关键词： 中空二氧化锰   人参皂苷Rg   透明质酸   三阴性乳腺癌   纳米粒  

摘要： 本研究制备了透明质酸 （hyaluronic acid， HA） 修饰的载人参皂苷Rg3中空二氧化锰纳米粒 （HMR@HA）， 并进行表征、体外释放与体外抗三阴性乳腺癌活性评价。采用模板法制备中空二氧化锰 (hollow mesoporous MnO2， HM) 纳米粒， 通过负载人参皂苷Rg3制得HMR， 修饰HA构建靶向纳米粒HMR@HA; 用激光粒度仪、透射电子显微镜、傅里叶红外光谱仪对其进行表征; 高效液相色谱法测定人参皂苷Rg3载药量并考察HMR@HA体外释药性能; 考察其对4T1细胞的摄取和体外抗肿瘤作用。结果表明最优制备工艺为药载比5∶1， 搅拌时间为12 h， 药物质量浓度为10 mg·mL-1; 制备的HMR@HA呈中空结构， 分布均一， 粒径为216.3 ± 1.3 nm， 平均载药量为 （42.42 ± 2.55）%; 体外释药具有pH值响应性， 累积释药量随pH值减小而增大; HMR@HA能够被4T1细胞有效摄取， 抑制癌细胞增殖与迁移; 细胞内活性氧及线粒体膜电位检测结果表明HMR@HA能促进肿瘤细胞凋亡。HMR@HA具有较高的载药量， 具有pH敏感释药性能， 与人参皂苷Rg3相比能明显增强抗肿瘤活性及诱导细胞凋亡， 为三阴性乳腺癌的治疗提供有效策略。

关键词： 赤芝   化学成分   羊毛脂甾烷三萜   三阴性乳腺癌  

摘要： 目的 研究赤芝（Ganoderma lucidum）的化学成分并对其抗三阴性乳腺癌活性进行初步评价。方法 通过各种色谱技术从干燥赤芝子实体中分离出单体化合物,结合一维二维核磁图谱以及高分辨质谱等数据进行结构鉴定。采用CCK-8法筛选对MDA-MB-231细胞具有增殖抑制作用的化合物并测定半数抑制浓度(IC50)。结果从赤芝80%乙醇提取物的乙酸乙酯部位中分离鉴定5个新化合物,bslingzhines A～E（1～5）。化合物5的IC50经计算为61.01μmol·L-1。结论 化合物1～5为新的羊毛脂甾烷类三萜,它们在体外抗三阴性乳腺癌活性均较弱。

关键词： 鳖甲-莪术药对   三阴性乳腺癌   组分配伍   自噬   mTORC1/ULK1信号通路   作用机制  

摘要： 目的探究鳖甲-莪术抗三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)的有效组分配伍及潜在作用机制并进行实验验证。方法利用TCMSP、Swiss Target Prediction获得鳖甲-莪术有效成分及作用靶点;OMMI、GeneCards数据库获取TNBC的疾病靶点;STRING数据库构建PPI网络;DAVID数据库进行GO、KEGG通路富集分析。Cytoscape3.9.1软件构建“药物-成分-靶点-疾病”网络,筛选关键靶点与成分进行分子对接,进一步对关键组分配伍及靶点进行体外实验验证。结果①鳖甲-莪术药对中筛选出71个有效成分,药物与疾病相关靶点146个,通过KEGG分析得出113条信号通路。鳖甲-莪术的71个潜在活性成分主要作用于mTORC1、ULK1、TNF、EGFR等关键靶点。分子对接结果显示,甘氨酸和姜黄素为鳖甲-莪术的关键活性成分,均对关键靶蛋白mTORC1和ULK1有较强的对接活性。②体外实验发现,甘氨酸联合姜黄素明显抑制TNBC细胞的增殖和克隆形成(P<0.05),抑制核心靶点EGFR的表达,上调自噬活性标志蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ表达、下调通路蛋白mTORC1、p-mTOR、p-ULK1蛋白表达、促进通路蛋白ULK1表达(P<0.05)。结论鳖甲-莪术药对抗三阴性乳腺癌关键组分配伍是甘氨酸-姜黄素,其作用机制可能与调控mTORC1/ULK1信号通路促进细胞自噬相关。

关键词： 3,5-二叔丁基水杨酸锌   纳米粒   三阴性乳腺癌   纳米沉淀法  

摘要： 目的3,5-二叔丁基水杨酸锌[Zn(DTBS)2]在水中的溶解度极低,易发生聚集沉淀而降低药效,为了克服这一缺陷,故制备可以提高原料药物生物利用度的3,5-二叔丁基水杨酸锌纳米粒(ZnNPs),并检测其对三阴性乳腺癌细胞的活性抑制作用。方法纳米沉淀法制得ZnNPs后,测定该纳米粒的形态、粒径、Zeta电位、包封率和载药量,MTS法检测它对人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的抑制作用。结果所得纳米粒呈大小均一的实心球状结构,粒径为(240±18)nm,ζ电位为(-35±8)mV,包封率为(82.66±1.98)%,载药量为(11.77±0.28)%。ZnNPs从50μmol/L的浓度开始,呈浓度和时间依赖性地抑制三阴性乳腺癌细胞活性,且相较于同样浓度的游离[Zn(DTBS)2],ZnNPs处理显示出更强的抗癌活性。结论Zn⁃NPs可增强Zn(DTBS)2对三阴性乳腺癌细胞活性的抑制作用。

关键词： 聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶1   含溴结构域蛋白4   双靶点药物   药效团   分子对接   乳腺癌  

摘要： 目的 发现一类骨架结构新颖的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP1)与溴结构域蛋白4(BRD4)双靶点抑制剂。方法 从ChEMBL数据库中收集已知的BRD4抑制剂作为筛选化合物库。采用药效团与分子对接串联筛选策略，从化合物库中筛选能够和PARP1高效结合的化合物作为模板分子。对模板分子进行结构修饰，合成得到衍生物。测试衍生物对PARP1与BRD4的酶抑制活性，对乳腺癌细胞的增殖抑制能力。结果 A（化合物5l）对PARP1与BRD4有中等水平的抑制能力，对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖抑制能力强于阳性药Olaparib，与JQ1水平相当。除了较高的脂水分配系数外，5l的理化性质大都分布在合理范围内，可作为先导化合物用于深入研究。结论 得到一类菲啶酮骨架结构的PARP1与BRD4双靶点抑制剂，证明通过计算机虚拟筛选发现PARP1与BRD4双靶点抑制剂是一种可行的策略。

关键词： 邻苯甲酰磺酰亚胺   HDAC抑制剂   抗肿瘤   三阴性乳腺癌   构效关系  

摘要： 作为一种关键的表观遗传调节因子,组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDACs)在癌症的发展中发挥着重要作用。小分子HDACs抑制剂已被证明能够抑制肿瘤增殖并诱导细胞凋亡,因此受到了广泛的研究关注。本研究设计和合成了一系列新的邻苯甲酰磺酰亚胺衍生物作为HDACs抑制剂。生物学实验表明,目标化合物9a展现出优于vorinostat的HDACs抑制活性,且对三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)具有良好的体内外抗肿瘤活性。所有动物实验经山东大学药学院伦理委员会批准(批准号:230094)。该项工作是以邻苯甲酰磺酰亚胺为母核发展HDACs抑制剂的一次探索,以9a为代表的活性化合物可以作为先导化合物进一步研究。

关键词： RNA   三阴性乳腺癌   药物递送系统  

摘要： 三阴性乳腺癌(TNBC)作为最具侵袭性的乳腺癌亚型,具有复发率高、死亡率高、治疗方法少等特点。核糖核酸干扰(RNA interference,RNAi)疗法可高效地调控靶标基因及相关下游通路,与化疗药物等联合应用,能够显著改善TNBC治疗效果,对基因调控和疾病治疗有重要意义。然而,RNA作为药物易被核酸酶降解、易被免疫系统识别及难以进行跨膜运输,因此设计靶向药物递送系统是RNA药物开发的重要目标。通过对抗TNBC的RNA药物递送系统进行综述并对其未来发展方向进行展望,以期为RNA药物的研发提供参考,促进RNA药物临床转化。

关键词： 瑞香狼毒提取物   乳腺癌多药耐药   凋亡   Nrf2   抗氧化  

摘要： 该研究将探讨瑞香狼毒提取物(SCL)抑制乳腺癌多药耐药的作用及机制。实验以人三阴性乳腺癌细胞亲本株MDA-MB-231,及其阿霉素耐药细胞株MDA-MB-231/ADR为研究对象,通过噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力;DAPI染色和Annexin-V/Pi凋亡双染检测细胞凋亡,Western blot(WB)检测Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱天冬酶(caspase)-9、caspase-3的表达水平,免疫荧光染色观察Nrf2细胞内分布,流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)水平。实验结果显示SCL的耐药因子是0.69,对应地,阿霉素和紫杉醇的耐药因子分别是8.40、16.36;DAPI染色结果显示SCL能够导致乳腺癌细胞核皱缩、碎裂;Annexin-V/Pi凋亡双染显示,在中、高剂量SCL的作用下,耐药细胞的平均凋亡率分别为32.64%、50.29%;WB检测结果提示:SCL能够明显降低抗凋亡蛋白Bcl-2、caspase-9和caspase-3表达水平,明显升高促凋亡蛋白Bax表达水平,进一步研究发现,SCL能够显著促进Keap1的表达,并明显抑制Nrf2和HO-1的表达,同时能够明显减少Nrf2的入核表达水平;相应地,流式检测细胞内ROS水平明显升高。综上所述,瑞香狼毒能够显著抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-231多药耐药细胞的增殖,引起细胞凋亡,其机制与抑制Keap1/Nrf2信号通路,导致耐药细胞内ROS累积,并增加凋亡相关蛋白的表达有关。