关键词： 手足口病   CA16   BK病毒   系统进化树   分子流行病学  

摘要： 手足口病(Hand-foot-and-mouth disease,HFMD)是一类由多种肠道病毒(Enterovirus,EV)引起的全球性儿童急性传染病,由其引起的主要临床症状通常为发烧,并且手、足、口腔和臀部出现皮疹或疱疹。尽管HFMD是一种典型的轻症疾病,大多数感染后可自行消退,但少数重症患者可能会出现严重的神经系统并发症,例如无菌性脑膜炎、心肌炎、急性弛缓性麻痹性心肌炎、肺水肿等,在严重的情况下甚至可导致患儿死亡。 HFMD是由小RNA病毒科肠道病毒属的肠道病毒引起的。HFMD两大主要病原体为肠道病毒EV71(Enterovirus71,EV71)和柯萨奇病毒A16型(Coxsackievirus A16,CA16),手足口病病原的复杂性和交替流行是疫情持续高发的重要因素。EV71的疫苗已经商品化,但是EV71疫苗对于CA16等病原体没有交叉保护作用,因此,研究CA16的分子流行病学对HFMD的防控和疫苗研发有重要意义。 BK病毒(BK Polyomavirus,BK)是一种多瘤病毒,BK多瘤病毒,也称为人多瘤病毒1,是一种小的非包膜病毒,具有环状双链DNA基因组。BK病毒是一种DNA病毒,由72个壳粒组成直径约为40.5-44 nm的二十面体的病毒颗粒,呈立体对称型。根据VP1基因区域的序列变异,BK病毒可以分为四种基因型:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。通常认为在肾移植后不久发生潜伏病毒的再激活,BK病毒感染后大约有30%～65%的患者移植肾丧失功能,个别患者会发生出血性膀胱炎。 在本研究中,我们从两地2018年的34个HFMD临床样本中分离得到了9株CA16病毒,其中8株从广东省广州市样本分离得到,另外一株来自湖北省武汉市。广东省地处中国华南地区,而湖北省位于中国中部,长江中游,两省在边境上无接壤。我们根据VP1基因序列的差异性,利用MEGA-X软件对这9株病毒进行基因亚型和系统发育分析,结果显示这9株病毒均属于CA16病毒B1b亚型。 我们还将这9株分离株与广州市近8年流行的CA16序列构建系统进化树,发现2018年的分离株独立成簇,与其他年份的分离株不形成聚集,这反映了病毒流行在时间轴上的特点。我们又将这9株分离株与广东省2009～2014年的分离株一起构建系统进化树,进化树显示9株分离株与广东省2014年的分离株遗传距离更近,且本研究分离的8株病毒株与广东省除广州市以外的亲缘性低于其与广州市的亲缘关系,这反映了病毒流行的地域特征。随后在NCBI数据库下载国内不同地区的CA16病毒株序列,通过亲缘关系比对,发现9株分离株分别与广东、江西、深圳、云南省的某些分离株相似度极高,江西在地理位置分别与湖北、广东接壤,广东省与云南省在地理位置上位于广西省东西两侧。这提示我们我国湖北、江西、广东、云南等南部省份流行的CA16病毒株存在共同进化和循环传播。 我们还分离得到的2株BK病毒株,通过系统进化树鉴定这两株BK病毒均为Ib-1亚型,这也符合I型病毒是我国临床病例中最常见的病毒基因型的现状。该鉴定结果为进一步研究和应用该病毒奠定了基础。

关键词： 手足口病   小波分析   周期性   气候因素   组合模型  

摘要： 目的探讨手足口病流行的周期和模式,研究手足口病流行影响因素,构建基于小波分析的预测模型来预测其流行。方法从郑州市疾病预防控制中心收集2009年-2016年手足口病发病数监测数据,从郑州市气象局收集同期气候数据（主要气候变量为气温、日照、气压、湿度）。运用小波变换、交互小波分析研究手足口病的周期性（periodicity）及其与气候因素的同步性（cohenrence）。将手足口病数据分为训练集2009年-2015年和验证集2016年,使用2009年-2015年数据构建基于小波分析的SARIMA（seasonal autoregressive integrated moving average）-NNAR（neural network nonlinear autoregressive）组合模型,使用自相关函数ACF和Box-Ljung test检验残差序列。预测2016年流行,并用实际2016年数据进行验证,同时构建单一ARIMA模型、单一NNAR模型、常规SARIMA-NNAR组合模型,进行模型性能比较。指标为均方根误差（RMSE）、平均绝对误差（MAE）和平均绝对百分比误差（MAPE）。结果郑州市手足口病周发病例数、平均气温、周日照时长、平均气压、平均相对湿度均具有一年的周期,气温、日照、气压、湿度和手足口病在一年周期处有共同高能量。手足口病周发病例数、周日照时长、平均相对湿度还具有半年的周期,日照、湿度和手足口病在半年周期处有共同高能量。构建的基于小波的SARIMA-NNAR组合模型为小波分解一层,SARIMA（4,1,0）(1,1,0)52（残差序列Box-Ljung检验P值为0.1476,ACF图示残差无自相关）,NNAR（16,1,9）52（残差序列Box-Ljung检验P值为0.0546,ACF图示残差无自相关）,模型拟合良好,可以用于预测。该模型在训练集拟合的RMSE、MAE、MAPE分别为71.29、37.45和21.81,在验证集预测的RMSE、MAE、MAPE分别为296.18、227.25和61.32。与其他三种模型相比较,其在验证集上的RMSE最小。就训练集拟合的RMSE、MAE、MAPE和验证集预测的MAE、MAPE而言,单一NNAR模型指标最小,基于小波的SARIMA-NNAR组合模型次之。拟合预测图显示基于小波的SARIMA-NNAR组合模型拟合和预测的值与实际值较为接近。结论平均气温、周日照时长、平均气压、平均相对湿度均和手足口病有密切关系,小波分析可用于研究手足口病流行与气候因素的关系。基于小波的SARIMA-NNAR组合模型性能良好,适合用于手足口病病例数预测。这种模型有助于手足口病的预防和控制。

关键词： 手足口病   重复感染   流行特征  

摘要： 目的分析陕西省2008—2019年重复感染手足口病患者的流行病学特征,为手足口病科学防控提供理论依据。方法利用R 3.5.1软件调用SQL语句筛选陕西省2008—2019年手足口病重复感染病例,用描述流行病学方法分析重复感染手足口病病例的三间分布及病原特征。结果陕西省2008—2019年手足口病实际病例数为578 815例,年均发病率为127.62/10万,手足口病重复感染率为2.21%,重症重复感染率为3.91%,轻症重复感染率为2.19%。重复感染时间间隔中位数为394 d(1.08年),重症重复感染中位时间间隔为590 d(1.61年),轻症重复感染中位时间间隔为392 d(1.07年)。83.37%的病例重复感染发生在初次感染后26个月内,再次感染发病时间特征分布与首次感染相同。男性重复感染率(2.37%)高于女性(1.96%),西安市重复感染率最高(3.08%),EV71重复感染率高于Cox A16。结论 3岁及以下男童手足口病重复感染较高,西安市重复感染较高,初次感染为重症,病原为EV71更易发生重复感染。应加强EV71疫苗宣传,做好流动人口聚集区和手足口病患儿监护人的健康教育,避免发生重复感染。

关键词： 蓝芩口服液   肠外营养   小儿手足口病  

摘要： 目的:探寻在小儿手足口病的临床采取不同的治疗手段所取得的疗效及对患儿预后的影响.方法:选取我院儿科自2019年1月至2020年1月期间收治的80例手足口病患儿,按照其入院接受诊疗的先后顺序对其进行随机化的分组,组别为对照组与试验组,每组患儿的数量均为40例,同时给予不同组别患儿不同的治疗方式,对照组的40例患儿全部实施常规治疗,试验组的40例患儿给予蓝芩口服液结合肠外营养治疗,疗程结束后,对比两组患儿的临床疗效、不良反应发生情况、住院情况及血象指标的变化情况等数据.结果:两组患儿的临床疗效、不良反应发生情况、住院情况及血象指标的变化情况等数据呈现了明显的差异,综合比较来看,试验组患儿的治疗总有效率显著高于对照组(P<0.05);不良反应发生率、症状消失时间、住院时间及住院费用显著低于对照组(P<0.05)而治疗前的血免疫球蛋白(Ig G)、总蛋白(TP)、白细胞计数(WBC)未表现出显著的差异(P>0.05),治疗后各项血象指标数据的差距逐渐拉开,研究组不断趋于正常状态,均明显优于对照组(P<0.05).结论:在手足口病患儿的临床治疗过程中,采取不同的诊疗手段所取得的临床疗效显著不同,以蓝芩口服液结合肠外营养治疗作为一项最佳的诊疗方案,不仅显著地提升了广大患儿的临床疗效,还缩短了症状消失的时间、住院时间,大大改善了广大患儿的预后,其疗效确切,获得了广大临床工作者的一致认可.

关键词： 手足口病   暴发疫情   罹患率  

摘要： 目的了解南宁市手足口病暴发疫情的流行病学特征,为手足口病暴发疫情防控工作提供科学依据。方法收集整理2008—2019年间南宁市报告的手足口病暴发疫情处置资料进行分析。结果 2008—2019年南宁市累计报告手足口病暴发疫情104起,每年3—6月和9—10月是疫情高发期,城区报告疫情起数较多,占61.54%,但县区罹患率较高,为4.56%,91.35%的暴发疫情发生在托幼机构,病例以3～4岁儿童为主,占65.33%,病原体以EV71和Cox A16为主,分别占42.86%和32.47%。62.50%疫情为疾控机构通过疫情网检测发现,疫情发现时长中位数为12 d,疫情流行时长中位数为12 d,疫情罹患率中位数为4.93%。结论近3年南宁市手足口病暴发疫情报告起数有下降趋势,托幼机构一直是手足口病暴发疫情重点场所。落实托幼机构保健医生的配备,加强托幼机构尤其是民办托幼机构手足口病防控知识培训,实现早发现早处置早停课,可有效控制手足口病暴发疫情的蔓延。

关键词： 肠道病毒71型   手足口病   尸体解剖   病理   细胞凋亡  

摘要： 背景及目的:手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)的病原体为小RNA病毒科,肠道病毒属,其中以柯萨奇病毒A组16型病毒(Coxsackievirus A16,CV-A16)和肠道病毒71型(Enterovirus A71,EVA71)最为常见。HFMD是一种自限性的疾病,多数患儿可以自愈,但也有少部分患儿病情危重,甚至死亡。而转重症的患儿多为EV-A71感染。目前认为,细胞凋亡是其病情加重的重要原因之一,但目前对HFMD中凋亡现象的研究较少。该实验目的为进一步研究HFMD中各凋亡途径在不同器官中的作用。方法:我们获取了7例因EV-A71感染致重症HFMD而死亡患儿的心、肝、脑、肺、肾以及肠组织。先对各组织进行HE染色,以确定该组织的损伤情况。接下来对组织进行凋亡因子Fas,Bax,半胱天冬酶3(Caspase3),肿瘤坏死因子受体2(Tumor necrosis factor receptor 2,TNFR2)和细胞色素C(Cytochrome C)的免疫组化染色,对每张切片进行凋亡表达评分。由于Caspase 3是细胞凋亡最后的执行者,以Caspase 3的表达程度代表各个组织凋亡程度,探究重症HFMD中各器官的凋亡程度差异;以Cytochrome C代表线粒体凋亡途径,以Fas和TNFR2分别代表外源性死亡受体Fas途径以及TNF-α与TNFR2结合诱导的凋亡途径,探讨各凋亡途径在不同组织间发挥作用的差异;由于Bax使线粒体外膜透化(Mitochondrial outer membrane permeabilization,MOMP)后,Cytochrome C从线粒体中漏出至细胞质,将Bax和Cytochrome C的表达程度进行比较,探究MOMP是否主要由Bax导致。结果:HE染色提示损伤较重的组织有肺,脑,肠;而心脏,肝,肾损伤较小。免疫组化染色提示在所有6种组织中都检测到了5种凋亡因子的表达。(1)同一凋亡因子在不同组织间表达的对比:Caspase 3在肠和肾的表达程度明显强于心脏,说明肠和肾组织发生的凋亡事件比心脏多,而其余组织间的凋亡程度无明显差异;Cytochrome C在心脏中的表达强于肺,说明心脏中线粒体途径的凋亡作用强于肺组织;凋亡因子Fas在肠组织的表达强于心脏,说明在肠组织中,细胞外死亡受体Fas途径的作用强于心脏;而TNFR2在肠、肺和脑中的表达强于心脏,说明在肠,肺和脑中TNFR2途径的凋亡作用强于心脏。(2)同一组织中不同凋亡因子的对比:除脑组织中TNFR2的表达明显强于Fas之外,其余组织中TNFR2和Fas的表达程度无明显差异,说明脑组织中TNFR2途径的凋亡作用强于Fas,而其余组织中TNFR2途径和Fas途径的作用无明显差别;除肠组织中Cytochrome C的表达强度和Bax无明显差异之外,其余组织中Cytochrome C的表达强度均明显强于Bax,说明除了肠组织中MOMP主要由Bax导致,其心、肝、脑、肺和肾组织中还存在Bax之外的因子能导致MOMP,释放Cytochrome C。结论:重症HFMD中各组织的损伤程度不一。各个组织间不同凋亡途径的作用存在不一致的现象;除肠组织外,其余组织中均存在Bax之外的因子能导致MOMP。

关键词： 手足口病   肠道病毒   临床特点   分子流行特点   重组分析  

摘要： 目的:为进一步全面了解昆明市儿童医院2019年-2020年由不同病原体感染的住院手足口病临床特点存在的差异性情况,在今后的临床诊治中能够对不同病原体感染进行明确辨识,然后进行更好治疗;另外,为详细明确的了解我院的手足口病病原体的分子流行病学特点,并且对于目前报道罕见的CA5(Coxsackievirus A)病毒株全基因的情况更进一步研究,开展了对本院手足口病病原体的分子流行病研究、CA5毒株的全基因研究。通过本次研究,对于昆明地区手足口病病原体的分布及进化情况,以及对今后手足口病病毒(除EV71)的疫苗研制起到一定推动作用。方法:首先,采用系统性回顾分析对我院病历系统中1294例2019年-2020年住院手足口病患儿临床资料信息进行收集并完成整理和分析,统计方法采用SPSS.20.0进行统计及分析;其次,收集2019年-2020年155份住院手足口病患儿粪便样本,依次经过病毒核酸提取、RT-PCR、并将产物送昆明擎科基因公司进行测序,将获得的部分VP1序列在NCBI上进行比对以确定分子分型,并对检出的前三位优势病毒株在MEGA7.0上构建系统进化树,并对其进化分析。最后,通过从NCBI获得两株CA5病毒株的参考株,运用参考株设计引物进行PCR扩增获得两株昆明临床病毒株的全基因序列,将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,后送至昆明擎科测序公司测序,头尾两端送至基因公司进行基因克隆,将不同序列进行拼接、得到全基因序列,然后运用MEGA 7.0、Simplot 3.5.1进行进化及基因重组分析。结果:1.2019年-2020年中通过我院住院病历系统收集收集到共1294例住院确诊手足口病病例,其中在1～2岁年龄段手足口病发病较其他年龄段稍高,EV71、CA16(Coxsackievirus A16)、CA6(Coxsackievirus A6)、CA10(Coxsackievirus A10)、其他(除外EV71、CA16、CA10、CA6的其他病原体感染)中发病年龄主要在幼儿时期,男童发病情况多于女童,其中感染EV71后更容易引起重症及危重症手足口病,各组不同病原体之间在发热热峰、纳少、神经系统症状、循环系统受累临床特点方面具有统计学意义(P<0.05);感染不同类型肠道病毒病例在引起白细胞计数方面、CRP>10mg/L、AST>40umol/L、CK>80U/L、LDH>394.1U/L、GLU>6.1mmol/L及脑电图异常中存在统计学意义(P<0.05)。2.在2019年-2020年中共收集155份住院手足口病患儿的粪便样本,男童108例,女童47例,男女比例2.29:1,年龄主要分布在1～2岁年龄段之间,其中轻症有99例,重症有55例;经过检测后105份手足口病患儿粪便样本中检测出肠道病毒,共检出10种病原体,本次研究的155份手足口病患儿的粪便样本检测结果中无混合感染情况。其中检测中前三位优势病毒为CA6(65.7%69/105)、CA16(11.4%12/105)、CA10(10.4%11/105),其中CA6是引起手足口病的主要病原体;其中CA6、CA16、CA10分别属于D3、B1a、D2亚型。3.通过PCR扩增所后得到的两株CA5全基因序列与襄阳市2017年所分离出的CA5毒株最具有同源性;与其他类型的肠道病毒存在重组情况,如CA12重组情况主要是在5’UTR、VP2、VP3、VP1有重组情况,与CA10在5’UTR在基因结构区域存在重组,与CA4在3D、3’UTR重组存在重组可能,在2A区域与CA16存在重组情况。结论:1.本地区手足口病住院患儿主要病原谱发生变化,表现为CA6成为引起手足口病的主要病原体,其引起手足口病临床特点在未来诊疗及疫苗研制中需要引起关注;2.加强对引起儿童手足口病的CA16、CA10、CA2、CA5、CA4等其他肠道病毒的深入研究迫在眉睫;3.本次研究的两株CA5毒株与国内襄阳分离株同源性高,且存在重组情况。

关键词： 肠道病毒71型   3C蛋白酶   核衣壳   抑制剂  

摘要： 手足口病是在我国婴幼儿中,非常常见的一种传染性疾病,该病可由多种肠道病毒感染引起,如肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇A16(CoxA16)等。临床表现为手部、足部及口腔周围等有红色疱疹或溃疡,并且通常还会伴随发热、乏力等症状,部分病例可能会出现心肌炎等较严重并发症。个别情况下,还会造成极少数的重症患儿死亡。手足口病对于儿童的健康,是严重的危害与威胁。对于手足口病,由于缺乏有效的针对致病病毒的药物,临床上只能采用广谱抗病毒药物及辅助性药物进行对症治疗。开发有效、低毒、儿童耐受良好的针对性药物对手足口病的防治有重要意义。在手足口病的致病病毒中,危害最大的是肠道病毒71型,即EV71,本论文以抗EV71病毒抑制剂的开发为研究方向,采用多样化的修饰策略,分别针对EV71的3C蛋白酶和核衣壳两个靶点,开发了多种类型的新颖化合物,在经过活性筛选后,对部分优选化合物进行了稳定性、药代动力学及成药性等性质的系统评估。在3C蛋白酶抑制剂的系列中,首次成功合成了 P2-P1'连接类型的新颖大环抑制剂,并制备解析了蛋白配体共晶结构。在核衣壳抑制剂的系列中,发现了活性及成药性较优的化合物K3,并在EV71感染的小鼠模型中确认了其优良的体内药效。两个靶点的研究工作,均为后续的对应抑制剂开发提供了非常有价值的参考与借鉴。

关键词： 手足口病   重复感染   影响因素   Meta分析  

摘要： 目的探讨了手足口病重复感染的影响因素,为拟定相关防控措施提供参考。方法检索了PubMed、Web of Science、Embase、中国知网、万方医学、维普资讯数据库截止至2021年4月16日公开发表关于手足口病重复感染的中英文文献,使用Stata 11.0进行meta分析。结果通过筛选和计算,重复感染的影响因素的合并优势比（OR）及95%置信区间（CI）、异质性和统计学检验结果为:≤3岁:2.276（1.911～2.711）,I2=96.6%,P<0.001;男性:1.230 （1.202～1.259）,I2=2.2%,P=0.429;幼托儿童（对比学生及其他）:2.180（1.132～4.200）,I2=94.0%,P<0.001;散居儿童（对比学生及其他）:2.533（1.068～6.008）,I2=96.7%,P<0.001;农村:0.859（0.765～0.966）,I2=91.4%,P<0.001;幼托儿童（对比散居儿童）:0.751（0.642～0.877）,I2=92.7%,P<0.001;感染病原:Cox A16（对比其他病原）:0.528（0.400～0.697）,I2=31.3%,P=0.215。结论年龄≤3岁、男性、幼托儿童（对比学生及其他）和散居儿童（对比学生及其他）是手足口病重复感染的危险因素;幼托儿童（对比散居儿童）、Cox A16（对比其他病原）和农村是手足口病重复感染的保护因素。

关键词： 心理护理   健康教育   手足口病   心理状态  

摘要： 目的探究心理护理联合健康教育对手足口病患儿心理状态的影响。方法将2019年1月～2020年1月本院收治的94例手足口病患儿作为研究对象,随机分为对照组47例,观察组47例。对照组给予常规护理方法,观察组给予心理护理联合健康教育方法,比较两组患者儿童焦虑性情绪障碍量表(SCARED)评分、儿童抑郁障碍自评量表(DSRSC)评分、症状改善时间及护理满意度。结果观察组护理后SCARED评分、DSRSC评分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组发热缓解时间、疱疹缓解时间及溃疡缓解时间均短于对照组(P<0.05);观察组护理态度、护理操作、心理护理及健康教育评分均高于对照组(P<0.05)。结论心理护理联合健康教育可改善患儿的心理状况,缩短症状缓解时间,提高护理满意度,临床价值较高。