关键词： 手足口病   扬州市   DLNM模型   季节性   预测模型   ARIMA模型  

摘要： 研究目的: 1.描述扬州市2013-2022年全市手足口病流行特征,包括其三间分布特征。 2.探究逐月和逐日两个时间维度气象因素对扬州市手足口病发病的影响。 3.基于扬州市手足口病发病数据,构建四种不同的预测模型,为扬州市手足口病的预防提供科学依据。 方法: 1.收集2013年1月1日-2022年12月31日期间扬州市手足口病发病资料,探究其时间分布、人群分布、空间分布特征,并采用季节指数和集中度两个指标描述手足口病发病的季节性,明确手足口病高发季节、重点发病地区及高发人群。 2.以新冠疫情暴发之前为时间点(2013年1月1日-2019年12月31日),使用GAM模型从逐月维度上探究各种气象因素与扬州市手足口病发病之间的关系,并采用DLNM模型定量分析气象因素对手足口病的暴露-滞后效应。 3.根据手足口病发病的时间规律以及周期性特征,分别构建ARIMA模型、NNAR模型以及ARIMA-NNAR组合模型,同时引入气象因素,构建SVM模型,以MAE和RMSE为评价指标,比较四种模型的拟合和预测效果,并进行评价。 结果: 1.扬州市2013-2022年累计发病52674例,年均发病5267例,年均发病率为117.26/10万;发病具有较强的双峰季节性,第一个主高峰集中在4-6月份,第二个次高峰在9-10月份;扬州市主城区(邗江区、广陵区)为手足口病高发地区,年均发病率最高;病例主要集中在3岁及以下年龄段,男性发病率高于女性,职业分布以散居儿童、幼托儿童为主。 2.逐月数据表明,平均气温和降水量与手足口病呈现“倒U型”关系,平均气压与手足口病呈现“U型关系”,相对湿度和日照时数与手足口病发病数近似呈现正线性关系。通过DLNM模型得到的气象因素-滞后天数-相对危险度的三维效应图,结果显示,不同滞后天数下,各气象因素与手足口病呈现非线性关系。 3.利用2013-2019年数据建立的四种模型中,AIRMA-NNAR组合模型在拟合阶段的RMSE=226.80,MAE=136.18是误差最小的模型,NNAR模型在预测阶段的RMSE=273.60,NNAR=148.66,是误差最小的模型。预测结果显示,每年的6、11月份为手足口病的高峰期,应当提前做好手足口病防控预案工作。 结论: 1.2013-2022年扬州市手足口病发病整体呈现双峰分布的特征,4-6月为一个主高峰,9-10月为一个次高峰。2013-2019年呈现“奇年低、偶年高”的趋势,2020-2022年呈现低流行水平。发病率较高的是邗江区、广陵区;人群分布中男性高于女性,发病集中在1～3岁儿童,职业以散居儿童和幼托儿童为主。 2.逐月数据显示,平均气温和降水量与手足口病呈现“倒U型”关系,平均气压与手足口病呈现“U型关系”,相对湿度和日照时数与手足口病发病数近似呈现正线性关系。逐日数据显示,除平均气温和日照时数外,不同滞后天数下,各气象因素与手足口病呈现非线性关系。提示在不同的气候条件下应做好手足口病的预防工作。 3.四种模型一定程度上可以模拟手足口病的发病趋势,ARIMA-NNAR模型在拟合阶段表现最佳,NNAR模型在预测阶段误差最小,然而模型的精度有待进一步优化。

关键词： 手足口病   流行病学   病原学  

摘要： 【目的】 1、研究2013年～2022年云南省红河州手足口病流行病学特征和病原构成特征。为手足口病防治策略制定提供依据。 2、对2023年1～7月红河州检出的其他肠道病毒（非肠道病毒71型和非柯萨奇病毒A组16型）进行型别分析,获得红河州手足口病病原谱构成。为免疫策略制定和疫苗研发提供依据。 【方法】 通过中国疾病预防控制信息系统以病例发病日期为限定条件,下载2013～2022年红河州手足口病监测数据,采用描述流行病学分析方法,对手足口病流行特征和病原学特征进行分析;收集2023年1～7月红河州13县（市）疾控中心手足口病核酸检测结果为其他肠道病毒阳性的标本,使用荧光定量逆转录聚合酶链式反应（Reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR）、逆转录半巢式PCR（RT-seminested PCR,RT-sn PCR）和基因片段测序方法对其他肠道病毒进行病毒型别分析。 【结果】 1、2013年～2022年红河州手足口病累计报告病例83 252例,其中重症病例360例,死亡病例11例。年发病率介于262.43/10万～110.27/10万之间,呈现出以2018年为拐点,先上升（122.18/10万～262.43/10万）后下降（262.43/10万～110.27/10万）的趋势。手足口病重症率和病死率呈现下降趋势（120.20/万～12.25/万,5.38/万～0.00/万）。 2、红河州手足口病发病具有季节性,除2013年5月和2020年10月呈现单个发病高峰外,其余各年均呈现双发病高峰,分别位于4月～7月和10月～12月。 3、手足口病0～7岁儿童高发;男性发病率高于女性（1.37:1）;以散居儿童和幼托儿童为主,占总发病人数的95.80%。在各年龄组中,1岁组的发病率、重症率均为最高（4 223.04/10万,572.61/10万）,发病率与年龄呈负相关。死亡病例集中于3岁以下儿童,0岁组病死率最高。死亡病例以散居儿童为主,占比为90.91%。 4、红河州北部地区发病率和重症率高于南部地区(243.33/10万（29）59.49/10万,372.76/10万（29）231.42/10万),且差异性具有统计学意义(χ2=19 625.297,（49）(27)0.05;χ2=11.003,（49）(27)0.05)。 5、病原谱分析结果显示,2013年、2015年以肠道病毒71型（Enterovirus A71,EV-A71）为优势病原体,其次分别为柯萨奇病毒A组16型（Coxsackievirus A16,CV-A16）和其他肠道病毒。2014年CV-A16为优势病原体,EV-A71位列第二。2016～2022年其他肠道病毒成为优势病原体,CV-A16位列第二。在重症病例中,2013～2017年EV-A71为主要病原体,其次为其他肠道病毒。2018年EV-A71和其他肠道病毒（EV-A71和其他肠道病毒均为22例）同为主要病原体,CV-A16位列第二。2019～2022年其他肠道病毒为主要病原体,EV-A71位列第二。在死亡病例中,EV-A71为优势病原体,其次为CV-A16和其他肠道病毒。 6、2016年EV-A71疫苗接种后,EV-A71在手足口病病原中的占比、重症病例病原中的占比和死亡病例病原中的占比相对于疫苗接种前明显降低。 7、2023年1～7月其他肠道病毒分型结果显示手足口病病原呈现多样性,CV-A6为优势病原,其次为CV-A4。 【结论】 1、2013年～2022年红河州手足口年发病率呈现出以2018年为拐点,先上升后下降的趋势。手足口病重症率和病死率呈现下降趋势。 2、2013～2022年红河州手足口病发病呈现季节性和地区性,7岁以下儿童高发。 3、EV-A71疫苗接种后EV-A71引起的重症率和死亡率相对于疫苗接种前均有显著降低。 4、手足口病病原呈现多样性,因此有必要进行手足口病多价疫苗研发。散居儿童和幼托儿童是防控重点。提高EV-A71疫苗适种儿童（6月～5岁）的接种率,有助于降低EV-A71造成的重症和死亡。

关键词： 手足口病   流行病学   病原学  

摘要： 目的 了解2014—2022年河池市手足口病流行特征及病原学变化情况，为科学防控手足口病提供依据。方法 对河池市2014—2022年手足口病疫情数据和病原学监测结果进行流行病学分析。结果 2014—2022年河池市共报告手足口病病例132 285例，年均发病率为422.12/10万，病死率为1.66/万，发病率呈下降趋势（趋势χ2=14.849,P<0.01），不同年份发病率差异有统计学意义（χ2=863045.749,P<0.01），不同年份病死率差异有统计学意义（χ2=21.307,P<0.01）；年均发病率最高为金城江区（676.80/10万），最低为天峨县（197.90/10万），不同地区间年均发病率差异有统计学意义（χ2=1092.831,P<0.01）；报告发病高峰期为4、5月，男女性别比为1.50∶1，男女年均发病率差异有统计学意义（χ2=4120.781,P<0.01）;3岁及以下年龄组婴幼儿占85.53%；职业以散居儿童为主（占81.49%）；病原学监测以其他肠道病毒为主（占60.85%），不同年份间EV71、CA16、其他肠道病毒构成比差异有统计学意义（χ2=1 638.373,P<0.01）。结论 河池市手足口病疫情虽呈下降趋势，但仍有波动，地区间发病率差异较大，防控形势依然严峻。应继续做好健康教育、重点场所消杀、病原学监测和EV71疫苗接种等各项防控工作。

关键词： 手足口病   脑损伤   柯萨奇病毒A6   细胞焦亡   中性粒细胞外陷阱  

摘要： 手足口病(Hand foot and mouth disease，HFMD)是全球重大公共卫生问题之一，严重威胁着婴幼儿的健康。近年来。柯萨奇病毒A组6型(Coxsackievirus A6,CVA6)已成为引发全球手足口病暴发和流行的最主要病原体。研究表明，CVA6感染可能导致中枢神经系统出现严重并发症，甚至导致死亡。然而，目前CVA6导致中枢神经系统损伤的具体机制仍待阐明。课题组前期研究发现，中性粒细胞外陷阱(Neutrophil extracellular traps,NETs)释放参与CVA6感染所致的疾病进展，但缺乏确凿的证据。已有证据显示，半胱天冬蛋白酶-1(Cysteinyl aspartate specific proteinase-1，Caspase-1)具有切割细胞焦亡成孔蛋白(Gasdermin-D,GSDMD)的功能，使 GSDMD 的 N 末端结构域(Gasdermin D-N terminal,GSDMD-N)释放。GSDMD-N进一步在中性粒细胞的细胞膜打孔，细胞内外失衡而破裂，引起NETs释放。因此，本研究旨在通过构建CVA6感染的小鼠脑损伤模型，深入揭示Caspase-1/GSDMD介导的中性粒细胞NETs释放在CVA6感染致脑损伤中的作用，并通过病例对照研究探讨外周血GSDMD和NETs水平与CVA6脑炎发生的关联。本研究有助于揭示小儿CVA6脑炎的发生机制，并为有效干预提供科学依据。　　目的　　1.通过构建动物感染模型，揭示Caspase-1/GSDMD介导的中性粒细胞NETs释放在CVA6感染致脑损伤中的作用;2.通过病例对照研究，探讨外周血GSDMD和NETs水平与CVA6脑炎发生的关联。　　方法　　1.构建CVA6感染的小鼠急性脑损伤模型:记录小鼠感染后1～15天(day past infection,dpi)的体重变化、临床评分和生存状况。免疫组化分析小鼠各组脑组织中CVA6 VP1的表达。苏木精-伊红染色(Hematoxylin-Eosin，H&E)、尼氏染色来观察小鼠脑组织的病理损伤。实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)检测小鼠脑组织中的白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(Interleukin-1 β,IL-1β)、白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)和单核细胞趋化蛋白-1(Monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)等炎症细胞因子的 mRNA 水平。蛋白免疫印迹(WesternBlot，WB)检测小鼠脑组织中细胞焦亡信号通路的蛋白表达水平，即 Caspase-1、Cleaved-Caspase-1(Cl-Caspase-1)、GSDMD、GSDMD-N、IL-1β和白细胞介素-18(Interleukin-18,IL-18)。免疫荧光检测感染小鼠脑组织中GSDMD和髓过氧化物酶(Myeloperoxidase，MPO)的共定位现象。南京建成髓过氧化物酶试剂盒比色法检测各组小鼠脑组织及血清中的MPO水平。　　2.阻断Caspase-1/GSDMD介导的NETs释放对CVA6感染致脑损伤的影响:本研究分别采用Caspase-1基因敲除(Knock-out,KO)小鼠和GSDMD抑制剂(Disulfiram，10 mg/kg·bw)干预。记录各组小鼠在感染CVA6后的体重变化、临床评分和生存状况。H&E染色和尼氏染色来评估各组小鼠脑组织的病理损伤。免疫荧光检测各组小鼠脑内GSDMD与MPO的共定位现象。采用比色法检测各组小鼠干预前后的MPO水平。qRT-PCR检测各组小鼠脑组织中IL-6、IL-1β、IL-10、TNF-α 和 MCP-1 的 mRNA 水平。　　3.病例对照研究:收集2018年1月-2023年12月在河南省儿童医院郑州儿童医院住院的283例HFMD患儿。根据病原学检测、临床症状、体征和影像学的结果，按性别年龄进行匹配，从中匹配到普通病例组(CVA6阳性，n=79)和CVA6脑炎组(n=79)的外周血白细胞，qRT-PCR检测GSDMD、IL-1β、IL-18的mRNA水平，计算OR值和95％CI,并做相关性分析。另外，同期按相同方法匹配普通病例组(CVA6阳性，n=83)和CVA6脑炎组(n=83)的外周血血清，比色法检测各组血清中MPO的水平，计算OR值和95％CI,并对病例外周血MPO水平与GSDMD水平(n=41,即纳入同时检测GSDMD转录水平和MPO水平的病例)进行相关性分析。　　结果　　1.与对照组小鼠相比，CVA6感染

关键词： 手足口病   柯萨奇病毒A组6型   临床症状   分子进化   基因重组   结构解析   氨基酸变异   血清流行病学  

摘要： 手足口病(hand, foot and mouth disease, HFMD)是一种可由多种肠道病毒引起的以儿童急性感染为主的全球性传染病。近期，柯萨奇病毒A组6型(coxsackievirus A6,CVA6)引起的典型及非典型HFMD在多个国家及地区发病率明显上升且临床表现多样。而CVA6的分子进化、人群群体免疫屏障的建立等均可影响HFMD的暴发流行及病原谱的变迁。现就CVA6的流行、分子进化与重组、氨基酸变异、结构解析及血清流行病学研究作一概述，旨在为HFMD的防控提供思路。

关键词： 手足口病   肠道病毒71型   RNAN6-甲基腺苷   作用机制  

摘要： 在重症手足口病患者中，肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)是最主要的病原体。固有免疫信号通路失调被认为是导致重症手足口病的主要原因之一，miR-146a作为机体最重要的miRNA之一，EV71感染后表达上调，通过抑制IFN-Ⅰ的产生影响疾病的发展，但miR-146a失调的机制尚不清楚。研究表明RNAN6-甲基腺苷(N6-methyladenosine，m6A)可能在miRNA成熟的过程中起重要作用，但EV71感染后RNAm6A是否会影响miR-146a的成熟，进而促进重症手足口病的进展尚不清楚，以及如果RNAm6A调控miR-146a的成熟，那么具体的作用机制是什么。　　目的　　本研究拟探讨EV71感染后RNAm6A对miR-146a成熟的影响及与下游靶基因TRAF6/IRAK1的关系。从表观遗传学角度阐述RNA甲基化和miR-146a在重症手足口病中的作用机制。　　方法　　***71以不同感染复数(MOI)和不同时间感染RD和U87-MG细胞，WesternBlot法检测EV71VP1和miR-146a靶基因IRAK1和TRAF6的表达水平;qPCR法检测miR-146a和IFN-ⅠmRNA表达水平。　　2.使用RNAm6A位点预测软件SRAMP对pri-miR-146序列进行分析，并分析可能的m6A位点在二级结构中的位置，位于pri-miR-146侧翼上的m6A位点可能影响其剪切成熟。MAZF-qRT-PCR法检测EV71感染后pri-miR-146侧翼m6A修饰水平;qPCR法检测pri-miR-146表达水平;WesternBlot法检测RNA甲基化修饰相关蛋白酶表达水平。　　3.将4日龄的C57BL/6小鼠随机分入各研究组，在感染EV71后的0天、5天及7天，进行安乐死处理并取出其脑组织进行后续分析。WesternBlot法检测甲基化转移酶METTL3蛋白水平，qPCR法检测miR-146a、pri-miR-146和IFN-ⅠmRNA表达水平，MAZF-qRT-PCR法检测小鼠pri-miR-146m6A修饰水平。　　4.检测甲基转移酶METTL3对miR-146a成熟的影响及其在抗病毒反应中的作用:使用siRNA-METTL3对宿主细胞METTL3进行敲低;构建pcDNA3.1(+)-METTL3重组质粒过表达宿主细胞甲基转移酶METTL3。qPCR和MAZF-qRT-PCR法检测调控METTL3后pri-miR-146表达及其m6A修饰水平;qPCR和WesternBlot法检测miR-146a和其下游靶基因IRAK1、TRAF6和IFN-Ⅰ,以及EV71VP1蛋白水平。　　***免疫共沉淀法（RIP）检测甲基转移酶METTL3是否直接作用于pri-miR-146;免疫荧光法检测METTL3与pri-miRNA剪切定位辅助蛋白DGCR8在RD和U87-MG细胞内的表达与定位;蛋白免疫共沉淀法（Co-IP）法进一步检测甲基转移酶METTL3与DGCR8的互作情况。　　6.采用病例对照研究验证RNAm6A促进pri-miR-146成熟参与重症手足口病的发生:收集2018年4月至12月在河南省儿童医院接受住院治疗的手足口病病例及血细胞样品。根据《手足口病诊疗指南（2018年版）》并按照年龄性别匹配，将病例分为轻症组（n=92）和重症组（n=92）。qPCR和MAZF-qRT-PCR法检测轻重症患者pri-miR-146及其m6A修饰水平，使用R语言ggplot包按照轻重症患者的发病时间（2、3、4和≥5天）拟合动态变化曲线。EV71感染会导致外泌体分泌上调，miR-146a优先富集于外泌体中并转移至细胞外。为此，本研究在下游基因IRAK1靶序列处设计特异性引物，靶序列处若被miR-146a“占据”，则IRAK1得不到有效扩增，因此更特异地反应IRAK1在体内被miR-146a靶向情况。qPCR法检测轻重症患者IRAK1水平，并按照发病时间进行动态对比和拟合分析。根据上述实验结果绘制相关指标用于重症手足口病判断的ROC曲线，并进行诊断测试评价。　　结果　　1.随着EV71感染时间和感染复数的增加，miR-146a和VP1表达升高，下游靶基因IRAK1、TRAF6和IFN-Ⅰ受到抑制，导致病毒复制增加。　　***预测pri-miR-146侧翼上可能存在5个m6A位点，且m6A修饰水平在EV71感染后升高，pri-miR-146消耗量升高;甲基化转移酶METTL3在EV71感染后升高。　　3.小鼠在感染EV715天和7天时，miR-146a表达升高，IRAK1和TRAF6的表达则受到抑制，IFN-Ⅰ表达在感染5天时最高，但在感染病毒7天时下降;METTL3在感染7天时表达升高，且pri-miR

关键词： 手足口病   新冠疫情   流行病学  

摘要： 目的 分析2012—2022年重庆市万州区手足口病（HFMD）流行病学特征，为HFMD防控提供依据。方法 从中国疾病预防控制信息系统获取2012—2022年现住址为万州区的HFMD报告病例数据，采用描述流行病学方法、卡方检验和t检验分析相关数据，用ArcGIS 10.8和SPSS 23.0软件对数据进行统计分析，检验水准为α=0.05。结果 2012—2022年万州区累计报告HFMD病例24 379例，年均发病率为141.04/10万，其中重症病例84例、死亡病例6例。2020—2022年（新冠疫情期间）HFMD平均月发病率明显低于2012—2019年（新冠疫情前）（t=2.249,P=0.026）。新冠疫情前HFMD发病呈季节性双峰分布，并呈波动上升和隔年高发的特点。2020和2022年HFMD发病季节性双峰特征消失。HFMD病例集中于5岁以下儿童（88.13%）和散居儿童（62.43%），新冠疫情期间3岁及以上年龄组占比较新冠疫情前上升7.03%，托幼儿童和学生病例占比上升6.26%。年平均报告发病率前5位的地区均位于中心城区。2012—2022年实验室诊断病例744例，感染EV A71的病例数在2015年达到高峰（65.83%）后下降，2022年占比回升（28.57%）。结论 新冠疫情期间HFMD发病率明显下降，需注意新冠病毒感染实施“乙类乙管”后HFMD发病率再次回升；在主抓学龄前儿童疫苗接种和健康宣传教育工作的同时，应加强托幼机构和小学的宣教；为防止感染EV A71病例增多，EV 71疫苗接种工作不容放松。

关键词： 手足口病   流行特征   病原学特征   长沙市  

摘要： 目的 了解湖南省长沙市6岁及以上人群手足口病流行特征，为手足口病防控提供科学依据。方法 通过中国疾病预防控制信息系统获取2013—2022年长沙市手足口病报告病例基本信息，同时收集各县（市、区）手足口病病原学监测数据。采用描述流行病学方法分析病例三间分布及病原构成变化。结果 2013—2022年长沙市累计报告6岁及以上人群手足口病病例14 889例，占手足口病总病例数的5.04%，无重症和死亡病例报告，年均报告发病率为19.54/10万。2013—2022年该人群病例在总病例数中的构成比总体呈上升趋势（χ2趋势=1 658.760,P<0.01），每年发病主高峰出现在4—7月。性别分布上，男性8 526例，女性6 363例，性别比为1.34∶1；年龄中位数为7(6,10)岁，最大年龄为91岁，年龄分布以6～15岁为主，占88.09%(13 116/14 889)；职业分布以学生为主，占55.97%(8 334/14 889)。城区（雨花区、开福区、岳麓区、芙蓉区和天心区）的年均报告发病率为24.70/10万，高于郊区（长沙县、浏阳市、宁乡市和望城区）的年均报告发病率（12.75/10万）。病原学监测结果显示，送检标本的肠道病毒阳性率为50.49%(156/309)，其中肠道病毒A组71型（enterovirus A71, EV-A71）、柯萨奇病毒A组16型（coxasckievirus A16, CV-A16）和其他肠道病毒的构成比分别为5.77%(9/156)、37.18%(58/156)和57.05%(89/156)。结论 2013—2022年长沙市手足口病病例中，6岁及以上人群占比总体呈升高趋势，以其他肠道病毒为主。建议密切关注6岁及以上人群的手足口病预防工作，加强中小学校手足口病防控措施，同时做好其他肠道病毒分型监测工作。

关键词： 手足口病   预测模型   气候变化   机器学习  

摘要： 手足口病（HFMD）是一种主要影响儿童的急性传染病，近年来在全球多个国家和地区广泛流行，在中国手足口病是丙类传染病中发病人数最多的疾病。手足口病传播速度快、影响范围广，开发有效的预测模型对于公共卫生干预和资源分配具有重要意义。　　本文基于2008-2020年中国大陆31省（市、自治区）的手足口病发病率数据，首先进行手足口病的时间、空间分布及空间聚集性的描述性统计分析。接下来以五项气象因素:气温、气压、降水量、湿度和风速，两项人口因素:人口数和人口密度，经济因素GDP和医疗卫生机构数、疾病预防控制中心数等十项因素为预测变量，构建SVR、决策树、随机森林、XGBoost、BP神经网络和LSTM六个手足口病预测模型，以交叉验证的均方误差（MSE）、平均绝对误差（MAE）和均方根误差（ RMSE）三个指标综合评估模型，最终结果显示XGBoost模型在大多数省（市、自治区）的预测效果是六种模型中最好的。　　因此接下来本文基于XGBoost模型,进一步进行模型的特征重要性探究。通过XGBoost模型本身的feature_importance_输出每个影响因素在各个省（市、自治区）上的特征重要性排名，得到结果:气压和气温是最重要的影响因素，它们在大多数省（市、自治区）都排在前面。然后对各省（市、自治区）特别是广西壮族自治区和海南省两个区域建立的XGBoost模型进行SHAP解释，结果反映了不同区域内气候变化等因素对手足口病发病率有着不同的影响。最后根据南方某城市的数据，对年龄和性别这两个影响因素进行探究，结果显示对该城市而言，男性要比女性更易感染手足口病，不同年龄段的儿童对手足口病的易感性不同，且5岁以下儿童更易感染。