关键词： 综合性护理   健康教育   小儿手足口病   症状   满意度  

摘要： 目的 探讨在小儿手足口病护理中联合实施综合性护理与健康教育的临床价值。方法 选取2019年1月至2022年12月我院收治的手足口病患儿60例，随机分为两组，每组30例。对照组行常规护理干预，观察组实施综合性护理联合健康教育，以护理效果、症状改善时间和住院时间、患儿家长护理满意度为观察指标。结果 观察组治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。观察组皮疹消退时间、口腔糜烂愈合时间、住院时间、退热时间均短于对照组(P<0.05)。观察组患儿家长护理满意度高于对照组(P<0.05)。结论 综合性护理联合健康教育对手足口病患儿的护理效果显著，可提升患儿治疗效果，加快患儿临床症状改善，获得了患儿家长的高度满意，建议在临床中广泛应用。

摘要： 手足口病是一种由多种肠道病毒引起的常见儿童传染病，高发季节通常在春季与夏季，尤其是5—7月，主要影响5岁以下儿童。因此，在此期间加强对手足口病的预防尤为重要。本文将从手足口病的症状与预防措施两方面进行探讨，以帮助家长与学校有效防范手足口病的传播。

关键词： 手足口病   重症   流行特征   趋势分析  

摘要： 目的 了解江西省重症手足口病流行特征和病原谱变化情况，掌握不同时间和人群的趋势变化特征，为手足口病疫情防控策略的制定和优化提供科学依据。方法 对2008—2023年江西省重症手足口病监测数据进行描述性分析，采用joinpoint回归模型分析不同年份、性别发病特点和变化趋势。结果 2008—2023年江西省共报告2 281例重症病例，实验室确诊占73.26%。重症比例由2010年的17.12‰降至2023年的0.15‰（APC=-34.74%）。4—7月高发，男性高于女性（2.13∶1），以3岁以下散居儿童为主（86.45%）。2008—2023年男性和女性重症比例总体变化趋势基本一致，其中2010—2023年均呈逐年下降趋势，但女性（37.86%）的年均降幅较男性（32.84%）大。EV-A71是实验室确诊病例优势毒株（79.89%），但其他肠道病毒占比明显增加。结论 2010年以来，江西省重症手足口病疫情呈逐年下降趋势。EV-A71为优势病原，但2017年后未再检出，应加强重症病例中其他肠道病毒基因分型。三岁以下儿童是重症手足口病重点干预对象，应采取针对性措施降低人群感染风险。

关键词： 手足口病   CVA4   小鼠模型   鱼腥草   丝裂原活化蛋白激酶  

摘要： 背景:柯萨奇病毒A4型（Coxsackievirus A4,CVA4）是引起手足口病（Hand foot and mouth disease,HFMD）的重要病原体之一。CVA4属于小核糖核酸病毒科,肠道病毒属,为单义正链RNA病毒,含有约7400个核苷酸。在过去的5年中,CVA4已成为全球手足口病的优势流行株,在全球引起了更严重、更大范围的流行性疾病。由于CVA4可致患儿心肌炎、脑膜炎甚至死亡,现已受到各国政府的广泛关注。理想的感染疾病动物模型是抗病毒药与疫苗开发的必要条件。近年来国内外相继有采用1至7日龄乳鼠建立CVA4感染疾病模型的报道,但由于7日龄以内乳鼠体型过小、器官发育不全及给药容量有限等诸多缺陷,很难适合用于抗病毒药物与疫苗疗效评价,因此迫切需要建立一种可用于抗病毒药物药效评价的大日龄CVA4感染小鼠模型。此外,目前国内外尚未有抗手足口病的特效药物,开展此类药物的研发尤为迫切。我国的临床实践表明由清热解毒类中草药组成的中药方剂在临床治疗手足口病具有一定疗效。初步机制研究显示此类药物主要通过抑制病毒复制、阻止病毒致细胞病变、调节免疫功能、改善肺循环、镇痛、抗炎等作用发挥抗手足口病疗效。因此,基于中草药的安全性与易获得性,从传统中草药（Traditional Chinese Medicine,TCM）中开发防治手足口病药物可能是一条比较便捷的途径。 目的:鉴于当前缺乏合适的CVA4药效评价模型,本论文首要目的是建立一种适合于开展抗CVA4病毒药物药效评价的大日龄小鼠模型;其次是通过体内外CVA4感染疾病模型对传统中草药鱼腥草抗CVA4的药效作用及机制进行研究,以期为后续开发广谱抗手足口病创新中药奠定基础。 方法: （一）柯萨奇病毒CVA4小鼠感染模型的建立首先采用蚀斑纯化法从临床样本中分离到一株对非洲绿猴肾细胞（Vero细胞）和人横纹肌肉瘤细胞（RD细胞）呈高致病性的CVA4临床分离株,然后通过肌肉注射在11日龄乳鼠体内和RD细胞上交替反复传代10次驯化获得对大日龄乳鼠呈高致死性的CVA4鼠适应株;然后在RD细胞上对其复制特性进行了测定;采用PCR法分段扩增CVA4鼠适应病毒株的全基因序列,经DNASTAR软件进行序列拼接,获得CVA4全基因序列并构建遗传进化树分析其基因型;在此基础上通过体内实验确定了CVA4最佳感染日龄、最佳感染剂量和最佳感染途径;CPE法测定乳鼠各个组织器官中的病毒载量;多细胞因子芯片法测定乳鼠血清中MIP-2、IL-22、IL-10、IL-18、TNF-α、IL-6、IL-13、IL-9、IL-4、IL-12p70、IFN-γ、MCP-1、MCP-3、MIP-1α、MIP-1β、RANTES、IP-10、Eotaxin和GM-CSF等19种炎症因子的水平;HE染色法分析CVA4感染乳鼠骨骼肌、肺、小肠和脑部位的组织病理学变化。 （二）鱼腥草抗CVA4药效作用及机制研究首先采用MTT法检测了鱼腥草在Vero和RD细胞中的细胞毒性;然后以CVA4分别感染Vero和RD细胞为模型,采用细胞病变抑制试验（CPE）对鱼腥草的抗CVA4活性进行评价;免疫荧光法对鱼腥草抑制CVA4复制的作用进行了评价,接着采用Western blot和q RT-PCR法分别对鱼腥草抑制CVA4蛋白表达与RNA的作用进行了分析;在此基础上采用Western blot法对鱼腥草抗CVA4感染的潜在作用机制进行了探究;最后以CVA4感染13日龄乳鼠为动物模型,以体重增长率、临床评分、生存率、生存时间、小鼠骨骼肌组织病理变化和病毒RNA水平等评价指标综合评估了鱼腥草体内抗CVA4感染的药效作用。 结果: （一）柯萨奇病毒CVA4小鼠感染模型的建立经11日龄乳鼠肌肉注射与人横纹肌肉瘤RD细胞多次交替传代所获得的鼠适应CVA4毒株能很好地在RD细胞中生长,测得其滴度可高达108.8TCID50/m L。全基因序列分析结果表明该毒株属于CVA4血清型中的C基因型。经最佳感染日龄、最佳感染剂量和最佳途径感染实验确定最佳感染条件为肌肉注射100TCID50的13日龄乳鼠模型。病毒载量测定结果表明CVA4感染不同日龄乳鼠的骨骼肌、心、肺、脑、肝、肾、脾和小肠部位均存在病毒复制,其中骨骼肌的病毒载量最高,接近10～6TCID50/50mg。CVA4感染13日龄乳鼠后第1天骨骼肌的病毒滴度为104.79TCID50/50mg;感染后第3天病毒滴度达到峰值,为106.59TCID50/50mg;感染后第5、7、9天病毒复制水平基本恒定,分别为106.14、106.92、105.87TCID50/50mg。血清细胞因子结果表明,CVA4感染乳鼠导致MIP-2、IL-22、IL-10、IL-18、TNF-α、IL-6、IL-13、IL-9、

关键词： 手足口病   肠道病毒   Joinpoint回归模型   流行趋势  

摘要： 目的 分析贵阳市手足口病流行病学和病原学趋势变化，为手足口病的科学防控提供依据。方法 通过中国疾病预防控制信息系统收集2008—2022年贵阳市报告的手足口病病例及病原学监测数据，采用Joinpoint回归模型比较不同特征人群的手足口病及其病原学的变化趋势及特点。结果 2008—2022年贵阳市累计报告手足口病124 288例，年均发病率为187.54/10万。2008—2010年手足口病年发病率呈快速上升趋势(APC=144.59%,P=0.002)。2010—2022年缓慢下降(APC=-13.07%,P<0.001)。其中，男性发病率2008—2010年呈上升趋势(APC=137.14%,P=0.003),2010—2022年呈下降趋势(APC=-13.54%,P<0.001);女性发病率2008—2010年快速上升(APC=157.49%,P=0.001),2010—2022年呈下降趋势(APC=-12.41%,P<0.001),女性相较男性呈现“上升快、下降慢”特点。同时，病原学分析结果显示EV71型呈下降趋势，Cox A16型呈“先降后升”的趋势变化，其他EVs型呈上升趋势。结论 贵阳市手足口病总体呈下降趋势，但发病率依然较高，优势病原株已由以往的EV71型转为其他EVs型，建议手足口病的免疫接种策略应适度有针对性调整，关注女性的防控措施。

关键词： 最优加权组合模型   手足口病   长短期记忆神经网络   遗传算法  

摘要： 目的: 分析2011年1月至2022年12月山西省手足口病发病率的基本特征;探讨最优加权ARIMA-GM-LSTM组合模型对于手足口病流行趋势的预测性能,旨在为山西省手足口病的预防和控制提供科学依据。 方法: 收集并整理2011年1月—2022年12月山西省手足口病发病率月度数据。基于2011年1月-2021年12月发病率数据,分别构建季节性自回归移动平均(Seasonal Autoregressive Integrated Moving Average Model,ARIMA)模型、趋势特征的灰色模型(Grey Model,GM)和非线性特征的长短期记忆神经网络(Long Short-Term Memory,LSTM)模型,其中,LSTM模型的部分参数通过麻雀搜索算法进行寻优。以上述三个模型的预测误差平方和作为目标函数,使用遗传算法搜索目标函数最小时的最优解,得到三个模型对应的最优权重系数,构建ARIMA-GM-LSTM组合模型,使用RMSE、MSE、MAE评价模型的预测性能,评价不同模型对2022年1-12月的发病率的预测性能。 结果: 山西省手足口病发病率有明显的季节性,整体上呈现下降态势,并且月发病率基本每年都存在两个高峰,主高峰集中在5-7月,次高峰为9-11月。 在使用单一模型预测时,SARIMA模型的MSE、MAE和RMSE相较于GM(1,1)模型分别降低了32.4%、17.7%和17.8%;LSTM模型的MSE、MAE和RMSE相较于SARIMA模型分别降低了12.3%、2.5%和6.3%。可以得到,在对山西省手足口病发病率进行预测时,SARIMA模型的预测效果优于GM(1,1)模型,而LSTM模型的预测效果又优于SARIMA模型。 在组合模型中,基于方差倒数法的组合模型各项误差值最大,基于优势矩阵法的组合模型MSE、MAE和RMSE相较于方差倒数法模型分别降低了31.4%、18.0%和17.2%;等权重法的预测效果与优势矩阵法相差不大;而基于遗传算法求解的最优加权组合模型的MSE、MAE和RMSE相较于等权重法分别降低了15.5%、48.0%和8.1%。基于遗传算法求解的最优加权组合模型预测效果最好。 结论: 1.山西省手足口病发病率具有明显的季节性,每年有两个相对固定的发病高峰,主高峰主要集中在5-7月,次高峰为9-11月。 ***模型对于手足口病发病率的预测性能优于GM模型,而LSTM模型的预测性能又优于ARIMA模型。 3.组合模型的预测效果优于单一模型,并可以充分利用单一模型所提供的有用信息。其中,基于遗传算法的最优加权组合模型的预测性能优于其他加权方法。本研究所采用的最优加权组合模型获得了良好的拟合和预测性能,能较好地呈现和预测山西省手足口病的发展规律,说明该模型可以对手足口病的暴发和流行提供一定的预警和预测作用。

关键词： 手足口病   空间分析   地理探测器   地理加权回归   广西  

摘要： 选取了2014年广西五岁以下手足口病住院病例作为样本数据,利用全局和局部自相关及热点分析探索广西手足口病的时空分布特征,地理探测器探测环境和社会因素对手足口病住院率单因子及交互作用的影响。通过相关性分析剔除共线性严重的影响因素,利用OLS逐步回归模型揭示气象要素(例如降水（PRE）、温度（TEM）、气压（PRS）、相对湿度（RHU）、以及风速大小（WIN）等)及空气质量指标（空气质量指数O3）,以及社会经济因素（如人均GDP与每万人口拥有的医生数量Dr）对手足口病住院率影响的最优模型。先对逐步回归的所有影响因素的回归系数分析,对OLS残差检验存在空间自相关,利用拉格朗日检验空间自相关显著,我们选择空间滞后模型分析地区之间的相互作用和影响。最后我们比较空间回归模型及地理加权回归模型,通过AIC拟合和ML（西格玛）指标,用GWR揭示手足口病住院率影响因素的空间异质性。主要结论如下: （1）从空间分布来看住院率最高的为田阳县、田东县,其中田东县手足口病住院率为2703/10000,住院率较高的县区有5个,分别是凌云县、巴马瑶族自治县、平果县、隆安县、玉州区。从时间上看有两个高峰期,第一个发病高峰出现在4-6月份,最高峰值出现在5月份,第二个高峰期出现在9-11月,最高峰出现在10月,住院数量最多的是5月份发病数为16596例。 （2）广西月平均温度南部最高,由南-北逐渐降低,气压、光照大致与温度分布一致,手足口病住院率高值地区位于这三个因素的中等和中高区间,手足口病住院率高值地区位于相对湿度中等区间83.7-84.6区间,风速位于低区间1.2-1.4m/s。广西除南部和南宁、柳州市外,其余地区的人均GDP水平不高,手足口病住院率高发地区人均GDP位于0.5-3.19万元/人之间,每万人病床数和每万人医生数均中低水平。PM2.5高值区位于中南部,整体是东部高于西部,O3高值区位于中北部,整体依然是东部高于西部,手足口病住院率高发区PM2.5和O3都处于较低水平。 （3）地理探测器探测发现双因子交互作用对手足口病住住院率的解释能力均高于单因子,主要呈现非线性增强,少数呈现双因子增强。这交互作用最强的是1月份人均GDP和地形,每万人医生数和温度,因子交互解释力都达到0.7,社会影响因素与气象、空气质量因素交互普遍增强且大多数在0.5以上,其次是气温、降水、气压与其他因子。 （4）空间滞后模型显示7个影响因素对手足口病住院率的影响具有统计学意义,1-4月、6月、12月温度、11月降水、10月气压与手足口病住院率正相关;6-7月人均GDP、6月和9月降水,2-4月及12月相对湿度,10月的风,1月、4月的臭氧,与手足口病住院率负相关。 （5）地理加权回归模型结果显示温度与广西5岁以下手足口病住院率呈正相关,影响最大的为西部,西北部地区,回归系数整体由西部向东部递减,其中8月呈现微弱负相关,负相关系数最大的为西部地区。臭氧与广西5岁以下手足口病住院率呈负相关,影响最大的是西部和北部地区,回归系数整体由西部-东部,西北部-东南方向递增。相对湿度与广西5岁以下手足口病住院率在3-6月、12月呈负相关,回归系数最小的是在西部,回归系数整体由西部-东部递增,在2月、10-11月呈正相关,回归系数最大在西部,回归系数整体由西部-东部递减。气压与广西5岁以下手足口病住院率呈负相关,负相关系数最小的是东部和南部地区,回归系数整体由东部-西部,南部-北部递增,其中10月是正相关,回归系数由西部-东部递减。

关键词： 柯萨奇病毒   生物学分析   流行特征   变异位点   VP1  

摘要： 目的 监测与检测分析2019-2023年金华市手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)流行病学和病原学特征,有助于全面掌握浙江省金华市HFMD的致病机制、流行分布、毒株种类和毒株变异情况,为全市HFMD的防治提供思路和指导。 方法 1.2019-2023年金华市手足口病的监测数据是由中国疾病预防控制中心的传染病报告信息系统提供的。收集五年内金华地区手足口病临床诊断病例标本,并对人肠道病毒(Human Enterovirus,HEV)通用型核酸试剂检测阳性的样本进行分型。 2.随机挑选2019-2023年分型后病毒载量>1×10～5拷贝/μl的阳性样本300例进行细胞传代和病毒分离培养,观察是否出现特异的细胞致病变效应,收集上清液。 3.对细胞致病变效应阳性的CVA6毒株,进行VP1序列扩增并测序,应用Prot Param、SOPMA、Swiss Mode、DNAstarv8.1.3等软件和在线网站进行预测分析,包括CVA6 VP1序列特点以及优势氨基酸变异位点毒株的理化性质、结构特征、B细胞抗原表位。 4.对细胞致病变效应阳性的CVA10毒株,进行VP1序列扩增并测序,对VP1区基因序列进行分析,构建系统进化树,并对毒株彼此间的遗传距离,核苷酸和氨基酸同源性进行计算分析。 结果 1.2019年至2023年,浙江省金华市共报告手足口病临床病例57944例。手足口病年平均发病率为193.7/10万人(范围:89.97～231.92),其中男性共34032例,女性共23912例,男性占58.73%(34032/57944),女性占41.27%(23912/57944)。五年内实验室共收集手足口病例数据2850例,其中阳性1689例,检出率59.26%,其中EVA71占1.01%(17/1689),CVA16占22.02%(372/1689),CVA6占53.17%(898/1689),CVA10占4.56%(77/1689),除这四者以外的其它肠道病毒占19.24%(325/1689)。CVA6阳性比超过同时期各型别阳性比,成为优势流行毒株。检出阳性数主要集中于4-8月,发病年龄主要以5岁以下儿童为主,占57.37%。CVA16和CVA6竞争成为HEV生态中的优势血清型。 2.对300例阳性样本进行细胞传代和病毒分离培养后,得到20株CVA6和3株CVA10毒株。 3.基因进化分析表明,20份CVA6均属于D3亚型,处于D3a分支上;与CVA6原型株Gdula(AY421764.1)相比,核苷酸同源性为82.5%～83.4%,氨基酸同源性为95.4%～95.7%;CVA6 VP1区全长915bp,编码305个氨基酸;本次研究的20株流行毒株中,存在19个氨基酸变异位点;20株流行毒株与上海、浙江、云南、北京等地分离株亲缘关系较近;CVA6流行存在多个传播链,且有毒力增强的趋势。 4.基因进化分析表明,3株CVA10均属于C亚型,处于C2分支上;与Kowalik(AY421767.1)原型株相比3株CVA10毒株VP1区已发生较大改变,核苷酸同源性为70.6%～75.9%,氨基酸同源性92.6%～95.6%;CVA10 VP1区全长894bp,编码298个氨基酸;本次研究的3株流行毒株中,存在28个氨基酸变异位点;3株CVA10毒株与北京、浙江等地分离株亲缘关系较近。 5.20株CVA6预测到3个N-糖基化位点发生改变,O-糖基化位点改变远多于N-糖基化位点。3株CVA10未预测到糖基化位点。20株CVA6与原型株对比,磷酸化位点均有增加与缺失,而3株CVA10仅有增加。 6.20株CVA6流行株以ZJ-JH-2023-20为代表的氨基酸变异位点毒株已转变成了优势氨基酸变异位点流行株;CVA6 VP1优势流行株为一具有亲水性的碱性蛋白,含有43个可能的磷酸化位点;其二级结构中以无规则卷曲居多;该分子内存在多个潜在的线性B细胞表位,其中的151～173位氨基酸残基区域的抗原指数最高。 结论 1.金华市手足口病发病率较高,检出主要以肠道病毒CVA6为主要病原,病毒检出有一定的季节性,传代细胞培养阳性率较低。 2.20株流行株CVA6 VP1基因存在多个抗原表位氨基酸变异,同时也可能存在多个CVA6传播链在金华市共循环,CVA6流行株可能正向着毒力增强的方向变异,这可能是金华市CVA6病例比例上升的一个原因。 ***10氨基酸突变现象可能是其在金华市手足口病病原谱中比例上升的重要原因。 4.我们成功地对CVA6和VP1的物理和化学特性、氨基酸的一级结构及其功能、氨基酸的二级和三级结构,以及可能存在的线性B细胞表位进行了深入的分析,这为该蛋白的后续研究以及免疫诊断试剂

关键词： 手足口病   肠道病毒71型   RNAN6-甲基腺苷   作用机制  

摘要： 在重症手足口病患者中，肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)是最主要的病原体。固有免疫信号通路失调被认为是导致重症手足口病的主要原因之一，miR-146a作为机体最重要的miRNA之一，EV71感染后表达上调，通过抑制IFN-Ⅰ的产生影响疾病的发展，但miR-146a失调的机制尚不清楚。研究表明RNAN6-甲基腺苷(N6-methyladenosine，m6A)可能在miRNA成熟的过程中起重要作用，但EV71感染后RNAm6A是否会影响miR-146a的成熟，进而促进重症手足口病的进展尚不清楚，以及如果RNAm6A调控miR-146a的成熟，那么具体的作用机制是什么。　　目的　　本研究拟探讨EV71感染后RNAm6A对miR-146a成熟的影响及与下游靶基因TRAF6/IRAK1的关系。从表观遗传学角度阐述RNA甲基化和miR-146a在重症手足口病中的作用机制。　　方法　　***71以不同感染复数(MOI)和不同时间感染RD和U87-MG细胞，WesternBlot法检测EV71VP1和miR-146a靶基因IRAK1和TRAF6的表达水平;qPCR法检测miR-146a和IFN-ⅠmRNA表达水平。　　2.使用RNAm6A位点预测软件SRAMP对pri-miR-146序列进行分析，并分析可能的m6A位点在二级结构中的位置，位于pri-miR-146侧翼上的m6A位点可能影响其剪切成熟。MAZF-qRT-PCR法检测EV71感染后pri-miR-146侧翼m6A修饰水平;qPCR法检测pri-miR-146表达水平;WesternBlot法检测RNA甲基化修饰相关蛋白酶表达水平。　　3.将4日龄的C57BL/6小鼠随机分入各研究组，在感染EV71后的0天、5天及7天，进行安乐死处理并取出其脑组织进行后续分析。WesternBlot法检测甲基化转移酶METTL3蛋白水平，qPCR法检测miR-146a、pri-miR-146和IFN-ⅠmRNA表达水平，MAZF-qRT-PCR法检测小鼠pri-miR-146m6A修饰水平。　　4.检测甲基转移酶METTL3对miR-146a成熟的影响及其在抗病毒反应中的作用:使用siRNA-METTL3对宿主细胞METTL3进行敲低;构建pcDNA3.1(+)-METTL3重组质粒过表达宿主细胞甲基转移酶METTL3。qPCR和MAZF-qRT-PCR法检测调控METTL3后pri-miR-146表达及其m6A修饰水平;qPCR和WesternBlot法检测miR-146a和其下游靶基因IRAK1、TRAF6和IFN-Ⅰ,以及EV71VP1蛋白水平。　　***免疫共沉淀法（RIP）检测甲基转移酶METTL3是否直接作用于pri-miR-146;免疫荧光法检测METTL3与pri-miRNA剪切定位辅助蛋白DGCR8在RD和U87-MG细胞内的表达与定位;蛋白免疫共沉淀法（Co-IP）法进一步检测甲基转移酶METTL3与DGCR8的互作情况。　　6.采用病例对照研究验证RNAm6A促进pri-miR-146成熟参与重症手足口病的发生:收集2018年4月至12月在河南省儿童医院接受住院治疗的手足口病病例及血细胞样品。根据《手足口病诊疗指南（2018年版）》并按照年龄性别匹配，将病例分为轻症组（n=92）和重症组（n=92）。qPCR和MAZF-qRT-PCR法检测轻重症患者pri-miR-146及其m6A修饰水平，使用R语言ggplot包按照轻重症患者的发病时间（2、3、4和≥5天）拟合动态变化曲线。EV71感染会导致外泌体分泌上调，miR-146a优先富集于外泌体中并转移至细胞外。为此，本研究在下游基因IRAK1靶序列处设计特异性引物，靶序列处若被miR-146a“占据”，则IRAK1得不到有效扩增，因此更特异地反应IRAK1在体内被miR-146a靶向情况。qPCR法检测轻重症患者IRAK1水平，并按照发病时间进行动态对比和拟合分析。根据上述实验结果绘制相关指标用于重症手足口病判断的ROC曲线，并进行诊断测试评价。　　结果　　1.随着EV71感染时间和感染复数的增加，miR-146a和VP1表达升高，下游靶基因IRAK1、TRAF6和IFN-Ⅰ受到抑制，导致病毒复制增加。　　***预测pri-miR-146侧翼上可能存在5个m6A位点，且m6A修饰水平在EV71感染后升高，pri-miR-146消耗量升高;甲基化转移酶METTL3在EV71感染后升高。　　3.小鼠在感染EV715天和7天时，miR-146a表达升高，IRAK1和TRAF6的表达则受到抑制，IFN-Ⅰ表达在感染5天时最高，但在感染病毒7天时下降;METTL3在感染7天时表达升高，且pri-miR

关键词： 手足口病   诊疗指南   指南制定   中西医结合  

摘要： 研究目的 手足口病是当前我国儿童疾病防治、提升儿童健康水平的重点疾病。目前针对手足口病,我国已分别有标准的西医和中医临床诊疗指南,但尚缺少规范的中西医结合诊疗指南。本课题通过循证医学程序研究制定《手足口病中西医结合诊疗指南》,以期为中西医结合诊疗儿童手足口病提供规范化临床诊疗参考。 研究方法 按照循证医学的临床指南制定要求,通过构建临床问题,文献检索、筛选、分析、综合,证据质量评价,德尔菲法专家调研的方法,获得推荐结果,撰写指南草案,完成本指南的制定研究。 1.构建临床问题:以“手足口病”“系统综述”“系统评价”“Meta分析”“指南”“hand foot and mouth disease”“system analysis”“Meta-analysis”“guideline”等为关键词进行检索,收集可能的临床问题和结局指标。根据结果开展专家调研,召开临床问题构建专家会,汇总专家意见,整理完成临床问题构建。 2.文献检索、筛选、分析、综合,证据质量评价:根据临床问题设计检索,检索关键词包括“手足口病”“中药”“中成药”“针灸”“外治”“中西医”“中医”“随机”“HFMD”“TCM”“Chinese patent drug”“acupuncture”“external therapy”“i ntegrated traditional Chinese and Western medicine”“RCT”等,检索数据库包括中国知网、万方数据知识服务平台、维普数据库、中国生物医学文献数据库、PubMed、the Cochrane Library、Web of Science,检索时间均为建库至2022年11月,检索结果通过文献管理软件NoteExpress3.***.0.9054进行文献管理与筛选。文献分析、综合中,对于原始研究:采用《Cochrane干预措施系统评价手册》中的偏倚风险评估工具进行评价;对于Meta分析:使用AMSTAR-2量表进行方法学质量评价;对于原始研究:运用RevMa n5.3软件进行Meta分析。最后采用GRADE工作组推出的证据分级体系对证据质量进行评价。 3.德尔菲法专家调研:本指南的推荐意见形成通过专家共识的方法达成,选择德尔菲法进行专家调研。具体步骤为对上述证据进行整合,从中提取本指南编制所需的研究内容,编制《手足口病中西医结合诊疗指南》专家调查问卷,开展德尔菲法专家组调研,汇总结果得到推荐意见清单,并最终根据推荐意见撰写指南草案。 研究结果 本指南制定成果按指南制定过程顺序经过依次为组成专家组1个,开展1次临床问题构建会,完成构建PICO及15个临床问题;根据临床问题开展文献检索共获得10938篇文献,经三轮筛选纳入268篇文献进行研究分析,获得Meta分析报告20个,并对推荐条目证据等级进行GRADE分级;根据循证结果制定专家调研问卷2份,开展2轮德尔菲法专家调研,最终汇总整理专家推荐结果,撰写形成《手足口病中西医结合诊疗指南》草案。 研究结论 本指南的制定研究严格按照循证医学的医学临床指南制定规范要求,完成融汇中医儿科、西医儿科及循证医学专家的综合意见完成指南,填补手足口病中西医结合治疗的标准化指南空缺,为日后临床一线儿科医生使用中西医结合手段诊疗手足口病提供规范指导。