(APACHEⅡ)及脓毒症临床症状评分指南,分为轻中度脓毒症组43例和重度脓毒症组39例。采集两组患者血样本,测定血清炎症因子高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein,HMGB1)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)和免疫指标调节性T细胞(Treg)、辅助性T细胞(TH)水平,以及反映患者肠道屏障状况的二胺氧化酶(Diamine Oxidase,DAO)、D-乳酸(D-lactic acid,D-LAC)及肠脂肪酸结合蛋白(Intestinal Fatty Acid Binding Protein,IFABP)含量,并分析上述指标与患者预后的关系。结果轻中度脓毒症患者组的HMGB1(23.21±4.23,ng/ml)、Treg(3.62±1.07,%)、IL-6(86.67±21.38,pg/ml)、TH(1.54±0.47,%)水平均低于重度脓毒症患者组,TNF-α(0.36±0.05,ng/L)水平高于重度脓毒症患者组(P<0.05)。轻中度脓毒症患者组的肠屏障功能指标DAO(17.36±1.86,mg/ml)、D-LAC(0.22±0.04,mmol/ml)、IFABP(21.38±3.62,pg/L)水平均低于重度脓毒症患者组(P<0.05)。存活组患者的HMGB1(24.12±4.36,ng/ml)、Treg(3.78±1.13,%)、IL-6(89.36±25.73,pg/ml)、TH(1.68±0.52,%)水平均低于死亡组,TNF-α(0.38±0.07,ng/L)水平高于死亡组(P<0.05)。多因素分析结果HMGB1、Treg、IL-6、TNF-α、TH指标与治疗后患者结局具有相关性。结论血清高迁移率族蛋白B1、调节性T细胞、IL-6、TNF-α、TH水平均与脓毒症患者肠屏障功能具有相关性,并影响患者预后,对患者病情具有一定的诊断意义。

关键词： 肺癌   轴突导向蛋白4B(SEMA4B)   肿瘤免疫微环境   血管形成  

摘要： 目的探讨轴突导向蛋白4B(SEMA4B)能否调控肺癌细胞的生长。方法构建SEMA4B过表达病毒载体,并建立稳定过表达SEMA4B的Lewis肺癌(LLC)细胞株。采用实时定量PCR检测过表达的LLC细胞SEMA4B的表达水平。采用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)法检测SEMA4B对体外培养的LLC细胞增殖的影响。检测LLC细胞移植瘤小鼠模型中SEMA4B对LLC细胞生长的影响。采用流式细胞术检测SEMA4B对肿瘤免疫微环境中CD4^+CD25^+FOXP3^+调节性T细胞(Treg)的百分比。免疫组织化学染色法检测瘤组织CD31、增殖细胞核抗原(PCNA)、 CC趋化因子配体2(CCL2)及F4/80^+巨噬细胞的表达。结果成功建立了SEMA4B过表达细胞株, SEMA4B过表达促进LLC细胞增殖,过表达组的移植瘤瘤块体积明显大于对照组。过表达组瘤组织CD31表达水平升高、巨噬细胞和Treg增加、 CCL2升高。结论 SEMA4B通过增加肿瘤组织巨噬细胞、 Treg数量,促进肿瘤血管形成,从而促进肺癌细胞的增殖和肿瘤生长。

关键词： 类风湿关节炎   调节性B细胞   Meta分析  

摘要： 目的:类风湿关节炎（RA）患者外周血中调节性B细胞（Bregs）比例减少和功能受损可能参与其发病机制,采用Meta分析的方法系统评价RA患者外周血Bregs比例的变化,进一步明确Bregs是否参与了RA的发病过程及与疾病活动度的关系,为治疗RA提供新思路。方法:检索PubMed、Embase、The Cochrane Library、Web of Science、中国知网数据库（CNKI）、万方数据知识服务平台等数据库,检索时限均为自建库起至2020年4月。中文检索词汇包括:“类风湿关节炎”“RA”“调节性B细胞”“Bregs”“B10细胞”等。英文检索词主题为:“Rheumatoid arthritis”and“B-Lymphocytes,Regulatory”。检索过程采用Mesh主题词与自由词搭配。纳入符合标准的文献并提取相关结局指标数据,采用NOS量表对文献进行质量评估。提取的数据用Review Manager 5.3软件进行统计学处理。首先进行异质性分析,根据异质性结果选择合适效应模型进行系统评价。进一步采用逐一剔除文献看合并效应量的方法进行敏感性分析。另外用漏斗图法定性判断是否存在发表偏倚的评价。结果:1.共纳入7个中高质量的病例-对照研究,包括719例RA患者,335例健康对照者。纳入文献异质性较高（P<0.001,I2=98%）,应用随机效应模型对数据进行合并。***分析结果显示:RA患者外周血Bregs比例显著低于健康对照组,差异有统计学意义[SMD=-1.17,95%CI（-2.23,-0.10）,P<0.05];***患者外周血Bregs比例与DAS28呈负相关[r=-0.286,95%CI（-0.369,-0.198）,P<0.001]。4.与健康对照组相比,RA患者血清中IL-10水平无显著差异[SMD=-4.94,95%CI（-10.44,0.56）,P=0.08],RA患者外周血Bregs细胞内IL-10水平降低[SMD=-3.32,95%CI（-4.02,-2.63）,P<0.001]5.亚组分析显示:RA患者外周血中“CD24hi、CD38hi”标记的Bregs比例显著低于健康对照组,差异具有统计学意义[SMD=-1.80,95%CI（-3.48,-0.11）,P=0.04];RA患者和健康对照组外周血中“CD24hi、CD27+”标记的Bregs比例无显著差异[SMD=-0.37,95%CI（-1.36,0.61）,P=0.46]。6.敏感性分析对每个研究进行剔除分析后合并效应量间无显著差异,说明Meta分析结果较稳定。7.漏斗图定性评价本次Meta分析未发现明显发表偏倚。结论:与健康对照者相比,RA患者外周血中表面标记为CD19+CD24hiCD38hi的Bregs比例降低及该群细胞内IL-10的水平降低,RA患者外周血中CD19+CD24hiCD38hiBregs比例与DAS28呈负相关。CD19+CD24hiCD38hii Bregs比例减少可能是RA炎症发生过程中的重要环节之一,与疾病活动度相关,可能是引起IL-10减少的原因,可以为寻找治疗RA的新靶点提供思路,但需要进一步的实验去验证该结论。

关键词： 原发性干燥综合征   高迁移率族蛋白B1   辅助性T细胞17   调节性T细胞   相关性  

摘要： 目的:探讨原发性干燥综合征患者外周血中高迁移率族蛋白B1（HMGB1）表达水平与辅助性T细胞17（Th17）/调节性T细胞（Treg）平衡的关系,及与相关细胞因子（IL-17、IL-6、IL-10、TGF-b）的相关性,旨在研究HMGB1在pSS发病机制中的作用。方法:选取2018年5月-2019年5月在山西医科大学第二医院风湿免疫科门诊及住院初诊的原发性干燥综合征患者40例作为pSS组,选择同期在本院体检中心检查的健康体检者20例作为对照组。采集受试对象肘静脉血,采用流式细胞仪检测Th17、Treg细胞数量,并计算Th17/Treg比值;流式细胞仪微球捕获芯片技术（CBA）方法检测血清白细胞介素-17（IL-17）、IL-6、IL-10浓度;酶联免疫吸附法（ELISA）检测HMGB1、转化生长因子-b（TGF-b）浓度。将上述各指标进行组间比较,并分析HMGB1与上述细胞及其相关细胞因子的相关性。结果:pSS组HMGB1、Th17、Th17/Treg水平高于对照组,Treg水平低于对照组,差异有统计学意义。pSS组IL-17、IL-6、TGF-b水平高于对照组,而IL-10水平低于对照组,差异有统计学意义。相关性分析结果表明HMGB1与Th17、Th17/Treg及其相关细胞因子IL-17、IL-6水平呈正相关（r=0.738、0.502、0.762、0.578,均P＜0.05）,与Treg、IL-10水平呈负相关（r=-0.657、-0.686,均P＜0.05）,与TGF-b无明显相关性。结论:原发性干燥综合征患者外周血HMGB1异常高表达,且与健康人相比存在明显的T细胞免疫异常,提示HMGB1可能通过导致Th17/Treg失衡参与原发性干燥综合征的发生发展。