关键词： 宫腔粘连   透明质酸   间充质干细胞   子宫内膜损伤  

摘要： 宫腔粘连指子宫内膜基底层受损,可归因于机械性损伤、感染等。目前宫腔粘连发病机制尚未明确,因此尚无统一的和标准化的临床治疗方案。透明质酸(HA)作为一种人体天然内源性生物分子,具有良好的体内相容性、降解性和安全性等,成为宫腔粘连治疗性水凝胶制剂的最理想材料之一。通过物理支持、免疫和炎症调节作用,HA水凝胶单独使用或作为载体以负载间充质干细胞或与其外泌体组成复合材料在宫腔粘连治疗或预防方面显示出独特优势和广阔的应用前景。

关键词： 四藤汤   宫腔粘连   湿热瘀结证   TCRA术后   雌孕激素序贯疗法  

摘要： 目的: 本课题基于随机、平行、对照原则评价中药复方四藤汤联合雌孕激素序贯疗法治疗宫腔粘连术后(湿热瘀结证)患者的临床疗效和安全性。 方法: 收集自2023年1月至2023年12月期间于成都中医药大学附属医院国际病房妇科就诊,实施宫腔镜下宫腔粘连分离术后,符合纳排标准的77例患者,将其随机分为对照组和观察组,对照组给予口服雌孕激素序贯治疗(补佳乐+地屈孕酮),观察组在对照组的基础上加用口服中药复方四藤汤治疗。采用前瞻性随机对照试验,通过SPSS 26.0统计软件进行分析,对比观察两组患者的一般情况、月经、中医证候、子宫内膜厚度、子宫动脉血流参数(阻力指数RI和搏动指数PI)等指标。 结果: 1.基本情况分析:在本试验中,对观察组与对照组在年龄、宫腔操作次数、宫腔粘连程度、月经量评分、中医证候评分、子宫内膜厚度、PI、RI值进行组间比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。 2.疗效评估:(1)组内治疗前后比较:两组患者分别对治疗前后月经疗效、中医证候积分、中医临床症状体征、子宫内膜厚度、PI值、RI值进行组内比较,差异均有统计学意义(P<0.05),提示两组患者经治疗后均具有临床疗效;(2)两组组间比较:对两组患者在治疗后进行组间对比,其中月经疗效、中医证候积分、中医临床症状体征、子宫内膜厚度、PI值的组间差异具有统计学意义(P<0.05),提示观察组针对改善上述指标的效果优于对照组;而RI值的组间差异无统计学意义(P>0.05),提示两组患者在改善RI值的治疗效果无明显差异。 3.安全性分析:本项研究整个治疗过程中均没有发生不良反应事件,治疗后血常规、肝肾功、乳腺彩超等均没有出现明显异常改变,未发生过敏现象。 结论: 1.四藤汤联合雌孕激素序贯疗法治疗宫腔粘连术后(湿热瘀结证)患者,在增加月经量、改善临床症状体征、降低中医证候积分方面优于单用雌孕激素序贯疗法。 2.四藤汤联合雌孕激素序贯疗法对于宫腔粘连术后(湿热瘀结证)患者增加子宫内膜厚度、降低PI值优于单用雌孕激素序贯疗法,降低RI值差异不明显,对于改善子宫内膜容受性的疗效评估尚待多项指标、大样本的研究。 3.四藤汤联合雌孕激素序贯疗法治疗宫腔粘连术后(湿热瘀结证)患者的治疗方案具有较高安全性。

关键词： 宫腔粘连   人脐带血单个核细胞   子宫内膜   妊娠率   干细胞治疗   宫腔粘连   人脐带血单个核细胞   纤维化   生长因子   宫腔粘连   人脐带血单个核细胞   铁死亡   上皮-间充质转化(EMT)   Wnt/β-catenin通路  

摘要： 第一部分:人脐带血单个核细胞联合透明质酸钠凝胶治疗宫腔粘连的疗效和安全性的临床研究 研究背景:宫腔粘连(IUA),又称Ascherman综合症(AS),是一种源于子宫内膜基底层受损的妇科疾病。该病的临床症状包括不孕、月经稀少、闭经以及反复流产。目前,宫腔镜下宫腔粘连切除术(TRCA)是治疗IUA的主要方法,虽然该手术可以修复解剖结构,但功能的完全恢复仍然存在不足。因此,寻找更为安全有效的非手术治疗方法成为当前研究的焦点。 人脐带血单个核细胞(HUCBMCs)是一种包含大量原始多能干细胞、祖细胞、单核细胞以及调节性T细胞的复合细胞群,其来源广泛,提取分离无创且安全,不存在伦理问题。与间充质干细胞相比,HUCBMCs的不成熟免疫细胞抗原提呈能力及反应性低,具有较低的免疫原性。同种异体脐带血移植物的抗宿主病发生率低,具有良好的临床安全性。目前,HUCBMCs在多项临床研究中已展现出卓越的疗效,但尚未在IUA子宫内膜中得到应用。本研究计划在宫腔粘连患者TRCA术后将HUCBMCs灌注入子宫腔内,并结合交联透明质酸钠(HA)以降低其流动性,使其在宫腔内停留。监测其治疗宫腔粘连的临床效果及安全性。 目的:本研究旨在探讨HUCBMCs治疗对宫腔粘连患者子宫内膜修复、纤维化逆转以及容受性增加的效果。通过此研究,我们旨在为有妊娠需求的宫腔粘连患者提供创新的治疗方案。 方法:本研究纳入了 105例患者,这些患者于2020年10月至2023年6月在安徽医科大学第一附属医院接受了宫腔粘连合并不孕症的TCRA手术(AFS评分≥5分)。通过数字表法,我们将患者分为两组:HUCBMCs+HA组(n=47)和HA组(n=58)。两组患者均在月经的第10-18天接受了 TCRA手术。在术后即刻及第一次月经近干净时,HUCBMCs+HA组将HUCBMCs联合交联透明质酸钠灌注入子宫腔内,而HA组则将交联透明质酸钠灌注入子宫腔内。两组患者均在第一次月经近干净时接受第二次宫腔灌注,并在黄体期进行经阴道多普勒超声检查。在TCRA手术后的半年内,我们将记录患者的月经量、月经持续时间、子宫内膜厚度、子宫内膜下血流以及妊娠情况。此外,我们还将详细记录任何不良事件、妊娠和分娩过程中的并发症。 结果:在治疗后的第一个月经周期中,HUCBMCs+HA组患者的月经量和月经持续时间明显改善,且子宫内膜厚度显著增加,与HA组相比有显著差异(P<0.001,P=0.002,P=0.032)。治疗后第1次月经黄体期,经阴道多普勒超声检测子宫内膜下血流,HUCBMCs+HA组的子宫内膜下血流明显优于HA组,差异具有统计学意义(P=0.017)。妊娠前子宫内膜厚度方面,HUCBMCs+HA组略高于HA组,但差异无统计学意义(P=0.191)。HUCBMCs+HA组的妊娠率明显高于HA组(61.70%vs 41.2%),差异具有统计学意义(P=0.038)。在手术过程和治疗期间,两组患者均未观察到不良现象,包括水中毒、子宫穿孔、腹痛、感染等。 结论:HUCBMCs与HA联合应用在治疗后表现出更好的月经恢复,子宫内膜增长和妊娠率,且未发生明显不良事件。是一种具有前景的治疗方法 第二部分:人脐带血单个核细胞抑制子宫内膜纤维化促进子宫内膜修复 研究背景:宫腔粘连,即子宫内膜修复后的一种病理性宫腔疾病,主要特征为子宫内膜纤维化。在正常子宫中,纤维组织占13%-20%,而IUA患者可高达50%-80%。HUCBMCs是否能减轻子宫内膜纤维化成为治疗IUA的重要指标。 育龄期女性子宫内膜随月经周期性脱落并再生,归功于基底层存在的子宫内膜干细胞。然而,宫腔粘连患者的子宫内膜基底层受损,早期损伤和炎症导致干细胞大量破坏,使子宫内膜再生变得困难,内膜功能难以恢复。研究人员期望找到新的治疗方法,恢复子宫内膜干细胞活性,逆转纤维化进程,促进子宫内膜再生,增加腺体数量。之前的临床研究表明HUCBMCs在IUA内膜中具有一定疗效,但对其具体修复作用和是否能逆转纤维化仍需进一步研究。 目的:本课题通过子宫内膜损伤的细胞和动物模型,探讨HUCBMCs对IUA子宫内膜的作用。旨在初步揭示其在子宫内膜纤维化中的作用和机制,为IUA的预防和治疗提供理论依据。 方法:本研究利用米非司酮建立损伤的子宫内膜间质细胞模型,并利用Transwell共培养体系,共培养人脐带血单个核细胞与子宫内膜间质细胞,CCK8试验用来检测子宫内膜间质细胞的增殖力改变;流式细胞术比较子宫内膜间质细胞凋亡情况,划痕实验检测子宫内膜间质细胞迁移能力的变化;Westem blot检测子宫内膜间质细胞纤维化指标α-SMA、Collagen I,检测PTEN-AKT通路的变化情况。动物实验中,利用酒精建立小鼠宫腔粘连模型,HUCBMCs尾静脉注射

关键词： 宫腔用交联透明质酸钠凝胶   人工流产   宫腔粘连   不良反应  

摘要： 目的：探讨宫腔用交联透明质酸钠凝胶对人工流产后宫腔粘连的预防作用。方法：2021年8月—2023年7月，选取300例行人工流产术患者，按照奇偶数法将患者分为两组，每组150例，对照组给予布洛芬与抗生素治疗，观察组在对照组基础上予以宫腔用交联透明质酸钠凝胶。比较两组术后重点指标、术后宫腔粘连情况以及不良反应。结果：术后，观察组阴道出血时间及月经复潮时间短于对照组，阴道出血量少于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。观察组术后宫腔粘连发生率为5.33%，显著低于对照组的19.33%(P<0.05)。观察组不良反应发生率为4.00%，低于对照组的10.67%(P<0.05)。结论：宫腔用交联透明质酸钠凝胶对人工流产后宫腔粘连的预防作用突出，副作用小，促进患者康复。

关键词： 宫腔粘连   佳蓉片   牙髓干细胞   子宫内膜纤维化   腺体   血管  

摘要： 目的: 采用机械刮宫与宫腔留置脂多糖棉线双重损伤法建立大鼠宫腔粘连(intrauterine adhesions,IUA)模型,研究佳蓉片联合牙髓间充质干细胞预防大鼠宫腔粘连的时效性及其作用机制,为临床治疗IUA提供新思路和理论依据。 方法: 1.建立大鼠IUA模型,观测不同时间点大鼠宫腔粘连的程度:动情周期规律,200-250g的雌性SD大鼠随机分为对照组和模型组,每组24只,对照组行假手术,模型组行双重损伤法损伤子宫内膜,分别于术后第2、3、7、14天观察子宫形态,并取子宫刮宫段,进行HE染色、Masson染色,观察粘连程度,并对子宫内膜厚度、腺体数量、血管数和纤维化面积进行统计分析; 2.佳蓉片联合牙髓干细胞预防大鼠宫腔粘连的时效性研究:动情周期规律,200-250g的雌性SD大鼠随机分为5组,每组18只,分别为:对照组、模型组、佳蓉片中药组、牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)移植组、联合组(佳蓉片联合牙髓干细胞),麻醉后对照组行假手术,模型组行双重损伤法损伤大鼠子宫内膜,剩余治疗组行双重损伤法损伤大鼠子宫内膜后,于手术当天分别给药,佳蓉片治疗组每天灌胃40mg/ml佳蓉片原药混悬液进行治疗,干细胞组双侧子宫原位注射0.2ml的牙髓间充质干细胞悬液(含1×10～6个DPSCs),联合治疗组不仅双侧子宫原位注射0.2ml的牙髓间充质干细胞悬液(含1×10～6个DPSCs)并且每天灌胃40mg/ml佳蓉片原药混悬液进行治疗。分别于治疗后第3、7、14天打开腹腔进行子宫形态观察,并取子宫刮宫段,进行HE染色、Masson染色,观察粘连程度,并对子宫内膜厚度、腺体数量、血管数和纤维化面积进行统计分析。western blot、q PCR检测子宫组织中结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、雌激素受体(estrogen receptor,ESR1)、转化生长因子(transforming growth factor-1,TGF-β1)、的蛋白表达量以及m RNA水平。另取30只大鼠随机分为对照组、模型组、雌激素组、佳蓉片治疗组、联合治疗组,预防治疗14天后进行妊娠实验,观察生育力情况。 结果: 1.行双重损伤法造模后第3天宫腔开始发生粘连。3天、7天、14天纤维粘连带逐渐增多,粘连程度逐渐加重,与对照组相比子宫内膜厚度明显降低,腺体数和血管数减少,纤维化面积增加,都为(P<0.05);与模型组刮宫后第3天相比,刮宫后第7天、14天腺体数和血管数继续减少,纤维化面积持续增加(P<0.05);与模型组刮宫后第7天相比14天血管数减少,纤维化面积增加(P<0.05)。模型组刮宫后第3天、7天、14天子宫内膜厚度差异无统计学意义(P>0.05)。 2.与模型组3天相比,三个治疗组预防治疗3天后,子宫形态无明显改变, 子宫内膜厚度、腺体数量、血管数和纤维化面积均无明显改善。与模型组7天相比,佳蓉片中药组预防治疗7天后,只有子宫内膜腺体数增加(P<0.05);牙髓干细组和佳蓉片中药联合牙髓干细胞组预防治疗7天后,子宫内膜腺体数和血管数均增加(P<0.05),子宫内膜纤维化面积减少(P<0.05);与模型组14天相比,三个治疗组预防治疗14天后,子宫形态明显恢复,子宫内膜厚度、腺体数和血管数明显增加(P<0.05),纤维化面积明显减少(P<0.05)。Western blot结果显示:与对照组相比,TGF-β1在模型组中的表达明显升高(P<0.05),ESR1的表达在模型组中降低(P<0.05);与模型组相比,各治疗组中TGF-β1的表达明显降低(P<0.05),ESR1的表达在各治疗组中明显升高(P<0.05)。q PCR的实验结果显示:与对照组相比,模型组中TGF-β1和CTGF的表达均明显升高(P<0.05),与模型组相比,各治疗组中TGF-β1和CTGF的表达均明显降低(P<0.05) 结论: 1.机械刮宫与宫腔留置脂多糖棉线的双重损伤法损伤的子宫内膜在造模后第3天宫腔开始发生粘连,并随时间的延长粘连程度逐渐加重。成功建立大鼠IUA模型。 2.佳蓉片中药和牙髓干细胞均可从子宫内膜腺体数、血管数、子宫内膜厚度以及纤维化面积等方面改善大鼠损伤的子宫内膜,并预防IUA的发生。佳蓉片中药在预防治疗第14天时可以预防IUA的发生;牙髓干细胞在第7天就可预防IUA的发生;两者均在第14天使子宫内膜增生。佳蓉片联合牙髓干细胞的效果优于单纯佳蓉片或牙髓干细胞,且显著提高子宫内膜损伤大鼠的生育力。佳蓉片中药和牙髓干细胞可能通过抑制TGF-β1、CTGF相关因子的表达来抑制子宫内膜纤维化,增加ESR1的表达,增加子宫内膜血管数和子宫内膜厚度,从而

关键词： 宫腔粘连   子宫球囊支架   人工周期   粘连复发  

摘要： 目的: 探讨子宫球囊支架联合人工周期预防宫腔粘连复发的效果,为临床实践提供理论上的参考。 方法: 以231例有中重度宫腔粘连患者作为研究对象,根据治疗方法的差异性进行组别划分,即:1、联合治疗组:采用子宫球囊支架联合人工周期。2、人工周期组:单纯采用人工周期。术后1年内定期随访,明确中重度宫腔粘连术后的治疗及预防的最佳方案。 结果: 采用不同的方法干预一段时间后,对收集的数据进行统计得出,联合治疗组均未发生中、重度的宫腔粘连;人工周期组中共有14例中度粘连,无重度粘连患者,两组数据差异显著(P<0.05);联合治疗组有56例完全改善,人工周期组有29例未改善,统计分析后两组在月经量改善方面差异显著(P<0.05);联合治疗组的子宫内膜改善112例,人工周期组改善88例。组间横向对比可知,两组在子宫内膜改善方面差异显著(P<0.05);联合治疗组有20例血白细胞升高,未见发热,人工周期组1例白细胞升高,1例治疗后发热,未出现严重的术后感染;联合治疗组自然受孕43例,IVF 13例,未受孕64例,人工周期组的自然受孕27例,IVF 6例,未受孕76例,差异显著(P<0.05)。 结论: 联合疗法预防宫腔粘连复发效果更为理想,相较于单一治疗,其可较大程度的改善患者月经、子宫内膜情况,患者满意度、依从度更高;宫腔粘连的复发率更低,生活质量得以提升,因此值得在临床实践中推广。

关键词： 宫腔粘连   水凝胶   脐带间充质干细胞   子宫内膜上皮类器官   子宫内膜上皮干细胞  

摘要： 背景:宫腔粘连(intrauterine adhesion,IUA)通常表示女性的宫腔内形成纤维样粘连。目前,应用干细胞治疗IUA,已成为了重建重度IUA患者生殖功能的希望。但是,宫腔直接注射的方式会给临床手术操作带来一定困难,尤其难以保证干细胞的存活率。因此,亟需出现新的方式改善注射治疗方式。此外,目前领域内对于IUA患者子宫内膜上皮细胞群表型特征变化的研究并不全面,对干细胞促进子宫内膜上皮的再生机制研究也不深入。 方法:1.通过质谱鉴定子宫内膜细胞外基质蛋白并以此为参考设计黏附模拟水凝胶。随后,通过CCK-8、Transwell、活细胞实时拍摄来评估水凝胶对脐带间充质干细胞(UCMSCs)的生物相容性。2.建立IUA大鼠模型并注射脐带间充质干细胞-黏附模拟水凝胶。随后,通过子宫形态学、病理染色、免疫染色、酶联免疫吸附实验、Luminex液相悬浮芯片等评估子宫内膜的恢复情况。3.建立子宫内膜上皮类器官模型(EEOs)及其上皮-间质转化模型(EEOs＿EMT),并结合免疫荧光染色、细胞流式分选、单细胞测序分析,来评估脐带间充质干细胞对上皮-间质转化及上皮再生的作用。 结果:1.基于“子宫内膜细胞外基质环境”的黏附模拟水凝胶可以为UC-MSCs提供良好的生长环境,也为改善现有原位注射方式提供了新的思路。2.脐带间充质干细胞-黏附模拟水凝胶可有效治疗宫腔粘连。***-MSCs可逆转上皮-间质转化过程。***可分泌WNT7A,激活具有干性特征的子宫内膜上皮细胞,进而促进子宫内膜上皮再生。5.上皮-间质转化表型的子宫内膜上皮细胞可分泌TGFA,进而上调UC-MSCs的E-cadherin蛋白。 结论:在本研究论文中,首先设计了一种用于UC-MSCs封装并原位注射的黏附模拟水凝胶。其次证实了UC-MSCs搭载黏附模拟水凝胶后可以有效治疗IUA。本研究还建立了EEOs模型及EEOs＿EMT模型。随后,本研究证实子宫内膜上皮细胞在TGF-β1的影响下发生EMT过程,并分析了UC-MSCs介导的MET过程。此外,本研究还证实了具有干性特征的子宫内膜上皮细胞发挥了再生过程的关键作用,并确定了参与其中的,由UC-MSCs分泌的信号因子WNT7A蛋白。最后,本研究还发现UC-MSCs可受到上皮-间质转化表型上皮细胞的影响,在TGFA的作用下上调E-cadherin蛋白。