关键词： Breg细胞   ITP   血小板   免疫调节  

摘要： 目的本实验通过给免疫性血小板减少症(ITP)模型小鼠经尾静脉注射经流式分选的Breg细胞,探究其对该疾病的治疗效果,以期为临床ITP的治疗提供新思路。方法(1)制备小鼠Breg细胞:将25只Balb/c雄性小鼠经麻醉脱颈处死后取脾脏,研磨后收集脾细胞,首先经磁珠分选出B细胞,再加入流式抗体分选出Breg细胞(CD19+CD5+CD1dhi)。(2)建立小鼠ITP模型:将12只小鼠随机分为两组,正常对照组和ITP模型组,模型组小鼠腹腔注射CD41抗体,注射剂量为每20克体重小鼠给予100µg药物,观察造模情况。(3)实验分组:将24只小鼠随机分为两组,即ITP模型组(I组)和ITP+Breg输注组(IB组),I组小鼠腹腔注射CD41抗体,IB组小鼠在腹腔注射CD41抗体后经尾静脉输注1×106个Breg细胞。每隔一定时间计数血小板,在I组与IB组血小板下降百分比有差距的时间点取小鼠脾脏进行Treg和Breg的流式检测。结果经尾静脉取血检测两组小鼠的血常规,统计血小板计数显示,在第5、42、68小时I组与IB组小鼠血小板计数下降的百分比比较,差异有统计学意义(P<0.05),在此3个时间点每组各取4只小鼠进行麻醉后并处死,在操作台上取脾脏磨脾来收集细胞进行流式检测。经过流式分析发现,I组小鼠的Treg细胞的变化为升高趋势,而IB组小鼠表现为先下降后又升高的趋势,两组第42、68小时比较,差异有统计学意义(3.27±0.86 vs.1.90±0.08,P=0.022;3.23±0.24 vs.2.30±0.10,P=0.009)。I组在这3个时间点的Breg细胞变化不大,IB组则表现为明显的先升高后下降,两组第42小时比较,差异有统计学意义(1.78±0.22 vs.4.33±1.30,P=0.010)。结论给ITP模型小鼠输注具有免疫负性调节作用的Breg细胞并未达到预期的治疗效果,这与临床ITP缓解患者外周血Breg细胞数量比初诊者升高不符,提示Breg细胞虽然是自身免疫性疾病的治疗方向,但在ITP疾病发生发展中的作用有待进一步探索。

关键词： 三氯乙烯   职业性三氯乙烯药疹样皮炎   肝功能   淋巴细胞   调节性T细胞   调节性B细胞  

摘要： 目的以职业性三氯乙烯药疹样皮炎(OMDT)患者为研究对象,分析治疗前后患者肝功能及外周血调节性淋巴细胞的变化特点。方法于2019年12月,以2017年2月至2019年2月期间收治的16例OMDT患者(其中8例为多形红斑,8例为重症多形红斑)为研究对象,检测患者治疗前后的肝功能指标和外周血调节性淋巴细胞百分数,分析肝功能与外周血调节性T、B淋巴细胞的变化情况及两者之间的相关性。结果治疗前,试验组患者丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)和谷氨酰肽酶(GGT)高于健康对照组,总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)和胆碱脂酶(CHE)低于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗前,试验组患者淋巴细胞、CD4^+T细胞、调节性T细胞(CD4^+CD25^+Tregs)、调节性B细胞(CD19^+CD24^+CD27^+Bregs)百分数和CD4^+/CD8^+比值均低于健康对照组,CD8^+T细胞百分数高于健康对照值,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗前,患者肝功能指标ALT、AST、GGT、DBIL水平与CD4^+CD25^+Tregs、CD19^+CD24^+CD27^+Bregs、CD4^+T细胞百分数和CD4^+/CD8^+比值呈负相关(r=-0.386^-0.809,P<0.05),与CD8^+T细胞百分数呈正相关(除DBIL外)(r=0.503~0.568,P<0.05);TP、ALB水平与CD4^+CD25^+Tregs、CD19^+CD24^+CD27^+Bregs、CD4^+T细胞百分数呈正相关(r=0.351~0.784,P<0.05),ALB与CD8^+T细胞百分数呈负相关(r=-0.315,P<0.05),CHE与CD4^+CD25^+Tregs、CD19^+CD24^+CD27^+Bregs百分数、CD4^+/CD8^+比值呈正相关(r=0.390~0.527,P<0.05)。结论OMDT患者存在免疫功能紊乱,可能由调节性淋巴细胞失衡引起,其肝脏损害可能与CD8^+T细胞的增高、CD4^+T细胞、CD4^+CD25^+Tregs、CD19^+CD24^+CD27^+Bregs百分数和CD4^+/CD8^+的比值降低有关。

关键词： 系统性红斑狼疮   调节性B淋巴细胞   作用机制  

摘要： 系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种以产生大量自身抗体、机体免疫复合物沉积、多脏器受损为特点的自身免疫性疾病。B细胞的过度活跃、增殖促使病理性免疫应答,导致SLE的发生与进展。SLE患者体内的B细胞兼有“致病性”和“保护性”的功能。而具有“保护性”功能的是具有负向免疫抑制作用的新型细胞亚群--调节性B淋巴细胞(Bregs)。Bregs介导的免疫抑制对维持免疫耐受有重要作用。Bregs主要通过分泌抑制性细胞因子(如IL-10、IL-35和TGF-β等)或直接同T淋巴细胞接触来参与免疫调节,抑制有害的免疫应答,从而发挥保护作用。本文就Bregs的发现、表型、功能以及在SLE中的作用机制展开综述。

关键词： 矽肺   CD19^+CD24hi CD38hi B细胞   CD19^+CD25^+B细胞   CD4^+CD25^+T细胞  

摘要： 目的探讨外周血调节性B细胞和调节性T细胞在Ⅰ期矽肺患者中的水平变化及意义。方法采用流式细胞术方法,检测82例Ⅰ期矽肺患者(矽肺组)、48例具有与矽肺组相同接尘条件的健康井下接尘矿工(接尘组)及45例井上健康查体人员(正常组)外周血CD19^+CD24hi CD38hi B、CD19^+CD25^+B及CD4^+CD25^+T细胞水平。结果与接尘组和正常组比较,矽肺组CD19^+CD24hi CD38hi B、CD19^+CD25^+B及CD4^+CD25^+T细胞水平升高,差异均具有统计学意义(P<0.01)。与正常组比较,接尘组CD19^+CD24hi CD38hi B细胞水平减低,差异具有统计学意义(P<0.05)。肺功能轻度障碍组CD4^+CD25^+T细胞水平低于正常组和中重度障碍组,差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。接尘年限<20年组CD19^+CD24hi CD38hi B细胞水平明显低于接尘年限20-年组和接尘年限30-年组,差异均具有统计学意义(P<0.01)。相关性分析显示,正常组外周血CD19^+CD24hi CD38hi B细胞水平与CD4^+CD25^+T细胞水平呈负相关(r=-0.441,P<0.05),CD19^+CD25^+B细胞水平与CD4^+CD25^+T细胞水平呈正相关(r=0.477,P<0.05),矽肺组和接尘组各指标间无相关性。结论Ⅰ期矽肺患者外周血CD19^+CD24hi CD38hi B、CD19^+CD25^+B及CD4^+CD25^+T细胞失衡并参与该病发生发展,CD4^+CD25^+T细胞水平可预示早期肺功能损伤,CD19^+CD24hi CD38hi B水平可能与接尘时间有关。

关键词： 儿童哮喘   流式细胞术   调节性B细胞   免疫紊乱  

摘要： 目的 通过流式细胞术分析哮喘患儿外周血调节性B细胞亚群（Bregs），探讨Bregs细胞在哮喘患儿免疫发病机制中的作用。方法 采用流式细胞术检测33例急性期哮喘患儿和20例同年龄健康儿童外周血的Bregs表达水平，比较两组间的差异。结果 与健康儿童比较，哮喘患儿外周血CD19;B细胞，CD19;CD24;CD27;B细胞，CD19;CD24;CD27;B细胞，CD19;CD24;CD38;B细胞和CD19;CD24;CD38;B细胞比例升高（P<0.05）；CD19;CD27;B细胞，CD19;CD24;CD27;B细胞，CD19;CD24;CD38;B细胞和CD19;CD27;CD38;B细胞降低（P<0.05）。各B细胞亚群均与IgE相关性无统计学意义（P>0.05）。结论 哮喘患儿CD19;CD24;CD27;B细胞的降低和CD19;CD24;CD38;B细胞的升高可能是导致儿童哮喘免疫功能异常活化的原因之一。

关键词： 多房棘球蚴   Bregs   B10细胞   IL-10   TGF-β  

摘要： 目的观察感染不同剂量多房棘球蚴小鼠脾脏中调节性B细胞(Bregs),产生IL-10的调节性B细胞(B10细胞)和肝脏中相关细胞因子表达的动态变化,探讨其在机体感染后形成免疫耐受中的作用,为抑制多房棘球蚴免疫逃逸研究提供更多的思路。方法小鼠腹腔注射不同剂量多房棘球蚴进行造模,HE染色观察肝脏病理学变化;流式细胞术检测脾脏中Bregs和B10细胞的动态变化;免疫组化法检测肝脏IL-10、TGF-β的表达。结果随着感染时间的延长,接种量越多,肝脏的病理损伤越重。与同期对照组相比,低剂量组Bregs和B10细胞无显著变化;中剂量组感染8、30 d时Bregs比例升高(P<0.05),随后降低,B10细胞感染8、30d时比例升高(P<0.05),随后降低(P<0.05);高剂量组感染早期Bregs比例升高(P<0.05),随后降低,感染90d时再升高(P<0.05),B10细胞感染早期升高(P<0.05),随后降低(P<0.05),感染90 d时再升高。与同期对照组相比,低剂量组小鼠肝脏IL-10、TGF-B表达无显著变化(P>0.05);中、高剂量组IL-10和TGF-β,表达量持续升高(P<0.05)。结论随着多房棘球蚴对宿主的持续感染,Bregs和B10细胞可能通过IL-10与TGF-β参与多房棘球蚴的免疫逃逸。

关键词： 红斑狼疮,系统性   T淋巴细胞,调节性   CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞   Th17细胞  

摘要： 目的探讨CD19+CD24hiCD38hi调节性B细胞(Bregs)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血的表达,以及该细胞与疾病活动度和其他血清学及免疫学指标的关系,明确其在SLE发病中的意义。方法选取41例SLE患者和39名健康对照为研究对象,流式细胞术测定外周血淋巴细胞亚群绝对计数、CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞绝对数量,分析CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞与SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分、补体、免疫球蛋白、尿蛋白定量(24 h)、自身抗体及其他淋巴细胞亚群的关系。结果 SLE患者外周血CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞较健康对照组明显减低,与SLEDAI评分呈负相关(r=-0.445,P=0.004),与补体C4呈正相关(r=0.322,P=0.040),与补体C3、C1q无相关性,与尿蛋白定量(24 h)呈负相关(r=-0.593,P=0.002)。CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞与免疫球蛋白、抗核抗体(ANA)滴度、抗ds-DNA抗体滴度之间无相关性。抗SSA抗体阳性组SLE患者CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞绝对计数较抗SSA抗体阴性组减少。在Anu A阳性组和阴性组间及AHA阳性组和阴性组间该细胞绝对数量均无明显差异。SLE患者外周血调节性T细胞数量较健康对照组明显减低,Th17细胞数量较健康对照组无明显差异。Th17/Breg比值与SLEDAI评分呈正相关,CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞绝对计数与Th17/Treg比值呈负相关(r=-0.278,P=0.013)。结论 SLE患者外周血CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞绝对计数减少,与疾病活动度、血清学指标及免疫学指标相关,提示CD19+CD24hiCD38hiBregs细胞参与SLE发病。

关键词： 肝炎   自身免疫性   B-淋巴细胞   T淋巴细胞  

摘要： 自身免疫性肝炎是一种自身免疫性疾病,目前机制不清,主要认为与机体免疫失衡有关。炎症性疾病中调节性B淋巴细胞(Breg)主要通过分泌IL-10抑制炎症反应,抑制CD4+T淋巴细胞分化为辅助性T淋巴细胞1和辅助性T淋巴细胞17。自身免疫性肝炎患者外周血IL-10水平降低,Breg数量及功能降低,导致其不能有效的抑制炎症反应,提示Breg在自身免疫性肝炎发病起到了一定的作用。综述了Breg亚群在自身免疫性肝炎中的作用机制。

关键词： 血小板减少   调节性B细胞   白介素-10   滤泡调节性T细胞   滤泡辅助性T细胞  

摘要： 目的探讨调节性B细胞(Breg)、滤泡辅助性T细胞(Tfh)、滤泡调节性T细胞(Tfr)在免疫性血小板减少症(ITP)中的作用和临床意义。方法选择2017年10月至2019年10月安徽医科大学第一附属医院收治的初次诊断的30例ITP患者为ITP组,同期选择健康对照组25例,应用流式细胞术(FCM)检测外周血Breg、Tfh、Tfr细胞的表达水平并统计分析。结果ITP组患者外周血CD19^+ B细胞中Breg[(1.93±1.21)%]、IL-10^+ Breg[(28.64±10.31)%]水平低于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);外周血CD4^+ T细胞中Tfh细胞比例高于健康对照组[(12.18±5.26)%vs(6.21±1.78)%],Tfr细胞比例[(1.64±1.01)%]、Tfr/Tfh比值(0.21±0.13)低于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论Breg细胞降低,IL-10分泌减少,Tfr/Tfh比值失衡,在ITP发病过程中可能起到重要的作用。

关键词： 调节性B细胞   复发性流产   母胎免疫耐受   CD3^+CD4^+T淋巴细胞  

摘要： 目的探讨CD19^+CD24^hiCD27^+Breg细胞在复发性流产(RSA)患者外周血的表达情况及临床意义。方法通过流式细胞技术检测复发性流产患者和正常健康育龄女性分别在非孕期和早孕期外周血CD19^+CD24^hiCD27^+Breg细胞百分比,并分析其临床意义。结果正常健康育龄女性外周血CD19^+CD24^hiCD27^+Breg细胞百分比在早孕组显著高于非孕组,差异具有统计学意义(P<0.05)。RSA患者外周血CD19^+CD24^hiCD27^+Breg细胞百分比在非孕组和早孕组,分别均低于同期正常健康育龄女性,差异均具有统计学意义(P<0.05)。RSA患者外周血CD19^+CD24^hiCD27^+Breg细胞百分比与CD3^+CD4^+T淋巴细胞百分比呈正相关(r=0.226,P=0.04),但与CD3^+CD8^+T淋巴细胞、CD16^+CD56^+NK细胞百分比无明显相关(P>0.05)。结论妊娠女性外周血CD19^+CD24^hiCD27^+Breg细胞水平变化可能参与机体母胎免疫耐受状态,其表达不足可能在RSA的发病机制中有重要作用。