关键词： 系统性红斑狼疮   Toll样受体9   调节性B细胞  

摘要： 背景:系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是以自身反应性B细胞异常激活,产生自身抗体和免疫复合物,最终导致器官系统损伤为特点的自身免疫性疾病。近年来,Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)在自身免疫性疾病发病机制中的作用成为研究热点,其家族成员TLR9能特异性识别内源或外源CpG-DNA基序,激活MyD88信号途径,活化包括B细胞在内多种免疫细胞,进而产生大量细胞因子、粘附分子及自身抗体等,导致异常免疫反应,在SLE的发病机制中发挥了一定作用。调节性B细胞(regulatory B cell,Breg)作为一类具有负性调节作用的B细胞亚群,在抑制免疫活化方面扮演重要角色,其通过分泌IL-10、TGF-β、IL-35等抑制性炎症细胞因子而发挥免疫调节作用。而在既往对人Breg细胞的研究中,CD19CD24CD27Breg细胞亚群及CD19CD24CD38Breg细胞亚群是Breg细胞的主要组成部分。因此,我们推测TLR9也可能通过调控Breg细胞的活化参与SLE的发生和发展。本项目通过研究TLR9与Breg细胞不同亚群的潜在相关性,以期为SLE的发病机制等研究提供新的思路和理论依据。目的:探讨SLE患者不同Breg细胞亚群的占比及其中TLR9表达与临床指标的相关性。方法:选取2021年1月至2021年10月就诊于河南科技大学第一附属医院风湿免疫科的52例SLE患者,根据患者SLE疾病活动指数(SLEDAI)进行分组,包括SLE非活动期组(SLEDAI≤4,n=19),SLE轻度活动期组(40.05);CD19CD24CD27Breg细胞中TLR9表达强度在SLE中重度活动期组较健康对照组显著升高(P=0.016),并与SLEDAI评分呈正相关(P=0.048),且与抗ds-DNA抗体滴度呈显著正相关(P=0.005),但与SLEDAI、C3、C4、24小时尿蛋白定量无明显相关性(P>0.05),与CD19CD24CD27Breg细胞占淋巴细胞百分比无明显相关性(P>0.05);***患者外周血中CD19CD24CD38Breg细胞占淋巴细胞百分比在SLE非活动期组、轻度活动期组、中重度活动期组及健康对照组间均无统计学差异(P>0.05),且与SLEDAI评分、C3、C4、抗ds-DNA抗体滴度、24小时尿蛋白定量无明显相关性(P>0.05);CD19CD24CD38Breg细胞中TLR9表达强度在非活动期组、轻度活动期组、中重度活动期组均较健康对照组增加(P=0.023、P=0.034、P=0.009),并与24小时尿蛋白定量呈正相关(P=0.025),与SLEDAI评分、C3、C4、抗ds-DNA抗体滴度无明显相关性(P>0.05),但与CD19CD24CD38Breg细胞占淋巴细胞百分比呈负相关(P=0.029)。结论:TLR9在SLE患者外周血CD19CD24CD27Breg细胞、CD19CD24CD38Breg细胞亚群中表达均增强,提示其可能通过调控Breg细胞参与了SLE的发病;而不同Breg细胞亚群及其TLR9表达强度与SLE疾病活动指标及脏器损伤存在一定关系,但不同亚群在SLE发病中的作用存在差异,未来可能作为评估SLE患者病情和预后的指标。

关键词： 链格孢霉   过敏性哮喘   过敏原特异性免疫治疗   重组蛋白Alt a 1   滤泡辅助性T细胞   调节性B细胞   T2型哮喘  

摘要： [研究背景]链格孢霉引起的过敏性哮喘患病率逐年增加。利用链格孢霉粗提物行皮下特异性免疫治疗(subcutaneous allergen-specific immunotherapy,SCIT)是现阶段唯一能改变该疾病自然进程并取得长期疗效的治疗手段,但迄今为止,国际上对链格孢霉免疫治疗的疗效研究相对少见,且粗提物存在未标准化和安全性欠佳等缺点。在寻求新型免疫治疗制剂过程中,Alta1作为链格孢霉的主要致敏组分,其重组蛋白因易获得和质量稳定等特点,已在临床上被广泛应用于链格孢霉引起的过敏性疾病的分子诊断,而关于重组Alta 1(recombinant Alta 1,rAlta 1)在免疫治疗中的应用和疗效,至今未见报道。当前,免疫治疗的调控机制仍不明确。滤泡辅助性T细胞(T follicular helper cells,Tfh)是近些年被认为调控过敏性疾病中免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)的生成和参与免疫治疗应答过程的新型T细胞亚群。调节性B细胞(regulatory B cells,Breg)和其产生的白细胞介素-10(interleukin 10,IL-10)作为负性调控介质,介导接受免疫治疗的机体产生免疫耐受。Tfh与Breg细胞是否参与链格孢霉和rAlt a 1的免疫治疗过程并受到影响,值得探索。T2型炎症是新近提出的一种哮喘内型,可分为T2-high和T2-low。已有研究证实真菌微生物群在T2型哮喘中表达的多样性,至于链格孢霉哮喘患者T2型炎症的临床特征如何,目前也无相关研究。因此,本研究拟着重评估链格孢霉和rAlt a 1的免疫治疗效果,探索Tfh与Breg细胞在免疫治疗中表达量的变化,同时分析链格孢霉哮喘患者内型的临床特征,旨在为此类患者的精准治疗提供依据。[研究目的]1.分析并评价链格孢霉过敏性哮喘患者接受SCIT的治疗效果。2.记录Tfh细胞和其亚型、Breg细胞在链格孢霉粗提物SCIT后的变化。3.明确粗提物SCIT后Tfh细胞和其亚型、Breg细胞与临床相关指标的相关性。4.探索纯化的rAlt a 1在哮喘小鼠模型中的有效治疗浓度,全面评估免疫治疗效果。5.明晰rAlt a 1免疫治疗后小鼠体内Tfh和Breg细胞表达量变化的情况。6.阐明有效浓度的rAlt a 1进行免疫治疗后,细胞因子相关的Tfh细胞和IL-10+Breg细胞的变化。7.分析链格孢霉哮喘患者T2-high和T2-low两种内型的临床特征。[研究方法]1.问卷、免疫学指标和肺功能评估接受链格孢霉SCIT患者的治疗效果。2.多因子检测技术分析血清中多种细胞因子的表达水平。3.流式细胞术检测外周血中循环Tfh细胞(circulating Tfh,cTfh)及其亚型、Breg细胞比例的变化。4.相关性分析明确粗提物SCIT后cTfh细胞和其亚型、Breg细胞与临床相关指标的相关性。5.合成并纯化rAlt a 1,验证纯度和免疫原性。6.构建皮下注射免疫治疗小鼠模型,设立rAlt a 1治疗浓度梯度:5μg、50μg、100 μg和 150 μg。7.通过评估肺组织炎症和气道阻力、检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)上清中细胞因子浓度、血清中免疫球蛋白和肥大细胞蛋白酶水平(mast cell protein-1,MCP-1)进行rAlt a 1治疗效果探索。8.流式细胞术检测不同浓度rAlt a 1治疗后小鼠脾脏中Tfh和Breg细胞的变化。9.纯化天然的Alt a 1(nature Alt a 1,nAlt a 1),构建以nAlt a 1和链格孢霉粗提物为对照组,有效治疗浓度rAlt a 1为实验组的免疫治疗小鼠模型,对比治疗效果。10.免疫组化二步法检测小鼠脾脏中B细胞淋巴瘤转录因子(transcriptionfactor B cell lymphoma 6,Bcl-6)的表达定位和强度。11.流式细胞术再次全面分析小鼠脾脏和淋巴结中IL-4+Tfh、IL-5+Tfh、IL-13+Tfh和IL-17A+Tfh细胞以及脾脏中IL-10+Breg细胞的表达情况。12.回顾性分析582例链格孢霉患者在T2-high和T2-low两种内型中年龄、性别、家族史、吸入激素情况、接受免疫治疗情况、宠物暴露史和T-IgE的差异。[研究结果]1.接受链格孢霉SCIT的患者症状和用药评分改善,肺功能第一秒用力呼气容积预计值(forced expiratory volume in the first second,FEV1%)提升。2.链格孢霉SCIT患者的血清中IgE和嗜酸性粒细胞表达水平可降低,但无统计学差异。3.血清中IL-4、IL-21、IL-5、IL-13和IL-17A的

关键词： 原发免疫性血小板减少症   骨髓   调节性B细胞   浆细胞   细胞因子   原发免疫性血小板减少症   Bruton酪氨酸激酶   B细胞   Fcγ受体   巨噬细胞   原发免疫性血小板减少症   克隆造血   鉴别诊断   预后  

摘要： 第一部分:ITP骨髓B细胞微环境失衡及其机制研究研究背景:原发免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia,ITP)是常见的自身免疫性出血性疾病,以外周血血小板数目减少和出血风险增加为临床特点。ITP的发病机制复杂且具有异质性,主要包括细胞免疫和体液免疫介导的血小板破坏过多,以及巨核细胞成熟障碍引起的血小板生成减少两大类。尽管ITP的诸多异常靶点已经被挖掘,其诊断依然缺乏特异性“金标准”,依赖于排除其他导致血小板减少的原因。同时,仅约2/3的患者对一线治疗反应,相当一部分患者经多线联合治疗仍无效,进展为难治性病例。因此,有必要进一步探究ITP的发病机制,为其精准诊疗提供新的策略。B细胞作为抗体的来源和产生免疫记忆的淋巴细胞,在自身免疫病中的作用不容小觑。一方面,B细胞对自身抗原失耐受后分化为浆细胞产生致病的自身抗体;另一方面,调节性B细胞(regulatory B cell,Breg)也可以通过其免疫抑制特性发挥抗炎作用。自身反应性B细胞在ITP的发生发展中处于核心地位。前期已有研究表明ITP患者外周血B细胞亚群紊乱,但覆盖群体不全面,趋势也存在争议;关于骨髓的研究多聚焦于T细胞和间充质干细胞,B细胞则鲜有报道。骨髓作为B细胞发育的场所,探究其微环境有助于揭示B细胞分化、趋化以及免疫耐受情况,从而进一步完善ITP的发病机制。研究目的:(1)探究ITP患者骨髓和外周血中总B细胞、各分化阶段B细胞亚群以及浆细胞与健康供者的差异,明确ITP患者存在的B细胞分化发育异常。(2)探究ITP患者骨髓B细胞免疫耐受状态,并利用动物模型验证Breg输注治疗ITP的可行性。(3)探究ITP患者B细胞成熟和趋化相关细胞因子及其受体的表达,分析与B亚群数量和分布的相关性,进一步完善ITP的发病机制。研究方法:(1)标本收集:收集初诊初治的ITP患者以及健康干细胞供者的骨髓和外周血;分离血浆,利用Ficoll密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞(bone marrow mononuclear cells,BMMCs)和外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)。(2)酶联免疫吸附试验:检测血浆趋化因子CXCL13、B细胞活化因子(B cell activating factor,BAFF)、增殖诱导配体(a proliferating inducing ligand,APRIL)和抗血小板膜糖蛋白(CD41a和CD42b)抗体。(3)流式细胞术:检测未成熟B细胞、初始B细胞,记忆B细胞,Breg,浆母细胞,短寿命/长寿命浆细胞,趋化因子受体CXCR5、细胞因子受体BAFF-R、BCMA和TACI的表达。(4)实时荧光定量聚合酶链式反应:留取PBMCs和BMMCs的mRNA,检测B细胞分化相关转录因子的表达;留取免疫磁珠分选后B细胞的mRNA,检测趋化因子受体/细胞因子受体在B细胞中的表达水平。(5)Breg体外功能试验:对B细胞体外加以CD40配体和Toll样受体9(Toll-like receptor 9,TLR9)刺激因子CPG-ODN诱导活化,并分别与同源单核细胞和CD4+T细胞共培养,检测共培养前后单核细胞分泌TNF-α的水平、CD4+T细胞分泌IFN-y的水平以及调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的分化程度。(6)ITP主动模型构建:利用C57BL/6背景的野生鼠血小板免疫同源CD61基因敲除(CD61 knockout,CD61-KO)鼠,取免疫好的后者脾细胞腹腔输注给200cGy 辐照过的严重联合免疫缺陷(severe combined immunodeficiency,SCID)小鼠。(7)Breg体内功能试验:对照组为不加干预的ITP主动模型小鼠;实验组分别为输注野生鼠骨髓Breg的主动模型鼠、输注免疫过的CD61-KO鼠骨髓Breg的主动模型鼠。每周股静脉取血检测血常规,探究Breg对ITP动物模型的影响。研究结果:(1)ITP患者B细胞早期发育异常:与健康供者相比,ITP患者骨髓总B细胞减少,CD127+未成熟B细胞群体占淋巴细胞比例减低;决定B细胞系谱特异性的转录因子Pax5在ITP患者的PBMCs和BMMCs中表达较供者大幅降低。(2)ITP骨髓B细胞亚群分化失衡:ITP患者骨髓中初始B细胞比例较供者降低,记忆B细胞比例增高;二者的浆母细胞和短寿命浆细胞虽无显著差异,但抗血小板自身抗体阳性患者的骨髓长寿命浆细胞较正常人和抗体阴性患者均显著增多。(3)ITP骨髓Breg数量和质量双重缺陷:ITP患者骨髓和外周血CD19+CD24highCD38high Breg数量较健康对照显著减少,其骨髓B细胞分泌免疫抑制性

关键词： 原发性胆汁性胆管炎   调节性B细胞   PD-1+CD8+T细胞   单细胞RNA测序   细胞焦亡  

摘要： 原发性胆汁性胆管炎（PBC）是一种由免疫系统异常攻击自身肝内小胆管而产生的慢性胆汁淤积性肝脏自身免疫性疾病。T细胞与B细胞被认为在PBC中发挥着尤为关键的作用。然而,关于T细胞与B细胞参与PBC发生发展的具体机制尚不清楚。目前PBC的治疗方式主要依赖于熊去氧胆酸（UDCA）,但该药只能缓解疾病进程,并不能治愈PBC。因此,进一步探究PBC的免疫学发病机制,寻找潜在的治疗靶点具有重要意义。本研究重点关注调节性B（regulatory B,Breg）细胞和CD8+T细胞在PBC中的作用,取得的研究成果主要包括:1.调节性B细胞的异质性及其在原发性胆汁性胆管炎中的变化B细胞在PBC中的作用存在争议:一方面B细胞产生与疾病相关的自身抗线粒体抗体与Ig M,另一方面PBC中存在具有免疫抑制作用的Breg细胞。然而,由于缺乏清晰的细胞表面标志物以及Breg细胞特异性的转录因子,使得目前关于Breg细胞的研究受到了很大的阻碍。另外,虽然Breg细胞在小鼠的多种脏器中均有发现,其在不同脏器中表型与功能的异质性仍需进一步阐明。因此,我们首先通过单细胞RNA测序技术对生理条件下Breg细胞的特性及其脏器特异性进行了系统的研究,并进一步探究了Breg细胞在PBC中的变化情况并讨论了其在PBC发生过程中的潜在作用。根据数据库中免疫抑制功能相关基因及文献中IL10+B10细胞特征基因的表达情况,我们对Breg细胞进行了鉴定,并发现Fcrl5与Atf3可能作为Breg细胞的特异性分子标志物。随后,我们对不同Breg细胞亚群的表型和功能以及在不同脏器中的分布进行了详细分析,并通过BCR（B cell receptor）分析确定了不同脏器间Breg细胞的克隆扩增关系。此外,根据基因表达和功能通路的差异,我们发现非B10的Breg细胞表现出更加活化的TGF-β信号通路,提示非B10的Breg细胞具有不同于传统B10细胞的免疫抑制特性。我们的这部分工作为Breg细胞的定义提供了新的见解,并阐明了在生理条件下不同脏器Breg细胞的转录表达谱和BCR克隆扩增情况,为探究Breg细胞在PBC中的作用提供了必要的前期基础。随后,我们利用了一种系统性免疫耐受打破引起PBC症状的dn TGFβRII Aire-/-小鼠模型进行了后续研究。根据Breg细胞的定义,我们通过单细胞RNA测序进一步探究了PBC模型小鼠肝脏中Breg细胞的变化,与对照小鼠相比,PBC模型小鼠肝脏B细胞中Breg细胞的比例明显增加,***,***1与Cd74等基因的表达水平显著升高,提示其可能具有更强的抗原递呈功能。这为我们探究Breg细胞对PBC的作用提供了基础,进一步加深了我们对PBC发病机制的理解。***-1+CD8+T细胞诱导肝实质细胞焦亡并促进肝脏炎症自身反应性T细胞尤其是CD8+T细胞在PBC中发挥着关键的致病作用,但自身反应性CD8+T细胞的具体致病机制及是否存在特定的关键致病性CD8+T细胞亚群尚不清楚。我们发现dn TGFβRII Aire-/-模型小鼠中肝脏CD8+T细胞显著增加,而清除CD8+T细胞后,肝脏中淋巴细胞浸润减少,且小鼠生存状态明显改善,这说明CD8+T细胞是该模型小鼠主要的致病细胞。进一步分析CD8+T细胞的亚群发现,肝脏中一群PD-1+CD8+T细胞出现大量扩增,并且产生高水平的γ干扰素（IFN-γ）与颗粒酶Β（granzyme B）,与PD-1-CD8+T细胞相比,PD-1+CD8+T细胞具有更高的增殖能力和更强的杀伤性。另外,我们对小鼠肝脏RNA测序结果分析发现,与对照小鼠相比,模型小鼠肝脏中焦亡相关基因的表达水平显著上调。因此,我们猜测PD-1+CD8+T细胞可能介导肝脏细胞发生焦亡,诱发肝脏中的炎症反应,从而在PBC的发病过程中发挥重要作用。在体外PD-1+CD8+T细胞和肝实质细胞的共培养实验中,表明PD-1+CD8+T细胞能够诱导肝实质细胞发生焦亡。此外,焦亡抑制剂DSF治疗后的模型小鼠生存期明显延长,且肝脏疾病情况得到明显改善,进一步说明PD-1+CD8+T可通过诱导肝实质细胞焦亡促进PBC进展。本研究中,我们利用PBC小鼠模型探究CD8+T细胞在疾病发展过程中的关键功能亚群的变化及其具体致病机制,发现PD-1+CD8+T细胞表现出很强的功能活性与细胞毒性并且能够诱导肝实质细胞发生焦亡,从而为深入理解免疫耐受打破引起的PBC发病机制以及针对性的临床治疗提供了理论依据。

关键词： PD-L1/PD-1   急性髓系白血病   调节性B细胞   T细胞  

摘要： 目的:调节性B细胞(regulatory B cell,Breg)是重要的免疫负调节细胞,在维持机体的免疫平衡状态,调节T细胞功能等方面发挥着重要作用。我们前期实验发现Breg细胞在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者中表达比例升高,且与不良预后相关。继往有文献报道Breg细胞通过白细胞介素(interleukin,IL)-10参与机体免疫调控,也有文献报道Breg细胞可能通过非IL-10途径比如程序性死亡配体-1(Programmed death-ligand 1,PD-L1)途径发挥免疫调节作用。PD-L1作为免疫检查点在多种实体肿瘤中表达升高,Breg细胞可能通过高表达PD-L1与T细胞上程序性细胞死亡蛋白-1(programmed cell death protein 1,PD-1)结合,抑制T细胞功能,使肿瘤发生免疫逃逸,但PD-L1在AML患者Breg细胞上的表达与作用尚不清楚。基于以上背景,本实验旨在研究AML患者的Breg细胞是否存在PD-L1高表达,并探究其与AML患者的不良预后是否存在相关性。方法:1、用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测10名AML患者及10名健康对照者血浆上清中IL-10、PD-1及PD-L1的表达情况;2、采用流式细胞术检测21名初诊AML患者不同阶段(初诊患者化疗前的骨髓及外周血、化疗后7天的骨髓及外周血,化疗后14天的外周血)和38例健康对照者(28例骨髓,10例外周血)的Breg细胞比例、Breg细胞PD-L1表达量及T细胞PD-1的表达情况,对各检测结果进行统计学分析;3、随访患者化疗后缓解及生存情况,评估高表达PD-L1的Breg细胞与AML患者预后的关系。结果:1、AML患者血浆中PD-1及PD-L1与健康对照者相比表达增高(P=0.0437,P=0.0009),而IL-10的表达两者无明显差异(P=0.97);2、Breg细胞在AML患者中骨髓及外周血中比例较健康对照者增高(均有P<0.0001);3、AML患者的骨髓及外周血的Breg细胞PD-L1表达量及CD3CD4T细胞PD-1表达量均高于健康对照者(分别为P<0.0001,P=0.0011,P<0.0001,P=0.0249),在经过诱导化疗后两者表达均有显著下降;4、Breg细胞PD-L1高表达组诱导化疗后完全缓解率明显降低,总生存期(overall survival,OS)降低但无统计学差异(P=0.17),无进展生存期(progression free survival,PFS)明显降低且具有显著性差异(P=0.035)。结论:AML患者的Breg细胞表达PD-L1,且表达量较健康对照显著升高;高表达PD-L1的Breg细胞与AML患者完全缓解率降低、PFS显著下降相关。

关键词： B10细胞   哮喘   细胞靶向治疗   叉头盒蛋白O1  

摘要： 哮喘是一种全球年发病人数超3亿的呼吸系统变态反应疾病。在免疫学发病机制方面,哮喘主要由Th2反应介导,现有的临床免疫治疗手段也由此衍生。B细胞是适应性免疫系统的重要细胞亚群之一,可通过产生致病性免疫球蛋白IgE来介导哮喘疾病进展。然而,B细胞中的一个新亚群:分泌IL-10的调节性B细胞(B10细胞)可在多种免疫相关疾病中发挥抑制炎症的作用。有报道指出,PI3K-Akt信号通路对B10细胞的分化有调控作用,而FoxO1作为该通路下游的关键因子在其中的作用尚未有报道。基于以上背景,本研究重点关注了FoxO1对于B10细胞分化发育的影响,进一步将B细胞中的FoxO1作为哮喘疾病免疫抑制治疗中的潜在靶点的可能性进行阐述。本研究取得的主要结果如下:1.哮喘疾病中B细胞上调FoxO1表达在哮喘发作期患者外周血中,我们发现B细胞FoxO1活性上调,B10细胞比例降低。同时,我们在哮喘小鼠模型的肺脏组织中也发现了类似的现象。***1可以抑制B10细胞分化体外实验中,我们发现FoxO1缺失的B细胞在体外有更强的IL-10合成、分泌能力。体内实验中,我们发现野生型小鼠B10细胞FoxO1活性降低,B细胞FoxO1特异性缺失小鼠的B10细胞比例增加。***1是FoxO1调控B10分化过程中的关键转录因子单细胞RNA测序数据提示FoxO1在小鼠脾脏、肺脏和人肺脏B细胞中通过调节prdm1来抑制IL-10的表达。进一步,我们通过体外实验证实了FoxO1通过抑制prdm1的表达来抑制B10细胞的分化。***1通过IL-10依赖或非依赖的方式影响IgE的分泌IgE是哮喘疾病中关键的致病性免疫球蛋白。在体外实验中,我们发现B细胞缺失FoxO1可直接抑制IgE的分泌。同时,IL-10在体外也可以直接抑制B细胞IgE的分泌。5.B细胞特异性敲除FoxO1的小鼠哮喘模型疾病缓解在治疗实验中,我们发现B细胞特异性FoxO1缺失可以缓解小鼠哮喘模型症状。B细胞特异性FoxO1缺失小鼠肺脏中的嗜酸性粒细胞、肺泡巨噬细胞明显下降,B细胞比例明显上升,同时伴随B10细胞比例的上升及Th2反应减弱。这一系列结果提示B10细胞抑制了哮喘Th2炎性反应。6.野生型小鼠可通过转输特异性敲除FoxO1的B细胞缓解哮喘在转输实验中,我们发现FoxO1敲除的B细胞可以在激发阶段直接抑制哮喘疾病,进一步证明了通过靶向FoxO1从而促进B细胞向B10分化,可以不依赖于IgE独立的缓解哮喘疾病,为临床的细胞靶向治疗提供了新的思路。

关键词： 非肥胖糖尿病   调节性B细胞   1型糖尿病  

摘要： 目的探讨非肥胖糖尿病(NOD)小鼠调节性B细胞(Breg细胞)与其他免疫细胞的关系。方法45只NOD小鼠均分为A组(4周龄)、B组(8周龄)和C组(1型糖尿病小鼠)三组。HE染色观察小鼠胰腺组织形态。流式细胞术检测三组小鼠脾脏调节性T细胞(Treg细胞)(CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+))、Th1细胞(CD4^(+)IFN-γ^(+))、Th17细胞(CD4^(+)IL-17^(+)),B10细胞(CD19^(+)CD5^(+)CD1d^(hi)B)和IL-10^(+)B细胞(CD19^(+)IL-10^(+))数量。结果与A组比较,B组Th1细胞、Th17细胞、B10细胞和IL-10^(+)B细胞增多,而C组Treg细胞减少,Th1细胞、Th17细胞、B10细胞IL-10^(+)B细胞、Th1/B10比例和Th17/B10比例增多(P<0.05);与B组比较,C组Th1细胞、Th17细胞、Th1/B10比例和Th17/B10比例增多,而Treg细胞、B10细胞和IL-10^(+)B细胞减少(P<0.05)。C组小鼠B10细胞数量与Th1细胞和Th17细胞数量呈负相关(r=-0.394.-0.472,P<0.05),而与Treg细胞和IL-10^(+)B细胞数量呈正相关(r=0.459、0.786,P<0.05)。结论NOD小鼠存在Breg细胞与其他免疫细胞的免疫失衡,参与1型糖尿病的发生。

关键词： 类风湿关节炎   调节性B细胞   髓系树突状细胞   辅助性T细胞   病情程度   关节活动度  

摘要： 类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是临床常见的自身免疫性疾病,多发于中老年人群,主要临床表现为慢性关节滑膜炎症[1]。目前临床上以药物治疗和手术治疗为主,可一定程度缓解炎症反应和改善关节功能,但RA病情反复,治愈难度较大,早诊断、早治疗可有效提高治疗效果、缓解疼痛、提高生活质量[2-3]。T、B细胞等免疫细胞的水平、功能异常在RA的病理生理机制中发挥重要作用,调节性B细胞(regulatory B cells,Breg)通过产生白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子而负性调节免疫功能.

关键词： 调节性B细胞   儿童哮喘急性发作   硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂   吸入用布地奈德混悬液   生长发育  

摘要： 目的探讨吸入布地奈德混悬液用于儿童哮喘治疗中的效果及其用药后1~2年对生长发育的影响。方法选择于2016年10月至2017年1月收诊的68例儿童哮喘患者,均为急性发作并持续用药,分为两组:34例应用硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂治疗的患者为对照组,34例应用吸入布地奈德混悬液联合硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂治疗的患者为观察组。比较两组儿童哮喘急性发作期患者的白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏-C反应蛋白(hs-CRP)、最大呼吸流量、IS最大呼气量、调节性B细胞比例、喘憋消失时间、气促缓解时间、湿啰音消失时间、咳嗽消失时间,并对比随访2年后的生长发育指标。结果用药结束,观察组的IL-6、TNF-α、hs-CRP、调节性B细胞比例、喘憋消失时间、气促缓解时间、湿啰音消失时间、咳嗽消失时间均低于对照组(P<0.05);观察组的最大呼吸流量、IS最大呼气量高于对照组(P<0.05)。观察组患儿随访结束后的生长激素水平、身高和体重均低于对照组(P<0.05)。结论吸入用布地奈德混悬液联合硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂雾化吸入疗法可缓解患儿的炎症反应,改善患儿的肺功能及免疫功能,加快临床症状的消失,但一定程度上会影响患儿的生长发育。

关键词： 调节性B细胞   肿瘤治疗   免疫抑制   癌症   白细胞介素-10   白细胞介素-35   转化生长因子-β  

摘要： 调节性B细胞(Breg)是近年来新发现的B细胞功能型亚群,其通过分泌白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-35(IL-35)和转化生长因子-β(TGF-β)等负向调节因子抑制机体免疫应答,在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用,影响肿瘤的发展、侵袭和转移。在肝癌、胃癌、乳腺癌、黑色素瘤、卵巢癌、肺癌等多种常见癌中均发现存在具有促癌效应的Breg。Breg和肿瘤的临床分期、治疗、预后存在一定的相关性。靶向Breg可能成为未来肿瘤免疫治疗的一个新方向。