关键词： 柯萨奇病毒A组16型   酶联免疫吸附测定   手足口病  

摘要： 为建立柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CA16)抗原双抗体夹心ELISA定量检测方法,用于CA16灭活疫苗的研发和生产。本文以纯化的CA16病毒颗粒免疫新西兰兔,分离含有CA16-IgG的血清,经纯化得到纯度较好的CA16-IgG作为包被抗体;将辣根过氧化物酶标记到CA16-IgG上作为酶标抗体。用CA16抗原国家标准品对建立方法的特异性、稳定性、精密度、准确度及线性和最低检测下限进行验证。用建立的方法检测疫苗生产中各工艺段关键中间品(包括CA16收获液、超滤浓缩液、纯化液、原液)的抗原含量。结果显示建立了CA16抗原的ELISA定量检测方法。该方法的线性范围为0.71~45.45 ng/mL,决定系数>0.99,最低检测下限为2.84 ng/mL;精密度良好,变异系数<15%;不同浓度的样本相对偏倚(RB)均≤±12%,准确度良好;将检测板密封后置于37℃5 d,决定系数>0.99且变异系数<15%,稳定性良好;与CA16以外的其他样品无交叉反应,特异性良好。随着CA16疫苗制备过程的不断推进,中间品的比活呈上升趋势。构建的CA16抗原ELISA定量检测方法符合定量检测需要,可用于CA16疫苗研发及生产。

关键词： 手足口病   柯萨奇病毒B组5型(CV-B5)   全基因组   遗传进化分析  

摘要： 研究引起辽宁地区手足口病的柯萨奇病毒B组5型(coxsackievirus B5,CV-B5)基因组特征。对2018年从辽宁省688份肠道病毒核酸阳性的标本中分离到的1株CV-B5进行高通量测序,并对其全基因组进行遗传进化分析。结果表明,CV-B5辽宁分离株与国内流行株的全基因组核苷酸序列同源性为78.5%~97%,氨基酸序列同源性为75.3%~96.7%。基于全基因组的进化分析将CV-B5流行株分为A~D四个基因型,辽宁分离株属于D基因型。通过重组分析发现其在P3区的3D区段发生重组。首次在辽宁地区手足口病患儿中分离出CV-B5,辽宁省分离株(LN2018-23-21/CHN/2018)可能为重组株。

关键词： 手足口病   EV71   分子流行病学   核酸序列   同源性   高明地区  

摘要： 目的:探究高明地区手足口病肠道病毒71型(EV71)的分子流行病学,并对其核酸序列同源性进行进化分析。方法:选择2020年1月-2022年12月高明区人民医院及疾控中心提供来源于1547例手足口病患者的标本共1547份,采用荧光定量RT-PCR对标本进行肠道病毒核酸检测,并对其进行EV71、柯萨奇病毒A组16型(CA16)、非EV71/CA16(N)分类,从时间、地区、年龄、性别、疾病类型5个方面对EV71病毒引起手术口病的分子流行病学进行调查,分离部分EV71毒株进行全基因测序分析,另采用生活信息学软件对病毒基因特征进行分析。结果:5-7月为EV71病毒引起手足口病高发时间;高明地区与佛山市其他地区EV71病毒引起手足口病病例占比无显著差异;≤1岁患者为手足口病高发群体,2021年和2022年EV71病例占比分别为36.36%和36.28%;男性为手足口病高发群体,2021年和2022年EV71病例男女比例分别为2.140∶1和2.092∶1。基于全基因序列构建亲缘进化树,分离的6株EV71毒株与C4亚型毒株具有最近的亲缘性和最高的同源性。结论:2021-2022年EV71病毒是高明地区手足口病流行的主要病原,EV71毒株属C4型且遗传性较为稳定。

关键词： 手足口疫苗   手足口病   疫苗接种   安全性   预防效果  

摘要： 探寻为儿童进行手足口疫苗的接种具有怎样的预防效果。方法:随机抽取2020年01月~2022年06月我院收治的2000例适龄、无接种禁忌且自愿接种疫苗的儿童,均分为试验组和对照组。为试验组儿童接种EV71,而对照组儿童则不作任何处理,分析两组手足口病的发生率、家属心理状态。结果:试验组手足口病的发生率较低(P<0.05)。试验组家属心理状态良好(P<0.05)。结论:为儿童进行手足口疫苗的接种可获得良好的免疫效果,从而可有效预防手足口病,给儿童生长发育提供健康保障,值得推广。

关键词： 小儿   手足口病   预防控制措施  

摘要： 目的对小儿手足口病预防控制措施展开回顾性分析,以控制儿童流行性疾病的传播。方法选取2018年5月—2020年5月天津市东丽区疾病预防控制中心收治的115例小儿手足口病患儿临床资料展开回顾性分析,随机分为对照组57例和研究组58例。对照组患儿选择常规治疗措施,研究组患儿则在常规治疗基础上加入疾病预防控制措施。对不同治疗方案所得临床效果展开分析,比较两组患儿治疗有效率及皮疹消退时间、口腔溃疡愈合时间和住院时间。结果研究组临床治疗总有效率为96.55%,高于对照组的77.19%,差异有统计学意义(χ^(2)=9.4987,P<0.05)。研究组皮疹消退、口腔溃疡愈合和住院时间均短于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论近些年,小儿手足口病正逐步成为儿童较常发生的一种流行性疾病,应用科学且合理的预防及控制措施,可对疾病传播展开有效控制,利于儿童身心健康持续发展。特别是<5周岁儿童需要做好卫生保健工作,若儿童有患病症状,则需立即对其采取隔离治疗措施,进而避免产生传染情况。

关键词： 手足口病   肠道病毒   非EV71非CA16肠道病毒   基因型   流行病学  

摘要： 目的对比了解2022—2023年新冠疫情期间及疫情后广州市和佛山市手足口病流行病学及非肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)非柯萨奇病毒A组16型(Coxsaekievirus group A 16,CA16)病毒的分子流行病学特征,为治疗和防控提供依据。方法运用荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对2022—2023年疑似手足口病患者标本同时进行肠道病毒(enterovirus,EV)通用型、EV71、CA16检测,并选取EV71和CA16是阴性而EV通用型是阳性的标本进行型别鉴定,设计5′非编码区(UTR)引物,RT-PCR扩增后进行序列测定,序列用BLAST程序进行序列的EV型别确定。结果2022年,同时进行EV通用型、EV71、CA163种病毒检测的疑似手足口病例标本共362份,总阳性47份,阳性率为12.98%;其中EV71阳性0份;CA16阳性5份,占1.38%;非EV71非CA16的EV阳性标本42份,占11.60%。2023年,同时进行EV通用型、EV71、CA163种病毒检测的疑似手足口病标本有297份,总阳性100份,阳性率为33.67%,全年没有检出EV71,CA16全年检出率为2.36%(7/297),非EV71非CA16的EV阳性率为31.31%(93/297)。51份非EV71非CA16阳性标本的序列分析表明,2022—2023检出的非EV71非CA16的EV有9种型别,分别为:CA6、CA10、CA4、CA2、CA8、柯萨奇病毒B组5型(CB5)、CB2、CB3、埃可病毒30型(E30),其中CA6占主要,为27.45%(14/51),其次是CA10,占15.69%(8/51)。结论新冠疫情结束后的2023年比疫情期间的2022年EV阳性率高。2022—2023年手足口病主要以非EV71非CA16为主,序列分析表明非EV71非CA16病毒中以CA6和CA10为主,应加强对CA6、CA10为主要非EV71非CA16病毒进行研究及监测。

关键词： 手足口病   柯萨奇病毒A10   基因特征   临床表现  

摘要： 目的分析青岛地区感染柯萨奇病毒A10型(CVA10)手足口病病例的分子特征及其所致轻重症病例的临床特征。方法以2014—2021年青岛市妇女儿童医院常规监测的手足口病病例为研究对象,共6677例,收集其咽拭子标本;采用回顾性研究的方法,收集研究对象的临床资料。对标本进行病毒核酸提取和肠道病毒分型鉴定;对CVA10病毒毒株进行VP1基因全长扩增,并进行序列测定;采用MEGA7.0软件对获取VP1基因序列进行系统进化分析,SPSS23.0软件对临床资料进行统计学分析。结果CVA10阳性病例285例,其中男性183例,女性102例,5岁以下儿童占89.8%,发病时间集中在4~9月份,重症患者与轻症患者比较,白细胞计数(WBC)、中性粒细胞百分比(N%)、血红蛋白浓度(HGB)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)显著升高,重症组胸片、脑CT异常较轻症组多,心电监护时间长。CVA10重症病例较轻症病例皮疹在发热前且皮疹较多出现在臀部,差异有统计学意义(P<0.05)。系统进化分析显示,青岛2014—2021年CVA10毒株大部分位于分支Ⅰ上,分支Ⅰ氨基酸序列共发生A23V和I283V两处变异。结论本研究中所有年龄段儿童均易感染CVA10,但大多数病例发生在5岁以下幼儿。CVA10在不同地域不同年份呈现复杂多样的流行动态。

关键词： 喜炎平   小儿手足口病   利巴韦林  

摘要： 探究临床在对手足口病患儿实施治疗期间联合运用喜炎平与利巴韦林的具体效果。方法 于2020年3月至2023年4月间在本院就诊并接受治疗的手足口病患儿中择取出148例,遵照随机双色球法分为参照组与探究组各计74例,在实施治疗期间对于参照组患儿运用利巴韦林,而探究组患儿则联合运用利巴韦林与喜炎平。对比分析两组手足口病患儿的治疗效果数据、治疗前后炎症因子水平变化情况、相关症状消退用时以及不良反应出现数据等。结果 探究组患儿在接受喜炎平联合利巴韦林治疗后其有效率数据(94.59%)显著性高于参照组(83.78%),P<0.05;两组手足口病患儿在接受治疗前其炎症因子水平并未有统计学上的显著差异(P>0.05);而在接受治疗后探究组患儿其TNF-α、IL-10、IL-6等指标皆显著性低于参照组(P<0.05);探究组患儿其口腔疱疹消退用时、体温恢复用时、皮疹消退用时等数据与参照组相比较也显著性偏低(P<0.05);探究组患儿治疗期间出现咳嗽、腹泻、呕吐、乏力等不良反应的总出现率与参照组相比较也显著性偏低(P<0.05)。结论 在临床上为手足口病患儿联合运用喜炎平与利巴韦林治疗不仅有助于明显缩短手足口病患儿的相关症状消退用时,同时还可以显著性减少治疗期间患儿出现不良反应的几率,安全性高,推荐参考。

关键词： 手足口病   柯萨奇病毒A组6型   基因重组   遗传特征  

摘要： 目的 研究江苏省2013-2022年分离到的柯萨奇病毒A6型(CV-A6)全基因组序列特征及对全基因组各编码区进行遗传进化分析,以期从分子流行病学特征的角度解释CV-A6取代肠道病毒A71和柯萨奇病毒A16成为江苏省引起手足口病(HFMD)主要病原的原因。方法 选取2013-2022年间江苏省地区流行的35株CV-A6毒株进行全基因组测序,采用DNASTAR、MEGA7.0和Similarity plots3.5.1等软件对获取的全基因组序列进行比对、相似性分析、系统进化分析和基因重组分析,对P1编码区和3D区主要氨基酸变异位点进行分析。结果 35株CV-A6江苏毒株的全基因组核苷酸和氨基酸序列相似性分别为87.5%~99.6%和97.0%~99.8%,与CV-A6原型株Gdula/USA/1949的全基因组核苷酸序列相似性仅为80.3%~81.0%,氨基酸序列相似性为94.7%~95.3%。基于VP1序列的系统进化树结果显示,2013-2022年江苏省有34株CV-A6分离毒株分属于D3a基因亚型,1株分属于D2基因亚型;基于3D区进化树划分不同重组模式,2013-2022年江苏省流行的CV-A6出现过4个重组进化分支:RF-A、RF-L、RF-K和RF-C型。重组分析结果显示:江苏省流行的CV-A6毒株与CV-A6原型株Gdula/USA/1949在结构蛋白序列上具有较高的相似性。而在非结构蛋白和非编码区则与其他EV-A原型株序列相似性更高。而氨基酸突变位点分析结果显示,与原型株Gdula/USA/1949相比,P1区和3D区多个氨基酸位点变异频繁,可能会使得衣壳蛋白的结构、潜在的受体结合位点产生变化。结论 通过对2013-2022年江苏省CV-A6的全基因组序列分析,有助于了解江苏省CV-A6基因重组及遗传进化关系,解释了近年来CV-A6成为手足口病的主要病原体的可能原因,对CV-A6的防控工作提供了基础资料。

关键词： 手足口病   肠道病毒   粪便   咽拭子  

摘要： 目的 探讨2017-2021年安阳市龙安区手足口病(HFMD)病原学变化。方法 采集2017年1月至2021年12月龙安区某市级医疗机构门诊及住院的HFMD患儿粪便标本655份和咽拭子标本345份,采用荧光定量RTPCR法对标本进行肠道病毒核酸检测,根据标本检测结果分析病原学变化情况。结果 2017-2021年共检测1 000份标本,近5年手足口病病原学阳性检出率为27.56%~93.18%,每年不同型别病原学构成比不同,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。其中2017年以CVA6型为主,2018年以EV71型为主,2019年以其他肠道病毒为主,2020年与2021年均以CVA16为主。男性患儿不同型别病毒的阳性检出率均略高于女性。0~3岁儿童标本,病原学阳性406份,占88.26%;10~12岁儿童标本,病原学阳性1份,仅占0.22%。655份粪便标本中,病原学阳性356份,检出率为54.35%,其中CVA16型占比最高,为32.58%;345份咽拭子标本中,病原学阳性104份,检出率为30.14%,其中EV71型、CVA16型占比较高,均为34.62%。不同类型的标本,手足口病肠道病毒阳性检出率差异有统计学意义(χ^(2)=53.304,P<0.001)。结论 龙安区手足口病肠道病毒阳性检出率不断上升,其中CVA16型和EV71型肠道病毒为主要病原体。