关键词： 宫腔粘连   薄型子宫   动物模型   母源基因   胚胎发育   辅助生殖  

摘要： 第一章大鼠宫腔粘连模型的建立宫腔粘连(Intrauterine Adhension,IUA)和薄型子宫内膜(Thin Endometrium,TE)是女性不孕的常见原因。宫腔镜微创手术的应用、普及,可以使宫腔粘连患者的宫腔形态得到基本或完全的恢复。可是,虽然术后宫腔内放置屏障系统或生物制剂已被证实对宫腔粘连的修复及形态维持有一定作用,中重度宫腔粘连患者的术后内膜修复情况仍不乐观,且存在继发感染的隐患。特别是III-IV度IUA子宫内膜薄、术后复发率高,妊娠率低,生殖预后情况不乐观。只有找到行之有效促进子宫内膜修复的方法才能真正改善此类患者的生殖预后。然而因为各类药物给药方式复杂及伦理原因,急需找到可用的动物模型。本课题旨在为子宫内膜损伤的发病机制和治疗方法提供更多可选择途径,尝试构建薄型子宫内膜模型与大鼠宫腔粘连模型,并模拟宫内水状用药和凝胶状用药,观察不同给药方式本身对大鼠内膜恢复情况的影响。研究目的:摸索并构建大鼠宫腔粘连与薄型子宫模型,并初步探索药物性状对治疗效果的影响。1)建立大鼠宫腔粘连模型,为内膜相关实验研究提供动物模型参考;2)摸索大鼠薄型子宫内膜模型的建立方法;3)摸索液体状药物在大鼠宫腔内的给药方式,为内膜相关实验提供给药方式参考;4)摸索凝胶状药物在大鼠宫腔内的给药方式,为内膜相关实验提供给药方式参考。研究方法:摸索并构建大鼠宫腔粘连与薄型子宫模型。1)220-280g健康雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠,实验组用95%酒精灌入大鼠子宫内膜,造模组注入约0.5m L95%的酒精,对照组分别不作处理、注入生理盐水、注入凝胶介质,同时每组均存在自身对照。2)220-280g健康雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠,实验组用脂多糖溶液灌入大鼠子宫内膜,并在宫内放置脂多糖棉线,对照组分别不作处理、注入生理盐水、注入凝胶介质,同时每组均存在自身对照。3)在造模后两周处死大鼠,取自身对照及用HE染色检测内膜厚度变化情况。研究结果:1)薄型子宫内膜模型实验组与对照组HE染色内膜厚度没有明显差异;2)宫腔粘连模型实验组与对照组HE染色内膜厚度有明显差异,差异具有统计学意义。其中生理盐水组与自身对照相比具有显著差异(P≤0.05),凝胶介质组与自身对照相比具有极显著差异(P≤0.01)。结论:用搔刮后置入手术棉线再注入脂多糖溶液以加重感染的三重损伤法能有效完成大鼠宫腔粘连模型的建模。第二章Nuf2基因在小鼠胚胎发育过程中的作用近年来,不孕不育相关疾病在世界范围内的发病率约为8%-15%,且发病率正逐年升高。在我国,有近千万对夫妇正在饱受不孕不育的困扰。生育力下降正成为威胁人类健康和繁衍的一项巨大挑战。1978年,英国科学家Edwards将实验室的研究成果与临床医学结合,获得了世界第一例体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的成功。近四十年来,由这种技术及其衍生技术辅助出生的孩子人数超过600万,已经成为一个庞大的群体。但目前ART成功率只有30%左右,尤其是若以成熟卵母细胞计数,活婴出生率在5%以下,效率非常低下。而由于技术方法及材料来源限制,目前对人类早期胚胎发育复杂机制的研究还不够透彻。因此,更加深入地了解人类早期胚胎发育机制至关重要。已有研究表明,Nuf2与细胞分离时纺锤体的组装以及细胞有丝分裂有关。但在胚胎中还未见相应报道。研究目的:探究Nuf2在小鼠胚胎发育过程中的作用及其机制。研究方法:取6-8周ICR胚胎,注入Nuf2 Morpholino抑制Nuf2蛋白表达后,通过观察后续胚胎发育过程的表型,确定Nuf2基因在胚胎发育过程中是否起作用,为进一步探寻其作用机制作确定的表型铺垫。研究结果:在抑制Nuf2蛋白表达后,小鼠胚胎体外发育过程明显抑制,囊胚率和4细胞/2细胞比率较对照组明显降低,差异具有统计学意义。结论:Nuf2在小鼠早期胚胎发育过程中起到非常重要的作用。

关键词： 不同剂量   雌激素   球囊子宫支架   宫腔粘连  

摘要： 目的:探究不同剂量雌激素+球囊子宫支架治疗宫腔粘连的效果.方法:回顾分析本院妇科2016.12-2017.12收治的82例宫腔粘连患者,按照随机抽签原则分为两组,各41例.所有患者均采用雌激素+球囊子宫支架治疗,但雌激素剂量不同.对照组采用2mg雌激素治疗,观察组采用6mg雌激素治疗.对所有术后患者开展为期半年的随访,对比宫腔粘连复发几率.结果:经随访可知,观察组出现轻度宫腔粘连、中度宫腔粘连、重度宫腔粘连的例数分为别5例、2例和0例,均低于对照组,存在统计学差异(P<0.05).结论:大剂量雌激素+球囊子宫支架治疗宫腔粘连,可降低子宫粘连复发率,效果显著.

关键词： 子宫内膜   宫腔粘连   Shh信号通路   Gli2   Collagen Ⅰ   E-cadherin   Ki67  

摘要： 背景:1894 年 Fritsh 提出了宫腔粘连(Intrauterine Adheions,IUA)的概念,1948 年又由Asherman进一步定义,临床表现为月经量明显减少、痛经、闭经,继发不孕、习惯性流产等,对育龄期妇女身体心理造成显著伤害,近年来受到越来越多的关注。目前,临床大多应用以宫腔镜下宫腔粘连分离术(transcervicalresectionof adhesion,TCRA)为主,术后给予多种辅助联合治疗。然而,由于各种方法都存在利弊,预后随访效果也无明显差距,临床治疗法尚未统一。尽管术后人工周期药物治疗对子宫内膜有一定的修复作用,在宫腔置放宫内节育器与透明质酸钠可有效降低再粘连的发生,重度宫腔粘连术后复发率仍高达20.0%～62.5%。因此现阶段的研究热点即:寻找宫腔粘连术后有效地促进子宫内膜再生以恢复宫腔形态和功能的治疗方法。内膜组织损伤被广泛的认为是IUA发生的特异性危险因素,子宫内膜组织损伤后产生的纤维变性组织对于粘连的形成有潜在作用。已发现多条信号通路及其相关蛋白共同参与宫腔粘连的发生发展。Hedgehog(Hh)信号通路作为当下细胞内信号通路的热点,其中Shh配体的作用原理和功能在目前的研究中较为清楚。Shh信号通路在各阶段生理过程中皆发挥作用,在胚胎发育的早期参与细胞的形成、增殖和分化,在胚胎发育的后期参与促进干细胞的形成和分化等。Shh信号通路的异常激活与许多疾病的发生发展有着直接或间接的关系。已有研究提示Shh通路的异常激活在宫腔粘连的发生发展过程中可能发挥作用。由此,本研究以Shh信号通路为切入点,探讨Shh信号通路及相关因子在正常子宫内膜组织中的表达及在宫腔粘连发生发展中发挥的作用,接着研究Shh信号通路对子宫内膜间质细胞增值以及对纤维化转变的影响,为宫腔粘连术后药物治疗提供理论依据。方法:本研究选取2017年3月至2017年6月在浙江大学附属邵逸夫医院行宫腔镜宫腔粘连分离术在术中及术后诊断为中重度宫腔粘连患者20例作为研究对象,宫腔镜宫腔粘连分离术中以刮匙刮取粘连组织周围的子宫内膜及疤痕组织,同时取同期因其他原因行宫腔镜探查非粘连患者的正常的子宫内膜组织20例,术后病理结果分别为10例增生期,10例分泌期作为对照组。首先通过检测Shh蛋白及其信号通路相关蛋白Ptch,Smo、Gli2、Gli3蛋白在增生期、分泌期子宫内膜中定位及表达,接着比较宫腔粘连患者子宫内膜与正常增生期子宫内膜中相关指标(Collagen I,E-cadherin,Ki67)和Gli2定位和表达。通过子宫内膜间质细胞转染Gli2过表达质粒,利用划痕实验观察Shh信号通路抑制剂Cycloamine(Smo-dependent)和rShh的作用,并且探讨Shh信号通路对子宫内膜间质细胞增殖以及对纤维化的影响。结果:本研究结果显示在增生期内膜中,Shh蛋白中等强度的表达,主要表达在间质和腺上皮中。膜受体Smo在子宫内膜中低度表达,膜受体Ptch则呈现散状分布,主要表达在腺上皮和腔上皮,在间质也有表达。Gli2、Gli3主要表达在上皮和腺体。在分泌期内膜中,Shh蛋白中等强度的表达,主要表达在间质中。Ptch、Smo低表达,特异性的表达主要在腺上皮,间质也有表达。Gli2,Gli3强表达,表达在间质和腺体。宫腔粘连患者的子宫内膜组织(疤痕组织)中腺上皮细胞及胞质均可见Collagen Ⅰ,Ki67蛋白阳性表达。在病灶部位的腺上皮中,E-cadherin的表达显著升高。另外,转染过表达Gli2后的子宫内膜间质细胞,Gli2的表达亦升高,纤维化指标CollagenI表达水平明显上调。在划痕试验中,rShh可以促进子宫内膜间质细胞的修复,而cyclopamine则抑制子宫内膜间质细胞的修复。结论:Shh信号通路在正常子宫内膜的增生期和分泌期都发挥作用,且相对在分泌期内膜中表达水平更高。Gli2,CollagenI,Ki67,蛋白在宫腔粘连患者宫腔组织中表达均较正常子宫内膜表达增加,E-cadherin在粘连部位中腺上皮的表达上升,这就说明宫腔粘连是纤维化的过程,伴随腺上皮上皮结构和细胞的异常增生。在体外细胞实验中,Shh信号通路能促进子宫内膜间质细胞的修复,促进纤维化指标的升高。这些结果都表明Shh信号通路在促进宫腔粘连的发生、发展发挥重要作用。抑制Shh信号通路可能对于延缓宫腔粘连的进程有治疗性意义。

关键词： 宫腔粘连   干细胞   治疗  

摘要： 宫腔粘连(Intrauterine adhesions,IUA),亦称为Asherman综合征,是子宫内膜基底层受损后,出现宫腔及宫颈内口等不同程度的闭塞,进而引发月经量减少甚至闭经,从而导致不孕、复发性流产等临床症状的疾病。目前对IUA的诊疗有不断的更新了解,但是重度IUA所得到的疗效差强人意。因此,本文对IUA目前的关注热点"干细胞治疗"进行总结与分析,希望能为更完善的治疗手段提供帮助。

关键词： 戊酸雌二醇   醋酸甲羟孕酮   人流术后宫腔粘连   预防效果  

摘要： 目的探究人流术后宫腔粘连预防中运用戊酸雌二醇与醋酸甲羟孕酮联合治疗的实际应用价值。方法选取118例在2016年3月2018年2月本院实施负压吸宫术的患者,根据随机分组原则分为观察组（戊酸雌二醇与醋酸甲羟孕酮联合治疗）和对照组（单纯醋酸甲羟孕酮治疗）各59人。比较两组患者治疗效果情况。结果与对照组（83.05%）相比,观察组存在较高的治疗总有效率（96.61%）,（P<0.05）。结论人流术后宫腔粘连预防中运用戊酸雌二醇与醋酸甲羟孕酮联合治疗后,可以促进治疗效果明显增高,有效预防宫腔粘连的发生,临床价值十分显著。

关键词： 宫腔镜   妇科千金胶囊   人流术   宫腔粘连   效果  

摘要： 目的探析宫腔镜联合妇科千金胶囊治疗人流术后宫腔粘连的临床效果。方法随机选取2016年3月2017年5月在我院治疗人流术后宫腔粘连的患者共50例,分为观察组和对照组,每组例数均等。对照组采用常规药物联合宫腔镜治疗,观察组在对照组基础上加用妇科千金胶囊治疗,分别观察两组患者临床治疗效果、月经来潮所需时间、子宫内膜情况。结果观察组临床治疗总有效率高于对照组（96.00%>76.00%）;月经来潮所需时间、子宫内膜情况改善效果优于对照组,P<0.05。结论与常规常规药物联合宫腔镜治疗相比,加用妇科千金胶囊不仅利于提高临床治疗效果,更利于改善人流术后宫腔粘连的情况,以及改善子宫内膜情况,促进月经恢复正常来潮,该治疗方法具有独特的临床效果,值得临床推广应用。

关键词： 三维超声造影   宫腔粘连   血流  

摘要： 宫腔粘连的发病原因多是由于宫腔手术操作不当引发的,特别是感染因素,导致子宫内膜过度损伤引起子宫肌层相互粘连,从而引起一系列临床症状,如周期性腹痛、月经量减少、闭经、不孕不育等。本文探讨对官腔粘连患者采用三维超声造影技术后的效果。方法:对142例患者行经阴道三维超声检查,研究准确率。 结果:三维超声造影技术诊断官腔粘连的符合率是90.14%,优于其他方法。

关键词： 宫腔粘连   宫腔镜   宫腔粘连分离术   人工周期   护理  

摘要： 目的探讨综合性护理干预在宫腔镜下宫腔粘连分离术联合人工周期治疗宫腔粘连患者围手术期中的应用效果。方法抽取2015年1月至2017年5月行宫腔镜下宫腔粘连分离术联合人工周期治疗的宫腔粘连患者68例作为研究对象,以围手术期所用护理方案分组,各34例。对照组行常规护理,观察组行综合护理干预。对两组干预效果进行评估。结果观察组并发症发生率为2.9%,显著低于对照组的17.6%,差异有统计学意义(P<0.05);观察组护理总满意率为94.1%,显著高于对照组的76.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对宫腔粘连患者行宫腔镜下宫腔粘连分离术联合人工周期治疗时,辅助应用综合护理干预,可降低不良事件发生风险,改善护理评价。

关键词： 穴位埋线   补肾活血中药   宫腔粘连  

摘要： 目的探讨穴位埋线联合补肾活血方对轻、中度宫腔粘连患者的临床疗效。方法将57例轻、中度宫腔粘连患者随机分为观察组和对照组,观察组29例采用穴位埋线+中药口服治疗,对照组28例采用雌孕激素序贯口服治疗,3个治疗周期后,比较2组术后宫腔粘连恢复情况。结果观察组治疗轻、中度宫腔粘连总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),观察组及对照组术后宫腔粘连评分均低于术前,差异有统计学意义(P<0.05),并且观察组评分优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论穴位埋线联合补肾活血方能够有效防治轻、中度宫腔粘连术后再粘连。

关键词： 超声检查,多普勒,能量,三维   宫腔粘连   宫腔镜   子宫内膜  

摘要： 目的应用三维能量多普勒超声(3D-PDUS)观察宫腔镜治疗重度宫腔粘连患者子宫内膜血流的变化,评估其治疗效果。方法选取经宫腔镜确诊的重度宫腔粘连患者40例,于宫腔粘连松解术前、术后应用二维常规经阴道超声和3D-PDUS对其进行检查,采用4D View VOCAL软件获得子宫内膜三维血管参数,包括血管指数(VI)、血流指数(FI)、血管化血流指数(VFI),以及子宫内膜容积,观察术前、术后各指标变化情况。结果 40例患者宫腔粘连松解术前子宫内膜容积、VI、FI及VFI分别为1.48 ml(1.32~2.20)、0.14(0.05~0.87)、21.17(18.22~26.07)、0.05(0.01~0.33),术后子宫内膜容积、VI、FI及VFI分别为3.12 ml(1.99~3.60)、0.49(0.12~1.24)、25.72(21.34~29.66)、1.04(0.28~1.62),术后子宫内膜容积、VI、FI及VFI均较术前增加,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 3D-PDUS可用于评估重度宫腔粘连患者宫腔镜治疗的效果。