关键词:
miR-Let-7b
LOX-1
子宫内膜
纤维化
宫腔粘连
摘要:
目的:检测miR-Let-7b及LOX-1在纤维化子宫内膜中的表达,分析miR-Let-7b靶向LOX-1在减轻子宫内膜纤维化中的作用。方法:分别构建人子宫内膜间质细胞株(hESCs)纤维化模型(TGF-β1-hESCs)及小鼠宫腔粘连模型,qRT-PCR法检测miR-Let-7b及LOX-1表达。慢病毒转染法将TGF-β1-hESCs细胞分为NC组、miR-con组、miR-Let-7bmimic组、miR-Let-7b+pcDNA组和miR-Let-7b+pcDNA-LOX-1组,CCK-8法、EdU法及细胞划痕试验检测各组细胞增殖、迁移能力。将小鼠随机分为假手术组、模型组和治疗组(宫腔注射miR-Let-7bmimic),HE染色观察子宫内膜病理变化,Masson染色法观察子宫内膜纤维化面积,Westernbloting检测各组细胞及子宫内膜组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)及纤维连接蛋白(fibronectin,FN)表达。双荧光素酶报告基因法验证miR-Let-7b和LOX-1间的靶向关系。结果:TGF-β1-hESCs细胞及宫腔粘连小鼠子宫内膜组织中miR-Let-7b均呈低表达,而LOX-1呈高表达,差异显著(P<0.001)。miR-Let-7bmimic组细胞活力、EdU阳性率、细胞迁移率均低于NC组及miR-con组,差异具有统计学意义(P<0.05)。miR-Let-7b+pcDNA-LOX-1组细胞活力、EdU阳性率、细胞迁移率均高于miR-Let-7b+pcDNA组,细胞内α-SMA、E-cadherin、FN蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-Let-7b与WT-LOX-1共转染后,miR-Let-7bmimic组细胞荧光素酶活性明显低于miR-con组,差异显著(P<0.001)。与模型组相比,治疗组小鼠子宫内膜腺体数量增多,纤维化面积减少,α-SMA、E-cadherin、FN蛋白表达降低,差异明显(P<0.05)。结论:miR-Let-7b在纤维化子宫内膜中低表达,而LOX-1呈高表达,miR-Let-7b可靶向LOX-1减轻子宫内膜纤维化,机制可能与抑制上皮间充质转化有关。