关键词： 宫腔粘连   子宫球囊支架   人工周期   粘连复发  

摘要： 目的: 探讨子宫球囊支架联合人工周期预防宫腔粘连复发的效果,为临床实践提供理论上的参考。 方法: 以231例有中重度宫腔粘连患者作为研究对象,根据治疗方法的差异性进行组别划分,即:1、联合治疗组:采用子宫球囊支架联合人工周期。2、人工周期组:单纯采用人工周期。术后1年内定期随访,明确中重度宫腔粘连术后的治疗及预防的最佳方案。 结果: 采用不同的方法干预一段时间后,对收集的数据进行统计得出,联合治疗组均未发生中、重度的宫腔粘连;人工周期组中共有14例中度粘连,无重度粘连患者,两组数据差异显著(P<0.05);联合治疗组有56例完全改善,人工周期组有29例未改善,统计分析后两组在月经量改善方面差异显著(P<0.05);联合治疗组的子宫内膜改善112例,人工周期组改善88例。组间横向对比可知,两组在子宫内膜改善方面差异显著(P<0.05);联合治疗组有20例血白细胞升高,未见发热,人工周期组1例白细胞升高,1例治疗后发热,未出现严重的术后感染;联合治疗组自然受孕43例,IVF 13例,未受孕64例,人工周期组的自然受孕27例,IVF 6例,未受孕76例,差异显著(P<0.05)。 结论: 联合疗法预防宫腔粘连复发效果更为理想,相较于单一治疗,其可较大程度的改善患者月经、子宫内膜情况,患者满意度、依从度更高;宫腔粘连的复发率更低,生活质量得以提升,因此值得在临床实践中推广。

关键词： 宫腔粘连   宫腔镜下宫腔粘连分离术   预防   术后复发   宫型节育器   避孕套  

摘要： 目的:比较中、重度宫腔粘连(IUA)患者经宫腔镜下宫腔粘连分离术(TCRA)后分别使用自制的避孕套包裹宫型节育器及Foley导尿管球囊预防粘连复发的临床资料,分析避孕套包裹宫型节育器预防术后宫腔粘连复发的临床疗效,并探讨其预防宫腔粘连复发的临床价值。 方法:根据纳入及排除标准,选取2022.07-2023.07期间就诊于遵义医科大学附属医院妇科,经宫腔镜检查确诊为中、重度宫腔粘连,且需住院行TCRA的92例患者。对所有患者按照本人意愿选择术后预防粘连复发的措施分为A、B两组,A组患者(n=43)术毕宫腔放置避孕套包裹宫型节育器,3个月后取出;B组患者(n=49)术毕宫腔放置Foley导尿管球囊,7天后取出。两组患者术后均给予3个疗程的雌孕激素序贯治疗。所有患者均于术后3个月再次行B超检查及宫腔镜检查并记录患者的月经改善情况及宫腔再粘连情况。通过分析两组患者临床资料,比较两组患者治疗前与治疗后3个月的月经恢复情况、宫腔形态恢复情况、子宫内膜厚度的变化情况、AFS评分的变化情况、肝肾功能和血脂的变化情况以及术后有无并发症的发生。 结果:1.两组患者在年龄、术前宫腔粘连程度及月经症状等方面进行比较,差异不存在统计学意义(P>0.05)。2.A组患者经治疗后15例月经基本恢复正常,23例月经改善,5例无改善,有效率为88.4%;B组患者中,经治疗后有4例月经基本恢复正常,22例月经改善,23例无改善,有效率为53.1%;A组月经改善的有效率明显优于B组(P<0.001)。3.术后3个月A、B两组子宫内膜厚度较术前均增厚(P<0.001),相较于B组而言,A组术后3个月的子宫内膜厚度明显增厚(P<0.001)。4.A组患者中,宫腔形态基本恢复正常33例,致密粘连10例,宫腔粘连复发率为23.3%;而B组患者中,宫腔形态恢复正常8例,膜状+致密粘连28例,致密粘连13例,宫腔粘连复发率为83.7%;A组患者宫腔粘连的复发率明显低于B组(P<0.001)。5.术后3个月A、B两组AFS评分均较术前均降低(P<0.001);相较于B组而言,A组术后AFS评分降低更为明显(P<0.001)。6.A、B两组术前、后肝功能及血脂比较差异不存在统计学意义(P>0.05),且均未出现手术并发症。 结论:对于中、重度宫腔粘连患者行TCRA术后放置避孕套包裹宫型节育器并结合雌孕激素治疗,能够促进宫腔形态的恢复及优化子宫内膜的状况,有效地降低宫腔粘连的复发率,从而改善患者的月经症状。

关键词： 宫腔粘连   水凝胶   脐带间充质干细胞   子宫内膜上皮类器官   子宫内膜上皮干细胞  

摘要： 背景:宫腔粘连(intrauterine adhesion,IUA)通常表示女性的宫腔内形成纤维样粘连。目前,应用干细胞治疗IUA,已成为了重建重度IUA患者生殖功能的希望。但是,宫腔直接注射的方式会给临床手术操作带来一定困难,尤其难以保证干细胞的存活率。因此,亟需出现新的方式改善注射治疗方式。此外,目前领域内对于IUA患者子宫内膜上皮细胞群表型特征变化的研究并不全面,对干细胞促进子宫内膜上皮的再生机制研究也不深入。 方法:1.通过质谱鉴定子宫内膜细胞外基质蛋白并以此为参考设计黏附模拟水凝胶。随后,通过CCK-8、Transwell、活细胞实时拍摄来评估水凝胶对脐带间充质干细胞(UCMSCs)的生物相容性。2.建立IUA大鼠模型并注射脐带间充质干细胞-黏附模拟水凝胶。随后,通过子宫形态学、病理染色、免疫染色、酶联免疫吸附实验、Luminex液相悬浮芯片等评估子宫内膜的恢复情况。3.建立子宫内膜上皮类器官模型(EEOs)及其上皮-间质转化模型(EEOs＿EMT),并结合免疫荧光染色、细胞流式分选、单细胞测序分析,来评估脐带间充质干细胞对上皮-间质转化及上皮再生的作用。 结果:1.基于“子宫内膜细胞外基质环境”的黏附模拟水凝胶可以为UC-MSCs提供良好的生长环境,也为改善现有原位注射方式提供了新的思路。2.脐带间充质干细胞-黏附模拟水凝胶可有效治疗宫腔粘连。***-MSCs可逆转上皮-间质转化过程。***可分泌WNT7A,激活具有干性特征的子宫内膜上皮细胞,进而促进子宫内膜上皮再生。5.上皮-间质转化表型的子宫内膜上皮细胞可分泌TGFA,进而上调UC-MSCs的E-cadherin蛋白。 结论:在本研究论文中,首先设计了一种用于UC-MSCs封装并原位注射的黏附模拟水凝胶。其次证实了UC-MSCs搭载黏附模拟水凝胶后可以有效治疗IUA。本研究还建立了EEOs模型及EEOs＿EMT模型。随后,本研究证实子宫内膜上皮细胞在TGF-β1的影响下发生EMT过程,并分析了UC-MSCs介导的MET过程。此外,本研究还证实了具有干性特征的子宫内膜上皮细胞发挥了再生过程的关键作用,并确定了参与其中的,由UC-MSCs分泌的信号因子WNT7A蛋白。最后,本研究还发现UC-MSCs可受到上皮-间质转化表型上皮细胞的影响,在TGFA的作用下上调E-cadherin蛋白。

关键词： 子宫内膜纤维化   转化生长因子β1   上皮间充质转化   宫腔粘连  

摘要： 目的:探讨宫腔粘连(IUA)子宫内膜基质细胞纤维化的分子机制,明确人脐带间充质干细胞来源的上清液(Human Umbilical cord mesenchymal stem cell supernatant,hUCMSCs-Sup)、人脐带间充质干细胞来源的外泌体(Human Umbilical cord mesenchymal stem cell exosomes,hUCMSCs-EXO)和Wnt/β-catenin通路抑制剂MSAB对人子宫内膜基质细胞(HESCs)纤维化的影响,并阐明其可能的作用机制。 方法:1.通过体外培养获得正常子宫和宫腔粘连(intrauterine adhesion,IUA)子宫的人子宫内膜基质细胞(human endometrial stromal cells,HESCs)。利用这两种细胞进行实验分组:来源于宫腔粘连的HESCs为IUA组;来源于正常子宫的HESCs根据不同的处理分为对照组(正常HESCs)、TGF-β1组、Sup组、EXO组和MSAB组。 ***实验检测各组细胞增殖率。 3.迁移实验检测各组细胞迁移率。 ***-qPCR实验检测各组细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关转录因子(Snail、Slug、Smuc、ZEB1和ZEB2)和COL1A1 mRNA表达水平。 *** blotting(WB)实验检测各组细胞纤维化标志蛋白:胶原蛋白1A1(collagen Type I alpha 1,COL1A1)和α-平滑肌肌动蛋白(Alpha-smooth muscle actin,α-SMA)、间质标志蛋白如N-钙黏蛋白(N-Cadherin)以及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白包括β-连环蛋白(β-catenin)和c-myc表达水平。 结果:1.与对照组比较,IUA组HESCs COL1A1和β-catenin表达水平显著升高(P<0.01);N-Cadherin和α-SMA表达水平明显升高(P<0.05)。 2.加入不同浓度的TGF-β1后,随着TGF-β1浓度的增加对HESCs的增殖活性无影响(P>0.05)。加入10ng/ml TGF-β1后,随着TGF-β1作用时间的延长COL1A1表达水平逐渐升高(P<0.01)。 3.各组细胞处理24h和48h后,IUA组和TGF-β1组分别与对照组(正常HESCs)相比,两组的细胞迁移率均更高(P<0.01);对照组、IUA组以及TGF-β1组细胞增殖活性差异均无统计学意义(P>0.05)。 4.加入hUCMSCs-Sup后,与TGF-β1组比较,Sup组中人子宫内膜基质细胞迁移率差异无统计学意义(P>0.05)、纤维化标志蛋白(COL1A1和α-SMA)和间质标志蛋白N-Cadherin表达量明显降低(P<0.05)。 5.加入hUCMSCs-EXO后,与TGF-β1组比较,EXO组中人子宫内膜基质细胞迁移率差异无统计学意义(P>0.05)、纤维化标志蛋白COL1A1、α-SMA表达量降低(P<0.01;P<0.05),间质标志蛋白N-Cadherin表达量也降低(P<0.05);同时,EXO组Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白β-catenin表达量明显降低(P<0.05)。 6.加入MSAB后,与对照组比较,TGF-β1组中TGF-β1上调的子宫内膜基质细胞迁移率、EMT相关转录因子Snail、Slug和COL1A1 mRNA表达水平降低(P<0.05;P<0.01)。此外,与TGF-β1组比较,MSAB组COL1A1、β-catenin和c-myc蛋白表达水平显著降低(P<0.01);N-Cadherin表达水平明显降低(P<0.05)。 结论:1.在子宫内膜纤维化进程中,Wnt/β-catenin信号通路被激活,其主要作用为促进子宫内膜纤维化进程,但不影响HESCs增殖。 ***来源的HESCs比正常HESCs迁移能能力更强;并且TGF-β1可以增强正常HESCs的迁移能力。药物MSAB(一种Wnt依赖性细胞的有效选择性抑制剂)可以减弱TGF-β1诱导正常HESCs的迁移能力。 ***-Sup和hUCMSCs-EXO主要作用于HESCs的EMT进程,进而减少COL1A1的沉积,也可以作用于Wnt/β-catenin通路进而影响HESCs纤维化进程。 ***通过抑制Wnt/β-catenin通路,阻断纤维化的潜在靶点,进而阻止子宫内膜基质细胞的EMT进程,减少COL1A1的表达,最终减少ECM在受损的器官或组织中沉积。

关键词： 宫腔粘连   脐带间充质干细胞   疗效评估  

摘要： 宫腔粘连（Intrauterineadhesion，IUA）是指由于机械创伤、感染等因素导致子宫内膜基底层损伤引起的并发症。粘连组织可使子宫宫腔、宫颈管部分或完全闭塞，从而导致宫腔变形甚至消失。临床上可引起月经量减少、闭经、腹痛、不孕、复发性流产等一系列症状。由于人工流产数量逐年上升，宫腔粘连（IUA）发病率居高不下，严重影响育龄期女性生殖需求和身心健康。目前，IUA主要治疗方法为宫腔镜宫腔粘连分离术，术后复发率极高，但目前尚缺乏有效治疗手段。　　随着干细胞治疗迅速发展，MSC因其有来源广、易获得、免疫原性低等优点，在治疗免疫、肌肉骨骼、神经和心血管等疾病中具有巨大应用前景。但MSC的异质性极大地降低了其在应用基础研究和临床研究中的可重复性和稳定性。有研究表明，通过对MSC亚群进行纯化，获得生物性能更加稳定的同质MSC亚群有望解决这一困境。我们前期研究表明：CD317+MSCs亚群是分化潜能和免疫抑制能力更强的MSC亚群。研究证明，持续性炎症是IUA患者子宫内膜纤维化的主要原因，炎性因子通过组织细胞与免疫细胞间的相互作用，使子宫内膜功能紊乱，从而促进纤维化和粘连的形成，参与IUA的病理生理过程。因此，本研究拟评估CD317highMSC亚群对IUA小鼠模型的治疗效果，主要包括：构建稳定的IUA小鼠模型，通过体外和体内实验优化IUA小鼠治疗策略;选用流式细胞分选技术对CD317high和CD317lowMSCs亚群进行纯化;利用优化的MSC宫腔灌注治疗体系对IUA小鼠进行治疗，并从组织形态、纤维沉积程度、腺体数量、内膜和肌层厚度、子宫内膜功能等方面，评估CD317highMSCs亚群对IUA小鼠模型治疗效果。　　研究结果显示，IUA小鼠模型除宫腔粘连、纤维沉积、腺体减少、内膜变薄等外，肌层Ki67阳性细胞增加可能是肌层异常增厚的原因;腺体和肌层ALDH1A1表达显著降低可能预示了腺体及临腔上皮重构受损;内膜HOXA10表达降低代表子宫内膜容受性降低。不同基质材料组合的体外和体内实验结果表明，使用50%血小板裂解物（PL）+50%透明质酸钠凝胶（HA）重悬细胞可以使MSC治疗效果更稳定。通过对CD317high和CD317lowUC-MSCs（脐带间充质干细胞）亚群对IUA小鼠模型治疗效果比较，结果显示：CD317high和CD317lowMSCs亚群对IUA小鼠模型治疗在子宫外观和形态学差异方面不明显。CD317highMSCs亚群抗子宫内膜纤维化稍优于CD317lowMSCs亚群;CD317highMSCs亚群治疗的IUA小鼠腺体数量比CD317lowMSCs亚群治疗组多，且接近健康对照水平。CD317highMSCs治疗组子宫内膜ER表达量相较于CD317lowMSCs治疗组增强;CD317high和CD317lowMSCs亚群治疗后，腺体和临腔上皮ALDH1A1和HOXA10表达量与IUA组相比有所增加，但两组之间无明显差异。这些结果说明CD317high和CD317lowMSCs亚群均可改善腺体、临腔上皮重构，增加子宫内膜容受性。　　因此，我们的研究表明：IUA小鼠模型存在宫腔粘连、纤维沉积、腺体减少、内膜变薄、肌层异常增厚、腺体和临腔上皮重构异常和子宫内膜容受性降低等特征。使用50%PL+50%HA重悬细胞可以使MSC治疗效果更稳定。CD317high比CD317lowUC-MSCs亚群抗纤维化能力更强，CD317highMSCs亚群治疗的IUA小鼠腺体数量可以恢复接近健康对照水平。CD317high和CD317lowMSCs亚群在改善腺体及临腔上皮重构，增加子宫内膜容受性无显著差异。