关键词： 手足口病   柯萨奇病毒A组6型   生物学特性   疫苗候选株  

摘要： 【目的】柯萨奇病毒A6（CVA6,Coxsackievirus A6）是引起手足口病（HFMD,Hand,foot and mouth disease）流行和爆发的主要病原体之一,已成为全球公认的威胁健康的流行病。本研究对CVA6病毒株在Vero、KMB17细胞上的适应性生长、病毒增殖、毒力及免疫原性等生物学特性进行研究分析,针对CVA6病毒株相关作用机制进行基础研究,对CVA6疫苗候选株的筛选提供评估和参考。 【方法】将来自云南省疾控中心的15个HFMD患儿的咽拭子临床研究样本进行分离,利用EV71、CVA16、CVA10和CVA6标准血清进行血清学鉴定,得到的8个CVA6阳性病毒株,再运用PCR方法进行VP1区基因片段的扩增并测序,利用MEGA6.0进行序列比对,构建进化树分析8个病毒株的亲缘性。将8个CVA6病毒株分别接种在非洲绿猴肾细胞（African green monkey kidney,Vero）和人胚肺二倍体细胞（Human embryonic lung diploid cell,KMB17）上进行病毒传代培养,绘制增殖动力学曲线,并在Vero细胞上对8个CVA6病毒株进行蚀斑形态观察。根据蚀斑效应及病变效应得到增值活性和滴度较高的J33株。经蚀斑克隆纯化三次后得到单克隆毒株在KMB17适应性传代,收获的CVA6-J33克隆株病毒收获液经100kd,20～50倍聚醚砜透过膜浓缩后,进行Opti Prep密度梯度超速离心。得到两条分离的密度梯度离心带,收集后利用透射电镜观察并分析病毒颗粒结构。 从细胞学水平筛选获得合适的CVA6候选株以外,建立动物模型同样很重要。对Babl/c新生乳鼠脑内免疫不同剂量J33克隆株进行病毒致病性实验,观察其临床症状、生存率,免疫后第3、6、9天处死小鼠,对其脑、肺进行病毒载量检测及HE染色组织病理学检查。对3～4周龄Babl/c雌鼠进行实验性甲醛灭活病毒CVA6-J33加入铝佐剂经不同剂量、不同途径免疫小鼠,于0、28天免疫,分别在初免后第7、14天,加强免疫后第7天鼠尾采血,检测小鼠血清中和抗体阳转率及血清中和效价。 【结果】15个临床样品血清学鉴别试验结果显示8份样本CVA6中和实验阳性,7份样本CVA10中和实验阳性。选取8份CVA6样本继续进行实验,根据种系进化树分析此8个CVA6病毒株均为D3亚型。将8个病毒株分别在Vero和KMB17细胞上传代,均能适应性培养。将8个病毒株在Vero和KMB17细胞上适应生长的P3代病毒分别进行增殖动力学曲线实验。结果显示,8株CVA6病毒株在Vero细胞上的感染性滴度均高于KMB17细胞,在Vero细胞各毒株于4d有明显病变,病变程度在40%～50%,在6d后病变情况趋于稳定。在KMB17细胞毒株在第5d开始有明显病变,8d后病变情况趋于稳定。J33株在Vero细胞和KMB17细胞上均显示较高的的感染型滴度,但在KMB17细胞上从36h开始进入病毒增殖期。于4d病变情况趋于稳定。各毒株的Vero细胞蚀斑形态略有不同,G4、G6的蚀斑形态呈现空斑较小,边界不清晰的形态;J30、J33、J34、J37的蚀斑形态呈现空斑边界清晰,I48、I67在Vero细胞上形成的空斑形态较小。8株CVA6病毒在KMB17细胞上连续传代培养至P15代提示仅有J33株增殖较好,其感染性滴度可达6.5CCID50/ml。由此可见,8株CVA6病毒株中,J33病毒株病变效应最快,滴度最高,蚀斑效应较好,在KMB17细胞上的增殖稳定性高。将CVA6连续蚀斑纯化三次,挑取感染性滴度最高的克隆株(6.25 CCID50/ml),选择其作为疫苗候选株,进行进一步研究。 新生乳鼠脑内感染不同剂量J33,高剂量组感染后2天陆续开始发病,于第6天全部死亡;中剂量组注射后第3天乳鼠大部分发病,呈现后肢无力活动量减少,单后肢瘫痪或双后肢瘫痪,前后肢麻痹等,于第8天全部死亡。低剂量组乳鼠发病于第5天开始,部分小鼠死亡,其余存活至实验结束,第8天后存活乳鼠临床状态逐渐转好。J33株对乳鼠的致死性更强,脑内注射量高于10～5 CCID50乳鼠100%发病死亡。经过病理检查发现,病毒对肌细胞、脑、肺具有较高毒性。以上实验结论分析得出J33是8株CVA6病毒株种最优疫苗候选株。小鼠实验性灭活疫苗免疫原性研究显示中剂量组10～5CCID50/只和高剂量组10～6CCID50/只,加强免疫后第7天小鼠抗体水平相较于初免后第28天均有明显的升;从不同免疫途径来看,皮内、肌肉、皮内途径都产生了免疫效果,但肌肉和腹腔途径免疫效果更佳,免疫小鼠后抗体效价最高均为1:512,皮内途径免疫小鼠抗体效价最高为1:64。以上结果提示,中剂量组10～5CCID50/只、高剂量组10～6CCID50/只,

关键词： 重症手足口病   肠道病毒71型   巨噬细胞极化   炎症因子  

摘要： 【目的】　　1.探讨巨噬细胞炎症性极化与重症手足口病的相关性。　　2.探讨巨噬细胞是否是EV71感染所致炎症因子风暴的主要炎症因子来源细胞，并验证IFN-γ是否能作为HFMD重症发展早期的预测因子。　　【方法】　　1.建立小鼠HFMD重症模型：分别向3、6、9日龄的小鼠中腹腔注射EV71病毒液，对照组注射同等剂量的DMEM培养基。注射病毒液或者培养基后连续观察小鼠的生存情况以及症状健康评分情况，并选取最佳日龄小鼠模型组并开展后续动物实验。　　2.动物模型中初步明确巨噬细胞与重症HFMD炎症因子风暴发生相关性　　(1)3日龄乳鼠感染EV71后，濒死的小鼠立即进行断颈处死，其它小鼠在感染14天后按同样方法处理并收集肺、骨骼肌等组织器官。使用HE染色方法观察肺及骨骼肌组织的病理变化，确认重症HFMD小鼠组织部位发生炎症损伤。　　(2)使用荧光定量PCR（qPCR）检测IFN-γ、TNF-α、IL-6、IL-1β在肺、骨骼肌组织中的表达变化，以确认重症HFMD炎症因子风暴的发生。　　(3)采用免疫组化方法（IHC）检测巨噬细胞的标记物（F4/80）在肺及骨骼肌组织中的表达情况，确认巨噬细胞与重症HFMD组织部位炎症损伤有关。　　3.体外细胞实验进一步明确EV71感染导致的巨噬细胞炎症性极化是炎症因子风暴发生的重要原因。　　(1)分离腹腔来源的巨噬细胞，使用不同剂量EV71病毒液攻毒后观察细胞形态变化，验证EV71感染与巨噬细胞极化相关性。　　(2)使用上述巨噬细胞进行体外实验。设置空白组（对照组）、EV71组、IFN-γ+EV71组，分别在不同时间段观察各细胞组形态变化。利用qPCR检测EV71感染组中不同时间段（6h、12h、24h、48h）炎症因子（IFN-γ、IL-1β、TNF-α、IL-6）的mRNA表达变化，进一步验证巨噬细胞是否为EV71感染所致重症HFMD中过量炎症因子的主要分泌细胞。　　(3)使用ELISA方法检测EV71组、IFN-γ+EV71组中不同时间段炎症因子（IL-6、TNF-α、IL-1β）的表达水平变化;并采用Spearman相关性分析验证在IFN-γ+EV71组中不同时间内炎症因子IL-6、TNF-α、IL-1β与IFN-γ的相关性，初步筛选在HFMD临床重症发生早期中有预测价值的炎症因子。　　4.进一步验证IFN-γ在重症HFMD发展早期的作用。利用ELISA检测3日龄乳鼠在接种EV71病毒后1周内每天IFN-γ血清学水平变化，明确IFN-γ是否能作为HFMD重症发展早期的预测指标。　　【结果】　　1.3日龄乳鼠接种EV71病毒后第2天，表现为嗜睡、活动量少等轻症表现，而在第3天小鼠陆续出现弓背、后肢无力或瘫痪等重症表现，后续全部死亡。EV71感染6日龄小鼠后期只有2只小鼠死亡，而9日龄感染小鼠中刚开始出现活动量减少、精神状态萎靡，随后症状恢复，最后与对照组小鼠无差别。遂选取3日龄乳鼠作为本课题中的小鼠模型对象，并且以接种EV71病毒后第3天的小鼠模型作为重症组、第2天的小鼠模型作为轻症组，正常小鼠作为对照组。　　***染色观察重症组的肺、骨骼肌组织，结果显示组织均严重损伤并伴有大量炎症细胞浸润;免疫组化检测肺及骨骼肌组织中巨噬细胞标记物（F4/80）的表达，较轻症组而言，重症组的肺及骨骼肌组织中出现明显的棕褐色颗粒物;qPCR方法检测动物模型各组中肺及骨骼肌组织中IFN-γ、IL-6、TNF-α和IL-1β的表达水平，重症组中炎症因子较轻症组及对照组明显升高（P＜0.05）。　　***71攻毒腹腔来源的巨噬细胞，结果显示随着病毒滴度增加，巨噬细胞表现为伸出伪足，并随时间变化伪足更明显。表明EV71感染时可诱导巨噬细胞炎症型极化（Ⅰ型）。　　4.细胞实验中，分别在6h、12h、24h观察到IFN-γ+EV71组及EV71组中巨噬细胞的形态，较对照组而言，均伸出伪足。随时间变化IFN-γ+EV71组中细胞伪足较EV71组更明显。qPCR检测各组中24h时间点的细胞分型标志物iNOS及Arg-1表达，结果显示IFN-γ+EV71组及EV71组两组中均以iNOS升高为主，前者较后者表达明显（P＜0.05）。进一步表明EV71感染时诱导巨噬细胞Ⅰ型极化。　　***检测在EV71组细胞中不同时间段炎症因子的mRNA表达变化，实验结果显示EV71感染导致巨噬细胞分泌大量IFN-γ、IL-6、TNF-α、IL-1β等促炎因子。进一步验证了巨噬细胞是EV71感染重症HFMD中过量炎症因子主要的分泌细胞。　　***方法检测IFN-γ+EV71组及EV71组分别在6h、12h、24h、48h中炎症因子（IL-6、TNF-α、IL-1β）的表达水平，结果显示炎症因子随时间进展，IFN-γ+EV71组中炎症

关键词： 手足口病   流行性腮腺炎   猩红热   小波分析   运气学说  

摘要： 目的: 收集整理2005-2018年广东省三种常见小儿温疫类疾病(手足口病、流行性腮腺炎、猩红热)的发病资料。基于运气学说,探讨五运六气变化对广东省手足口病、流行性腮腺炎、猩红热发病规律的影响,以期为广东省相关传染病的预防及治疗提供思路。 方法:1、整理2005-2018年广东省手足口病、流行性腮腺炎、猩红热发病资料并建立 数据库,包括年发病人数、年发病率、月发病人数、月发病率等。 2、分别对广东省手足口病、流行性腮腺炎、猩红热三种温疫类疾病进行小波分析及统计学分析。采用SPSS 22.0,Matlab2016b及Origin2018完成以上统计分析。 3、对三种温疫类疾病的发病特点进行分析,探索广东省手足口病、流行性腮腺炎、猩红热的发病规律特点,并在运气学说的指导下,分析其与五运六气的关联性。 结果: 1.广东省手足口病发病包含了时间尺度为74个月、50个月及38个月的3个周期变化规律,在74个月时间尺度的周期变化最为明显,为其第一主周期。在74个月时间尺度上,发病率的平均周期为12个月;在50个月时间尺度上平均周期为8-9个月;在38个月时间尺度上平均周期为7-8个月。从五运而言,14年间广东省手足口病最高发病年份为2014年,即甲午之年,从六气而言,广东省手足口病多发于三之气时段。 2.广东省流行性腮腺炎发病包含了时间尺度为74个月及37个月的2个周期变化规律,在74个月时间尺度的周期变化最为明显,为其第一主周期。在74个月时间尺度上,发病率的平均周期为12个月;在37个月时间尺度上,发病率的平均周期为6个月。从五运而言,14年间广东省流行性腮腺炎最高发病年份为2011年,即辛卯之年,从六气而言,广东省流行性腮腺炎多发于三之气时段。 3.广东省猩红热发病包含了时间尺度为71个月、63个月及83个月的3个周期变化规律,在71个月时间尺度的周期变化最为明显,为其第一主周期。在71个月时间尺度上,发病率的平均周期为11-12个月;在63个月时间尺度上平均周期为10-11个月;在83个月时间尺度上平均周期为13-14个月。从五运而言,14年间广东省猩红热最高发病年份为2017年,即丁酉之年,从六气而言,广东省猩红热多发于终之气时段。 结论: 广东省手足口病、流行性腮腺炎、猩红热的发病特点与五运六气存在密切的关联性。三种温疫类疾病的发病周期具有多周期及多周期相互叠加特征,且均存在与运气学说相近的周期变化规律。小波分析能够为揭示运气学说的科学性提供一定的佐证,也能为温疫类疾病的规律探寻提供新的途径。

关键词： 手足口病   气象因素   交互作用  

摘要： 目的 分析贵阳市5岁及以下儿童手足口病流行情况及气象因素间的交互作用，为预警监测及防控提供科学依据。方法 采用R4.0.2软件对2013—2021年贵阳市5岁及以下儿童手足口病流行特征进行描述性统计，利用广义相加模型分析气象因素与手足口病交互影响。结果 2013—2021年贵阳市累积报告手足口病209 783例，平均发病率76.82/10万。发病有明显的周期性和季节性，每年发病出现2个高峰，3—5月出现第一高峰，平均发病率为132.91/10万，9—10月出现次高峰，平均发病率为98.63/10万。气温差、平均气温与发病风险均呈倒“V”型，气温差峰值为9.0℃(RR=1.127,95%CI:1.101～1.713)，后呈负向相关趋势；平均气温从4.4℃开始，峰值在19.0℃左右出现(RR=1.462,95%CI:1.334～1.823)，随后逐渐降低。手足口病发病风险随着日平均风速0.78～2.70 m/s时，正相关，当日平均风速从2.70 m/s增至5.40 m/s时，进入平台期，7.10 m/s达到峰值(RR=1.883,95%CI:1.584～2.231)。平均气温在19.0℃左右，且日平均风速高(0.78～7.10 m/s)发病风险大；气温差在9.0℃同时湿度差较低时，发病风险较高，气温差低同时湿度差大时，发病风险低。结论 平均气温、日平均风速、气温差等气象因素与手足口病的发病密切相关，呈非线性且有一定的滞后性，气象因素两两存在协同交互效应，对手足口病的早期防治预警监测等应综合考虑气象因素。

关键词： 免疫球蛋白   超敏C反应蛋白   小儿手足口病  

摘要： 目的：探究免疫球蛋白和超敏C反应蛋白在小儿手足口病中的应用价值。方法：文中抽取50例小儿手足口病患儿作为此次研究对象，2020年12月～2022年10月为病例选取起始时间，将其设为观察组；选择同期进行体检的50例健康儿童作为对照组，采用免疫比浊法对观察组以及对照组免疫球蛋白和超敏C反应蛋白进行检测。结果：进行分别检测后观察组IgG、IgM、IgA、Hs-CRP水平和对照组相比，P<0.05，两组数据具有统计学意义。结论：对患儿进行免疫球蛋白和超敏C反应蛋白检测可有效鉴别小儿手足口病，为临床诊断提供依据。

关键词： 手足口病   新型冠状病毒   穿透素-3  

摘要： 研究背景及目的手足口病(Hand-foot-mouth disease,HFMD)是由多种肠道病毒感染引起的传染性疾病,肠道病毒71型(Enterovirus A71,EV-A71)、柯萨奇病毒A16型(Coxsackievirus A16,CA16)和柯萨奇病毒 A10 型(coxsackievirus A10,CA10)是主要的致病病毒。为了深入了解手足口病的致病机制,本研究利用手足口小鼠感染模型,通过转录组、蛋白质组和磷酸化蛋白质组等组学研究手段,对感染动物的肌肉组织,从基因表达、蛋白水平及磷酸化位点改变等进行不同角度分析,研究三种病毒感染导致的机体免疫反应的共同变化因素。同时,我们利用严重急性呼吸综合征冠状病毒 2(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)小鼠感染模型,通过蛋白质组学及磷酸化蛋白质组学,分析SARS-CoV-2感染后小鼠多个器官中参与新冠肺炎的关键分子。最终,我们发现参与天然免疫的蛋白PTX3(Pentraxin 3)在机体对抗病毒侵染时具有特殊作用。PTX3是一种可溶性识别分子,可识别多种外源微生物和补体成分,在细菌、真菌和病毒感染引发的天然免疫中都发挥重要作用。针对PTX3对炎症反应作用的多样性,本文重点研究其在EV-A71感染小鼠引起的肌炎和在SARS-CoV-2感染小鼠导致的严重肺炎中的重要影响。方法1)7日龄Balb/c小鼠腹腔注射100 μl 100 LD50 EV-A71病毒,于感染后第2天和第5天分离肌肉进行蛋白质组及磷酸化蛋白质组分析。2)7日龄ICR小鼠分别腹腔注射100 μl 100 LD50 EV-A71,CA16或CA10,于感染后第2天分离血液、肌肉、脾和胸腺,检测病毒载量并进行RNA-Sequencing测序分析。3)10 周龄 K18-hACE2 小鼠滴鼻感染 50 μl 1×105 TCID50 SARS-CoV-2,于感染后第5天分离大脑皮质,海马,丘脑,肺和肾脏进行蛋白质组及磷酸化蛋白质组分析。4)10日龄C57小鼠腹腔注射感染100μl 100 LD50 EV-A71病毒,6-12周龄hACE2 小鼠滴鼻感染 50 μl 1×105 TCID50 SARS-CoV-2,采用 qRT-PCR 及 ELISA 技术检测病毒感染后组织中PTX3含量变化,免疫荧光检测产生PTX3的细胞来源。5)ELISA检测PTX3与EV-A71结合能力;细胞中和实验研究PTX3对病毒感染细胞的保护作用。6)10日龄C57小鼠与PTX3-/-小鼠分别经腹腔注射感染100 μl 100 LD50 EV-A71病毒,C57治疗组每日腹腔注射200 μg/kg PTX3蛋白,PTX3-/-治疗组每日腹腔注射400 μg/kg PTX3蛋白观察记录临床表现,于感染后第3、5、7天取材血液及后肢骨骼肌,qRT-PCR检测病毒载量,通过H&E、免疫组化、流式细胞术、MPO含量检测和luminex检测炎性细胞和促炎因子表达,从而比较分析机体炎症反应。通过免疫荧光及qRT-PCR检测肌肉组织C3沉积和FH聚集,探究病毒感染过程中PTX3与补体互作调节炎症反应的作用机制。7)6-12周龄hACE2与hACE2&PTX3-/-鼠滴鼻感染50 μl 1×105 TCID50 SARS-CoV-2,观察记录体重变化,于感染后3、5和7天取材血液和肺组织,qRT-PCR检测病毒载量,H&E观察病理损伤,探究PTX3在SARS-CoV-2感染中的作用。8)10日龄C57小鼠、PTX3-/-小鼠与PSGL-1-/-小鼠分别经腹腔注射感染100 μl 100 LD50 EV-A71病毒,感染0天起每日腹腔注射P-Selectin拮抗剂(2mg/kg),观察记录小鼠临床评分,体重和生存率,于感染后第3、5、7天取材血液及后肢骨骼肌,qRT-PCR检测病毒载量,通过H&E和MPO含量检测观察炎症发生情况。探究PTX3与PSGL-1互作在病毒感染中的作用机制。结果1)利用手足口小鼠感染模型,通过蛋白质组及磷酸化蛋白质组分析小鼠感染EV-A71病毒后不同时间点的差异表达蛋白及磷酸化位点,根据模糊C均值聚类方法将差异表达蛋白及磷酸化位点以FC值划分为6个趋势,其中在持续上调的趋势中检测出162个差异表达蛋白和110个差异表达磷酸化位点,发现PTX3蛋白在病毒感染后持续上调表达。转录组分析EV-A71、CA16、CA10三种病毒共有差异表达基因,发现血液中共有554个,肌肉中共有2027个,脾脏中共有2623个,胸腺中共有1348个。而Ptx3基因在三种病毒感染后的肌肉组织中均表达上调。表明PTX3可能是手足口病病毒感染导致的共性表达上调因子。2)利用S

关键词： 气象因素   双峰特征   第二峰   病例对照研究   病例交叉研究  

摘要： 目的分析气象因素与手足口病(Hand,Foot,and Mouth Disease,HFMD)双峰流行特征之间的关联关系。方法收集甘肃省2010-2018年HFMD发病数据和同期气象数据,采用病例对照研究设计思路,构建Logistic回归模型估计气象因素与HFMD流行第二峰出现的关系。同时,使用病例交叉研究设计,构建条件Logistics模型估计气象因素与HFMD第二峰发病风险之间的关系。以双峰前累计滞后1周至8周的不同暴露窗口气象因素差异(差值与变化百分比)为暴露,以双峰报告发病率的差值为结局,构建广义线性回归模型(Generalized Linear Model,GLM)估计气象因素与HFMD流行第二峰高于第一峰的关联关系。通过构建GLM模型,以HFMD流行双峰间的气象因素为暴露,以HFMD流行双峰间隔时长为结局,估计气象因素与双峰间隔的关联关系。研究同时使用限制性立方样条(Restricted Cubic Splines,RCS)估计暴露与结局的暴露反应关系。结果1.暴露窗口分别为1周和1-7周时,相对湿度和风速对HFMD季节性流行第二峰出现的影响最大,即相对湿度和风速分别每增加1%和1m/s,第二峰出现的风险分别增加4%(95%置信区间:1%-7%)和193%(22%-730%)。2.暴露窗口为1-3周时,温度对HFMD第二峰发病风险的影响最大,即温度每增加1°C,第二峰发病的风险增加53%(11%-110%)。3.暴露窗口为1-8周时,平均温度、相对湿度、降雨量及风速分别每变化1°C、1%、1mm及1m/s,HFMD第二峰发病率比第一峰分别增加12%、3%、1%及35%。4.双峰间平均温度、相对湿度、降雨量及风速分别每增加1°C、1%、1mm及1m/s时,HFMD双峰间隔分别减少80%、增加10%、减少49%及减少87%。结论相对湿度和风速对HFMD第二峰出现产生影响,温度则对第二峰发病产生影响。温度和风速变化对HFMD第一峰和第二峰发病率差存在影响,HFMD双峰间隔也受到双峰间平均温度、相对湿度和降雨量的影响。

关键词： 大理州   手足口病   肠道病毒   时空聚集性分析   分布滞后非线性模型分析  

摘要： 目的掌握大理州手足口病(hand foot and mouth disease,HFMD)的流行病学特征、聚集风险、演变趋势以及气象影响因素,并将聚集区域、风险格局可视化展示,为HFMD的流行风险研判、预警和防控提供科学依据。方法2009—2021年HFMD的发病资料来源于《传染病报告信息系统》;2013—2021年HFMD的病原学监测资料来源于大理州疾病预防控制中心(简称:大理州疾控中心)检验科的病毒核酸结果;2009—2021年社会人口学资料来源于大理州人口统计局;云南省矢量地图来源于国家基础地理信息系统;2009—2021年大理市气象因素数据来源于https://***/网站。收集、整理和清洗资料和数据后,采用描述性分析、Joinpoint回归模型分析、时空聚集性分析和分布滞后非线性模型分析等方法进行数据分析。结果2009—2021年大理州累计报告HFMD病例58598例,年均报告发病率为125.11/10万,发病年龄集中在5岁以下人群,性别比为1.33:1,主要为双季流行,夏季高发,发病率排名前三为永平县、宾川县和大理市;2013—2021年大理州累计检测HFMD样本4 634份,阳性率为60.27%,不同年份间HFMD的病原体阳性率的差异具有统计学意义(χ2=686.54,P<0.001),非线性Joinpoint回归模型分析显示其它EVs型逐渐成为优势病原型,阳性检出数排名前三的地区为洱源县、宾川县和鹤庆县;发病率在全局空间上成随机分布,在局部空间上呈显著的聚集性分布,大理州HFMD在时间和空间上均存在明显聚集性,每年的主集群有所不同,聚集时间主要集中在1/4-31/7和1/9-31/12,有中部逐渐向西、向南转移的趋势;大理市HFMD日发病数与气象因素为日平均气温、日平均相对湿度、日最低气温和日最高气温呈正相关,与日平均气压和日平均风速呈负相关,气温在HFMD发病中起着重要作用,具有延迟性和非线性效应。结论云南省大理州HFMD的主要分布在5岁以下人群,男孩多于女孩,夏季高发,以其它EVs为优势病原株,多种病原体循环传播,HFMD在时间和空间上均存在明显聚集性,日平均气温对HFMD的发病具有非线性和延迟性。

关键词： 手足口病   空气污染物   气象因子   时间序列分析   分布滞后非线性模型   自回归移动平均模型  

摘要： 目的:了解合肥市2014—2020年手足口病的三间分布特征及其与气象因子、空气污染物的相关性,评估空气污染物在手足口病中的作用并量化该效应在浓度维度、滞后维度的估计值,拟合最佳预测模型,以期减轻易感人群和卫生系统的疾病负担,达到科学防制手足口病的效果。方法:本研究以合肥市2014—2020年每日手足口病报告发病数数据为基础,结合同期气象因子和空气污染物数据建立时间序列,使用分布滞后非线性模型对气象因子的效应进行修正,探讨空气污染物与手足口病的关联效应,并将空气污染物的效应结合到预测模型的构建上,以赤池信息准则（Akaike information criterion,AIC）为标准确定最佳自回归移动平均（autoregressive integrated moving average,ARIMA）模型。结果:（1）合肥市2014—2020年共报告手足口病116 888例,日均45.71例,年平均发病率为205.19/10万。男性发病率高于女性（242.98/10万v.s.165.99/10万）,5岁以下儿童病例共计103 867例,占88.86%,手足口病发病率逐渐降低。散居儿童较多,占68.70%,幼托儿童占26.92%。（2）二氧化硫（sulfur dioxide,SO2）在10～16μg/m3时对手足口病存在危险效应,RR最大为1.022 4（12μg/m3）,增加10μg/m3,手足口病日发病数可增加3.70%。二氧化氮（nitrogen dioxide,NO2）对手足口病的总效应呈“M”型,浓度高于5μg/m3时均存在危险性,最大RR=1.304 1（53μg/m3）,增加10μg/m3当日可增加5.45%的手足口病发病数。臭氧（ozone,O3）对手足口病的危险性体现在O3小于68μg/m3和76μg/m3～130μg/m3时,总效应最大为1.425 4（26μg/m3）,极低O3浓度（33μg/m3）对手足口病的效应表现为危险（RR=1.040 7）,而在高浓度O3下对手足口病的危险性消失。细颗粒物(fine particulate matter,PM2.5)对手足口病的总效应在低于12μg/m3时呈危险性,随着浓度的增加危险度总体呈下降趋势,最大RR=1.427 7（0μg/m3）。（3）男性在SO2、NO2浓度增加10μg/m3时对手足口病发生的敏感性均较女性高,而O3浓度增加时,女性在滞后维度上均有RR值高于男性。相比≥5岁组,<5岁儿童对SO2增加浓度、NO2增减浓度更敏感。幼托儿童关于降低SO2浓度、增减O3或PM2.5浓度对发生手足口病的风险敏感度高于散居儿童,相反降低10μg/m3 NO2浓度对散居儿童的效应大于幼托儿童。在冷季时降低NO2、O3、PM2.5浓度呈现出短效的危险性。（4）本研究共拟合了96个模型,其中ARIMA（1,0,1）(2,1,0)[52]结合同期O3浓度数据后的模型AIC最小,为2 503.29,均方根误差=77.05,平均绝对误差=51.09,平均绝对百分比误差=23.87。结论:（1）通过对研究结果的总结和讨论,发现合肥市空气污染物SO2、NO2、O3、PM2.5对手足口病发病存在影响,男性对SO2、NO2浓度增加敏感,女性对O3浓度增加敏感,<5岁儿童、幼托儿童相对来说对空气污染物浓度变化更敏感,冷季效应更强,提示在手足口病防制工作中不可忽视环境污染的效应,建议易感人群尤其是敏感性更强的人群及其监护人在相关空气污染物污染和寒冷季节时注意防护与隔离。（2）本研究拟合的预测模型有助于卫生部门科学精准防控手足口病,值得应用和推广。在借助模型开展的手足口病预测预防工作中,结合一些同期空气污染物数据可以更好地帮助预测。