关键词： 腹腔镜   宫腔粘连切除术   宫腔粘连  

摘要： 目的探讨宫腹腔镜联合治疗中重度宫腔粘连临床疗效。 方法选择2012年1月～2013年10月于我院就诊、有生育要求经宫腔镜检查确诊为中重度宫腔粘连62例,其中中度23例,重度39例。所有患者均在腹腔镜下行宫腔镜手术。膨宫后针状电极划开宫颈及宫腔粘连并打开宫腔,环状电极切取粘连组织,术毕宫腔内注入透明质酸钠后宫腔置Foley导尿管注水球囊压迫,联合雌孕激素人工周期治疗3月,合并盆腔病变者同时行腹腔镜手术治疗,分别于术后1个月,3个月及6个月复查随访其月经恢复情况及宫腔形态恢复情况,对宫腔粘连复发者行二次粘连分离术。随访其月经及妊娠情况。 结果62例术中同时合并盆腔病变者22例(35.48%),其中盆腔粘连8例(12.90%),输卵管积水系膜囊肿5例(8.06%),盆腔子宫内膜异位4例(6.45%),卵巢囊肿2例(3.23%),多囊卵巢3例(4.84%),分别给予相应处理。62例手术前后子宫内膜厚度变化比较差异有统计学意义(F=34.73,P<0.05)。62例手术前后经期天数及月经量变化比较差异有统计学意义(F=38.92,46.53,均P<0.05)。术后1、3、6个月随访,23例中度粘连患者宫腔形态恢复正常；39例重度粘连者中34例宫腔形态恢复正常,3例转为轻度粘连,2例转为中度粘连,给予再次手术。术后宫腔再粘连发生率为8.06%(5/62)。发生并发症1例,已治愈。目前已有8人获得正常妊娠。 结论宫腹腔镜联合治疗中重度粘连可明显改善子宫内膜厚度,促使宫腔恢复正常形态,同时对盆腔病变予以相应处理,对于改善月经、提高正常妊娠率有较大的临床价值。

关键词： 宫腔粘连   几丁糖   预防  

摘要： 目的：宫腔粘连(intrauterine adhesion，IUA)又称asherman综合征，是子宫内膜受损后修复过程中形成瘢痕组织，引起宫腔壁相互粘连，破坏宫腔的正常结构，从而引发月经过少、闭经、痛经、不孕或反复流产等严重后果，严重影响患者的生活质量。多由宫腔手术操作、盆腔感染等因素所导致。随着宫腔镜技术的不断发展，宫腔镜手术治疗宫腔粘连已得到广泛认可及应用。其具有更直观、微创、恢复快、并发症少的优点，对治疗宫腔粘连临床疗效显著。但中、重度宫腔粘连术后复发率高，临床治愈率及远期预后都不理想。本研究意以传统治疗方法做对照，通过分析术后宫腔粘连复发率、月经恢复有效率、妊娠率三个方面研究综合治疗方法对预防术后宫腔粘连的疗效。 方法：对邢台市人民医院妇产科2012年9月一2013年10月58例中、重度宫腔粘连患者的临床资料进行回顾性分析。将2012年9月—2013年3月宫腔粘连患者分为A组，将2013年4月—2013年10月宫腔粘连患者分为B两组，每组29例。两组患者的平均年龄、粘连程度的构成比等一般情况对比无显著性差异（p>0.05），具有可比性。术后防粘连的方法分别为放置宫内节育器+戊酸雌二醇、黄体酮人工周期组(A组)和采用宫腔内放置气囊导尿管1周+注入防黏连剂几丁糖+放置宫内节育环+戊酸雌二醇、黄体酮人工周期组(B组)。有生育要求的患者可于术后3个月取环。两组患者术后均进行严密随访，分别于术后l、3、9个月返院复查，记录其月经恢复及妊娠情况，同时进行宫腔镜检查宫腔粘连复发情况。本研究数据使用x2检验，P<0．05可认为对比效果满意，有统计学意义。 结果：①术后1个月复查结果为：A组宫腔粘连复发率51.7%，月经恢复有效率55.2％；B组宫腔粘连复发率31.0%，月经恢复有效率75.9％，B组宫腔粘连复发率低于A组(P<0．05)，月经恢复有效率高于A组(P<0．05)，两组比较差异均有统计学意义； ②术后3个月复查结果为：A组复发率可达34.5%，月经恢复可达65.5％；B组复发率可达17.2%，月经恢复可达82.8％，B组复发率低于A组(P<0．05)，月经恢复有效率高于A组(P<0．05)，两组比较差异均有统计学意义； ③术后9个月复查结果为A组复发率可达24.1%，月经恢复可达75.9％，妊娠率可达29.4％；B组复发率可达10.3%，月经恢复可达89.7％，妊娠率可达55.6％，B组复发率低于A组(P<0．05)，月经恢复有效率、妊娠率均高于A组(P<0．05)，两组比较差异均有统计学意义。 结论：本研究中采用术后于宫腔内放置气囊导尿管1周作为扩张支架，辅以几丁糖防黏连，1周后放置宫内节育器，配合雌、孕激素人工周期的综合治疗方法预防术后宫腔再粘连，其术后宫腔再粘连率明显低于对照组，月经恢复及生殖预后均高于对照组，临床治疗效果满意，值得临床推广。

关键词： 宫腔粘连   TGF-β1   β-catenin   雌激素   生长激素  

摘要： 目.的：研究宫腔粘连患者子宫内膜TGF-β1、β-catenin的表达以及雌激素与生长激素治疗的比较。 方法：选取2013年3月-2013年10月因不孕症于中南大学湘雅二医院门诊宫腔镜室行宫腔镜检患者显示子宫内膜正常者作为对照组共30例(A组)。选取宫腔镜检诊断为轻-中度宫腔粘连的患者30例作为研究组(B组),随后将B组随机分为2组,即B1组和B2组,其中B1组中15例术后予雌激素治疗(雌激素治疗组),B2组中12例予生长激素治疗(生长激素治疗组)。记录患者月经量、子宫内膜变化情况,取患者少许子宫内膜用Real Time-PCR检测TGF-β1mRNA、β-catenin mRNA在各组宫内膜组织中的表达量,并进行统计分析。 结果：1.雌激素治疗组与生长激素治疗组患者月经量均较前增多,治疗效果比较,无统计学差异(X2=1.178,P>0.05) 2.宫腔粘连患者雌激素治疗前后子宫内膜平均厚度分别为(6.43±1.29mm)、(8.03±1.36mm),两者比较,有统计学差异(P<0.01).生长激素治疗前后子宫内膜平均厚度分别为(6.00±0.83mm)、(7.58±1.01mm),两者比较,有统计学差异(P<0.01)。治疗前B1、B2两组患者内膜厚度比较,无统计学差异(P=0.324)。治疗后两组患者子宫厚度比较,无统计学差异(P=0.362)。 3. TGF-β1mRNA在对照组(A组)和研究组(B组)子宫内膜中相对表达量分别为(3.43±1.21)、(8.48±2.72),二者比较,差异有统计学意义(P<0.01)。P-catenin mRNA在对照组(A组)和研究组(B组)的相对表达量分别为(9.99±4.30)、(23.05±5.28),二者比较,差异有统计学意义(P<0.01)。 4. TGF-β1mRNA在雌激素治疗前后患者子宫内膜的相对表达量分别为(8.92±2.60)、(4.91±1.58),二者比较,差异有统计学意义(P<0.01)；TGF-β1mRNA在生长激素治疗前后相对表达量为分别为(8.01±2.13)、(5.28±1.28),二者比较,差异有统计学意义(P<0.01)。；β-catenin mRNA在雌激素治疗前后子宫内膜的相对表达量为(23.26±2.73)、(12.26±4.60),二者比较差,异有统计学意义(P<0.01)；β-catenin mRNA在生长激素治疗组前后相对表达量为分别为(22.41±2.76)、(11.16±1.51),二者比较,差异有统计学意义(P<0.01)。雌激素治疗前和生长激素治疗前两组患者TGF-β1mRNA相对表达量分别为(8.92±2.60)、(8.01±2.13),二者比较,差异无统计学意义(P>0.05)；β-catenin mRNA相对表达量为(23.26±2.73)、(22.41±2.76),二者比较,差异无统计学意义(P>0.05)；两种药物治疗后TGF-β1mRNA相对表达量分别为(4.91±1.58),(5.28±1.28),二者比较,差异无统计学意义(P>0.05)；β-catenin mRNA相对表达量为(12.26±4.60)、(11.16±1.51),二者比较,差异无统计学意义(P>0.05)。 5. TGF-β1mRNA和β-catenin mRNA在不孕症患者的子宫内膜中的相对表达量spearman相关分析显示： r=0.197,P=0.297>0.05,二者无相关性。 TGF-β1mRNA和β-catenin mRNA在宫腔粘连患者子宫内膜中的相对表达量spearman相关分析：r=0.480,P=0.007<0.01,二者为正相关；在雌激素治疗后宫腔粘连患者的子宫内膜中的相对表达量spearman相关分析显示：r=0.683,P=0.005<0.01,二者为正相关；在生长激素治疗后宫腔粘连患者的子宫内膜中的相对表达量spearman相关分析显示：r=0.755,P=0.005<0.01,二者为正相关。 结论：1.雌激素与生长激素治疗后均能使宫腔粘连患者月经量增多、子宫内膜增厚。 2.宫腔粘连患者子宫内膜TGF-β1与β-catenin表达明显升高；雌激素与生长激素均能降低宫腔粘连子宫内膜中TGF-β1与β-catenin的表达。 ***-β与Wnt/β-catenin信号通路可能参与子宫内膜纤维化的形成。

关键词： 宫腔粘连   子宫内膜   Wnt-1蛋白   Sfrp-1蛋白   表达意义   相关性分析  

摘要： 目的:　　研究Wnt-1蛋白与Sfrp-1蛋白在宫腔粘连患者子宫内膜中的表达情况，初步探讨其与宫腔粘连的相关性。　　方法:　　采用免疫组织化学(IHC)方法，检测60例宫腔粘连(Intrauterin adhesions，IUA)患者子宫内膜组织（轻、中、重度IUA各20例）及20例子宫纵隔患者正常子宫内膜组织中的Wnt-1蛋白与Sfrp-1蛋白的表达差异，分析宫腔粘连患者子宫内膜中Wnt-1蛋白和Sfrp-1蛋白的表达与宫腔粘连程度的相关性。　　结果:　　***-1蛋白在子宫内膜腺上皮细胞及间质细胞中的胞膜和胞浆表达，Wnt-1蛋白在IUA组中表达高于非IUA组(P＜0.05)，且Wnt-1蛋白在重度IUA组表达高于中度IUA组，中度IUA组高于轻度IUA组(P＜0.05)。　　***-1蛋白主要在子宫内膜腺上皮细胞及间质细胞的胞浆中表达，部分在胞膜表达，Sfrp-1蛋白在非IUA组中表达高于IUA组(P＜0.05)，且Sfrp-1蛋白在轻度IUA组高于中度IUA组，中度IUA组高于重度IUA组(P＜0.05)。　　***-1蛋白和Sfrp-1蛋白在IUA患者子宫内膜中的表达呈负相关（相关系数r=-0.713）。　　结论:　　***-1可能与宫腔粘连的形成及严重程度有关。　　***-1可能在宫腔粘连的形成中起抑制作用。　　***-1和Sfrp-1可能相互作用参与宫腔粘连的形成。

关键词： 宫腔粘连   生殖预后   KGF   ERα  

摘要： 目的：分析IUA的病因、临床特点,评估宫腔镜的疗效及影响生殖预后的因素,观察角质细胞生长因子(KGF)和雌激素受体α(ER a)在IUA子宫内膜中的表达,分析KGF、ERα在子宫内膜损伤修复中的作用。 方法：对259例行宫腔粘连松解术的病例资料进行回顾性分析。对76例IUA患者,30例纵隔子宫且内膜正常患者,应用免疫组化测KGF、ERα在子宫内膜中的表达。 结果： 1、与妊娠相关的宫腔操作是引起IUA的主要原因(89.6%),宫腔操作次数与不同程度宫腔粘连呈正相关(r=0.999,P<0.05)。 2、IUA的主要症状以月经异常(83%)、生育异常(26.3%)为主,术前月经与不同程度宫腔粘连呈正相关(r=0.224,P<0.05)。 3、术后宫腔形态恢复有效率为66.4%,月经改善率为82.3%,妊娠率为52.2%。不同程度宫腔粘连与术后月经、术后3月宫腔形态呈正相关(r=0.643,P<0.05)。 4、年龄、术前月经对术后妊娠无影响(P>0.05),不同宫腔粘连程度、术后3月宫腔形态、术后月经影响术后妊娠,其中术后3月宫腔形态对术后妊娠结局影响最大(P<0.05) 5、KGF在轻、中、重度IUA子宫内膜和正常子宫内膜中表达灰度值为分别为116.8±9.7,124.0±10.2,122.7±9.5,133.8±12.3,KGF在轻、中、重度IUA子宫内膜表达均高于正常子宫内膜,差异有统计学意义(P<0.05)。 6、ER α在轻、中、重度IUA子宫内膜和正常子宫内膜中表达灰度值为分别为145.6±16.6,140.4±25.6,134.7±15.3,161.5±16.5, ERα在轻、中、重度IUA子宫内膜表达均高于正常子宫内膜,差异有统计学意义(P<0.05)。 7、KGF在轻度IUA子宫内膜的表达高于中、重度IUA,差异有统计学意义(P<0.05); ERα在重度IUA子宫内膜的表达高于轻度IUA,差异有统计学意义(P<0.05) 结论： 1、与妊娠相关的宫腔操作是引起IUA的主要原因,宫腔操作次数越多,宫腔粘连越重。 2、IUA患者的临床表现中术前月经量在一定程度上可反映宫腔粘连的程度。 3、影响IUA患者术后妊娠的相关因素中,以术后宫腔形态对术后妊娠结局的影响最大。 4、KGF与ER α在IUA子宫内膜中表达上调,提示二者参与了IUA患者子宫内膜的损伤修复过程。

关键词： 人流术   宫腔粘连   几丁糖   预防  

摘要： 目的：探究分析对人流术后预防宫腔粘连采用几丁糖进行治疗的临床效果。方法选取我院2012年2月---2013年7月收治的220例人工流产患者作为临床研究对象，根据入院编号的偶数将其分为治疗组和对照组，各110例，对照组患者不采用几丁糖进行治疗，治疗组患者采用几丁糖进行治疗，对两组患者的月经量减少、宫腔粘连发生率以及闭经等情况进行观察对比。结果治疗组患者的月经减少量、闭经发生率显著低于对照组（ P ＜0．05）；治疗组患者的宫腔粘连发生率明显低于对照组（P＜0．05）。结论对人流术患者采用几丁糖治疗，能够有效降低宫腔粘连发生率，降低月经量减少与闭经发生率，预防宫腔粘连的效果较为明显，值得临床推广。

关键词： 中药   补肾活血   宫腔粘连   基质金属蛋白抑制因子-1   血管内皮生长因子  

摘要： 目的通过中药补肾活血周期疗法联合西药人工周期疗法与单纯西药人工周期疗法防治宫腔镜下宫腔粘连分离(transcervical resection of adhensions,TCRA)术后宫腔粘连(intrauterine adhensions,IUA)的对比观察,评价中西医联合疗法治疗TCRA术后IUA的效果;并以治疗前后子宫内膜中TIMP-1及VEGF表达为指标,初步探讨中药补肾活血周期疗法防治TCRA术后IUA的作用机制。方法本研究为随机、单盲、对照临床研究。80例诊断为IUA且拟行择期TCRA术患者,随机分为中西医联合疗法组与西药疗法组,每组纳入40例患者。中药补肾活血周期疗法方法为:经后方服用7天;经前方服用14天;经期方服用7天。TCRA术后,中西医联合疗法组患者以中药补肾活血周期疗法联合西药人工周期疗法、西药疗法组仅以西药人工周期疗法治疗。患者完成3个月用药疗程后再次进行宫腔镜检查。分别于TCRA术及再次宫腔镜检查时取患者适量子宫内膜组织,以免疫组织化学法检测子宫内膜中基质金属蛋白抑制因子-1(TIMP-1)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达。比较用药前后两组患者临床表现(治愈、有效、无效)、中医症候群评分、IUA程度(March分类法)、子宫内膜TIMP-1、VEGF的表达水平。结果(1)中西医联合疗法组患者中治愈例数为28例,治愈率为70%,有效例数为9例,占22.5%,无效例数为3例,占7.5%,有效率为92.5%;西药组患者中治愈例数为18例,治愈率为45%,有效例数为15例,占37.5%,无效例数为7例,占17.5%,有效率为82.5%。两组相比,中西医联合疗法组治愈率高于西药组(x2=6.719,P=0.041),但有效率相似(x2=0.163,P=1.942);(2)中西医联合疗法组患者用药前中医症候群评分为25.0±8.7,西药组为22.7±9.1,两组相似(t=1.155,P=0.251);用药后中西医联合疗法组患者中医症候群评分为10.8±4.7,西药组为16±5.1,中西医联合疗法组低于西药组(t=4.742,P=0.000);两组患者用药后中医症候群评分均低于用药前(t=9.082、4.062,P=0.000);(3)中西医联合疗法组中用药前轻、中、重度IUA人数分别为1、19、20例,西药组中为5、17、18例,IUA不同程度发生人数分布相似(Z=-0.849,P=0.396)。中西医联合疗法组中用药后轻、中、重度IUA人数分别为33、4、3例,与用药前相比,IUA轻度人数分布增加,中及重度人数减少(Z=-6.699,P=0.000);西药组用药后轻、中、重度IUA人数分别为22、10、8例,与用药前相比,IUA轻度人数分布增加,中及重度人数减少(Z=-3.695,P=0.000);与西药组相比,中西医联合疗法组中用药后IUA轻度人数分布增加,中及重度人数减少(Z=-2.603,P=0.009);(4)用药前中西医联合疗法组与西药组患者子宫内膜TIMP-1表达阴性人数相似(x2=2.051,P=0.152);用药后中西医联合疗法组患者TIMP-1表达阴性人数比例明显高于西药组(x2=4.713,P=0.030)。用药前中西医联合疗法组与西药组患者子宫内膜VEGF表达(-)、(+)、(++)人数相似(Z=-0.792,P=0.428);用药后中西医联合疗法组患者VEGF表达(-)人数比例明显高于西药组(Z=-2.192,P=0.028)。结论中药补肾活血周期治疗能有效预防TCRA术后IUA,其机制可能与抑制IUA患者子宫内膜TIMP-1及VEGF的过度表达有关。

关键词： 宫腔粘连   纤维化   转化生长因子β1   microRNA-29a   荧光定量PCR  

摘要： 研究背景： 宫腔粘连(intrauterine adhesions, IUA)又称Asherman综合征,由Asherman于1948年首先详细描述报道并定义为：由于子宫内膜损伤导致子宫内膜纤维化,宫腔部分或全部闭锁,继而引起月经过少、闭经、不孕或反复流产。临床上常表现为月经量减少、继发性闭经或周期性腹痛,可引起前置胎盘、胎盘粘连或植入等产科并发症,甚至导致反复流产或不孕,严重影响育龄期女性患者的身心健康及生育能力。随着人流术等宫腔操作的增加、宫腔镜手术在妇科领域的普及以及临床医生对宫腔粘连认识的提高,宫腔粘连的发病率和诊断率日益增高,但其治愈率和妊娠率仍较低。宫腔粘连的治疗需要综合性、个体化的治疗,前提是分离粘连,关键在于预防粘连再发,重点是促进子宫内膜修复。目前公认采用宫腔镜下粘连分离术、节育器隔离及术后加用大剂量雌激素的综合方法进行治疗,但术后再粘连发生率仍较高,尤其重度粘连者,术后再粘连发生率高达62%。因此,探索宫腔粘连的发病机制,寻求有效作用靶点来阻断子宫内膜纤维化的发生、预防宫腔粘连的形成,成为临床医生及科研学者的共同目标。 宫腔粘连是子宫内膜损伤后异常修复、纤维化形成的结果。与其他脏器纤维化过程相似,宫腔粘连的形成同样存在着纤维化病变的共同病理基础——细胞外基质(extracellular matrix, ECM)过度堆积,组织重构,瘢痕形成。子宫内膜基底层损伤后出现胶原纤维过度增生、细胞外基质沉积,而子宫内膜增生受抑制,内膜组织逐渐被纤维结缔组织取代,导致内膜纤维化,进而瘢痕形成,出现粘连。因此,阻断子宫内膜损伤后修复过程中的纤维化和细胞外基质形成,可能对预防宫腔粘连的发生起着积极作用。 转化生长因子-β1(transforming growth factor-beta, TGF-β1)是迄今发现最主要的促纤维形成细胞因子,其信号主要经下游中介分子Smad2、Smad3进行转导。创伤发生后,TGF-β1首先由血小板释放至损伤部位,剂量依赖性地趋化成纤维细胞、单核细胞、中性粒细胞等细胞。TGF-β1与成纤维细胞等细胞膜上的特异性受体结合后,由Smad2、3将TGF-β1信号经胞质传导至胞核内,进而调节基质蛋白(包括纤维粘连蛋白和胶原蛋白)等靶基因的转录,并调控ECM的合成和降解。正常生理条件下,TGF-β1可以促进损伤部位的组织修复和伤口愈合,此时ECM的合成与降解处于动态平衡状态；而病理条件下,TGF-β1可刺激纤维粘连蛋白、胶原蛋白等基质蛋白的基因转录,加速ECM的合成并抑制ECM的降解,形成纤维粘连。 microRNA-29(简称miR-29)是新近发现的一个与纤维化疾病紧密相关的小分子RNA家族,已成为生物学研究的新热点。miR-29在多种脏器纤维化组织部位的表达均下降,如心梗部位的心肌组织、肝星状细胞、肺纤维化组织等,且下降程度与纤维化程度呈正比。miR-29不仅可直接抑制多种ECM成分的表达,还参与了包括TGF-β1/Smad信号通路等多条与纤维化相关的信号通路。TGF-β1可抑制miR-29的表达,而过表达miR-29可反过来降低TGF-p1的表达,并抑制Smad3活性。由此可见miR-29具有强大的抗纤维化潜能,为纤维化疾病的诊断和治疗提供了新的思路。目前miR-29在宫腔粘连子宫内膜中的表达情况未见相关报道。现已知人类miR-29包括miR-29a, miR-29b1, miR-29b2和miR-29c,其中miR-29a的靶基因具有最多的细胞纤维化相关蛋白,故本课题选择miR-29a作为目标因子进行研究。如果能明确miR-29a在子宫内膜中的表达,确定其与宫腔粘连之间的关系,及其在子宫内膜纤维化病变过程中的作用潜能,有望为防治宫腔粘连提供新的研究方向。 因此,本课题从纤维化形成的相关细胞因子着手,拟采用荧光定量PCR法(fluorescence quantitative polymerase chain reaction, FQ-PCR)和免疫组化法(immunohistochemistry, IHC)检测宫腔粘连患者子宫内膜组织中TGF-β1、Smad2、3及miR-29a等因子的表达情况,探讨其与宫腔粘连的相关性,为后续深入研究提供理论依据,寻求可能的作用靶点来阻断和预防宫腔粘连的形成和发展。 研究资料： 1分组： 收集2012年3月至2014年01月在我院行宫腔镜手术的IUA患者共80例,依宫腔粘连程度将其分为轻度粘连组、中度粘连组、重度粘连组3个组,其中轻度粘连组30例,中度粘连组26例,重度粘连组24例。选取同期非IUA患者共27例为对照组。各组年龄、孕产次、宫腔手术操作次数等一般性资料经统计学分析比较差异无显著性(P>0.05),具

关键词： 子宫内膜   宫腔粘连   基质细胞   雌二醇   前列腺素   E2增殖细胞核抗原  

摘要： 研究背景 子宫内膜在人体内作为一个高度再生的组织，在雌孕激素的作用下发生周期性的变化。雌激素可促进子宫内膜生长，其在体内的变化受下丘脑-垂体-卵巢轴的调节。当一些原因导致子宫内膜损伤，使子宫前后壁粘连、宫腔闭锁，就可形成宫腔粘连(Intrauterine adhesions，IUA)。近年来随着人流、药流手术及宫腔操作的增多，IUA已成为妇科常见病之一，并且成为不孕、流产、早产的一项重要原因。IUA治愈率低下，手术分离后粘连易发，严重影响着广大女性的身体及心理健康。因此粘连分离术后如何防止粘连复发、促进内膜生长的治疗是临床工作的一大难题。目前IUA分离术后多采用人工周期治疗2～3个月促进子宫内膜的再生，防止粘连复发。但雌激素剂量及疗程目前尚无明确规定，主要是根据患者的粘连程度、类型以及术者的经验，且治疗效果并不太满意，子宫内膜的生长并不能得到很好的改善。有些学者认为对雌激素生理剂量无效的子宫内膜，可加大雌激素剂量促进子宫内膜的生长。但也有研究发现子宫内膜基底层严重受损后，内膜再生能力下降，高雌激素水平可能导致某些纤维化细胞因子水平的上升，反而促进IUA的形成。目前，雌激素的不同用量以及应用时间的长短对子宫内膜生长作用的影响尚不明确。 感染对子宫内膜生长的影响目前尚无明确定论，一些学者认为宫腔操作后没有必要使用抗生素预防感染。但是一旦出现感染，炎症反应可能导致子宫内膜损伤加剧，并引起子宫内膜修复障碍，加速IUA的再形成。在所有的致炎因子中，前列腺素E2(ProstaglandinE2，PGE2)是一种重要的细胞生长和调节因子，对多种细胞的增殖及生物学功能有调节作用，并与子宫内膜生理及病理密切相关。它能诱导全身炎症反应，增强细胞中胶原生物的合成，促进炎性区域发生纤维化改变。但前列腺素E2对子宫内膜生长的影响以及对子宫内膜细胞有何种调节作用尚不明确。 目的 本课题通过子宫内膜基质细胞体外培养传代系统，应用不同浓度、不同时间雌二醇及炎症因子前列腺素E2作用于细胞，采用MTT法及Real-time PCR法观察雌二醇及炎症因子PGE2对子宫内膜基质细胞增殖情况的影响，为进一步探索宫腔粘连分离术后辅助雌激素治疗以及炎症对内膜增长有无影响提供一个前期的实验依据。 材料和方法 1.采用胶原酶消化法及筛网法分离培养人子宫内膜基质细胞，MTT法绘制细胞正常生长曲线，观察细胞生长周期。通过形态学及免疫组化法对培养的细胞进行鉴定。 2.将人子宫内膜基质细胞分为对照组：加入正常培养液。雌二醇组：分别加入浓度为1x10-9、10-8、10-7、10-6mol/L雌二醇。雌二醇+PGE2组：同时分别加入不同浓度的雌二醇(10-9、10-8、10-7、10-6mol/L)和PGE2(浓度为50ng/L)。PGE2组：单独加入PGE2(浓度为50ng/L)。MTT法间接测定各组别子宫内膜基质细胞增殖情况，实时荧光定量PCR法测定各组细胞内PCNAmRNA表达的变化。 3.将所有实验数据以均数±标准差(x±S)表示，两个独立样本间的比较采用t检验方法分析数据之间的差异，各组间资料的分析采用单因素方差分析法，采用LSD-t法进行组间两两比较。各组不同时间点的比较采用重复测量资料设计法分析，检验水准α=0.05。 结果 1.细胞形态学特点：培养出的基质细胞多为多角形，细胞两端有多个短小突起，细胞排列无极性，贴壁生长。随着细胞的传代培养，细胞逐渐拉长成梭形，具有成纤维细胞形态。 2.细胞生长周期及免疫组化结果：细胞生长周期一般为7-10天，第1天为潜伏生长期，第2-4天进入对数生长期，5-6天后达平台期，7天后逐渐萎缩消退。基质细胞特异的波形蛋白抗体(Vimentin)染色阳性，阳性细胞胞质呈棕黄色，角蛋白抗体染色阴性。 3.随着作用时间的延长，雌二醇组基质细胞增殖率明显升高，细胞增殖呈时间依赖性，差异有统计学意义(P<0.05)，而各组浓度之间并无明显差异(P>0.05)。24h雌二醇+PGE2组与雌二醇组比较，细胞平均增殖率升高，差异有统计学意义(P<0.05)。72h雌二醇+PGE2组细胞随着作用时间的延长虽有增长趋势，但与雌二醇组相比，细胞生长速率明显下降(P<0.05)。PGE2组细胞增殖率随着作用时间的延长明显下降(P<0.05)。 4.随着作用时间的延长，72h雌二醇组细胞PCNA mRNA的相对表达量明显升高，与48h、24h相比，差别均有统计学意义(P<0.05)，而各组浓度之间无明显差异(P>0.05)。24h雌二醇+PGE2组与雌二醇组比较，PCNA mRNA的相对表达量升高(P<0.05)。72h雌二醇+PGE2组细胞PCNAmRNA的相对表达量随着作用时间的延长而升

关键词： 宫腔粘连   骨桥蛋白   免疫组织化学   逆转录-聚合酶链反应   纤维化  

摘要： 目的：探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在宫腔粘连患者子宫内膜中的表达情况及其在宫腔粘连发病机制中的作用。 方法：采用免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)及逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-PCR,RT-PCR)法,分别检测70例宫腔粘连(intrauterine adhension, IUA)患者子宫内膜及30例子宫纵隔患者正常子宫内膜组织中OPN的蛋白及mRNA的表达情况,比较宫腔粘连组与正常组子宫内膜OPN的表达量的差异,以及不同程度宫腔粘连组子宫内膜OPN的表达量的差异,并对结果进行分析。 结果：1.免疫组织化学检测结果：OPN蛋白主要在子宫内膜腺体表达,间质有少量表达。IUA组的表达高于非IUA组,差异具有统计学意义(P<0.05)；OPN蛋白在重度IUA组的表达高于中度IUA组,中度IUA组的表达高于轻度IUA组,差异具有统计学意义(P<0.05)。2.逆转录-聚合酶链反应法检测结果：OPNmRNA在IUA组的表达高于非IUA组,差异具有统计学意义(P<0.05)；重度IUA组的表达高于中度IUA组,中度IUA组的表达高于轻度IUA组,差异具有统计学意义(P<0.05),与免疫组织化学检测结果相符。 结论：***在宫腔粘连患者子宫内膜中表达明显增强,提示OPN可能与宫腔粘连的发生有关；2.随着宫腔粘连程度的加重,OPN的表达逐渐增强,提示OPN可能与宫腔粘连的严重程度相关。